兒童醫(yī)院兒科醫(yī)學研究所李梨平標記免疫檢測技術(shù)新進展標記免疫技術(shù)的發(fā)展化學發(fā)光系統(tǒng)及其原理免疫檢測項目進展放免酶免熒光免疫化學發(fā)光電化學發(fā)光1960‘S1970~80‘S2000‘S1，抗體技術(shù)的革命，從使用多克隆抗體向使用單克隆抗體轉(zhuǎn)變2，從手工操作向全自動分析儀的轉(zhuǎn)變3，從液相放射免疫技術(shù)向均相和固相免疫分析技術(shù)的轉(zhuǎn)變1959年Berson和Yalow建立了放射免疫分析方法（RIA），大大提高了免疫測定的敏感度，這種標記免疫測定開拓了醫(yī)學檢驗的新領(lǐng)域。缺點半衰期短，試劑貨架期不長。標記物不斷變化，試劑批間、批內(nèi)變化大，標準曲線不能保存反應(yīng)時間長，操作步驟很難自動化。使用放射性核素，對人體有一定的危害性。分析的限度為10mol/ml或10g/ml。在一定時期內(nèi)曾被采用，正在被逐步取代放射免疫測定法

1971年Engvall和Perlman建立了固相酶免疫測定方法（ELISA），這種非放射標記免疫測定在臨床檢驗，特別是感染性疾病的診斷中取得了廣泛應(yīng)用。酶免疫測定法缺點試劑制備困難。操作步驟復(fù)雜，耗時長。影響因素多，質(zhì)量控制難以保證。最后測定的是顏色的光密度，其精密度和敏感性不如發(fā)光免疫技術(shù)。各實驗室操作不規(guī)范，質(zhì)量難以保證。有學者認為ELISA技術(shù)已逐步走向退化，可能會逐步退出臨床實驗室。

發(fā)光是指分子或原子中的電子吸收能量后，由基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)，然后再返回到基態(tài)，并釋放光子的過程。

化學發(fā)光是吸收了化學反應(yīng)過程中所產(chǎn)生的化學能使分子激發(fā)而發(fā)光

化學發(fā)光免疫分析是將化學發(fā)光與免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于檢測微量抗原或抗體的標記免疫分析技術(shù)，分為直接化學發(fā)光免疫分析，化學發(fā)光酶免疫分析和電化學發(fā)光免疫分析?；瘜W發(fā)光免疫分析

按發(fā)光劑不同分為

1.發(fā)光酶免疫測定技術(shù)（CLEIA）

2.化學發(fā)光免疫測定技術(shù)(CLIA)

3.電化學發(fā)光免疫測定技術(shù)(ECLIA)

immunoassay化學發(fā)光免疫分析目前分類化學發(fā)光反應(yīng)參與的免疫測定分為二種類型第一種是以發(fā)光劑作為酶免疫測定的底物，通過發(fā)光反應(yīng)增強測定的敏感性第二種是以發(fā)光劑作為抗體或抗原的標記物，直接通過發(fā)光反應(yīng)檢測標本中抗原或抗體的含量。

屬于酶免疫測定的一種。只是最后一步酶反應(yīng)所用底物為發(fā)光劑，通過發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光在特定的儀器上進行測定。技術(shù)類型

根據(jù)酶促反應(yīng)底物不同可分為

1.熒光酶免疫測定技術(shù)

2.化學發(fā)光酶免疫測定技術(shù)

根據(jù)免疫學反應(yīng)模式分

1.雙抗體夾心法和雙抗原夾心法

2.固相抗原競爭法：發(fā)光酶免疫測定技術(shù)（CLEIA）

用化學發(fā)光劑直接標記抗原或抗體,與待測標本中相應(yīng)Ab或Ag、磁顆粒性的Ag或Ab反應(yīng)，通過磁場把結(jié)合狀態(tài)（沉淀部分）和游離狀態(tài)的化學發(fā)光劑標記物分離開來，然后加入發(fā)光促進劑進行發(fā)光反應(yīng)，通過對發(fā)光強度的檢測進行定量或定性檢測。

技術(shù)類型

1.分離方法常用磁顆粒分離技術(shù)

2.免疫學反應(yīng)模式同酶發(fā)光免疫測定技術(shù)

3.不同只是相應(yīng)標記物是吖啶酯而不是酶化學發(fā)光免疫測定技術(shù)（CLIA）用吖啶酯直接標記抗體(抗原)，與待測標本中相應(yīng)的抗原(抗體)發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成固相包被抗體-待測抗原-吖啶酯標記抗體復(fù)合物，這時只需加入氧化劑（H2O2）和NaOH使成堿性環(huán)境，吖啶酯在不需要催化劑的情況下分解、發(fā)光。由集光器和光電倍增管接收、記錄單位時間內(nèi)所產(chǎn)生的光子能，這部分光的積分與待測抗原的量成正比，可從標準曲線上計算出待測抗原的含量。直接化學發(fā)光免疫分析

直接化學發(fā)光的機理

發(fā)光YYY磁微粒被測抗原+抗體+帶丫啶酯標記物抗體YYYYYYYYYYY沖洗后---夾心法（1）加入H2O2（pH<10）（2）加入堿（pH>10）磁微粒模式圖YYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYY特點抗原和抗體結(jié)合與未結(jié)合部分易分離縮短抗原抗體結(jié)合反應(yīng)時間，使測定時間減少，并降低交叉污染率。磁微粒技術(shù)

化學發(fā)光酶免疫分析（chemiluminescenceenzyme

immunoassay，CLEIA）是用參與催化某一化學發(fā)光反應(yīng)的酶如辣根過氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶(ALP)來標記抗原或抗體，在與待測標本中相應(yīng)的抗原(抗體)發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成固相包被抗體-待測抗原-酶標記抗體復(fù)合物，經(jīng)洗滌后，加入底物(發(fā)光劑)，酶催化和分解底物發(fā)光，由光量子閱讀系統(tǒng)接收，光電倍增管將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柌⒓右苑糯?，再把它們傳送至計算機數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，計算出測定物的濃度。化學發(fā)光酶免疫分析

該分析系統(tǒng)采用辣根過氧化物酶（HRP）標記抗體(或抗原)，在與反應(yīng)體系中的待測標本和固相載體發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成固相包被抗體-待測抗原-酶（HRP）標記抗體復(fù)合物，這時加入魯米諾發(fā)光劑、H2O2和化學發(fā)光增強劑使產(chǎn)生化學發(fā)光。辣根過氧化物酶標記的化學發(fā)光免疫分析辣根過氧化物酶標記化學發(fā)光免疫分析示意圖

該分析系統(tǒng)以堿性磷酸酶標記抗體(或抗原)，在與反應(yīng)體系中的待測標本和固相載體發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成固相包被抗體-待測抗原-酶標記抗體復(fù)合物，這時加入AMPPD發(fā)光劑，堿性磷酸酶使AMPPD脫去磷酸根基團而發(fā)光。

堿性磷酸酶標記的化學發(fā)光免疫分析堿性磷酸酶標記化學發(fā)光免疫分析示意圖電化學發(fā)光免疫技術(shù)電化學發(fā)光免疫測定法（ECLIA）發(fā)展于1996年，它在發(fā)光反應(yīng)中加入了電化學反應(yīng)，是繼放射免疫、酶免疫、化學發(fā)光免疫測定之后的新一代標記免疫測定技術(shù)，是電化學和免疫測定相結(jié)合的產(chǎn)物。世界公認的最先進的臨床免疫檢測技術(shù)1996年德國寶靈曼公司推出Elecsys2010系統(tǒng)世界上第一臺應(yīng)用電化學發(fā)光技術(shù)的全自動免疫分析儀1998年羅氏公司收購寶靈曼公司2001年羅氏推出電化學發(fā)光免疫模塊E170羅氏是全球唯一應(yīng)用電化學發(fā)光免疫技術(shù)制造儀器的廠商2006年羅氏推出電化學發(fā)光免疫模塊e6012007年羅氏推出電化學發(fā)光免疫模塊e411ECL2010diskE170ECL2010racke601Elecsys系列全自動免疫分析儀e411diske411rack

是一種在電極表面由電化學引發(fā)的特異性化學發(fā)光反應(yīng)，用化學發(fā)光劑三聯(lián)吡啶釕[Ru(bpy)3]2+標記Ab，通過Ag-Ab反應(yīng)和磁珠分離技術(shù)，根據(jù)三聯(lián)吡啶釕在電極上發(fā)出的光強度對待測的Ag或Ab進行定量。技術(shù)類型

1.分離方法常用磁顆粒分離技術(shù)

2.免疫學反應(yīng)模式同酶發(fā)光免疫測定技術(shù)

3.相應(yīng)標記物是三聯(lián)吡啶釕而不是酶電化學發(fā)光免疫測定技術(shù)（ECLIA）電化學發(fā)光原理底物：三聯(lián)吡啶釕[Ru(bpy)2+3]N羥基琥珀酰胺酯(NHS)

三丙胺(TPA)

在電極陽極表面，以上兩種電化學活性物質(zhì)同時失去電子發(fā)生氧化反應(yīng)，2價的[Ru(bpy)2+3]標記物被氧化成3價的[Ru(bpy)3+3]的標記物，TPA被氧化成陽離子自由基TPA+*，TPA+*很不穩(wěn)定，自發(fā)地失去一個質(zhì)子而形成自由基TPA*，其為強還原劑，將一個電子給3價的[Ru(bpy)3+3]，使其成為激發(fā)態(tài)的Ru(bpy)2+3

，而TPA自身被氧化成氧化產(chǎn)物。激發(fā)態(tài)的Ru(bpy)2+3衰減時發(fā)射一個波長620nm的光子，重新形成基態(tài)的Ru(bpy)2+3。這一過程在電極表面周而復(fù)始進行，產(chǎn)生許多光子。使得光信號增強。電化學發(fā)光反應(yīng)的原理三聯(lián)吡啶釕和三丙胺在電極表面發(fā)生的電化學發(fā)光反應(yīng)

SandwichPrinciple雙抗夾心法

largemolecularweightantigensaremeasured

directlyproportionalmeasurement,means:lowsignal=lowconcentrationhighsignal=highconcentration

e.g.TSH,CA15-3II–assays雙抗夾心法&橋聯(lián)免疫法

CompetitivePrinciple競爭法

smallmolecularweightantigensaremeasured

indirectlyproportionalmeasurement,means:highsignal=lowconcentrationlowsignal=highconcentration

e.g.T4,FolateII–assays競爭法電化學發(fā)光免疫系統(tǒng)核心原理電化學發(fā)光磁性微粒子固相親和素-生物素間接包被流動池檢測系統(tǒng)簡單試劑管理，先進的定標概念直徑最小–2.8um表面積大而均一磁性微粒子呈懸浮狀態(tài)使異相反應(yīng)變成類均相反應(yīng)加快反應(yīng)速度提高反應(yīng)靈敏度磁性微粒子固相載體的優(yōu)點專利的鏈霉親和素-生物素包被技術(shù)適用于包被各種化合物，如多肽、脂多糖等。親和素包被微粒子高效、均一、穩(wěn)定、通用。鏈霉親和素-生物素間接包被的優(yōu)勢生物素結(jié)合物與標本液相反應(yīng)。生物素-親和素反應(yīng)親和力強。由磁鐵將結(jié)合標記Ag-Ab復(fù)合物的磁性微粒（結(jié)合相）吸附于電極上，游離相被緩沖液沖走；電極表面的電化學發(fā)光的信號檢測完成后，磁鐵移走并使用系統(tǒng)清潔液沖走電極表面的結(jié)合標記Ag-Ab復(fù)合物的磁性微粒子；實現(xiàn)了結(jié)合相與游離相的全自動分離流動池檢測系統(tǒng)電化學發(fā)光免疫分析示意圖靈敏度高這是CLIA關(guān)鍵的優(yōu)越性，其靈敏度可達10-16/-21mol/L（RIA為10-12mol/L）。又如化學發(fā)光底物（如AMPPD）可檢測出的堿性磷酸酶的濃度比顯色底物要靈敏5х105倍?；瘜W發(fā)光免疫分析的優(yōu)點幾種標記免疫技術(shù)靈敏度的比較酶標熒光放免發(fā)光靈敏度(mol/L)10-1810-1510-1210-9線性范圍寬發(fā)光強度在4～6個量級之間與測定物質(zhì)濃度間呈線性關(guān)系。這與顯色的酶免疫分析吸光度（OD值）為2.0的范圍相比，優(yōu)勢明顯。也優(yōu)于放射免疫分析技術(shù)。幾種標記免疫技術(shù)線性范圍的比較酶標熒光放免發(fā)光線性范圍105104103102安全性好

試劑無放射性危害，環(huán)保、安全且易保存幾種標記免疫試劑的有效期比較酶標熒光放免發(fā)光有效期（月）1815129630全新生殖健康診斷指標InhibinA

1InhA發(fā)現(xiàn)與應(yīng)用歷史1930s-70s1980s1990s2000s-10s

1932年McCullagh發(fā)現(xiàn)非類固醇來源的抑制物質(zhì)1966年HCG和LH檢測的實現(xiàn)推動了Inh調(diào)節(jié)作用的理念1975年Sherman&Korenman觀察到卵巢卵泡液中存在抑制素樣物質(zhì)

1985年從牛和豬的卵泡液中分離出Inh1986年基因克隆和重組技術(shù)進一步分離出Inh，并大批量生產(chǎn)上世紀90年代InhA歐美等國開始應(yīng)用于臨床篩查唐氏綜合征，以及先兆子癇等生殖健康領(lǐng)域的研究DSL公司研發(fā)了ELISA方法試劑用于唐氏綜合征篩查獲得了美國FDA許可

InhA在歐美國家臨床得到廣泛應(yīng)用，并列入主要國家指南標準，證明其臨床價值2005年貝克曼庫爾特收購DSL公司后，擁有獨家專利。實現(xiàn)InhA檢測自動化，進一步優(yōu)化其臨床應(yīng)用的可行性和便利性2012年4月貝克曼庫爾特完成在中國SFDA注冊，填補國內(nèi)InhA產(chǎn)篩應(yīng)用及其他臨床應(yīng)用的空白41抑制素屬于TGF-?超家族成員PadmanabanSuresh,etal.,EndocrineJournal,2011Inhibin-A=α+βA32kDa糖蛋白男性：睪丸支持細胞、塞爾托利細胞女性：卵巢顆粒細胞、黃體細胞、子宮內(nèi)膜、胎盤負反饋抑制垂體FSH的分泌抑制素A的結(jié)構(gòu)和合成deKretserDM,etal.,HumReprodUpdate,200244抑制素A參與調(diào)節(jié)女性卵泡發(fā)育MendezLozanoetal.,FertilSteril,2006(Abstract)抑制素A臨床意義及應(yīng)用方向2InhA臨床應(yīng)用方向唐氏綜合征篩查指標性激素檢測菜單新指標孕中期四聯(lián)篩查方案（AFP+βhCG+uE3+InhA）卵巢/黃體功能評估先兆子癇預(yù)測指標葡萄胎診斷及監(jiān)測InhibinA唐氏綜合征篩查應(yīng)用建議依據(jù)中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準WS322.1—2010：《胎兒常見染色體異常與開放性神經(jīng)管缺陷的產(chǎn)前篩查與診斷技術(shù)標準第1部分：中孕期母血清學產(chǎn)前篩查》(2012年12月31日頒布實施)美國ACMGStandardsandGuidelines美國ACOGPracticebulletin加拿大SOGCClinicalPracticeGuideline加拿大BC省PerinatalServicesBCObstetricGuideline美國2010-CLSI-maternalserumscreening2ndeditionSURUSS2003FASTER2005BUN2003ChinaInhAstudyprojectInhA-唐氏篩查中國衛(wèi)生部行業(yè)標準其他國家篩查指南或標準文獻依據(jù)臨床研究數(shù)據(jù)47中文英文孕周項目孕早期聯(lián)合篩查FTS（FirstTrimesterCombinedScreening）9-13＋6WNT+PAPP-A+βhCG孕中期二聯(lián)篩查Double（DoubleScreening）14-20+6WAFP+βhCG孕中期三聯(lián)篩查Triple（TripleScreening）14-20+6WAFP+βhCG+uE3孕中期四聯(lián)篩查Quad（QuadrupleScreening）14-20+6WAFP+βhCG+uE3+InhA整合篩查(孕早期不出報告)IPS（IntegratedPrenatalScreening）9-13＋6W&14-20+6W9-13＋6W:NT+PAPP-A+βhCG14-20+6W:AFP+βhCG+uE3+InhA血清整合篩查(孕早期不出報告)SIPS（SerumIntegratedPrenatalScreening）9-13＋6W&14-20+6W9-13＋6W:PAPP-A14-20+6W:AFP+βhCG+uE3+InhA序貫篩查(僅高危病例在孕早期出報告)SSPS（StepwisesequentialPrenatalScreening)9-13＋6W&14-20+6W9-13＋6W:NT+PAPP-A+βhCG14-20+6W:AFP+βhCG+uE3+InhA酌情篩查(僅灰色區(qū)域風險孕婦進行孕中期篩查)CPS（ContingentPrenatalScreening)9-13＋6W&14-20+6W9-13＋6W:NT+PAPP-A+βhCG14-20+6W:AFP+βhCG+uE3+InhA常用篩查方案術(shù)語48中國衛(wèi)生部行業(yè)標準b)三聯(lián)法：

AFP+Freeβ-HCG+uE3

或AFP+HCG+uE3或AFP+Freeβ-HCG+Inh-A7.3.1實驗室檢測的母體血清標記物方案c)四聯(lián)法:

AFP+Freeβ-HCG+uE3+Inh-A

或AFP+HCG+uE3+Inh-A《胎兒常見染色體異常與開放性神經(jīng)管缺陷的產(chǎn)前篩查與診斷技術(shù)標準第1部分：中孕期母血清學產(chǎn)前篩查》49其他國家篩查指南與標準全球主要國家篩查策略國家孕婦<13W孕婦>14W美國整合篩查；血清整合篩查孕中期四聯(lián)加拿大孕早期聯(lián)合；整合篩查/血清整合篩查為主孕中期四聯(lián)加拿大哥倫比亞省整合篩查血清整合篩查孕中期四聯(lián)英國孕早期聯(lián)合為主；整合篩查，血清整合篩查孕中期三聯(lián)或四聯(lián)中國孕早期聯(lián)合（僅少數(shù)中心）孕中期二聯(lián)或三聯(lián)50經(jīng)美國病理醫(yī)學學院（CAP）授權(quán)方法實驗室數(shù)量年通量孕早期整合33253,000孕中期AFP測試85257,000孕中期三聯(lián)4490,000孕中期四聯(lián)1181,444,000整合篩查22103,000序貫篩查21361,000血清整合24120,000總計1192,608,000總出生人口4,250,000篩查率61%美國唐氏綜合征篩查:2011/12年均檢測InhA510102030405060708090100DetectionRate(%)孕婦年齡+三聯(lián)四聯(lián)聯(lián)合血清整合整合

孕中期孕早期-整合-30%71%81%85%87%94%89%86%95%93%不同唐氏篩查模式的性能在5%假陽性率

85%79%SURUSSBUNFASTER

74%

69%52孕中期二聯(lián),三聯(lián)&四聯(lián)篩查:四聯(lián)篩查降低假陽性率，提高檢出率篩查方案及選擇

二聯(lián)篩查三聯(lián)篩查四聯(lián)篩查檢出率(DR)85%85%85%假陽性率(FPR)13.1%9.3%6.2%接受羊穿的正常孕婦10,4627,4275,026流產(chǎn)的正常胎兒*946745SURUSS研究(Wald等，2003)*假設(shè)80％的孕婦接受羊穿并且有0.9%的致流產(chǎn)率。新生兒唐氏綜合癥的預(yù)期發(fā)生率為1.74/1000。二聯(lián)，三聯(lián)和四聯(lián)篩查采用的截斷值分別為1:470，1：385和1:300。降低假陽性率和提高檢出率的意義:篩查中FPR的降低意味著進行侵入性診斷的孕婦數(shù)量減少了。因為羊膜腔穿刺比篩查貴10倍以上，因而降低了成本。同時，還可以降低侵入性診斷可能造成的正常胎兒的流產(chǎn)率和由此給孕婦造成的精神創(chuàng)傷。提高檢出率在降低整體篩查成本同時并為患者提供更多信息以便在作出最佳選擇的基礎(chǔ)上檢出更多唐氏患兒。因此，SURUSS研究推薦對于孕中期參加孕期保健的孕婦：孕中期四聯(lián)篩查為最佳方案

二聯(lián)篩查三聯(lián)篩查四聯(lián)篩查檢出率(DR)71%77%83%假陽性率(FPR)5%5%5%Down’s檢出例數(shù)/總例數(shù)124/174134/174144/17453整合篩查為最高效安全的篩查方案如果無法開展NT檢測：推薦血清整合篩查方案對于孕中期參加孕期保健的孕婦：孕中期四聯(lián)篩查為最佳方案對于孕早期參加產(chǎn)篩測試的孕婦：推薦孕早期聯(lián)合篩查SURUSS研究結(jié)論四聯(lián)篩查與孕早期聯(lián)合篩查相同DR下，F(xiàn)PR相當54四聯(lián)篩查在95%可信區(qū)間下正確檢出率可以提高到81%,已接近于孕早期聯(lián)合篩查13周檢出率相比較二聯(lián)和三聯(lián)而言檢出率提高10%以上FASTER研究(Wald等，2005)篩查方案孕周固定假陽性率1%5%檢出率孕早期篩查11周12周13周11周12周13周孕早期血清(PAPPA+fβhCG)50%46%43%70%67%65%(43-59)(64-78)孕早期聯(lián)合篩查(NT+PAPPA+fβhCG)73%72%67%87%85%82%(66-81)(82-92)(80-90)(77-88)孕中期篩查15-17周三聯(lián)篩查(AFP+βhCG+uE3)45%(38-48)69%(63-74)四聯(lián)篩查(AFP+βhCG+uE3+InhibinA)60%(48-66)81%

(70-86)85%(固定檢出率)三聯(lián)篩查(AFP+βhCG+uE3)14%(10-21)四聯(lián)篩查(AFP+βhCG+uE3+InhibinA)7.3%(4.6-16)FASTER研究55

國內(nèi)InhA臨床數(shù)據(jù)-抑制素A研究項目研究題目唐氏綜合征孕中期二聯(lián)或三聯(lián)（時間分辨熒光方法）篩查結(jié)合抑制素A（磁微?；瘜W發(fā)光方法）篩查模式回顧性研究目的1.研究中國人群正常和異常妊娠抑制素A的統(tǒng)計學參數(shù)（中位數(shù)、標準方差、MoM值平均數(shù)、體重校正參數(shù)等）2.比較由CLEIA方法抑制素A和DELFIA方法三聯(lián)篩查（AFP+FreehCGβ+uE3）組成的四聯(lián)篩查與DELFIA方法三聯(lián)篩查（AFP+FreehCGβ+uE3）的篩查性能的比較。3.比較由CLEIA方法抑制素A和DELFIA方法二聯(lián)篩查（AFP+FreehCGβ）組成的新三聯(lián)篩查與DELFIA方法二聯(lián)（AFP+FreehCGβ）、三聯(lián)篩查（AFP+FreehCGβ+uE3）的篩查性能的比較。研究例數(shù)4000例正常孕婦+80例唐氏妊娠孕婦研究樣本孕齡為孕中期（15-20+6）的妊娠婦女/儲存于-70℃的廢棄血清樣本研究單位4家研究中心持續(xù)時間03,2012–07,201256研究中心信息中心城市醫(yī)院負責人介紹1北京北京協(xié)和醫(yī)院邊旭明劉俊濤衛(wèi)生部產(chǎn)前診斷專家組國家產(chǎn)前診斷辦公室國家產(chǎn)前診斷培訓(xùn)中心2昆明云南省第一人民醫(yī)院朱寶生衛(wèi)生部產(chǎn)前診斷專家組國家產(chǎn)前診斷培訓(xùn)中心3杭州浙江大學醫(yī)學院婦產(chǎn)科醫(yī)院呂時銘衛(wèi)生部產(chǎn)前診斷專家組國家產(chǎn)前診斷培訓(xùn)中心4成都四川大學華西附屬第二醫(yī)院王和衛(wèi)生部產(chǎn)前診斷專家組國家產(chǎn)前診斷培訓(xùn)中心57方法不同假陽性率下的檢出率（%）1%3%5%本實驗PE三聯(lián)526875TC三聯(lián)536876TC新三聯(lián)577279TC四聯(lián)647884SURUSS文獻三聯(lián)567077四聯(lián)647783不同假陽性率下的檢出率TC新三聯(lián)比PE三聯(lián)DR提高5.3%，TC四聯(lián)比PE三聯(lián)DR提高12%本實驗的TC四聯(lián)結(jié)果與SURUSS文獻上的結(jié)果接近5%效果提高75參考組76+1.3%DR79+5.3%DR84+12%DR778358不同檢出率下的假陽性率方法不同檢出率下的假陽性率（%）70%75%80%85%本實驗PE三聯(lián)3.44.97.010.3TC三聯(lián)3.44.87.010.4TC新三聯(lián)2.63.85.58.2TC四聯(lián)1.62.43.65.6SURUSS三聯(lián)2.94.26.29.3四聯(lián)1.62.53.96.2TC新三聯(lián)比PE三聯(lián)FPR降低22%，TC四聯(lián)比PE三聯(lián)FPR降低51%75%4.94.83.82.44.22.5效果提高參考組-2.0%FPR-22%FPR-51%FPR59中國出生缺陷現(xiàn)狀中國每年有100萬出生缺陷兒發(fā)生,其中只有30%可以治愈或糾正全國累計有近3000萬個家庭曾生育過出生缺陷和先天殘疾兒,占全國家庭總數(shù)1/10中國每年有約3-5萬唐氏兒,10萬神經(jīng)管缺陷患兒出生造成沉重的社會負擔和精神壓力:--此項支出每年達到300億以上

--每個唐氏患兒僅醫(yī)藥費支出就達25萬以上

--1個患兒累及7個成人關(guān)鍵在于預(yù)防:三級預(yù)防可大幅度減少出生缺陷和先天殘疾兒的發(fā)生

--1級:孕前保健

--2級:孕期保健(產(chǎn)前篩查與診斷)--3級:新生兒篩查(早發(fā)現(xiàn)早干預(yù))60孕中期四聯(lián)>80%的檢出率意味著……抑制素A與產(chǎn)前篩查最大程度地提高孕中期篩查的篩查效率，提高檢出率，降低假陽性率更少的孕婦選擇昂貴高風險的羊水穿刺手術(shù)易于質(zhì)量管理控制，普及推廣，適合中國國情為“準父母”減輕了沉重的心理負擔和經(jīng)濟負擔較少的投入，減少產(chǎn)前篩查項目成本，極大地節(jié)省醫(yī)療資源提升產(chǎn)篩中心服務(wù)水平，降低醫(yī)療風險——已成為歐美孕中期唐氏綜合癥篩查的常規(guī)指標61性激素檢測菜單新指標建議依據(jù)抑制素A在黃體中期達最大值，說明在黃體期主要同黃體細胞產(chǎn)生抑制素A水平反映了IVF-胚胎移植治療后黃體數(shù)量ROC曲線提示抑制素A在0.553MoM時，預(yù)測妊娠失敗的能力最佳，敏感性達90.6%，特異性為99.5%目前沒有單一的指標可以準確預(yù)測子癇前期抑制素A隨子癇前期的嚴重程度增加而升高可以應(yīng)用四聯(lián)指標對先兆子癇進行風險評估正常妊娠孕婦抑制素A水平的顯著升高與葡萄胎孕婦抑制素A水平?jīng)]有重疊

清宮后，抑制素A水平在10-15天內(nèi)迅速降到非妊娠水平，利于監(jiān)測InhA-性激素卵巢/黃體功能評估先兆子癇預(yù)測葡萄胎診斷與監(jiān)測6263反映黃體功能ChatchaiTreetampinich,etal.,HumRepro,2000妊娠組治療方案：激素替代HRT

自然周期NAT

克羅米芬最低刺激CC

卵巢刺激

單胎COH-VS

多胎COH-VM64ChatchaiTreetampinich,etal.,HumRepro,2000HRT組（無功能卵巢），抑制素A水平極低反映了缺乏有功能的黃體自然周期組相比卵巢刺激組抑制素A水平低是因為只有一個黃體接受卵巢刺激方案的婦女都有多個黃體，抑制素A水平最高反映黃體功能65預(yù)測不良妊娠結(jié)局PasqualeFlorio,etal.,FertilityandSterility,2004ROC曲線提示抑制素A在0.553MoM時，預(yù)測妊娠失敗的能力最佳，敏感性達90.6%，特異性為99.5%。66妊娠期高血壓發(fā)生的常見類型2000年全國孕產(chǎn)婦妊高征死亡率為7.6%，位于各種死亡原因第二位可能機制：滋養(yǎng)細胞浸潤胎盤床不足、子宮-胎盤缺血缺氧

合體滋養(yǎng)細胞缺血、發(fā)育良；細胞滋養(yǎng)細胞增生

各種生物因子分泌失控子癇前期目前沒有單一的指標可以準確預(yù)測子癇前期AUC敏感性%特異性90%特異性80%Activin+inhibinA+PIGF+uterinearteryPI0.9419093JYu,etal.,UltrasoundObstetGynecol,2011發(fā)展成嚴重子癇前期的孕婦相比正常孕婦，血中和羊水中的抑制素A水平明顯升高。Shin-YoungKim,etal.,JKoreanMedSci,200669抑制素A隨子癇前期的嚴重程度增加而升高

VorapongPhupong,etal.ArchGynecolObstet,2009葡萄胎○正常妊娠12-14w▲非妊娠婦女卵泡期●部分性葡萄胎清宮前/后

正常妊娠孕婦抑制素A水平的顯著升高與葡萄胎孕婦抑制素A水平?jīng)]有重疊

清宮后，抑制素A水平在10-15天內(nèi)迅速降到非妊娠水平，利于監(jiān)測PasqualeFlorio,etal.Cancer,200271抑制素A通過抑制FSH、以及性腺局部旁分泌發(fā)揮其生理作用青春期開始，卵巢是女性抑制素A的主要合成器官在月經(jīng)周期中，抑制素A主要由黃體合成，負反饋控制FSH分泌抑制素A水平可用作預(yù)測卵巢功能的減退，評估黃體功能妊娠前期，主要由黃體合成抑制素A；妊娠中晚期，主要由胎盤合成抑制素A抑制素A可以用于預(yù)測子癇前期、唐氏篩查、診斷葡萄胎結(jié)語腫瘤診療現(xiàn)狀：腫瘤早期臨床癥狀不明顯70-80%患者一經(jīng)診斷均處于腫瘤晚期喪失了早期治療機會，預(yù)后差，3-5年的生存率較低腫瘤的診斷：病理學影像學實驗室檢查腫瘤的治療：手術(shù)放療化療其他綜合治療腫瘤的診斷和治療腫瘤標志物為腫瘤的早期診斷提供了可能腫瘤標志物動態(tài)監(jiān)測，可以評估腫瘤的治療的療效，在影像學改變之前提示腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移胃泌素釋放肽-GRPGRP=胃泌素釋放肽

初始作為胃腸激素檢測GRP的生理學功能:

刺激胃的G細胞分泌胃泌素

參與平滑肌細胞的收縮

促進細胞間的相互作用

上皮細胞增殖、轉(zhuǎn)移和細胞擴散中發(fā)揮重要作用ProGRP在良性疾病的分布MolinaRetal.AnticancerRes.2005,25,1773-1778腎衰是導(dǎo)致ProGRP假陽性升高的重要因素，51.6%的腎衰患者ProGRP升高

ProGRP對在多種腫瘤的分布source:PetraStieber,Inst.F.Klin.Chemie,KlinikumderUniversit?tMünchen–Grosshadern,2010cut-offProGRP:30pg/mLProGRP主要在SCLC顯著升高ProGRP在腫瘤升高的百分比SCLCProGRP是SCLC診斷特異性的標志物樣本分布目的：評估ProGRP對不同類型肺癌的診斷價值結(jié)果：ProGRP對SCLC診斷的敏感性=83.8%；特異性=95%KimH-Retal.Oncology&Hematology2011,26,625-630肺癌標志物臨床指南

NACB推薦組織學治療前治療后和隨訪未知CYFRA21-1,NSE,ProGRP,CEA術(shù)后：根據(jù)組織學結(jié)果選擇標志物晚期腫瘤：選擇首選的標志物腺癌CYFRA21-1和

CEACYFRA21-1和/或

CEA鱗癌CYFRA21-1和

CEA(和SCC)CYFRA21-1和/或

CEA大細胞癌CYFRA21-1和

CEACYFRA21-1和/或

CEA小細胞癌NSE和

ProGRPNSE和/或

ProGRPsource:NACB:PracticeGuidelinesAndRecommendationsForUseOfTumorMarkersInTheClinic:LungCancer(Section3P)T

Toxoplasmagondii（弓形體）O

Others(ParvovirusB19,Eppstein-BarrVirusetc.)R

RubellaVirus（風疹病毒）C

Cytomegalovirus（巨細胞病毒）H

HerpesVirus（單純皰疹病毒）TORCH

弓形體 1-7 / 1,000lifebirths風疹病毒

0.2-0.5 / 1,000lifebirths巨細胞病毒

10 / 1,000lifebirthsTORCH感染

發(fā)病率和易感人群

如下情況一般需要TORCH感染檢測：免疫狀態(tài)測定孕期急性或既往感染診斷新生兒感染診斷免疫低下患者監(jiān)測（例如：AIDS或移植患者）TORC