東城區(qū)學(xué)年度第二學(xué)期期末統(tǒng)一檢測(cè)高二生物本試卷共頁(yè)，滿分分?？荚嚂r(shí)長(zhǎng)分鐘?？忌鷦?wù)必將答案答在答題卡上，在試卷上作答無(wú)效?？荚嚱Y(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。第一部分本部分共題，每題2分，共分。在每題列出的四個(gè)選項(xiàng)中，選出最符合題目要求的一項(xiàng)。1.在生態(tài)系統(tǒng)中，生產(chǎn)者固定的能量可以沿著食物鏈傳遞，食物鏈彼此交錯(cuò)連接成食物網(wǎng)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.食物鏈和食物網(wǎng)構(gòu)成了生態(tài)系統(tǒng)的營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)B.作為次級(jí)消費(fèi)者的肉食性動(dòng)物屬于第二營(yíng)養(yǎng)級(jí)C.每種動(dòng)物在生態(tài)系統(tǒng)中只能處于一個(gè)營(yíng)養(yǎng)級(jí)D.食物網(wǎng)越復(fù)雜生態(tài)系統(tǒng)的恢復(fù)力穩(wěn)定性越強(qiáng)【答案】A【解析】【分析】生態(tài)系統(tǒng)的能量流動(dòng)是單向的、逐級(jí)遞減的，沿著食物鏈和食物網(wǎng)流動(dòng)；生產(chǎn)者為第一營(yíng)養(yǎng)級(jí)，初級(jí)消費(fèi)者為第二營(yíng)養(yǎng)級(jí)，次級(jí)消費(fèi)者為第三營(yíng)養(yǎng)級(jí)。【詳解】A、食物鏈和食物網(wǎng)是生態(tài)系統(tǒng)中物質(zhì)循環(huán)和能量流動(dòng)的渠道，共同構(gòu)成生態(tài)系統(tǒng)的營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)，A正確；B、次級(jí)消費(fèi)者以初級(jí)消費(fèi)者為食，屬于第三營(yíng)養(yǎng)級(jí)，而非第二營(yíng)養(yǎng)級(jí)，B錯(cuò)誤；CC錯(cuò)誤；DD錯(cuò)誤。故選A。2.某稻田生態(tài)系統(tǒng)中存在食物鏈“水稻→福壽螺→中華鱉”，下圖表示該生態(tài)系統(tǒng)中部分營(yíng)養(yǎng)級(jí)的能量流動(dòng)過(guò)程，圖中字母代表能量值。下列敘述正確的是（）第1頁(yè)/共26頁(yè)A.在該生態(tài)系統(tǒng)中，信息沿食物鏈從福壽螺向中華鱉單向傳遞B.圖中a表示福壽螺用于生長(zhǎng)、發(fā)育和繁殖等生命活動(dòng)的能量C.由福壽螺流入分解者的能量值可以用圖中的c+d+e表示D.福壽螺的同化量不能100%流入中華鱉與圖中d、e、f對(duì)應(yīng)途徑有關(guān)【答案】D【解析】+糞便量（糞便量屬于上一個(gè)營(yíng)養(yǎng)級(jí)流向+用于生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖的能量。用于生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖的能量有兩個(gè)去向：傳遞給下一個(gè)營(yíng)養(yǎng)級(jí)+流向分解者?！驹斀狻緼、生態(tài)系統(tǒng)中的信息傳遞往往是雙向的，而不是沿食物鏈單向傳遞，在該生態(tài)系統(tǒng)中福壽螺和中華鱉之間的信息傳遞是相互的，A錯(cuò)誤；B、據(jù)圖分析，a表示福壽螺的同化量，b表示福壽螺用于生長(zhǎng)、發(fā)育和繁殖等生命活動(dòng)的能量，B錯(cuò)誤；C、由福壽螺流入分解者的能量值應(yīng)是d+e，c屬于水稻同化的能量，C錯(cuò)誤；D、圖中顯示福壽螺一部分能量通過(guò)呼吸作用散失（f于生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖等生命活動(dòng)的能量中，一部分被中華鱉攝入后以糞便的形式流入分解者（e一部分以遺體、殘骸等形式流入分解者（d的同化量不能100%流入中華鱉與圖中d、e、f對(duì)應(yīng)途徑有關(guān)，D正確。故選D。3.對(duì)某松林生態(tài)系統(tǒng)中各部分的碳儲(chǔ)量進(jìn)行調(diào)查，繪制碳轉(zhuǎn)移途徑如下圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）第2頁(yè)/共26頁(yè)A.碳在非生物環(huán)境與生物群落之間循環(huán)，具有全球性B.大氣中CO2主要通過(guò)光合作用固定進(jìn)入生物群落中C.植被與植食性動(dòng)物之間碳元素以CO2形式進(jìn)行傳遞D.圖中“？”為23.17時(shí)，該系統(tǒng)處于碳收支平衡的狀態(tài)【答案】C【解析】1、生態(tài)系統(tǒng)中的組成成分越多，營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)就越復(fù)雜，生態(tài)系統(tǒng)的自動(dòng)調(diào)節(jié)能力就越強(qiáng)，其抵抗力穩(wěn)定性就越強(qiáng)，相反的其恢復(fù)力穩(wěn)定性就越弱。2、生態(tài)系統(tǒng)具有一定的自我調(diào)節(jié)能力，但這種自我調(diào)節(jié)能力有一定限度，如果外界干擾超過(guò)了這個(gè)限度，生態(tài)系統(tǒng)就會(huì)遭到破壞?！驹斀狻緼、碳在非生物環(huán)境與生物群落之間循環(huán)，具有全球性，A正確；B、在生態(tài)系統(tǒng)中，大氣中的CO2主要通過(guò)生產(chǎn)者（主要是綠色植物）的光合作用被固定，將CO2和水轉(zhuǎn)化為有機(jī)物，并釋放出氧氣，從而使碳元素進(jìn)入生物群落。這是碳進(jìn)入生物群落的主要途徑，B正確；CCO2植被中的含碳有機(jī)物，從而獲得碳元素。因此，植被與植食性動(dòng)物之間碳元素是以含碳有機(jī)物的形式進(jìn)行傳遞的，而不是以CO2形式傳遞，C錯(cuò)誤；D、由圖可知，植物從大氣中獲取了35.9噸（公頃·年）的CO，要保證該系統(tǒng)碳收支平衡，則圖中“？”應(yīng)為35.9-12.1-0.6-0.03=23.17，D正確。故選C。4.下列不屬于對(duì)國(guó)家一級(jí)保護(hù)動(dòng)物丹頂鶴的保護(hù)措施的是（）A.建立人工巢穴B.在其棲息地修建公路C.增加覓食的濕地面積D.建立自然保護(hù)區(qū)第3頁(yè)/共26頁(yè)【答案】B【解析】【分析】丹頂鶴作為國(guó)家一級(jí)保護(hù)動(dòng)物，其保護(hù)措施應(yīng)圍繞保護(hù)棲息地、減少人為干擾等方面展開(kāi)。【詳解】A、建立人工巢穴可幫助丹頂鶴繁殖，屬于輔助性保護(hù)措施，A不符合題意；B、在棲息地修建公路會(huì)破壞其生存環(huán)境，增加干擾和生態(tài)碎片化，B符合題意；C、增加覓食濕地面積能改善棲息環(huán)境，保障食物資源，C不符合題意；D、建立自然保護(hù)區(qū)是就地保護(hù)的核心措施，D不符合題意。故選B。5.黃河流域某鹽堿地建立了“上糧下藕、藕魚套養(yǎng)、鴨鵝混養(yǎng)”立體種養(yǎng)模式。在鹽堿地開(kāi)挖魚塘，挖出）A.臺(tái)田經(jīng)雨水沖刷后土壤中無(wú)機(jī)鹽含量降低，適于種植農(nóng)作物B.“上糧下藕”有利于生物充分利用資源，提高經(jīng)濟(jì)效益C.田間害蟲(chóng)為鴨、鵝提供食物使能量能夠循環(huán)利用D.這種立體種養(yǎng)模式體現(xiàn)了生態(tài)工程的整體原理【答案】C【解析】【分析】生態(tài)農(nóng)業(yè)：是按照生態(tài)學(xué)原理和經(jīng)濟(jì)學(xué)原理，運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)成果和現(xiàn)代管理手段，以及傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)的有效經(jīng)驗(yàn)建立起來(lái)的，能獲得較高的經(jīng)濟(jì)效益、生態(tài)效益和社會(huì)效益的現(xiàn)代化農(nóng)業(yè)?！驹斀狻緼、臺(tái)田由鹽堿地泥土堆成，雨水沖刷可淋失部分鹽分，降低無(wú)機(jī)鹽含量，改善作物生長(zhǎng)條件，A正確；B“上糧下藕”B正確；CC錯(cuò)誤；D、該模式統(tǒng)籌協(xié)調(diào)生產(chǎn)、環(huán)境、經(jīng)濟(jì)等因素，體現(xiàn)生態(tài)工程“整體原理”D正確。故選C。6.家庭制作果酒與工業(yè)化啤酒生產(chǎn)共同的特點(diǎn)是（）A.都利用了酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精的原理B.發(fā)酵前都需要對(duì)原料滅菌創(chuàng)設(shè)無(wú)菌環(huán)境C.都能夠嚴(yán)格控制發(fā)酵溫度、氧氣等條件第4頁(yè)/共26頁(yè)D.發(fā)酵結(jié)束后都必須進(jìn)行消毒以延長(zhǎng)保存期【答案】A【解析】【分析】果酒的制作離不開(kāi)酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無(wú)氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。A樣是依靠酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精，二者都利用了酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精的原理，A正確；B啤酒生產(chǎn)會(huì)對(duì)原料等進(jìn)行嚴(yán)格滅菌創(chuàng)設(shè)無(wú)菌環(huán)境，二者不同，B錯(cuò)誤；C有差異，C錯(cuò)誤；D保存期，二者不同，D錯(cuò)誤。故選A。7.某同學(xué)研究植物提取物WW標(biāo)。據(jù)圖分析下列說(shuō)法不正確的是（）A.將菌液與溫度適宜的滅菌培養(yǎng)基混勻，傾倒平板可得到實(shí)驗(yàn)菌平板B.在平板上打孔的工具鋼管需要灼燒滅菌，目的是防止微生物污染平板C.抑菌圈直徑大小與菌體濃度、提取物W的濃度和擴(kuò)散時(shí)間密切相關(guān)D.提取物W在培養(yǎng)基中擴(kuò)散，加入提取物W2小時(shí)即可獲得最佳抑菌效果【答案】D【解析】第5頁(yè)/共26頁(yè)【分析】培養(yǎng)基一般含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽等，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基屬于細(xì)菌培養(yǎng)基，麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基適合培養(yǎng)真菌。常用的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。常用的滅菌方法：干熱滅菌法、灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法?！驹斀狻緼、菌液中含有實(shí)驗(yàn)菌，將一定量菌液與溫度適宜的滅菌培養(yǎng)基混勻并倒平板可得到試驗(yàn)菌平板，A正確；B平板造成污染，B正確；C、抑菌圈直徑的大小與菌體濃度、提取物W的濃度和預(yù)擴(kuò)散時(shí)間有很大關(guān)系，C正確；DWW后的2小時(shí)獲得抑菌圈最大平均增幅速率，說(shuō)明提取物在2小時(shí)內(nèi)擴(kuò)散得較快，但不能確定為最佳抑菌效果，上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，24小時(shí)抑菌圈的直徑最大，抑菌效果更佳，D錯(cuò)誤。故選D。8.百歲蘭是一種裸子植物，被譽(yù)為植物界的“活化石”。為研發(fā)高效的百歲蘭葉片愈傷組織誘導(dǎo)體系，探究避光與晝夜節(jié)律（每天16h光照和8h黑暗）條件對(duì)誘導(dǎo)百歲蘭葉片愈傷組織的影響，結(jié)果見(jiàn)下圖。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.培養(yǎng)基中需要加入適宜比例的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素B.愈傷組織形成經(jīng)過(guò)已分化細(xì)胞變成未分化細(xì)胞過(guò)程C.百歲蘭葉片經(jīng)誘導(dǎo)形成的愈傷組織不具有全能性D.與避光相比，晝夜節(jié)律下百歲蘭愈傷組織生長(zhǎng)得更好【答案】C【解析】【分析】植物組織培養(yǎng)時(shí)，生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵激素，二者的濃度、比例等都會(huì)影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向：生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比例適中時(shí)，有利于愈傷組織的形成；生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比例升高，利于根的分化、抑制芽的形成；生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比例降低，利于芽的分第6頁(yè)/共26頁(yè)化、抑制根的形成。A成，A正確；B、外植體經(jīng)脫分化形成愈傷組織，愈傷組織形成經(jīng)過(guò)已分化細(xì)胞變成未分化細(xì)胞過(guò)程，B正確；C、百歲蘭葉片經(jīng)誘導(dǎo)形成的愈傷組織能發(fā)育成完整植株，具有全能性，C錯(cuò)誤；DD正確。故選C。9.白葉枯病是水稻最嚴(yán)重的病害之一，疣粒野生稻具有高度抗病性。利用疣粒野生稻與栽培稻進(jìn)行體細(xì)胞72株雜種植株鑒定，發(fā)現(xiàn)24株染色體數(shù)目在27~38條之間，40株表現(xiàn)抗病。下列敘述不正確的是（）A.①用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體B.②可用聚乙二醇、滅活病毒等方法處理，獲得融合細(xì)胞C.雜種植株形成說(shuō)明兩種細(xì)胞融合后分裂能力恢復(fù)D.雜種植株細(xì)胞中染色體的丟失可能與X射線照射有關(guān)【答案】B【解析】【分析】植物體細(xì)胞雜交是指將不同來(lái)源的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新植株的技術(shù)。植物體細(xì)胞雜交技術(shù)在打破生殖隔離，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種，培育植物新品種等方面展現(xiàn)出獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性。【詳解】A、①為獲得原生質(zhì)體，可纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁獲得，A正確；B、②獲得融合細(xì)胞，滅活病毒誘導(dǎo)法用于動(dòng)物細(xì)胞融合，B錯(cuò)誤；CX射線處理及碘乙酰胺處理后的原生質(zhì)體均不能進(jìn)行細(xì)胞分裂，故雜種植株形成說(shuō)明兩種細(xì)第7頁(yè)/共26頁(yè)胞融合后分裂能力恢復(fù)，C正確；DX的丟失，D正確。故選B。10.胞生物學(xué)研究等領(lǐng)域。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.懸浮培養(yǎng)可增加細(xì)胞與培養(yǎng)液的接觸，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收B.若培養(yǎng)密度過(guò)大，會(huì)出現(xiàn)有害代謝產(chǎn)物積累使分裂受阻C.對(duì)動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行懸浮培養(yǎng)時(shí)通常不會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象D.對(duì)動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行懸浮培養(yǎng)不需傳代，適合規(guī)模化培養(yǎng)【答案】D【解析】【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)?！驹斀狻緼、懸浮培養(yǎng)使細(xì)胞分散于培養(yǎng)液中，充分接觸培養(yǎng)基，利于吸收營(yíng)養(yǎng)，A正確；B、高密度培養(yǎng)時(shí)，代謝廢物（如乳酸、氨等）積累會(huì)抑制細(xì)胞分裂，B正確；C、接觸抑制發(fā)生于貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞因分散而不受此限制，C正確；DD錯(cuò)誤。故選D。將四種關(guān)鍵基因?qū)胄∈蟮某衫w維細(xì)胞，可獲得誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSiPS細(xì)胞具有和胚胎干細(xì)胞類似的功能，可分化成神經(jīng)細(xì)胞、心血管細(xì)胞和原始生殖細(xì)胞等。下列敘述不正確的是（）A.應(yīng)使用顯微注射法將四種基因直接注入成纖維細(xì)胞B.導(dǎo)入的四種基因具有促使體細(xì)胞恢復(fù)分裂能力的作用C.iPS細(xì)胞能分化成多種細(xì)胞，是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果D.iPS細(xì)胞可在一定程度上避免胚胎干細(xì)胞涉及的倫理問(wèn)題【答案】A【解析】ES或EKiPS與ES細(xì)胞一樣，可通過(guò)定向誘導(dǎo)分化修補(bǔ)某些功能異常的細(xì)胞來(lái)治療疾病。第8頁(yè)/共26頁(yè)A因片段。直接注入的基因難以整合到宿主基因組中，A錯(cuò)誤；BOct4Sox2iPSB正確；C、iPS細(xì)胞分化為不同細(xì)胞是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果，符合細(xì)胞分化的本質(zhì)，C正確；D、iPS細(xì)胞來(lái)源于體細(xì)胞，無(wú)需破壞胚胎，避免了胚胎干細(xì)胞涉及的倫理爭(zhēng)議，D正確；故選A。12.利用新鮮菜花作為實(shí)驗(yàn)材料提取DNA時(shí)，下列做法正確的是（）A.可將菜花置于清水中，細(xì)胞吸水破裂后將DNA釋放出來(lái)B.離心后上清液中加入95%冷酒精，出現(xiàn)的白色絲狀物就是純凈的DNAC.將晾干的白色絲狀物置于2mol/L的NaCl溶液中，會(huì)發(fā)生溶解現(xiàn)象D.向DNA溶液中加入二苯胺試劑混勻，溶液會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色【答案】C【解析】【分析】DNA粗提取和鑒定的原理：1、DNA1）DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分2）DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。2DNADNA沒(méi)有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60-80℃的高溫，而DNA在80℃以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但對(duì)DNA沒(méi)有影響。3、DNA的鑒定：在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑?！驹斀狻緼、菜花是植物細(xì)胞，其細(xì)胞壁有保護(hù)和支撐的作用，不會(huì)吸水漲破，需要用洗滌劑瓦解細(xì)胞膜，A錯(cuò)誤；B、在上清液中加入等體積的95%的冷酒精，白色絲狀物是粗提取的DNA，B錯(cuò)誤；CDNA在2mol/L的氯化鈉溶液中溶解度較大，所以將晾干的白色絲狀物置于2mol/L的NaCl發(fā)生溶解現(xiàn)象，C正確；D、DNA在沸水浴條件下遇到二苯胺試劑呈現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)，D錯(cuò)誤。故選C。13.大腸桿菌中的Z酶可催化X-gal水解產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)。pUC18質(zhì)粒（如圖甲）中l(wèi)acZ'編碼Z酶的一個(gè)片第9頁(yè)/共26頁(yè)段（αα肽、缺失α肽的Z酶片段單獨(dú)存在時(shí)均無(wú)Z酶活性，同時(shí)存在時(shí)表現(xiàn)出Z酶活性。將圖乙目的基因插入pUC18質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌，可根據(jù)菌落顏色篩選含有重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞。下列相關(guān)分析不正確的是（）A.選用SalⅠ限制酶切割目的基因與pUC18質(zhì)粒B.利用DNA連接酶連接目的基因與pUC18質(zhì)粒獲得重組質(zhì)粒C.作為受體細(xì)胞的大腸桿菌需滿足Z酶基因中僅編碼α肽的DNA序列缺失D.在含有X-gal培養(yǎng)基中培養(yǎng)時(shí)，含有重組質(zhì)粒大腸桿菌的菌落顏色為藍(lán)色【答案】D【解析】【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定?！驹斀狻緼、根據(jù)乙圖可知，HindIII會(huì)破壞目的基因，故選用Sa1I限制酶切割目的基因和pUC18質(zhì)粒，A正確；B、利用DNA連接酶連接目的基因與pUC18質(zhì)粒獲得重組質(zhì)粒，B正確；C、已知α肽、缺失α肽的Z酶片段單獨(dú)存在時(shí)均無(wú)Z酶活性，同時(shí)存在時(shí)表現(xiàn)出Z酶活性，故要想根據(jù)菌落顏色篩選含有重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞，作為受體細(xì)胞的大腸桿菌需滿足Z酶基因中僅編碼α肽的DNA序列缺失，C正確；DSalⅠ限制酶會(huì)破壞pUC18質(zhì)粒中l(wèi)acZ'ZX-gal的培養(yǎng)基中培養(yǎng)時(shí)，含有重組質(zhì)粒大腸桿菌的菌落顏色為無(wú)色，D錯(cuò)誤。故選D。第10頁(yè)/共26頁(yè)14.凝乳酶是奶酪生產(chǎn)中的關(guān)鍵性酶?？茖W(xué)家采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對(duì)凝乳酶進(jìn)行改造，將其第20位和第24位氨基酸改變?yōu)榘腚装彼?，催化能力提高?倍。下列敘述不正確的是（）A.該技術(shù)需要先預(yù)期蛋白質(zhì)的功能B.該技術(shù)直接操作對(duì)象是凝乳酶基因C.該技術(shù)可直接在體外合成凝乳酶D.改造后的凝乳酶需進(jìn)行生物功能檢測(cè)【答案】C【解析】【分析】蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。也就是說(shuō)，蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來(lái)的第二代基因工程，是包含多學(xué)科的綜合科技工程領(lǐng)域。【詳解】A、采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對(duì)凝乳酶進(jìn)行改造之前需要先預(yù)期蛋白質(zhì)的功能，A正確；B白質(zhì)，故對(duì)凝乳酶進(jìn)行改造技術(shù)中直接操作對(duì)象是凝乳酶基因，B正確；C、該技術(shù)不能直接在體外合成凝乳酶，而是對(duì)凝乳酶基因進(jìn)行改造，實(shí)現(xiàn)對(duì)凝乳酶的改造，C錯(cuò)誤；D、改造后的凝乳酶需進(jìn)行生物功能檢測(cè)，以確保獲得預(yù)期的凝乳酶，D正確。故選C。15.下述實(shí)驗(yàn)操作需在無(wú)菌環(huán)境條件下進(jìn)行的是（）A.對(duì)分解尿素細(xì)菌進(jìn)行顯微計(jì)數(shù)B.將外植體接種到培養(yǎng)基上C.從新鮮洋蔥中粗提取DNAD.用PCR儀對(duì)DNA片段進(jìn)行擴(kuò)增【答案】B【解析】【分析】植物組織培養(yǎng)要求非常嚴(yán)格的無(wú)菌環(huán)境，如果滅菌不徹底，培養(yǎng)過(guò)程中存在污染，會(huì)造成培養(yǎng)的幼苗生長(zhǎng)緩慢甚至培育失敗。A環(huán)境下，因?yàn)榇藭r(shí)主要是對(duì)已有的細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，A錯(cuò)誤；B體爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)，影響外植體的生長(zhǎng)和分化，所以必須在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行，B正確；第11頁(yè)/共26頁(yè)CDNADNA的無(wú)菌環(huán)境，C錯(cuò)誤；DPCR儀對(duì)DNAPCR反應(yīng)體系中有耐高溫的DNA聚合酶等物質(zhì)，并且反應(yīng)在高溫條件下進(jìn)行，一般雜菌難以生存，不需要在無(wú)菌環(huán)境下操作，D錯(cuò)誤。故選B。第二部分本部分共6題，共分。16.濕地接納污水，并對(duì)人工濕地的作用效果進(jìn)行定量評(píng)估。（1）人工濕地建設(shè)者因地制宜，以當(dāng)?shù)鼐哂羞^(guò)濾和吸附能力的黏性土壤為基質(zhì)，引種本地蘆葦和菖蒲等，體現(xiàn)了生態(tài)工程的__________________原理。（2）在人工濕地的進(jìn)、出水口設(shè)置采樣點(diǎn)對(duì)水質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如圖1，表明人工濕地可以有效凈化流入__________________NP的去除率最大值在7月，可能的原因是__________________。（3）進(jìn)一步研究人工濕地對(duì)土壤養(yǎng)分的影響。在濕地內(nèi)、外分別布設(shè)5個(gè)采樣點(diǎn)，在采樣點(diǎn)的0~60cm土壤深度范圍內(nèi)，每隔10cm采集一份樣品，測(cè)定土壤有機(jī)質(zhì)含量如圖2。共采集和統(tǒng)計(jì)了_________份土壤樣品，結(jié)果說(shuō)明__________________。第12頁(yè)/共26頁(yè)（4）目前人工濕地仍面臨一些問(wèn)題，如水分蒸發(fā)量大導(dǎo)致的鹽分積累，外來(lái)物種入侵，經(jīng)濟(jì)效益低下等，要解決這些問(wèn)題，可采取的措施包括_______。A.引入當(dāng)?shù)亟?jīng)濟(jì)型鹽生植物，并定期收割B.建立魚—植物共生系統(tǒng)，養(yǎng)殖耐鹽魚類C.建立入侵物種預(yù)警系統(tǒng)，及時(shí)清除入侵物種D.去除非優(yōu)勢(shì)植物，大量種植當(dāng)?shù)貎?yōu)勢(shì)植物【答案】（1）協(xié)調(diào)、自生（2）①.（進(jìn)水的N或P濃度-出水的N或P濃度）/進(jìn)水的N或P濃度×100%②.7月濕地內(nèi)植NP升（3）①.60②.在不同土壤深度，人工濕地均可以顯著提高土壤養(yǎng)分（4）ABC【解析】【分析】生態(tài)工程所遵循的基本原理：整體，協(xié)調(diào)、循環(huán)、自生等。1、自生：由生物組分而產(chǎn)生的自組織、自我優(yōu)化、自我調(diào)節(jié)、自我更新和維持就是系統(tǒng)的自生。遵循自生原理，需要在生態(tài)工程中有效選擇生物組分并合理布設(shè)。2、循環(huán)：循環(huán)是指在生態(tài)工程中促進(jìn)系統(tǒng)的物質(zhì)遷移與轉(zhuǎn)化，既保證各個(gè)環(huán)節(jié)的物質(zhì)遷移順暢，也保證主要物質(zhì)或元表的轉(zhuǎn)化效率較高。3生物與生物的協(xié)調(diào)與平衡，需要考慮環(huán)境容納量。4、整體：遵循整體原理，首先要遵從自然生態(tài)系統(tǒng)的規(guī)律，各組分之間要有適當(dāng)?shù)谋壤?，不同組分之間應(yīng)構(gòu)成有序的結(jié)構(gòu)，通過(guò)改變和優(yōu)化結(jié)構(gòu)，達(dá)到改善系統(tǒng)功能的目的。【小問(wèn)1詳解】以當(dāng)?shù)鼐哂羞^(guò)濾和吸附能力的黏性土壤為基質(zhì)”，體現(xiàn)了生態(tài)工程的自生原理，協(xié)調(diào)：處理好生物與環(huán)境、第13頁(yè)/共26頁(yè)體現(xiàn)了生態(tài)工程的協(xié)調(diào)原理?！拘?wèn)2詳解】圖中去除率的計(jì)算方法是（進(jìn)水的N或P濃度-出水的N或P濃度）/進(jìn)水的N或P濃度×100%7月濕地NP率提升，因此人工濕地對(duì)N、P的去除率最大?！拘?wèn)3詳解】在人工濕地內(nèi)、外分別布設(shè)5個(gè)采樣點(diǎn)，在采樣點(diǎn)的0~60cm土壤深度范圍內(nèi)，每隔10cm采集一份樣品，因此共有65個(gè)采樣點(diǎn)一共有5×6=3060知，不同深度下，人工濕地內(nèi)的有機(jī)質(zhì)均多于人工濕地外，說(shuō)明在不同土壤深度，人工濕地均可以顯著提高土壤養(yǎng)分?！拘?wèn)4詳解】A、引入當(dāng)?shù)亟?jīng)濟(jì)型鹽生植物，可吸收大量鹽分，定期收割，減少鹽分積累，A正確；B、建立魚—植物共生系統(tǒng)，養(yǎng)殖耐鹽魚類，可以減少鹽分積累，B正確；C、建立入侵物種預(yù)警系統(tǒng)，及時(shí)清除入侵物種，改善營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)，避免生態(tài)入侵，C正確；DD錯(cuò)誤。故選ABC。17.羥基脂肪酸酯（PHA（1_________。將培養(yǎng)的菌液_________后分別涂布于不同的平板培養(yǎng)基上，分離、培養(yǎng)并鑒定出該菌株。（2）該菌株合成PHA的主要途徑如圖1。為提高PHA產(chǎn)量，研究人員敲除菌株中編碼P酶的基因，目的是_________。在敲除P酶基因的菌株中過(guò)表達(dá)M基因，顯微鏡下觀察菌株形態(tài)，結(jié)果如圖2。結(jié)果顯示，與對(duì)照組細(xì)胞相比，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞_________。實(shí)驗(yàn)組菌株能夠在液體培養(yǎng)基中自動(dòng)沉降。（33所示的“非滅菌連續(xù)開(kāi)放發(fā)酵系統(tǒng)”培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)組菌株并生產(chǎn)PHA第14頁(yè)/共26頁(yè)過(guò)調(diào)節(jié)馬達(dá)轉(zhuǎn)速控制_________。根據(jù)圖中培養(yǎng)條件分析，該系統(tǒng)不需要滅菌的理由是_________。（4）綜合上述信息，分析利用（3）所示系統(tǒng)生產(chǎn)PHA的兩點(diǎn)優(yōu)勢(shì)___________?！敬鸢浮浚?）①.碳源②.梯度稀釋（2）①.減少丙酰輔酶A向2-甲基檸檬酸轉(zhuǎn)化②.出現(xiàn)纖長(zhǎng)化現(xiàn)象（3）①.培養(yǎng)液的溶解氧濃度②.鹽濃度為6%pH為9酶變性失活，生長(zhǎng)繁殖受到抑制（4）利用餐廚廢料及海水發(fā)酵，降低成本；細(xì)菌可發(fā)生自沉降，實(shí)現(xiàn)簡(jiǎn)單快速分離菌體；培養(yǎng)液上清循環(huán)使用，實(shí)現(xiàn)了無(wú)廢水連續(xù)發(fā)酵和廢鹽回收利用【解析】【分析】在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽?！拘?wèn)1詳解】葡萄糖是含碳的有機(jī)物，在培養(yǎng)基中能為微生物生長(zhǎng)提供碳源。為了獲得單個(gè)菌落，將培養(yǎng)的菌液進(jìn)行梯度稀釋后分別涂布于不同的平板培養(yǎng)基上，這樣可以使菌液中的微生物分散開(kāi)來(lái)，便于后續(xù)的分離、培養(yǎng)和鑒定?！拘?wèn)2詳解】從圖1P酶催化丙酰輔酶A生成2-A是合成PHA株中編碼PA向2-A用于合成PHA，提高PHA產(chǎn)量。觀察圖2，與對(duì)照組細(xì)胞相比，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞出現(xiàn)纖長(zhǎng)化現(xiàn)象，且實(shí)驗(yàn)組菌株能夠在液體培養(yǎng)基中自動(dòng)沉降。第15頁(yè)/共26頁(yè)【小問(wèn)3詳解】在“非滅菌連續(xù)開(kāi)放發(fā)酵系統(tǒng)”PHA的合成。從圖中可知，鹽濃度為6%，其他雜菌因失水過(guò)多死亡；pH為9，其他雜菌的酶變性失活，生長(zhǎng)繁殖受到抑制，而該嗜鹽菌能夠在這樣的環(huán)境中生長(zhǎng)，所以該系統(tǒng)不需要滅菌。【小問(wèn)4詳解】3PHA快速分離菌體；培養(yǎng)液上清循環(huán)使用，實(shí)現(xiàn)了無(wú)廢水連續(xù)發(fā)酵和廢鹽回收利用。18.LFLF含量會(huì)隨泌乳時(shí)間延長(zhǎng)而顯著下降。研究發(fā)現(xiàn)CS基因編碼的酪蛋白在乳汁中持續(xù)高表達(dá)。研究人員利用CRISPR/Cas9技術(shù)將LF基因敲入CS基因獲得基因編輯豬。（11CRISPR/Cas9系統(tǒng)中g(shù)RNA能與DNA特定堿基序列（靶點(diǎn)）結(jié)合，引導(dǎo)（核酸酶）定點(diǎn)切割，并通過(guò)同源重組修復(fù)，實(shí)現(xiàn)基因敲入。①修復(fù)時(shí)，DNA斷裂處兩側(cè)與供體DNA的同源區(qū)段會(huì)發(fā)生_____________，實(shí)現(xiàn)供體DNA片段的插入。②本研究中未將gRNA靶點(diǎn)設(shè)計(jì)在CSCS列上游，實(shí)現(xiàn)在LF基因和CS基因共用同一啟動(dòng)子的同時(shí)，__________________。（2）將構(gòu)建好的gRNA、Cas9、LF基因表達(dá)載體共同轉(zhuǎn)入豬胎兒成纖維細(xì)胞。轉(zhuǎn)入前需利用PCR擴(kuò)增Y染色體特異區(qū)域（）進(jìn)行性別鑒定，應(yīng)選擇______________（填“有”或“無(wú)”）條帶的細(xì)胞。（32為L(zhǎng)F基因敲入后CS基因部分結(jié)構(gòu)。據(jù)圖分析，要篩選正確轉(zhuǎn)入LF基因的細(xì)胞，同時(shí)避免內(nèi)源LF基因干擾，PCR時(shí)應(yīng)選擇的兩對(duì)最佳引物組合為_(kāi)_________________。第16頁(yè)/共26頁(yè)（4）將成纖維細(xì)胞注入培養(yǎng)到______________時(shí)期且去核的卵母細(xì)胞中，使兩細(xì)胞融合，培養(yǎng)至重構(gòu)胚后，移植入代孕母豬中。移植前應(yīng)對(duì)供體和受體進(jìn)行同期發(fā)情處理，目的是______________。最終獲得在乳汁中持續(xù)高表達(dá)LF基因的基因編輯豬。（5）本研究中所用載體不含抗性基因等篩選標(biāo)記，從生物安全的角度分析，可以減少_______________?！敬鸢浮浚?）①.交換②.最大限度地減少對(duì)CS基因的破壞（2）無(wú)（3）引物1和引物4，引物3和6（4）①.MⅡ②.使供體和受體的生理?xiàng)l件達(dá)到同步或一致（5）引入外源基因【解析】【分析】基因工程的具體步驟為：目的基因的獲取，基因表達(dá)載體的構(gòu)建，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞和目的基因的檢測(cè)和鑒定。小問(wèn)1詳解】DNA斷裂處兩側(cè)與供體DNA的同源區(qū)段會(huì)發(fā)生交換實(shí)現(xiàn)供體DNA片段的插入。②本研究中未將gRNA靶點(diǎn)設(shè)計(jì)在CSCS列上游，這樣實(shí)現(xiàn)在LF基因和CS基因共用同一啟動(dòng)子的同時(shí)，最大限度地減少對(duì)CS基因的破壞?！拘?wèn)2詳解】因?yàn)橐@得雌性豬的乳汁來(lái)獲取LFY染色體是雄性特有的，是Y染色體上的性別決定基因，所以應(yīng)選擇無(wú)【小問(wèn)3詳解】要篩選正確轉(zhuǎn)入LFLFLF基因與CS基因連接區(qū)域的引物組合。觀察圖2可知，引物1和引物4、以及引物3和6均能夠特異性擴(kuò)增LF基因與CS基因連接區(qū)域，所以PCR時(shí)應(yīng)選擇的兩對(duì)最佳引物組合為引物1和引物4，引物3和6?！拘?wèn)4詳解】M第17頁(yè)/共26頁(yè)細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)，有利于重構(gòu)胚的發(fā)育。在胚胎移植前，對(duì)供體和受體進(jìn)行同期發(fā)情處理，目的是使供體和受體的生理?xiàng)l件達(dá)到同步或一致。【小問(wèn)5詳解】本研究中所用載體不含抗性基因等篩選標(biāo)記，從生物安全的角度分析，可以減少引入外源基因。19.表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）結(jié)構(gòu)如圖1，可與配體表皮生長(zhǎng)因子（EGF）結(jié)合促進(jìn)細(xì)胞增殖，其突變或過(guò)表達(dá)可驅(qū)動(dòng)腫瘤發(fā)生。研究人員通過(guò)制備EGFR單抗治療癌癥。（1）研究人員將EGFR全長(zhǎng)蛋白注射到小鼠體內(nèi)，分離出B淋巴細(xì)胞后誘導(dǎo)其與小鼠的_________細(xì)胞融合，經(jīng)篩選及克隆化培養(yǎng)，最終獲得EGFR單抗。利用EGFR單抗治療癌癥的機(jī)理是_________。（2EGFREGFR改成EGFR的_________重新制備，獲得的單抗抑制癌細(xì)胞增殖效果明顯提升。（3EGFRMet碼另一種生長(zhǎng)因子的受體）拷貝數(shù)增多。推測(cè)耐藥性的產(chǎn)生可能是該基因擴(kuò)增導(dǎo)致的，理由是_________。（4EGFR-Met2FcNK細(xì)胞）表面的Fc受體結(jié)合，介導(dǎo)殺傷細(xì)胞直接殺傷靶細(xì)胞，稱為抗體依賴—細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用（ADCC測(cè)EGFR-Met_________a.EGFR單抗b.EGFR-Met雙特異性抗體c.無(wú)關(guān)抗體d.NK細(xì)胞e.癌細(xì)胞f.B細(xì)胞結(jié)果表明雙特異性抗體的ADCC活性相比EGFR單抗更高。請(qǐng)?jiān)趫D3中補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)組和空白對(duì)照組的結(jié)果__________。（5EGFR靶點(diǎn)耐藥患者的治療，請(qǐng)?zhí)岢鲂柽M(jìn)一步研究的問(wèn)題________?！敬鸢浮浚?）①.骨髓瘤②.EGFR單抗可與EGF競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合EGFREGF對(duì)細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用（2（3MetMetMet第18頁(yè)/共26頁(yè)性（4）①.bde②.（5）藥物對(duì)耐藥腫瘤的抑制效果如何；藥物對(duì)人體是否有副作用等【解析】【分析】單克隆抗體的制備過(guò)程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞（A為B淋巴細(xì)胞，BABAABB型細(xì)胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞?！拘?wèn)1詳解】制備EGFR單抗需將EGFR全長(zhǎng)蛋白免疫小鼠，取B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得?？拱C(jī)理是EGFR單抗與EGF競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合EGFR，阻止受體與配體結(jié)合，降低EGF對(duì)細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用?！拘?wèn)2詳解】因EGFR單抗阻斷癌細(xì)胞增殖效率低，將全長(zhǎng)EGFR改為胞外區(qū)域重新制備單抗，抑制效果提升，說(shuō)明胞外區(qū)域是與配體結(jié)合關(guān)鍵區(qū)域。【小問(wèn)3詳解】耐藥病人癌細(xì)胞中Met基因拷貝數(shù)增多，因基因擴(kuò)增會(huì)使表達(dá)出的Met蛋白增加，使Met受體增多，Met途徑的作用增強(qiáng)，癌細(xì)胞可能通過(guò)該受體接收生長(zhǎng)信號(hào)，擺脫EGFR單抗抑制，從而產(chǎn)生耐藥性?！拘?wèn)4詳解】實(shí)驗(yàn)組選EGFR-Met雙特異性抗體（bNK細(xì)胞（deADCC活性檢測(cè)效果?？誧ADCC3中實(shí)驗(yàn)組曲線應(yīng)高于EGFR曲線接近0（因無(wú)關(guān)抗體無(wú)特異性結(jié)合，ADCC第19頁(yè)/共26頁(yè)。【小問(wèn)5詳解】將該雙特異性抗體開(kāi)發(fā)成藥物用于EGFR靶點(diǎn)耐藥患者的治療，需進(jìn)一步研究的問(wèn)題有藥物對(duì)耐藥腫瘤的抑制效果如何、藥物對(duì)人體是否有副作用、雙特異性抗體藥物的安全性（對(duì)正常細(xì)胞影響）等20.學(xué)習(xí)以下材料，回答（1）~（5）題。細(xì)胞中隱藏的生命調(diào)節(jié)信息—微RNA兩位科學(xué)家Ambros和Ruvkun因發(fā)現(xiàn)微RNA（miRNA）在基因表達(dá)調(diào)控中的作用及分子機(jī)制獲得2024年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。他們的研究始于秀麗隱桿線蟲(chóng)中的兩種基因：lin-4和lin-14。lin-4功能缺失突變體線蟲(chóng)存在明顯的發(fā)育缺陷，會(huì)一直停留在發(fā)育早期。研究者通過(guò)實(shí)驗(yàn)將lin-4基因定位到一個(gè)經(jīng)限制酶SalI切割后含有693個(gè)堿基對(duì)的DNAlin-4基因的RNA產(chǎn)物，結(jié)果如圖1。分析lin-4RNA的堿基序列發(fā)現(xiàn)lin-4RNA是一種非編碼RNA。在線蟲(chóng)發(fā)育早期，lin-14基因編碼的核蛋白表達(dá)量較高，隨著發(fā)育蛋白水平會(huì)逐步下降。lin-14功能缺失突變體線蟲(chóng)會(huì)跳過(guò)發(fā)育早期，呈現(xiàn)出發(fā)育后期的特征。比較lin-4和lin-14RNA序列，發(fā)現(xiàn)lin-14RNA的3'非3'UTRlin-4RNA存在長(zhǎng)度為22個(gè)核苷酸的互補(bǔ)片段。在一種lin-14片段缺失導(dǎo)致lin-14蛋白水平提高了4~7倍，而RNA含量沒(méi)有變化。由此推測(cè)，lin-4RNA能夠調(diào)控lin-14基因的表達(dá)。由于lin-4RNA分子很小，研究者將其稱為miRNA。大量證據(jù)表明miRNA號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等。目前已在人類基因組中鑒定出超過(guò)一千種miRNA基因。細(xì)胞內(nèi)成熟miRNA產(chǎn)生的經(jīng)典途徑及作用如圖2所示。miRNA的發(fā)現(xiàn)將基因表達(dá)調(diào)控領(lǐng)域的研究擴(kuò)展到了全新維度：蛋白質(zhì)在細(xì)胞核中調(diào)控RNA的轉(zhuǎn)錄和剪接，而miRNA則在細(xì)胞質(zhì)中控制mRNA的翻譯和降解。第20頁(yè)/共26頁(yè)（1lin-4DNA_________物片段，將它們分別導(dǎo)入適宜階段的lin-4功能缺失突變體中，若突變體發(fā)育正常，則說(shuō)明_________。（2）lin-4基因RNA產(chǎn)物檢測(cè)時(shí)，設(shè)置U6RNA的目的是排除上樣量、點(diǎn)樣操作等對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，說(shuō)明U6作為內(nèi)參基因應(yīng)具備的特點(diǎn)是_________。（3）下列關(guān)于lin-4miRNA的敘述中，從文中信息不能推斷出_________。A.原miRNA在細(xì)胞質(zhì)中被加工為前miRNAB.與lin-14基因終止子下游的區(qū)域互補(bǔ)結(jié)合C.在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控lin-14基因表達(dá)D.抑制lin-14mRNA翻譯和促進(jìn)lin-14mRNA降解（4）綜合文中信息，解釋圖1中第3組出現(xiàn)兩條lin-4雜交帶的原因________。（5）依據(jù)文中信息，分析lin-4功能缺失突變體停留在發(fā)育早期的原因是_________?！敬鸢浮浚?）①.SalⅠ②.該產(chǎn)物片段中含有l(wèi)in-4基因（2（3ABD（43組中導(dǎo)人了外源的正常lin-461個(gè)核苷酸的前miRNA度為22個(gè)核苷酸的成熟miRNA。由于外源基因表達(dá)量高，前miRNA有部分尚未被進(jìn)一步加工，因此第3組同時(shí)含有上述兩種RNA且均能與探針結(jié)合第21頁(yè)/共26頁(yè)（5）lin-4功能缺失，無(wú)法抑制lin-14RNA的翻譯，lin-14基因編碼的核蛋白含量始終較高【解析】【分析】基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與表達(dá)。其中，基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心?！拘?wèn)1詳解】文中提到“研究者通過(guò)實(shí)驗(yàn)將lin-4基因定位到一個(gè)經(jīng)限制酶SalI切割后含有693個(gè)堿基對(duì)的DNA片段上”，所以從野生型線蟲(chóng)細(xì)胞中提取DNA后，要用限制酶SalI進(jìn)行處理，從而分離得到多種產(chǎn)物片段，將這些產(chǎn)物片段分別導(dǎo)入適宜階段的lin-4lin-4基因，因?yàn)橹挥泻衛(wèi)in-4基因才能使功能缺失突變體恢復(fù)正常發(fā)育?！拘?wèn)2詳解】因?yàn)樵O(shè)置U6RNAU6作為內(nèi)參基因應(yīng)具備在不同細(xì)胞和發(fā)育階段表達(dá)量穩(wěn)定且較高的特點(diǎn)，這樣才能以其為參照，消除因上樣量等操作因素帶來(lái)的誤差，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性?！拘?wèn)3詳解】A2中可以看到原miRNA在細(xì)胞核中被加工為前miRNA推斷出原miRNA在細(xì)胞質(zhì)中被加工為前miRNA，A錯(cuò)誤；Blin-14RNA的3'3'UTRlin-4RNAlin-14基因終止子下游的區(qū)域互補(bǔ)結(jié)合，從文中信息不能得出該結(jié)論，B錯(cuò)誤；C、由“l(fā)in-4RNA能夠調(diào)控lin-14基因的表達(dá)”以及“miRNA則在細(xì)胞質(zhì)中控制mRNA的翻譯和降解”可知，lin-4miRNA在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控lin-14基因表達(dá)，C正確；D、據(jù)文中信息可知，比較lin-4和lin-14RNA序列，發(fā)現(xiàn)lin-14RNA的3'非翻譯區(qū)（3'UTR）與lin-4RNA存在長(zhǎng)度為22個(gè)核苷酸的互補(bǔ)片段，可推斷出lin-4基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物經(jīng)加工后形成的lin-4miRNA，與lin-14mRNA部分配對(duì)，抑制其翻譯過(guò)程，但不能推斷出lin-4miRNA能促進(jìn)lin-14mRNA降解，D錯(cuò)誤。故選ABD?！拘?wèn)4詳解】1中第3組出現(xiàn)兩條lin-4雜交帶的原因第3組中導(dǎo)人了外源的正常lin-4依次被加工成長(zhǎng)度為61個(gè)核苷酸的前miRNA22個(gè)核苷酸的成熟miRNA高，前miRNA有部分尚未被進(jìn)一步加工，因此第3組同時(shí)含有上述兩種RNA且均能與探針結(jié)合?！拘?wèn)5詳解】lin-4功能缺失突變體中l(wèi)in-4基因不能正常表達(dá)lin-4RNAlin-14RNA的3'3'UTRlin-4RNA第22頁(yè)/共26頁(yè)存在互補(bǔ)片段，由于lin-4功能缺失，無(wú)法抑制lin-14RNA的翻譯，lin-14基因編碼的核蛋白含量始終較高，使得線蟲(chóng)停留在發(fā)育早期。21.JA發(fā)育和青蒿素合成，轉(zhuǎn)錄因子M3在此過(guò)程中起重要作用。（1）在構(gòu)建M3基因過(guò)表達(dá)的青蒿植株中，需將M3與圖1所示質(zhì)粒連接，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入細(xì)胞，使用__________篩選T-DNA成功轉(zhuǎn)入的青蒿細(xì)胞。（2）同時(shí)構(gòu)建了M3基因敲低的青蒿植株，圖2結(jié)果說(shuō)明M3在發(fā)育和青蒿素合成中發(fā)揮正調(diào)控作_______________。為進(jìn)一步得出“JA通過(guò)誘導(dǎo)M3基因表達(dá)調(diào)節(jié)發(fā)育和青蒿素合成”這一結(jié)論，還需要補(bǔ)充的證據(jù)是_________。（3）研究人員推測(cè)“M3通過(guò)直接結(jié)合D1啟動(dòng)子來(lái)增強(qiáng)D1的轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)發(fā)育”。若要證明該推測(cè)，將圖3所示質(zhì)粒1和質(zhì)粒2同時(shí)導(dǎo)入同一細(xì)胞，用______________反映轉(zhuǎn)錄因子對(duì)該啟動(dòng)子的作用效果。請(qǐng)?jiān)趫D3的①、②、③處填寫相應(yīng)的組成元件。第23頁(yè)/共26頁(yè)①__________②__________③_______