2026上半年醫(yī)學(xué)（核酸檢驗技術(shù)士）答題技巧

（考試時間：90分鐘滿分100分）班級______姓名______第I卷（選擇題，共40分）答題要求：本卷共20題，每題2分。每題的備選項中，只有一個最符合題意。請將正確答案填涂在答題卡相應(yīng)位置。1w.核酸檢驗技術(shù)中，用于提取病毒核酸的經(jīng)典方法是A.煮沸法B.酚氯仿抽提法C.離子交換法D.親和層析法2w.在核酸擴增反應(yīng)體系中，TaqDNA聚合酶的作用是A.識別引物B.延伸DNA鏈C.解旋DNA模板D.合成引物3w.核酸電泳時，常用的核酸染料是A.考馬斯亮藍(lán)B.溴化乙錠C.二苯胺D.甲基綠4w.下列哪種核酸分子雜交技術(shù)常用于檢測特定基因的表達(dá)水平A.Southern雜交B.Northern雜交C.Western雜交D.原位雜交5w.在核酸提取過程中，加入蛋白酶K的目的是A.破壞細(xì)胞膜B.降解蛋白質(zhì)C.沉淀核酸D.抑制核酸酶活性6w.核酸測序技術(shù)中，Sanger測序法的原理是基于A.DNA合成的終止B.DNA片段的分離C.DNA的化學(xué)修飾D.DNA的雜交7w.用于核酸定量分析的儀器是A.電子天平B.紫外可見分光光度計C.氣相色譜儀D.液相色譜儀8w.在核酸檢驗中，陽性對照的作用是A.驗證試劑有效性B.檢測樣本是否污染C.確定實驗操作是否正確D.以上都是9w.核酸檢驗結(jié)果的報告應(yīng)包括A.檢測方法B.檢測結(jié)果C.報告日期D.以上都是10w.下列哪種病毒的核酸為RNAA.乙肝病毒B.丙肝病毒C.皰疹病毒D.腺病毒11w.核酸檢驗技術(shù)的質(zhì)量控制包括A.室內(nèi)質(zhì)量控制B.室間質(zhì)量評價C.人員培訓(xùn)D.以上都是12w.在核酸提取過程中，防止核酸降解的關(guān)鍵措施是A.低溫操作B.加入核酸酶抑制劑C.避免劇烈振蕩D.以上都是13w.核酸電泳圖譜中，核酸條帶的遷移速度與A.核酸分子大小有關(guān)B.核酸濃度有關(guān)C.電場強度有關(guān)D.以上都是14w.用于核酸擴增的引物設(shè)計原則不包括A.長度適中B.具有特異性C.富含GCD.避免形成二級結(jié)構(gòu)15w.核酸檢驗結(jié)果出現(xiàn)假陽性的可能原因是A.樣本污染B.試劑失效C.操作失誤D.以上都是16w.在核酸雜交技術(shù)中，探針的標(biāo)記方法不包括A.放射性標(biāo)記B.熒光標(biāo)記C.酶標(biāo)記D.化學(xué)修飾標(biāo)記17w.核酸檢驗技術(shù)中，實時熒光定量PCR的優(yōu)點不包括A.靈敏度高B.特異性強C.操作簡便D.可同時檢測多個樣本18w.用于核酸保存的常用緩沖液是A.TE緩沖液B.PBS緩沖液C.Tris緩沖液D.檸檬酸緩沖液19w.核酸檢驗技術(shù)的發(fā)展趨勢不包括A.自動化B.高通量C.低成本D.低靈敏度20w.在核酸檢驗中，陰性對照的作用是A.驗證試劑有效性B.檢測樣本是否污染C.確定實驗操作是否正確D.以上都是第II卷（非選擇題，共60分）（一）填空題（共10分）答題要求：請在每題的橫線上填上正確答案。1.核酸包括______和______兩大類。2.核酸提取的主要步驟包括______、______、______和______。3.核酸擴增反應(yīng)的基本條件包括______、______、______、______和______。4.核酸電泳的支持介質(zhì)有______、______和______等。5.核酸分子雜交技術(shù)主要包括______、______、______和______等。（二）簡答題（共20分）答題要求：請簡要回答下列問題。1.簡述核酸檢驗技術(shù)的基本原理。2.核酸提取過程中應(yīng)注意哪些問題？3.簡述實時熒光定量PCR的原理及應(yīng)用。4.核酸檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性受哪些因素影響？（三）論述題（共15分）答題要求：請詳細(xì)論述下列問題。1.結(jié)合實際工作，談?wù)勅绾巫龊煤怂釞z驗技術(shù)的質(zhì)量控制。（四）材料分析題（共10分）答題要求：請分析以下材料，并回答問題。材料：某實驗室在進(jìn)行核酸檢驗時，發(fā)現(xiàn)部分樣本的檢測結(jié)果出現(xiàn)異常。經(jīng)過調(diào)查，發(fā)現(xiàn)實驗過程中存在以下問題：一是核酸提取過程中未嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行，導(dǎo)致樣本核酸提取量不足；二是核酸擴增反應(yīng)體系的配制不準(zhǔn)確，影響了擴增效率；三是核酸電泳時電壓設(shè)置過高，導(dǎo)致核酸條帶變形。問題：1.請分析上述問題可能對核酸檢驗結(jié)果產(chǎn)生的影響。2.針對上述問題，應(yīng)采取哪些改進(jìn)措施？（五）案例分析題（共5分）答題要求：請分析以下案例，并回答問題。案例：某患者核酸檢測結(jié)果為陽性，但臨床癥狀不典型。經(jīng)過進(jìn)一步檢查，發(fā)現(xiàn)該患者的核酸檢測結(jié)果存在假陽性。經(jīng)過調(diào)查，發(fā)現(xiàn)實驗過程中存在以下問題：一是樣本采集時未嚴(yán)格按照規(guī)范進(jìn)行，導(dǎo)致樣本被污染；二是核酸提取過程中使用的試劑已過期，影響了核酸提取效果；三是核酸擴增反應(yīng)體系中引物濃度過高，導(dǎo)致非特異性擴增。問題：1.請分析上述問題可能導(dǎo)致核酸檢測結(jié)果假陽性的原因。2.針對上述問題，應(yīng)如何避免核酸檢測結(jié)果出現(xiàn)假陽性？答案：1.B2.B3.B4.B5.B6.A7.B8.D9.D10.B11.D12.D13.A14.C15.D16.D17.D18.A19.D20.B1.DNA、RNA2.樣本預(yù)處理、核酸提取、核酸純化、核酸濃縮3.模板、引物、dNTP、TaqDNA聚合酶、緩沖液4.瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠、毛細(xì)管5.Southern雜交、Northern雜交、Western雜交、原位雜交1.核酸檢驗技術(shù)是通過提取、擴增、檢測等步驟，對樣本中的核酸進(jìn)行分析，以確定是否存在特定的病原體或基因變異等。2.注意樣本的采集與保存，嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行核酸提取，避免核酸降解，注意試劑的質(zhì)量和有效期，防止污染等。3.原理：在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，通過監(jiān)測熒光信號的變化實時監(jiān)測PCR擴增過程。應(yīng)用：病原體核酸定量檢測、基因表達(dá)分析等。4.樣本因素、試劑因素、操作因素、儀器因素等。1.質(zhì)量控制包括室內(nèi)質(zhì)量控制和室間質(zhì)量評價。室內(nèi)質(zhì)量控制應(yīng)做好標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的使用、試劑的質(zhì)量監(jiān)控、操作過程的規(guī)范等。室間質(zhì)量評價可通過參加外部質(zhì)量評價活動，與其他實驗室進(jìn)行結(jié)果比對，及時發(fā)現(xiàn)問題并改進(jìn)。2.問題1影響：核酸提取量不足可能導(dǎo)致檢測靈敏度下降；擴增反應(yīng)體系不準(zhǔn)確影響擴增效率，可能出現(xiàn)假陰性或定量不準(zhǔn)確；電泳電壓過高導(dǎo)致條帶變形，影響結(jié)果判斷。問題2改進(jìn)措施：嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行核酸提??；準(zhǔn)確配制擴增反應(yīng)體系