⑦可靠化：自動(dòng)化的儀器最重要的特質(zhì)就是穩(wěn)定、可靠。這樣才能發(fā)揮自動(dòng)化的優(yōu)勢，將實(shí)驗(yàn)中的人為誤差降至最低。而軟件則是其中的重要一環(huán)，主流廠商如美國吉爾森公司的產(chǎn)品運(yùn)用數(shù)據(jù)庫底核架構(gòu)的軟件來控制儀器的運(yùn)行，不但使得軟件更加穩(wěn)定，而且方便客戶隨時(shí)調(diào)閱以往實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)記錄。有些廠家往往把各類功能集合在一起，這樣反而由于功能模塊的過多使得故障率偏高，往往一個(gè)模塊如濃縮的問題導(dǎo)致整套系統(tǒng)癱瘓，十分影響到客戶的正常應(yīng)用。二、固相萃取技術(shù)在醫(yī)藥分析中的應(yīng)用20世紀(jì)80年代以來，隨著硅膠鍵合相等新型固相吸附劑的不斷開發(fā)，固相萃取技術(shù)有了迅速的發(fā)展。固相萃取技術(shù)憑借溶劑用量少、操作簡單、選擇性高、重現(xiàn)性好的優(yōu)勢，已發(fā)展成為分離和濃縮各種樣品中痕量分析物質(zhì)的一種強(qiáng)有力的工具，廣泛應(yīng)用于藥物分析、毒物分析、環(huán)境檢測等方面。1、化學(xué)藥檢測Clidy等人使用新的96孔固相萃取盤測定苯二氮卓類藥物（去甲安定、安定、去甲羥基安定以及氯羥去甲安定），無需使用真空泵和LC-MS/MS裝置。固相萃取盤是十八烷基鍵合的硅膠，其中使用硅膠作為吸附劑，并且96孔板的粒徑為12μm。液相色譜條件為Shimadzu（LC-10，AD）液相色譜儀，體積流量為0.5mL/min，流動(dòng)相A為乙腈-水（10:90，含有0.1％乙酸），流動(dòng)相B.乙腈-水（90:10，含0.1％乙酸），梯度洗脫程序：0-5分鐘，100％A-100％B，進(jìn)樣體積20μL。使用機(jī)器自動(dòng)進(jìn)樣器將提取物在96孔固相萃取盤中平行進(jìn)行。三種提取底物是磷酸鹽緩沖液，尿液和血漿。使用96孔固相萃取盤，樣品預(yù)處理時(shí)間為0.94分鐘。三種基質(zhì)的可重現(xiàn)RSD值不超過9％。所有基質(zhì)的檢測限和定量限分別為0.02至0.15和0.2至2.0ng/mL，線性范圍為0.2至500ng/mL。固相萃取盤可以重復(fù)使用，降低了樣品預(yù)處理的成本。與傳統(tǒng)的SPE方法相比，該方法不需要真空泵，實(shí)驗(yàn)條件簡單，新穎，實(shí)用。Wan等人使用在線SPE提取和LC-MS/MS組合技術(shù)定量分析人血漿中的哌嗪嘧啶衍生物ABT-925。使用ThermoAquasilC18（50mm×3mm，3μm）柱。流動(dòng)相為乙腈-水-甲酸（50：50：0.1），體積流速為0.35mL/min，柱溫為室溫。線性范圍為0.0102~5.24μg/mL，線性相關(guān)系數(shù)為0.9991。樣品和內(nèi)標(biāo)的回收率分別為81.6％和73.0％。在0.0102,0.0256,0.160,0.999,4.16,5.24μg/mL的濃度下測量樣品的準(zhǔn)確度和精密度，并且RSD值均小于0.1％。ABT-925可在-20℃保持在60℃，因此研究了ABT-925的穩(wěn)定性及其在室溫下的穩(wěn)定性。首先將樣品解凍，然后在室溫下靜置一段時(shí)間，最后返回-20℃冰箱，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度。在室溫下約34.5小時(shí)后，濃度沒有顯著變化。系統(tǒng)滯后也是在線SPE方法的一個(gè)重要方面，主要影響因素是提取柱。將空白樣品重復(fù)測量6次，得到的主峰面積小于定量極限的主峰面積的14％。該方法已用于ABT-925的II期臨床試驗(yàn)。簡單的自動(dòng)化樣品處理可減少錯(cuò)誤并降低實(shí)驗(yàn)失敗的可能性。可以看出，已經(jīng)開發(fā)并利用了用于檢測人血漿中ABT-925的高靈敏度，高特異性和良好再現(xiàn)性的方法。由靜電紡絲聚苯乙烯納米纖維填料制成的Kang和其他微柱可用于分離和分析地西泮及其在人和狗血漿中的主要代謝物。使用的色譜條件為ABC18柱（150mm×4.6mm，5μm），檢測波長為230nm，體積流速為1.0mL/min，進(jìn)樣體積為20μL，柱溫為室溫。吸附在固定相上的樣品用50μL甲醇洗脫，并通過HPLC和UV檢測器一起測定。用柱預(yù)處理0.5mL血漿樣品，處理時(shí)間少于10分鐘。血漿中地西泮的檢出限可達(dá)1μg/L。與傳統(tǒng)方法相比，該方法快速簡便，靈敏度高，檢出限提高，縮短了樣品的預(yù)處理時(shí)間，可用于檢測和藥理學(xué)。治療藥物。研究。與傳統(tǒng)的液-液萃取方法相比，固相萃取技術(shù)操作簡便，節(jié)省溶劑，提高萃取率，不容易乳化，可自動(dòng)進(jìn)行樣品處理。該技術(shù)與LC-MS相結(jié)合，已成為化學(xué)樣品預(yù)處理的主要工具。2、中藥及天然藥物中藥及天然藥物是我國具有國際優(yōu)勢的產(chǎn)業(yè)之一，但因其所含成分復(fù)雜，一直沒有在國際市場上得到應(yīng)有的地位。為了提高中藥及天然藥物的療效，減低毒副作用，選用合理的提取分離技術(shù)是非常重要的。近年來固相萃取技術(shù)在中藥及天然藥物有效成分分析方面的應(yīng)用越來越受到人們的重視。曾元兒在2004年的固相萃取法在中藥分析中的應(yīng)用中介紹到固相萃取法(SolidPhaseExtraction,SPE)是復(fù)雜樣品前處理領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用的一種實(shí)驗(yàn)技術(shù),它能快速簡便有效地除去各類樣品中的雜質(zhì)組分并濃縮待測組分,在藥物、環(huán)保、食品等方面得到了廣泛的應(yīng)用。在中藥分析中,由于供試液共存成分相當(dāng)復(fù)雜,待測組分分離純化不佳將嚴(yán)重制約分析的專屬性和重現(xiàn)性。另一方面,現(xiàn)代儀器快速發(fā)展,其靈敏度越高,對供試液純度要求也越高,于是,樣品前處理成為中藥分析的一個(gè)瓶頸環(huán)節(jié)。固相萃取法以傳統(tǒng)的液-液萃取法無法比擬的優(yōu)勢,在中藥樣品的分離和純化上開始發(fā)揮出越來越重要的作用。種類豐富的鍵合相硅膠則成為固相萃取的新一代主力軍。反相鍵合相硅膠有C1、C2、C4、C6、C8、C18、環(huán)己烷基、苯基、二苯基等;正相鍵合相硅膠有氨基、伯氨基、仲氨基、腈基、二醇基等;離子交換的有季氨基、苯磺酸基、丙磺酸基等。此外還有苯乙烯-二乙烯苯聚合物等新型固定相。李禮在應(yīng)用分子印跡-固相萃取法提取中藥活性成分非瑟酮中分別以中藥黃櫨的主要成分非瑟酮為印跡分子、丙烯酰胺為功能單體及乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑，通過封管聚合法合成了分子印跡聚合物；將其裝于自制的固相萃取柱中，研究了以不同體積比的乙醇．水溶液為溶劑時(shí)非瑟酮在柱上的保留行為；通過優(yōu)化清洗及洗脫條件，使非瑟酮與它的結(jié)構(gòu)相似物槲皮素在柱上得到了很好的分離。楊光在2006年的淺析固相萃取法在天然產(chǎn)物研究中的應(yīng)用中用固相萃取法已成功用于中草藥目標(biāo)化合物的分離提取與分析測試,其在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)訂立及質(zhì)量控制環(huán)節(jié)中的作用也日益引起注意。該技術(shù)的完善應(yīng)用將推進(jìn)天然產(chǎn)物相關(guān)研究的發(fā)展。傳統(tǒng)中草藥數(shù)千年來一直被國人廣泛用于預(yù)防和治療各種疾病。低毒性和良好的治療效果使其在許多領(lǐng)域受到廣泛的關(guān)注。特別是近年來,人們的醫(yī)療觀念逐漸由治療型向預(yù)防型轉(zhuǎn)變,中草藥以其強(qiáng)大的預(yù)防保健功能,日益受到青睞。三白草,是三白草科三白屬類植物,全株均可入藥,其含有許多有效成分,蘆丁就是其中之一。三白草具有多重療效和藥理活性,而且易得,對于將來的醫(yī)藥來說,研究與開發(fā)它是極其必要的?；泵?是豆科植物槐的干燥花蕾?；泵字械奶J丁含量占到20%以上,是醫(yī)藥工業(yè)中提取蘆丁的常用中藥材之一。曾歡在2011的中草藥中活性成分蘆丁的分離分析方法研究與應(yīng)用中分子印跡-固相萃取法萃取分離中草藥中的蘆丁采用溶液聚合法,通過優(yōu)化分子印跡聚合物的合成條件(功能單體的種類,交聯(lián)劑的種類及模板分子-功能單體-交聯(lián)劑的摩爾比),獲得了較佳的蘆丁分子印跡材料。最佳的合成條件如下:自由基引發(fā),雙功能單體(AM-2-VP,摩爾比=3:1),雙交聯(lián)劑(EDMA-DVB,摩爾比=3:1),模板分子-功能單體-交聯(lián)劑的摩爾比為1:6:20,四氫呋喃為致孔劑及反應(yīng)溶劑。應(yīng)用掃描電子顯微鏡(SEM)及傅里葉變換紅外光譜(FT-IR)表征了最佳條件下合成的蘆丁分子印跡聚合物(MIPs)及非分子印跡聚合物(NIPs)的結(jié)構(gòu)情況。將最佳條件下合成的MIPs及NIPs作為固相萃取(SPE)柱的填料,應(yīng)用于混合標(biāo)樣(蘆丁及其結(jié)構(gòu)類似物槲皮素、柚皮素及山奈酚)的吸附分析。此外,將MISPE應(yīng)用于實(shí)際樣品三白草及槐米萃取液中蘆丁成分的吸附分離分析實(shí)驗(yàn),所得回收率分別為87.6%(RSD=3.24%)和90.8%(RSD=2.97%)。并將自制的MISPE與常用的固相萃取柱(C18柱,Silica柱及PCX柱)進(jìn)行了比較,發(fā)現(xiàn)只有MISPE柱具有選擇性吸附性能,研究結(jié)果表明將合成的分子印跡聚合物應(yīng)用于復(fù)雜樣品活性成分的固相萃取中具有很好的應(yīng)用前景。吳謙建立了一種綠色、快速、高效萃取和富集中藥急性子中4種鳳仙萜四醇皂苷的方法。采用離子液體并結(jié)合超聲輔助萃取急性子中的化學(xué)成分,利用固相萃取小柱富集提取液中的鳳仙萜四醇皂苷。通過考察離子液體種類及用量、pH值、超聲時(shí)間、固相萃取劑和洗脫劑等實(shí)驗(yàn)條件對提取率的影響,確立了最優(yōu)萃取劑為[C6mim]Br,最優(yōu)萃取條件:萃取劑用量為0.9mL,提取液pH=7.0,超聲為30min,最優(yōu)富集條件:固相萃取小柱填料為0.9gCHP20/P120,上樣流速為1.5mL/min,洗脫劑為1.5mL甲醇。在最優(yōu)條件下,4種鳳仙萜四醇苷加標(biāo)回收率在92.1％～108.2％之間,相關(guān)系數(shù)范圍為0.9945～0.9975,檢出限范圍為1.8～4.5μg/mL,RSD<3.9％。本方法與傳統(tǒng)回流提取方法提取效果接近,可準(zhǔn)確測定急性子中4種鳳仙萜四醇苷含量。鄭春英在2015年固相萃取-超聲加溫法在中藥連翹質(zhì)量控制中的應(yīng)用中成功采用固相萃取方法進(jìn)行了重要連翹的質(zhì)量控制。連翹的主要活性成分是以連翹苷為代表的木脂素類。因此,常以連翹苷的含量來確定連翹或含連翹的復(fù)方的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。其提取方法多數(shù)采用超聲法、熱回流提取法、冷浸過夜法。前者雖較為常用,但不易提取完全;后二者雖能提取完全,但費(fèi)時(shí)、費(fèi)溶劑;此外,文獻(xiàn)報(bào)道的關(guān)于連翹及其復(fù)方質(zhì)量控制所進(jìn)行樣品的純化方法均為中性Al2O3柱層析法,本實(shí)驗(yàn)提出采用固相萃取(SPE)-超聲加溫法進(jìn)行測定,對上述不足之處作了改進(jìn)。3、生物藥魏伯平建立了SPE-LC-MS/MS法測定重組人粒細(xì)胞刺激因子注射液中氨芐西林的殘留量。將樣品純化并通過HLB固相萃取柱濃縮以有效除去雜質(zhì)。使用的液相色譜條件為AgilentEclipseXDB-C18柱（150mm×4.6mm，5μm），柱溫35°C，體積流速0.8mL/min，進(jìn)樣體積10μL，甲酸pH3.15，乙腈-水。流動(dòng)相，梯度洗脫：0~4min，5％~80％B;4~5min，80％~5％B;5~6min，5％B。使用電噴霧電離源（ESI），正離子模式和多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）進(jìn)行質(zhì)譜分析。氨芐青霉素在0.0442~3.5362μg/L時(shí)的線性關(guān)系良好（r=0.9995），定量下限為0.0442μg/L，回收率為101.1％~106.7％，檢測內(nèi)和檢測間的RSD值均為分別低于5.8％和7.3％。結(jié)果表明，該方法準(zhǔn)確，可靠，重現(xiàn)性好，靈敏度高，為免疫產(chǎn)品中抗生素殘留的檢測提供了參考。SPE技術(shù)的出現(xiàn)大大簡化了生物制藥樣品的預(yù)處理過程，具有溶劑少，萃取率高，分析速度快的優(yōu)點(diǎn)。但其在生物藥方面的應(yīng)用也有局限性，如專屬性不強(qiáng)，不耐高溫等，有待進(jìn)一步改進(jìn)。三、結(jié)語固相萃取因其低污染，低消耗，萃取回收率高，易于自動(dòng)化，已經(jīng)被越來越多的科研工作者用于樣品預(yù)處理中。與液–液萃取法相比較，SPE是以固態(tài)吸附劑代替液