[國家事業(yè)單位招聘】2024中國科學(xué)院動物研究所國家干細(xì)胞資源庫細(xì)胞資源技術(shù)主管崗位招聘1人公筆試歷年參考題庫典型考點(diǎn)附帶答案詳解(3卷合一)（第1套）一、單項(xiàng)選擇題下列各題只有一個正確答案，請選出最恰當(dāng)?shù)倪x項(xiàng)（共25題）1、細(xì)胞培養(yǎng)過程中，最常用的平衡鹽溶液是？A.PBS緩沖液B.生理鹽水C.Hank's液D.RPMI-1640培養(yǎng)基2、干細(xì)胞最顯著的生物學(xué)特性是？A.分化能力B.增殖能力C.自我更新和多向分化能力D.遷移能力3、細(xì)胞凍存時最常用的保護(hù)劑是？A.甘油B.二甲基亞砜C.蔗糖D.丙二醇4、細(xì)胞計(jì)數(shù)時通常使用的計(jì)數(shù)板是？A.血球計(jì)數(shù)板B.玻璃計(jì)數(shù)板C.塑料計(jì)數(shù)板D.金屬計(jì)數(shù)板5、細(xì)胞培養(yǎng)箱的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)條件是？A.37℃，5%CO2B.25℃，3%CO2C.37℃，10%CO2D.4℃，5%CO26、在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，CO2培養(yǎng)箱的標(biāo)準(zhǔn)CO2濃度通常設(shè)置為多少？A.1%B.5%C.10%D.20%7、以下哪種細(xì)胞器是植物細(xì)胞特有的結(jié)構(gòu)？A.線粒體B.高爾基體C.葉綠體D.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)8、PCR反應(yīng)中，DNA變性溫度通常設(shè)置為多少度？A.55°CB.72°CC.94°CD.37°C9、下列哪種培養(yǎng)基最適合哺乳動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)？A.LB培養(yǎng)基B.DMEM培養(yǎng)基C.瓊脂培養(yǎng)基D.麥康凱培養(yǎng)基10、在顯微鏡下觀察細(xì)胞時，下列哪種染色方法常用于觀察細(xì)胞核？A.伊紅染色B.蘇木精染色C.革蘭氏染色D.革蘭氏復(fù)染11、在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，以下哪種培養(yǎng)基最適合干細(xì)胞的體外擴(kuò)增？A.DMEM培養(yǎng)基B.RPMI-1640培養(yǎng)基C.ES細(xì)胞專用培養(yǎng)基D.MEM培養(yǎng)基12、細(xì)胞凍存時最常用的保護(hù)劑是？A.甘油B.二甲基亞砜(DMSO)C.乙醇D.丙二醇13、以下哪種檢測方法最適合評估細(xì)胞活力？A.臺盼藍(lán)染色法B.HE染色法C.革蘭氏染色法D.吉姆薩染色法14、細(xì)胞傳代時，最常用的消化酶是？A.胰蛋白酶B.膠原酶C.彈性蛋白酶D.蛋白酶K15、干細(xì)胞的最基本特征是？A.分裂速度快B.具有自我更新和多向分化潛能C.體積小D.核質(zhì)比高16、在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，CO2培養(yǎng)箱的標(biāo)準(zhǔn)CO2濃度通常設(shè)定為多少？A.1%B.5%C.10%D.15%17、下列哪種細(xì)胞器具有雙層膜結(jié)構(gòu)？A.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)B.高爾基體C.線粒體D.溶酶體18、PCR反應(yīng)中DNA聚合酶的最適溫度通常為多少攝氏度？A.37℃B.55℃C.72℃D.94℃19、細(xì)胞凋亡過程中起關(guān)鍵作用的酶類是？A.DNA聚合酶B.Caspase家族蛋白酶C.RNA聚合酶D.蛋白激酶20、原代細(xì)胞培養(yǎng)傳代次數(shù)通常限制在多少代以內(nèi)？A.5代B.10代C.20代D.50代21、在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，為了維持培養(yǎng)基的pH值穩(wěn)定，最常用的緩沖系統(tǒng)是？A.磷酸鹽緩沖系統(tǒng)B.碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)C.Tris緩沖系統(tǒng)D.HEPES緩沖系統(tǒng)22、干細(xì)胞具有自我更新和多向分化潛能的特點(diǎn)，其分化能力最強(qiáng)的是？A.多能干細(xì)胞B.全能干細(xì)胞C.單能干細(xì)胞D.亞全能干細(xì)胞23、細(xì)胞凍存時最常用的保護(hù)劑是？A.甘油B.二甲基亞砜C.丙二醇D.蔗糖24、流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期時，最常使用的DNA染料是？A.藻紅蛋白B.異硫氰酸熒光素C.碘化丙啶D.德克薩斯紅25、在無菌操作中，75%乙醇消毒的殺菌機(jī)制主要是？A.破壞細(xì)胞壁B.使蛋白質(zhì)變性凝固C.抑制酶活性D.阻斷DNA復(fù)制二、多項(xiàng)選擇題下列各題有多個正確答案，請選出所有正確選項(xiàng)（共15題）26、細(xì)胞培養(yǎng)過程中，常用的抗生素組合包括：A.青霉素和鏈霉素B.慶大霉素和卡那霉素C.新霉素和制霉菌素D.萬古霉素和氯霉素27、干細(xì)胞的特征性標(biāo)志物包括：A.Oct4B.NanogC.Sox2D.CD4528、細(xì)胞凍存時常用的保護(hù)劑包括：A.二甲基亞砜(DMSO)B.甘油C.丙二醇D.乙二醇29、細(xì)胞計(jì)數(shù)時需要考慮的因素包括：A.細(xì)胞活率B.細(xì)胞大小C.細(xì)胞形態(tài)D.細(xì)胞密度30、細(xì)胞傳代培養(yǎng)的操作要點(diǎn)包括：A.選擇合適的消化酶B.控制消化時間C.確保無菌操作D.調(diào)整適宜的細(xì)胞密度31、細(xì)胞培養(yǎng)過程中需要嚴(yán)格控制的環(huán)境因素包括哪些？A.溫度B.pH值C.濕度D.氣體環(huán)境E.光照強(qiáng)度32、干細(xì)胞的基本特征包括哪些？A.自我更新能力B.多向分化潛能C.無限增殖能力D.特異性標(biāo)記蛋白表達(dá)E.遺傳穩(wěn)定性33、細(xì)胞凍存技術(shù)中常用的保護(hù)劑包括哪些？A.二甲基亞砜(DMSO)B.甘油C.丙二醇D.蔗糖E.葡萄糖34、細(xì)胞計(jì)數(shù)時需要考慮的因素包括哪些？A.細(xì)胞存活率B.細(xì)胞聚集情況C.細(xì)胞大小差異D.細(xì)胞周期分布E.細(xì)胞形態(tài)35、無菌操作技術(shù)的基本要求包括哪些？A.操作前手部消毒B.使用無菌器具C.在生物安全柜內(nèi)操作D.避免交叉污染E.定期檢測無菌狀態(tài)36、細(xì)胞培養(yǎng)過程中，以下哪些因素會影響細(xì)胞的生長狀態(tài)？A.培養(yǎng)基的pH值B.二氧化碳濃度C.培養(yǎng)箱溫度D.細(xì)胞傳代次數(shù)37、干細(xì)胞的主要特征包括哪些？A.自我更新能力B.多向分化潛能C.無限增殖能力D.特定的表面標(biāo)記物38、以下哪些技術(shù)屬于細(xì)胞生物學(xué)研究的常用方法？A.流式細(xì)胞術(shù)B.免疫熒光染色C.實(shí)時熒光定量PCRD.蛋白質(zhì)印跡法39、細(xì)胞凍存的關(guān)鍵技術(shù)要點(diǎn)包括哪些？A.使用凍存保護(hù)劑B.控制降溫速率C.選擇合適的凍存容器D.維持液氮儲存溫度40、實(shí)驗(yàn)室生物安全管理的基本原則包括哪些？A.個人防護(hù)措施B.實(shí)驗(yàn)室物理隔離C.廢物處理規(guī)范D.人員培訓(xùn)制度三、判斷題判斷下列說法是否正確（共10題）41、細(xì)胞培養(yǎng)過程中，CO2濃度通常維持在5%左右以維持培養(yǎng)基的pH值穩(wěn)定。A.正確B.錯誤42、干細(xì)胞具有自我更新和多向分化潛能兩個核心特征。A.正確B.錯誤43、液氮冷凍保存細(xì)胞時，降溫速度越快越有利于細(xì)胞存活。A.正確B.錯誤44、無菌操作技術(shù)是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵要素之一。A.正確B.錯誤45、細(xì)胞傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間越長對細(xì)胞越有利。A.正確B.錯誤46、細(xì)胞培養(yǎng)過程中，CO2濃度通常維持在5%左右以維持培養(yǎng)基的pH值穩(wěn)定。A.正確B.錯誤47、干細(xì)胞具有自我更新能力和多向分化潛能。A.正確B.錯誤48、PCR反應(yīng)中引物的設(shè)計(jì)長度通常在18-30個堿基之間。A.正確B.錯誤49、哺乳動物細(xì)胞的最適培養(yǎng)溫度一般為37℃。A.正確B.錯誤50、細(xì)胞凍存時通常使用DMSO作為冷凍保護(hù)劑。A.正確B.錯誤

參考答案及解析1.【參考答案】A【解析】PBS（磷酸鹽緩沖鹽水）是最常用的平衡鹽溶液，具有穩(wěn)定的pH值和滲透壓，廣泛用于細(xì)胞洗滌、稀釋等操作，是細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)試劑。2.【參考答案】C【解析】干細(xì)胞的兩個核心特征是自我更新（無限增殖）和多向分化（能分化為多種細(xì)胞類型），這是干細(xì)胞區(qū)別于其他細(xì)胞的根本特性。3.【參考答案】B【解析】DMSO（二甲基亞砜）是細(xì)胞凍存的經(jīng)典保護(hù)劑，能滲透細(xì)胞膜，降低冰晶形成對細(xì)胞的損傷，保護(hù)細(xì)胞在冷凍過程中不受損害。4.【參考答案】A【解析】血球計(jì)數(shù)板是標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞計(jì)數(shù)工具，具有精確的刻度和容積，適用于各種懸浮細(xì)胞的計(jì)數(shù)，是細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本設(shè)備。5.【參考答案】A【解析】人體細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)條件是37℃恒溫，5%CO2濃度維持培養(yǎng)基pH值，濕度95%以上，模擬人體生理環(huán)境確保細(xì)胞正常生長。6.【參考答案】B【解析】CO2培養(yǎng)箱中CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH值穩(wěn)定。細(xì)胞培養(yǎng)液中通常含有碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)，需要5%的CO2濃度來維持pH在7.2-7.4之間，這是細(xì)胞生長的最佳pH范圍。7.【參考答案】C【解析】葉綠體是植物細(xì)胞特有的細(xì)胞器，含有葉綠素，是進(jìn)行光合作用的場所。動物細(xì)胞和大多數(shù)微生物細(xì)胞都不含有葉綠體，而線粒體、高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)在各種真核細(xì)胞中都存在。8.【參考答案】C【解析】PCR反應(yīng)包括三個步驟：變性、退火和延伸。DNA變性是指雙鏈DNA在高溫下分離成單鏈的過程，需要94-98°C的高溫來破壞氫鍵，使DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)解離。9.【參考答案】B【解析】DMEM（Dulbecco'sModifiedEagleMedium）是專門設(shè)計(jì)用于哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基，含有豐富的氨基酸、維生素和營養(yǎng)成分。其他培養(yǎng)基主要用于細(xì)菌培養(yǎng)或其他特定用途。10.【參考答案】B【解析】蘇木精是堿性染料，能夠與細(xì)胞核中的酸性物質(zhì)DNA、RNA結(jié)合，使細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色或紫色。伊紅染細(xì)胞質(zhì)，革蘭氏染色主要用于區(qū)分細(xì)菌類型，蘇木精-伊紅染色（HE染色）是最常用的組織學(xué)染色方法。11.【參考答案】C【解析】干細(xì)胞培養(yǎng)需要特殊的培養(yǎng)基來維持其未分化狀態(tài)和自我更新能力。ES細(xì)胞專用培養(yǎng)基含有白血病抑制因子(LIF)等關(guān)鍵成分，能夠有效維持干細(xì)胞的多能性，促進(jìn)體外擴(kuò)增。12.【參考答案】B【解析】二甲基亞砜是最常用的細(xì)胞凍存保護(hù)劑，能夠滲透細(xì)胞膜，降低冰點(diǎn)，減少冰晶形成，有效保護(hù)細(xì)胞在冷凍過程中不受損傷，提高復(fù)蘇后細(xì)胞存活率。13.【參考答案】A【解析】臺盼藍(lán)染色法基于活細(xì)胞膜的完整性，活細(xì)胞排斥染料不著色，死細(xì)胞膜受損可被染成藍(lán)色，是評估細(xì)胞活力的標(biāo)準(zhǔn)方法，操作簡便且結(jié)果直觀。14.【參考答案】A【解析】胰蛋白酶能夠分解細(xì)胞間的連接蛋白，使貼壁細(xì)胞脫離培養(yǎng)皿表面，是細(xì)胞傳代的標(biāo)準(zhǔn)消化酶，濃度和作用時間需嚴(yán)格控制以避免損傷細(xì)胞。15.【參考答案】B【解析】干細(xì)胞的基本特征是自我更新能力（無限增殖）和多向分化潛能（可分化為多種細(xì)胞類型），這是干細(xì)胞生物學(xué)的核心概念，也是其臨床應(yīng)用的基礎(chǔ)。16.【參考答案】B【解析】細(xì)胞培養(yǎng)需要維持適宜的pH環(huán)境，CO2培養(yǎng)箱中CO2濃度通常設(shè)定為5%，與培養(yǎng)基中碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)配合，維持培養(yǎng)液pH在7.2-7.4之間，為細(xì)胞生長提供最佳環(huán)境條件。17.【參考答案】C【解析】線粒體具有獨(dú)特的雙層膜結(jié)構(gòu)，外膜光滑，內(nèi)膜向內(nèi)折疊形成嵴，含有自己的DNA和核糖體，是細(xì)胞進(jìn)行有氧呼吸和ATP合成的主要場所。18.【參考答案】C【解析】PCR反應(yīng)中的DNA延伸步驟需要DNA聚合酶催化合成新鏈，Taq酶的最適溫度為72℃，此溫度下酶活性最強(qiáng)，能高效完成DNA鏈的延伸合成。19.【參考答案】B【解析】Caspase家族蛋白酶是細(xì)胞凋亡過程中的核心執(zhí)行分子，通過級聯(lián)反應(yīng)激活，負(fù)責(zé)切割特定蛋白質(zhì)底物，導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)解體和凋亡特征性改變。20.【參考答案】B【解析】原代細(xì)胞保持了較多的體內(nèi)特性，但傳代過程中會逐漸老化和轉(zhuǎn)化，為保證細(xì)胞生物學(xué)特性穩(wěn)定，原代細(xì)胞培養(yǎng)通常在10代以內(nèi)使用，超過此范圍細(xì)胞可能失去原有特征。21.【參考答案】B【解析】碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)是細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的緩沖系統(tǒng)，它與CO2形成緩沖對，能夠有效維持培養(yǎng)基pH值在7.2-7.4之間。該系統(tǒng)具有生理相容性好、緩沖能力強(qiáng)的特點(diǎn)，是大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)基的標(biāo)準(zhǔn)配置。22.【參考答案】B【解析】根據(jù)分化潛能大小排序：全能干細(xì)胞>多能干細(xì)胞>亞全能干細(xì)胞>單能干細(xì)胞。全能干細(xì)胞具有發(fā)育成完整個體的潛能，包括胚胎干細(xì)胞和受精卵，分化能力最強(qiáng)。23.【參考答案】B【解析】二甲基亞砜（DMSO）是細(xì)胞凍存中最常用的滲透性保護(hù)劑，能夠穿透細(xì)胞膜，降低冰晶形成對細(xì)胞的機(jī)械損傷，有效保護(hù)細(xì)胞在冷凍過程中的活性，凍存濃度通常為5-10%。24.【參考答案】C【解析】碘化丙啶（PI）是核酸特異性染料，能嵌入DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)，熒光強(qiáng)度與DNA含量成正比，通過檢測不同DNA含量的細(xì)胞比例，可分析G0/G1、S、G2/M期細(xì)胞分布。25.【參考答案】B【解析】乙醇通過脫水作用使菌體蛋白質(zhì)脫水、變性、凝固，破壞微生物的結(jié)構(gòu)和功能。75%濃度效果最佳，濃度過高會過快使表面蛋白凝固形成保護(hù)膜，影響滲透效果。26.【參考答案】A、B【解析】青霉素和鏈霉素是細(xì)胞培養(yǎng)中最經(jīng)典的抗生素組合，用于預(yù)防細(xì)菌污染。慶大霉素和卡那霉素也是常用的抗生素組合，具有廣譜抗菌作用。其他選項(xiàng)中的組合在細(xì)胞培養(yǎng)中使用較少。27.【參考答案】A、B、C【解析】Oct4、Nanog和Sox2是維持干細(xì)胞多能性的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，是干細(xì)胞的特征性標(biāo)志物。CD45是造血細(xì)胞表面標(biāo)志物，不是干細(xì)胞特異性標(biāo)志物。28.【參考答案】A、B【解析】DMSO和甘油是細(xì)胞凍存中最常用的保護(hù)劑，能夠防止細(xì)胞在冷凍過程中因冰晶形成而受損。丙二醇和乙二醇在細(xì)胞凍存中應(yīng)用較少。29.【參考答案】A、B、C、D【解析】細(xì)胞計(jì)數(shù)時需要綜合考慮細(xì)胞活率(死活細(xì)胞比例)、細(xì)胞大小(影響計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性)、細(xì)胞形態(tài)(判斷細(xì)胞狀態(tài))和細(xì)胞密度(決定實(shí)驗(yàn)用量)等所有因素。30.【參考答案】A、B、C、D【解析】傳代培養(yǎng)需要選擇合適的消化酶(如胰酶)并控制消化時間避免細(xì)胞損傷，嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作防止污染，同時調(diào)整適宜的細(xì)胞密度保證細(xì)胞正常生長。31.【參考答案】ABCD【解析】細(xì)胞培養(yǎng)需要模擬體內(nèi)環(huán)境，溫度一般控制在37℃，pH值維持在7.2-7.4，濕度保持在95%以上，氣體環(huán)境需要CO2濃度調(diào)節(jié)pH值。光照強(qiáng)度對細(xì)胞培養(yǎng)影響較小。32.【參考答案】ABD【解析】干細(xì)胞具有自我更新和多向分化兩大基本特征，同時表達(dá)特異性標(biāo)記蛋白。并非所有干細(xì)胞都具有無限增殖能力，遺傳穩(wěn)定性也是相對的。33.【參考答案】ABD【解析】DMSO是最常用的細(xì)胞凍存保護(hù)劑，甘油主要用于細(xì)菌保存，蔗糖作為滲透性保護(hù)劑可防止細(xì)胞脫水。葡萄糖和丙二醇不是常規(guī)細(xì)胞凍存保護(hù)劑。34.【參考答案】ABCE【解析】細(xì)胞計(jì)數(shù)時需評估存活率，避免細(xì)胞聚集影響準(zhǔn)確性，考慮細(xì)胞大小差異，觀察細(xì)胞形態(tài)判斷狀態(tài)。細(xì)胞周期分布雖重要但不直接影響計(jì)數(shù)操作。35.【參考答案】ABCDE【解析】無菌操作要求手部消毒，使用無菌器具，生物安全柜提供無菌環(huán)境，避免交叉污染，定期檢測確保無菌狀態(tài)，五項(xiàng)均是無菌操作的基本要求。36.【參考答案】ABCD【解析】細(xì)胞培養(yǎng)需要嚴(yán)格控制環(huán)境條件，pH值影響酶活性和細(xì)胞膜穩(wěn)定性，CO2濃度維持培養(yǎng)基緩沖系統(tǒng)，溫度影響細(xì)胞代謝速率，傳代次數(shù)過多會導(dǎo)致細(xì)胞衰老和功能退化。37.【參考答案】ABD【解析】干細(xì)胞具備自我更新和多向分化兩大核心特征，通過不對稱分裂維持干細(xì)胞池穩(wěn)定，能分化為多種功能細(xì)胞，同時具有特定表面標(biāo)記便于識別分離。38.【參考答案】ABCD【解析】流式細(xì)胞術(shù)用于細(xì)胞分選和分析，免疫熒光觀察蛋白定位，qPCR檢測基因表達(dá)，Westernblot驗(yàn)證蛋白表達(dá)，均為細(xì)胞生物學(xué)研究的基礎(chǔ)技術(shù)。39.【參考答案】ABCD【解析】凍存保護(hù)劑防止冰晶損傷細(xì)胞，控制降溫避免細(xì)胞內(nèi)外滲透壓失衡，專用凍存管保證密封性，-196℃液氮環(huán)境維持細(xì)胞代謝靜止?fàn)顟B(tài)。40.【參考答案】ABCD【解析】生物安全需要多層面防護(hù)，個人防護(hù)避免直接接觸，實(shí)驗(yàn)室設(shè)施提供物理屏障，廢棄物無害化處理防止污染擴(kuò)散，人員培訓(xùn)確保安全操作規(guī)范執(zhí)行。41.【參考答案】A【解析】細(xì)胞培養(yǎng)需要在適宜的pH條件下進(jìn)行，通常使用CO2/HCO3-緩沖系統(tǒng)。5%CO2濃度能夠維持培養(yǎng)基pH在7.2-7.4之間，為細(xì)胞生長提供穩(wěn)定的環(huán)境條件。42.【參考答案】A【解析】干細(xì)胞的定義包含兩個基本特征：自我更新能力，即能夠不斷增殖產(chǎn)生與自身相同的細(xì)胞；多向分化潛能，即能夠分化為多種不同類型的成熟細(xì)胞，這是干細(xì)胞研究的基礎(chǔ)。43.【參考答案】B【解析】冷凍保存需要控制降溫速度，通常采用程序降溫法。過快降溫會產(chǎn)生細(xì)胞內(nèi)冰晶損傷，過慢降溫則會導(dǎo)致細(xì)胞脫水。適宜的降溫速度（1-3°C/分鐘）可避免冰晶形成，保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整。44.【參考答案】A【解析】細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境必須保持無菌狀態(tài)，任何微生物污染都會導(dǎo)致培養(yǎng)失敗。無菌操作包括使用無菌器具、在生物安全柜中操作、嚴(yán)格手部消毒等措施，是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的基本要求。45.【參考答案】B【解析】胰酶消化需要精確控制時間，過度消化會損傷細(xì)胞膜表面蛋白和細(xì)胞連接，影響細(xì)胞活性和后續(xù)貼壁。通常根據(jù)細(xì)胞類型選擇適宜的胰酶濃度和消化時間，以達(dá)到最佳解離效果。46.【參考答案】A【解析】細(xì)胞培養(yǎng)需要CO2環(huán)境維持pH穩(wěn)定，5%CO2濃度能與培養(yǎng)基中的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)配合，維持pH在7.2-7.4之間，確保細(xì)胞正常生長。47.【參考答案】A【解析】干細(xì)胞的兩個核心特征是自我更新（能不斷分裂產(chǎn)生相同子代細(xì)胞）和多向分化（能分化成多種不同功能細(xì)胞類型），這是干細(xì)胞生物學(xué)的基礎(chǔ)概念。48.【參考答案】A【解析】PCR引物長度在此范圍內(nèi)的原因是：過短特異性差，過長延伸溫度過高且成本增加。該長度能保證特異性結(jié)合和有效擴(kuò)增。49.【參考答案】A【解析】37℃接近哺乳動物正常體溫，此時細(xì)胞代謝酶活性最佳，細(xì)胞增殖和功能維持處于最適狀態(tài)，是標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞培養(yǎng)條件之一。50.【參考答案】A【解析】DMSO能滲透細(xì)胞膜，在冷凍過程中防止細(xì)胞內(nèi)形成有害冰晶，減少細(xì)胞損傷，是目前最常用的細(xì)胞冷凍保護(hù)劑，濃度一般為10%。

[國家事業(yè)單位招聘】2024中國科學(xué)院動物研究所國家干細(xì)胞資源庫細(xì)胞資源技術(shù)主管崗位招聘1人公筆試歷年參考題庫典型考點(diǎn)附帶答案詳解(3卷合一)（第2套）一、單項(xiàng)選擇題下列各題只有一個正確答案，請選出最恰當(dāng)?shù)倪x項(xiàng)（共25題）1、在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，以下哪種氣體組合最有利于哺乳動物細(xì)胞的生長？A.95%氧氣+5%二氧化碳B.95%氮?dú)?5%二氧化碳C.95%空氣+5%二氧化碳D.100%空氣2、胚胎干細(xì)胞具有以下哪種特征？A.只能分化為特定類型的細(xì)胞B.具有發(fā)育成完整個體的全能性C.僅能分化為外胚層來源的細(xì)胞D.不能進(jìn)行自我更新3、細(xì)胞冷凍保存時最常用的保護(hù)劑是？A.甘油B.二甲基亞砜（DMSO）C.乙醇D.甲醇4、以下哪種技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)基因的精確編輯？A.PCR技術(shù)B.基因測序C.CRISPR-Cas9技術(shù)D.凝膠電泳5、干細(xì)胞的基本特性不包括以下哪項(xiàng)？A.自我更新能力B.多向分化潛能C.無限增殖能力D.特定功能執(zhí)行6、在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，CO2培養(yǎng)箱的標(biāo)準(zhǔn)CO2濃度通常設(shè)置為多少？A.3%B.5%C.8%D.10%7、以下哪種顯微鏡最適合觀察活細(xì)胞的動態(tài)過程？A.透射電子顯微鏡B.掃描電子顯微鏡C.倒置相差顯微鏡D.熒光顯微鏡8、細(xì)胞凍存時最常用的保護(hù)劑是什么？A.甘油B.二甲基亞砜(DMSO)C.乙醇D.丙二醇9、在無菌操作中，75%酒精的主要作用機(jī)制是什么？A.破壞細(xì)胞壁B.使蛋白質(zhì)變性凝固C.抑制DNA復(fù)制D.阻斷能量代謝10、細(xì)胞傳代時，胰酶消化的適宜溫度通常是？A.4℃B.25℃C.37℃D.42℃11、在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，CO2培養(yǎng)箱的標(biāo)準(zhǔn)溫度設(shè)置通常為多少度？A.25℃B.37℃C.42℃D.30℃12、以下哪種細(xì)胞器被稱為細(xì)胞的"動力工廠"？A.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)B.高爾基體C.線粒體D.溶酶體13、細(xì)胞凋亡過程中，DNA斷裂的特點(diǎn)是斷裂片段呈現(xiàn)什么規(guī)律？A.隨機(jī)長度片段B.180-200bp及其倍數(shù)片段C.50bp片段D.1000bp片段14、在干細(xì)胞研究中，胚胎干細(xì)胞的典型表面標(biāo)志物包括以下哪些？A.CD34和CD45B.SSEA-4和TRA-1-60C.CD14和CD11bD.CD4和CD815、細(xì)胞傳代時，胰酶消化細(xì)胞的主要作用是什么？A.殺死細(xì)胞B.分解細(xì)胞間連接和細(xì)胞外基質(zhì)C.促進(jìn)細(xì)胞分裂D.提供營養(yǎng)16、下列哪種細(xì)胞具有最強(qiáng)的分化潛能？A.成體干細(xì)胞B.胚胎干細(xì)胞C.造血干細(xì)胞D.間充質(zhì)干細(xì)胞17、細(xì)胞培養(yǎng)過程中，CO?培養(yǎng)箱的主要作用是什么？A.提供氧氣B.維持pH值穩(wěn)定C.控制溫度D.防止污染18、下列哪種方法最適合長期保存干細(xì)胞活性？A.4℃冷藏保存B.-20℃冷凍保存C.液氮超低溫保存D.常溫保存19、干細(xì)胞的自我更新能力指的是什么？A.分化為多種細(xì)胞類型B.無限增殖的能力C.保持干細(xì)胞特性的分裂D.修復(fù)組織損傷20、間充質(zhì)干細(xì)胞主要來源于哪個組織？A.骨髓B.血液C.神經(jīng)組織D.肌肉組織21、在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，維持細(xì)胞正常生長所需的最適pH值范圍通常為？A.6.0-6.5B.6.8-7.2C.7.2-7.4D.7.6-8.022、干細(xì)胞具有自我更新和多向分化潛能，下列哪種干細(xì)胞分化能力最為廣泛？A.造血干細(xì)胞B.間充質(zhì)干細(xì)胞C.胚胎干細(xì)胞D.神經(jīng)干細(xì)胞23、細(xì)胞凍存過程中最重要的保護(hù)劑成分是？A.葡萄糖B.氯化鈉C.二甲基亞砜D.氨基酸24、流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期時，通常使用的DNA染料是？A.臺盼藍(lán)B.碘化丙啶C.考馬斯亮藍(lán)D.甲基綠25、體外培養(yǎng)的細(xì)胞傳代時，常用的消化試劑是？A.胰蛋白酶B.膠原酶C.蛋白酶KD.纖維素酶二、多項(xiàng)選擇題下列各題有多個正確答案，請選出所有正確選項(xiàng)（共15題）26、在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，以下哪些因素會影響細(xì)胞的生長狀態(tài)？A.培養(yǎng)基的pH值和滲透壓B.培養(yǎng)箱內(nèi)的CO2濃度C.細(xì)胞傳代的頻率和密度D.培養(yǎng)皿的品牌型號E.環(huán)境溫度的穩(wěn)定性27、干細(xì)胞的基本特性包括哪些方面？A.自我更新能力B.多向分化潛能C.無限增殖特性D.特定的表面標(biāo)志物表達(dá)E.不對稱分裂能力28、細(xì)胞冷凍保存的關(guān)鍵技術(shù)要點(diǎn)包括：A.使用合適的冷凍保護(hù)劑B.采用程序降溫方式C.選擇適當(dāng)?shù)膬龃鏈囟菵.快速冷凍避免冰晶形成E.確定合理的凍存細(xì)胞密度29、以下哪些方法可以用于細(xì)胞活力檢測？A.臺盼藍(lán)染色法B.MTT比色法C.流式細(xì)胞術(shù)檢測D.細(xì)胞計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)E.乳酸脫氫酶釋放法30、細(xì)胞資源庫的質(zhì)量控制體系應(yīng)包含哪些要素？A.細(xì)胞來源的可追溯性記錄B.定期的無菌檢測程序C.細(xì)胞功能特性的驗(yàn)證D.儲存條件的實(shí)時監(jiān)控E.操作人員的資質(zhì)認(rèn)證31、細(xì)胞培養(yǎng)過程中，以下哪些因素會影響細(xì)胞的生長狀態(tài)？A.培養(yǎng)基的pH值B.培養(yǎng)箱的CO2濃度C.細(xì)胞傳代的頻率D.培養(yǎng)皿的材質(zhì)E.環(huán)境溫度的穩(wěn)定性32、干細(xì)胞的主要特征包括哪些？A.具有自我更新能力B.能夠分化為多種細(xì)胞類型C.無限增殖的特性D.具有特定的形態(tài)特征E.可維持基因組穩(wěn)定性33、細(xì)胞凍存技術(shù)的關(guān)鍵要素有哪些？A.冷凍保護(hù)劑的使用B.冷凍速率的控制C.液氮的儲存溫度D.細(xì)胞活力的檢測E.培養(yǎng)基成分的優(yōu)化34、細(xì)胞污染的常見類型包括哪些？A.細(xì)菌污染B.真菌污染C.支原體污染D.病毒污染E.細(xì)胞交叉污染35、細(xì)胞計(jì)數(shù)和活力檢測的常用方法包括哪些？A.臺盼藍(lán)染色法B.細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)C.MTT法D.流式細(xì)胞術(shù)E.光學(xué)顯微鏡觀察36、細(xì)胞培養(yǎng)過程中，以下哪些因素會影響細(xì)胞的生長狀態(tài)？A.培養(yǎng)基的pH值B.二氧化碳濃度C.培養(yǎng)箱濕度D.細(xì)胞傳代次數(shù)E.培養(yǎng)皿材質(zhì)37、干細(xì)胞的基本特性包括哪些方面？A.自我更新能力B.多向分化潛能C.無限增殖特性D.特定表型標(biāo)記E.免疫原性較低38、細(xì)胞凍存技術(shù)的關(guān)鍵要素有哪些？A.冷凍保護(hù)劑的選擇B.降溫速率控制C.液氮儲存溫度D.細(xì)胞活力檢測E.復(fù)蘇時的升溫速度39、以下哪些技術(shù)可用于細(xì)胞鑒定和分析？A.流式細(xì)胞術(shù)B.免疫熒光染色C.實(shí)時熒光定量PCRD.細(xì)胞計(jì)數(shù)E.細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察40、細(xì)胞培養(yǎng)污染的主要類型包括哪些？A.細(xì)菌污染B.真菌污染C.支原體污染D.病毒污染E.細(xì)胞交叉污染三、判斷題判斷下列說法是否正確（共10題）41、細(xì)胞培養(yǎng)過程中，CO2濃度通常維持在5%左右以維持培養(yǎng)基的pH值穩(wěn)定。A.正確B.錯誤42、干細(xì)胞具有自我更新和多向分化潛能兩個基本特征。A.正確B.錯誤43、PCR技術(shù)需要DNA模板、引物、DNA聚合酶和dNTPs四種基本組分。A.正確B.錯誤44、細(xì)胞凍存時通常使用DMSO作為冷凍保護(hù)劑，濃度為10%。A.正確B.錯誤45、熒光顯微鏡觀察時，激發(fā)光波長通常比發(fā)射光波長短。A.正確B.錯誤46、DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中，腺嘌呤與胸腺嘧啶之間形成三個氫鍵。A.正確B.錯誤47、細(xì)胞凋亡是一種程序性細(xì)胞死亡過程，通常伴隨著炎癥反應(yīng)。A.正確B.錯誤48、蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)主要包括α螺旋和β折疊兩種形式。A.正確B.錯誤49、線粒體是細(xì)胞內(nèi)唯一含有DNA的細(xì)胞器。A.正確B.錯誤50、酶的活性中心通常具有特定的空間結(jié)構(gòu)，對底物具有高度專一性。A.正確B.錯誤

參考答案及解析1.【參考答案】C【解析】哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)通常需要5%的二氧化碳來維持培養(yǎng)基的pH值，其余95%使用空氣即可提供充足的氧氣供細(xì)胞代謝使用。純氧氣會導(dǎo)致氧化應(yīng)激，純氮?dú)馊狈ρ鯕庵С旨?xì)胞生長。2.【參考答案】B【解析】胚胎干細(xì)胞具有全能性，能夠分化為體內(nèi)所有類型的細(xì)胞，并且具有無限的自我更新能力，這是胚胎干細(xì)胞區(qū)別于其他類型干細(xì)胞的重要特征。3.【參考答案】B【解析】二甲基亞砜是最常用的細(xì)胞冷凍保護(hù)劑，能夠滲透細(xì)胞膜，降低細(xì)胞內(nèi)外的滲透壓差，減少冰晶形成對細(xì)胞的損傷，有效保護(hù)細(xì)胞在冷凍過程中的活性。4.【參考答案】C【解析】CRISPR-Cas9技術(shù)是目前最精確的基因編輯工具，能夠特異性地識別并切割目標(biāo)DNA序列，實(shí)現(xiàn)基因的敲除、插入或替換，具有高效、精準(zhǔn)的特點(diǎn)。5.【參考答案】D【解析】干細(xì)胞具有自我更新和多向分化兩個基本特性，但其主要功能是維持和修復(fù)組織，而不是執(zhí)行特定的生理功能，執(zhí)行特定功能是分化后成熟細(xì)胞的特征。6.【參考答案】B【解析】細(xì)胞培養(yǎng)需要維持適宜的pH環(huán)境，CO2培養(yǎng)箱通過提供5%的CO2濃度與培養(yǎng)基中的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)配合，維持培養(yǎng)液pH在7.2-7.4之間，這是大多數(shù)細(xì)胞生長的最適pH范圍。7.【參考答案】C【解析】倒置相差顯微鏡能夠直接觀察未染色的活細(xì)胞，具有良好的對比度，可實(shí)時監(jiān)測細(xì)胞形態(tài)變化、分裂過程等動態(tài)現(xiàn)象，且對細(xì)胞損傷較小，是活細(xì)胞觀察的首選設(shè)備。8.【參考答案】B【解析】DMSO是細(xì)胞凍存的標(biāo)準(zhǔn)化保護(hù)劑，能有效防止細(xì)胞內(nèi)形成冰晶造成損傷，提高細(xì)胞復(fù)蘇后的存活率，通常使用濃度為10%。其滲透性強(qiáng)，能快速進(jìn)出細(xì)胞膜。9.【參考答案】B【解析】75%酒精通過使微生物蛋白質(zhì)變性凝固，破壞其酶系統(tǒng)和細(xì)胞結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致微生物死亡。此濃度殺菌效果最佳，過高濃度會使菌體表面蛋白質(zhì)快速凝固形成保護(hù)膜，反而影響殺菌效果。10.【參考答案】C【解析】37℃是細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)溫度，此溫度下胰酶活性最強(qiáng)，能夠有效消化細(xì)胞間的連接蛋白，使細(xì)胞從培養(yǎng)瓶壁上脫落。同時保持細(xì)胞活力，避免低溫影響消化效率或高溫?fù)p傷細(xì)胞。11.【參考答案】B【解析】細(xì)胞培養(yǎng)需要模擬人體生理環(huán)境，37℃是人體正常體溫，也是大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞生長的最適溫度。CO2培養(yǎng)箱維持37℃恒溫環(huán)境，有利于細(xì)胞正常代謝和增殖。12.【參考答案】C【解析】線粒體是細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行氧化磷酸化的主要場所，負(fù)責(zé)ATP的合成，為細(xì)胞提供能量。由于其在能量代謝中的核心作用，被稱為細(xì)胞的"動力工廠"。13.【參考答案】B【解析】細(xì)胞凋亡時，DNA被核酸內(nèi)切酶切割成180-200bp及其倍數(shù)的片段，形成梯狀條帶，這是凋亡的典型生化特征。14.【參考答案】B【解析】SSEA-4和TRA-1-60是胚胎干細(xì)胞的特異性表面標(biāo)志物，用于鑒定干細(xì)胞的多能性狀態(tài)。15.【參考答案】B【解析】胰酶能夠分解細(xì)胞間的蛋白質(zhì)連接和細(xì)胞外基質(zhì)成分，使貼壁細(xì)胞分散，便于傳代操作。16.【參考答案】B【解析】胚胎干細(xì)胞來源于早期胚胎的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，具有全能性，能夠分化為體內(nèi)所有類型的細(xì)胞，包括胚外組織。而成體干細(xì)胞只能分化為特定類型的細(xì)胞，分化潛能有限。因此胚胎干細(xì)胞具有最強(qiáng)的分化潛能。17.【參考答案】B【解析】CO?培養(yǎng)箱通過提供5%的CO?濃度，與培養(yǎng)基中的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)共同作用，維持培養(yǎng)環(huán)境的pH值在7.2-7.4之間。雖然培養(yǎng)箱也能控制溫度，但其主要功能是維持pH穩(wěn)定，為細(xì)胞生長提供適宜的酸堿環(huán)境。18.【參考答案】C【解析】液氮保存溫度可達(dá)-196℃，能有效停止細(xì)胞內(nèi)所有生化反應(yīng)，最大程度保持干細(xì)胞的生物活性和增殖能力。常規(guī)冷凍保存溫度過高，無法有效阻止細(xì)胞損傷；冷藏和常溫保存會加速細(xì)胞代謝和老化，不適合長期保存。19.【參考答案】C【解析】干細(xì)胞的自我更新是指干細(xì)胞通過不對稱分裂，產(chǎn)生一個干細(xì)胞和一個分化細(xì)胞的過程，保持干細(xì)胞群體數(shù)量的穩(wěn)定。這不同于單純的無限增殖，而是維持干細(xì)胞干性特征的分裂方式，是干細(xì)胞維持組織穩(wěn)態(tài)的基礎(chǔ)。20.【參考答案】A【解析】間充質(zhì)干細(xì)胞最早從骨髓中分離獲得，是骨髓基質(zhì)細(xì)胞的重要組成部分。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞具有多向分化潛能，能分化為成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等中胚層來源的細(xì)胞類型，是再生醫(yī)學(xué)研究的重要細(xì)胞來源。21.【參考答案】C【解析】細(xì)胞培養(yǎng)需要維持生理性的pH環(huán)境，人體細(xì)胞最適pH值為7.2-7.4，此范圍內(nèi)細(xì)胞代謝酶活性最高，細(xì)胞形態(tài)和功能保持正常。過酸或過堿都會影響細(xì)胞膜通透性、酶活性和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)。22.【參考答案】C【解析】根據(jù)分化潛能從高到低排列：全能干細(xì)胞>多能干細(xì)胞>專能干細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞來源于早期胚胎，具有發(fā)育成完整個體的潛能，可分化為三個胚層的所有細(xì)胞類型，分化能力最廣泛。23.【參考答案】C【解析】二甲基亞砜（DMSO）是細(xì)胞凍存的常用保護(hù)劑，能夠滲透細(xì)胞膜，降低冰點(diǎn)，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶形成，防止細(xì)胞膜損傷。通常使用濃度為5-10%，配合血清或蛋白質(zhì)使用效果更佳。24.【參考答案】B【解析】碘化丙啶（PI）是核酸結(jié)合染料，能嵌入DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)，熒光強(qiáng)度與DNA含量成正比，可區(qū)分G0/G1、S、G2/M期細(xì)胞。臺盼藍(lán)用于活死細(xì)胞檢測，考馬斯亮藍(lán)用于蛋白檢測。25.【參考答案】A【解析】胰蛋白酶能夠消化細(xì)胞外基質(zhì)和細(xì)胞間連接蛋白，使貼壁細(xì)胞從培養(yǎng)皿表面脫落，適用于大多數(shù)貼壁細(xì)胞的傳代。使用時需用血清終止消化，避免過度消化損傷細(xì)胞膜。26.【參考答案】ABCE【解析】培養(yǎng)基的pH值和滲透壓直接影響細(xì)胞的生理活動；CO2濃度影響培養(yǎng)基pH值；傳代頻率和密度影響細(xì)胞接觸抑制和營養(yǎng)狀況；環(huán)境溫度穩(wěn)定對細(xì)胞正常代謝至關(guān)重要。27.【參考答案】ABDE【解析】干細(xì)胞具有自我更新和多向分化兩大基本特性；通過不對稱分裂維持干細(xì)胞池穩(wěn)定；具有特定表面標(biāo)志物用于識別；并非所有干細(xì)胞都無限增殖。28.【參考答案】ABCE【解析】冷凍保護(hù)劑減少冰晶損傷；程序降溫避免細(xì)胞內(nèi)冰晶形成；-196℃液氮溫度適于長期保存；合理的細(xì)胞密度保證復(fù)蘇活力。29.【參考答案】ABCE【解析】臺盼藍(lán)染色區(qū)分死活細(xì)胞；MTT法檢測細(xì)胞代謝活性；流式細(xì)胞術(shù)可定性定量分析；LDH釋放檢測細(xì)胞膜完整性；直接計(jì)數(shù)不能區(qū)分細(xì)胞活力。30.【參考答案】ABCDE【解析】可追溯性確保安全性；無菌檢測保證純度；功能驗(yàn)證維持有效性；條件監(jiān)控保障穩(wěn)定性；人員資質(zhì)確保操作規(guī)范性，構(gòu)成完整質(zhì)量控制體系。31.【參考答案】ABCE【解析】培養(yǎng)基pH值直接影響細(xì)胞代謝，通常維持在7.2-7.4；CO2濃度調(diào)節(jié)pH值和細(xì)胞呼吸；傳代頻率過低會導(dǎo)致細(xì)胞老化，過高影響生長；溫度波動影響酶活性。培養(yǎng)皿材質(zhì)雖有影響，但非主要因素。32.【參考答案】ABE【解析】干細(xì)胞核心特征是自我更新和多向分化潛能；需要維持基因組穩(wěn)定避免突變；并非所有干細(xì)胞都無限增殖；形態(tài)特征因類型而異，不具特異性。33.【參考答案】ABC【解析】冷凍保護(hù)劑防止冰晶損傷；冷凍速率影響細(xì)胞存活率，通常1°C/分鐘；液氮-196°C提供穩(wěn)定低溫；細(xì)胞凍存前需檢測活力保證質(zhì)量；培養(yǎng)基優(yōu)化屬于培養(yǎng)環(huán)節(jié)。34.【參考答案】ABCDE【解析】細(xì)菌污染最常見，產(chǎn)生渾濁；真菌形成菌落；支原體難檢測但影響實(shí)驗(yàn)；病毒污染具傳染性；細(xì)胞交叉污染導(dǎo)致細(xì)胞系混淆。均需嚴(yán)格無菌操作預(yù)防。35.【參考答案】ABCD【解析】臺盼藍(lán)區(qū)分死活細(xì)胞；計(jì)數(shù)板精確計(jì)數(shù)；MTT檢測細(xì)胞代謝活性；流式細(xì)胞