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文檔簡介
艾滋病標(biāo)本采集及保存流程標(biāo)準(zhǔn)艾滋病的實驗室檢測依賴高質(zhì)量的標(biāo)本,標(biāo)本采集與保存流程的規(guī)范性直接影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性,同時關(guān)系到生物安全防護的有效性。本文結(jié)合臨床實踐、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(如WS293《艾滋病和艾滋病病毒感染診斷》、GB____《實驗室生物安全通用要求》),系統(tǒng)梳理標(biāo)本采集、保存的關(guān)鍵環(huán)節(jié),為醫(yī)療機構(gòu)、疾控中心及第三方檢測機構(gòu)提供實操指引。一、標(biāo)本采集前準(zhǔn)備(一)人員資質(zhì)與培訓(xùn)采集人員需具備醫(yī)學(xué)檢驗或相關(guān)執(zhí)業(yè)資格,崗前需接受生物安全操作、艾滋病檢測技術(shù)、應(yīng)急處理流程等培訓(xùn),考核合格后方可上崗。定期參與復(fù)訓(xùn),確保操作規(guī)范性與風(fēng)險防控能力。(二)設(shè)備與材料準(zhǔn)備采集器材:一次性無菌注射器(1-5ml)、抗凝管(EDTA-K?、肝素鋰等,依檢測目的選擇)、血清分離管(促凝管)、唾液采集器、尿液采集管、采樣拭子等,需在有效期內(nèi)且無破損。防護用品:醫(yī)用防護服、一次性手套(雙層)、護目鏡、醫(yī)用口罩(N95或同級),防止職業(yè)暴露。輔助設(shè)備:生物安全柜(Ⅱ級及以上)、離心機(轉(zhuǎn)速適配標(biāo)本處理)、低溫冰箱(-20℃、-80℃,校準(zhǔn)合格)、溫度計(實時監(jiān)控溫度)。(三)環(huán)境要求采集區(qū)域需清潔、通風(fēng),劃分“清潔區(qū)-操作區(qū)-污染區(qū)”,操作臺面用75%乙醇或含氯消毒劑(500mg/L)消毒,醫(yī)療廢物按“感染性廢物”規(guī)范處置(雙層包裝、專用容器)。(四)受試者準(zhǔn)備告知檢測目的、流程及注意事項,必要時簽署知情同意書(如科研或特殊檢測)。采血前避免劇烈運動、飲酒,建議空腹或餐后2小時采集;唾液采集前30分鐘避免進食、飲水、吸煙;尿液采集取中段尿,女性需擦拭外陰、男性清潔龜頭,避免污染。二、標(biāo)本采集流程(一)血清/血漿標(biāo)本采集(靜脈血)1.消毒:75%乙醇消毒穿刺部位(直徑≥5cm),待干后穿刺(避免碘伏殘留影響核酸檢測)。2.采血:用一次性注射器采集3-5ml靜脈血,緩慢注入血清分離管(促凝管,用于抗體檢測)或抗凝管(如EDTA-K?管,用于核酸檢測)。3.處理:血清管:室溫(20-25℃)靜置30-60分鐘,待血液凝固后,以3000rpm離心10分鐘分離血清??鼓埽翰杉筝p柔顛倒混勻(避免溶血),4小時內(nèi)以3000rpm離心10分鐘分離血漿。4.注意事項:避免溶血(采血時勿過度擠壓、注射器勿回推),離心后及時分離血清/血漿,標(biāo)記“姓名縮寫+編號+采集時間+標(biāo)本類型”。(二)全血標(biāo)本采集(適用于快速檢測、核酸檢測)1.末梢血(膠體金法等快速檢測)消毒:75%乙醇消毒指尖,待干后穿刺(深度適中,避免擠壓過度導(dǎo)致溶血)。采血:用毛細(xì)吸管或微量采血管采集20-50μl全血,直接滴入檢測卡或抗凝管(如用于核酸檢測,需立即加入RNA穩(wěn)定劑)。2.靜脈全血(核酸檢測、長期保存)同“血清/血漿采集”流程,使用抗凝管,采集后輕柔混勻,4小時內(nèi)送檢或處理。(三)唾液標(biāo)本采集(專用采集器)1.采集前30分鐘用清水漱口(無需牙膏),避免進食、吸煙。2.自然分泌或輕咬采集器棉墊,使唾液浸潤棉墊(約5分鐘),或通過舌面攪動促進分泌,采集量以覆蓋棉墊為宜。3.將棉墊放入保存液中,旋緊蓋子,輕柔擠壓棉墊使唾液充分混合,標(biāo)記標(biāo)本信息。(四)尿液標(biāo)本采集(中段尿)1.清潔尿道口(女性擦拭外陰,男性清潔龜頭),留取中段尿5-10ml于無菌采集管。2.注意事項:采集后2小時內(nèi)送檢;若無法及時處理,可4℃保存24小時,或-20℃凍存(長期保存)。三、標(biāo)本保存流程(一)短期保存(≤24小時)血清/血漿:2-8℃保存,避免反復(fù)凍融;全血(抗凝)2-8℃保存,4小時內(nèi)檢測或處理。唾液/尿液:2-8℃保存,唾液標(biāo)本需確保保存液與標(biāo)本充分混合,尿液避免污染。(二)長期保存(>24小時或需存檔)血清/血漿:分裝后-20℃保存(可穩(wěn)定數(shù)月);如需長期(數(shù)年)保存,轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱(建議分裝成單次檢測量,避免反復(fù)凍融)。全血(核酸檢測):加入RNA穩(wěn)定劑后,可-20℃或-80℃保存,避免RNA降解。唾液/尿液:-20℃凍存,唾液標(biāo)本凍存前確保保存液作用充分,尿液凍存前離心去除沉淀。(三)運輸要求冷鏈運輸:標(biāo)本置于帶冰袋的保溫箱,血清/血漿、全血(抗凝)保持2-8℃(運輸時間≤24小時)或-20℃(長期運輸);唾液/尿液同保存溫度。包裝規(guī)范:標(biāo)本管密封,外裹吸水紙,放入生物安全運輸箱,貼“生物危害”標(biāo)識,隨附送檢單(含標(biāo)本信息、采集時間、檢測目的)。四、質(zhì)量控制要點(一)標(biāo)本標(biāo)識采用唯一編號(如“HIV-____”),與送檢單信息一致,注明采集時間、類型、受試者信息(脫敏處理,如“張××”)。(二)污染防控操作全程在生物安全柜內(nèi)進行,避免標(biāo)本間交叉污染;醫(yī)療廢物按《醫(yī)療廢物管理條例》處理(雙層包裝、專用容器、及時轉(zhuǎn)運)。(三)記錄管理詳細(xì)記錄采集時間、人員、標(biāo)本狀態(tài)(如是否溶血、量是否充足)、保存溫度、運輸信息,便于溯源。建議使用電子臺賬,實時更新標(biāo)本流向。(四)質(zhì)控品使用每批次標(biāo)本采集時,同步采集質(zhì)控品(如已知陽性、陰性對照),監(jiān)控采集、保存流程的穩(wěn)定性(如陽性對照檢測陽性率、陰性對照無假陽性)。五、注意事項(一)生物安全防護采集過程中若發(fā)生職業(yè)暴露(如針刺傷、黏膜接觸),立即按《艾滋病職業(yè)暴露處理程序》處理:針刺傷:擠出傷口血液,用肥皂水+流動水沖洗,75%乙醇消毒,報告上級并評估預(yù)防性用藥。黏膜接觸:用大量生理鹽水沖洗,報告上級并監(jiān)測。(二)標(biāo)本狀態(tài)監(jiān)控采集后檢查標(biāo)本是否合格(如血清無溶血、量≥2ml,唾液無雜質(zhì),尿液無渾濁),不合格標(biāo)本重新采集(需告知受試者原因,獲得配合)。(三)人員培訓(xùn)與考核定期開展操作培訓(xùn)(每半年至少1次),考核合格后方可上崗,確保流程執(zhí)行一致性(如采血手法、離心參數(shù)、保存溫度監(jiān)控)。結(jié)語艾滋病標(biāo)本的采集與保存是檢測準(zhǔn)確性的“第一道防線”,規(guī)范的流程不僅保障檢測質(zhì)量,更降低生物安全風(fēng)險。各機構(gòu)應(yīng)結(jié)合自身條件,嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)操作流程(SOP),定期優(yōu)化管理(如引入信息化溯
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