第四章人類疾病動(dòng)物模型第一節(jié)概述一、人類疾病動(dòng)物模型定義（12題）人類疾病動(dòng)物模型(Animalmodelsofhumandiseases）是指醫(yī)學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象和相關(guān)材料。

NK細(xì)胞活性缺陷（由于細(xì)胞溶解作用的識(shí)別過程受損傷所致。（一）注意環(huán)境因素對(duì)模型動(dòng)物的影響干擾動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響因素

3．了解動(dòng)物實(shí)驗(yàn)記錄的規(guī)范要求；(1)無毛：毛囊發(fā)育不良，外觀上看幾乎沒有被毛1、自發(fā)性高血壓動(dòng)物模型應(yīng)該懂得沒有一種動(dòng)物模型能完全復(fù)制人類疾病真實(shí)情況，動(dòng)物畢竟不是人體的縮影。第三節(jié)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用誘發(fā)性疾病動(dòng)物模型(3)劑量:小鼠5~20IU兔30~60IU采用人工方法，改變動(dòng)物的生活環(huán)境造模1、自發(fā)性高血壓動(dòng)物模型（2）糖尿病腎病動(dòng)物模型五、內(nèi)分泌疾病動(dòng)物模型第一天腹腔注射PMSGDBA／2及C3H小鼠對(duì)同一病毒(Newcastle病毒)的反應(yīng)和DBA／1小鼠完全不同，前者引起肺炎而后者引起腦炎。(1)誘發(fā)性動(dòng)物模型（experimentalanimalmodel）二.人類疾病動(dòng)物模型意義（12題）1.避免人體實(shí)驗(yàn)造成的危害。2.可研究平時(shí)不易見到的疾病.3.可提供發(fā)病率低,潛伏期和病程長(zhǎng)的疾病動(dòng)物模型.4.克服復(fù)雜因素，增加方法學(xué)上的可比性。5.簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)操作，樣品收集方便，結(jié)果易于分析。6.有利于更全面地認(rèn)識(shí)疾病的本質(zhì)。二、模型的設(shè)計(jì)原則

三、動(dòng)物模型的分類

按產(chǎn)生原因分

按模型種類分

按系統(tǒng)范圍分

按中醫(yī)藥體系分類

(13題）(1)誘發(fā)性動(dòng)物模型（experimentalanimalmodel）

通過使用物理、化學(xué)、生物因素，復(fù)合致病因素作用于動(dòng)物，造成動(dòng)物組織，器官或全身一定的損害出現(xiàn)某些類似人類疾病時(shí)而出現(xiàn)的功能，代謝或形態(tài)結(jié)構(gòu)方面的病變。優(yōu)點(diǎn)：制作方法簡(jiǎn)便，實(shí)驗(yàn)條件比較簡(jiǎn)單，其他因素容易控制，短時(shí)間內(nèi)可大量復(fù)制。缺點(diǎn)：誘發(fā)的疾病模型與自然產(chǎn)生的疾病在某些方面有所不同。而且有些人類疾病不能用人工方法誘發(fā)出來。近交系、突變系。(3)抗疾病動(dòng)物模型(4)生物醫(yī)學(xué)動(dòng)物模型(2)自發(fā)性動(dòng)物模型（spontaneousanimalmodel）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物未經(jīng)任何人工處置,在自然條件下自發(fā)產(chǎn)生或由于基因突變的異常表現(xiàn)通過遺傳育種手段保留下來的動(dòng)物模型.優(yōu)點(diǎn)：是在一定程度上減少了人為的因素，更接近自然的人類疾病。缺點(diǎn)：種類有限，疾病動(dòng)物飼養(yǎng)條件要求高，發(fā)病率低，發(fā)病時(shí)間長(zhǎng)。自發(fā)腫瘤模型因動(dòng)物種系、品種不同，其腫瘤所發(fā)生的類型和發(fā)病機(jī)制有差異。自發(fā)性動(dòng)物模型應(yīng)用價(jià)值很高，特別是在遺傳性疾病、免疫缺陷病、腫瘤等的研究上得到了廣泛應(yīng)用。近幾十年來科學(xué)界十分重視自發(fā)性動(dòng)物模型的開發(fā)。如與人類疾病相似的心臟病的加拿大犬；與兒童碳水化合物、氨基酸代謝失調(diào)相似的貓；自發(fā)性高血壓和腦中風(fēng)大鼠；青光眼兔；自發(fā)性糖尿病地鼠；肥胖癥小鼠；裸鼠：肺癌、淋巴肉瘤、白血病等等。3、抗疾病型動(dòng)物模型（negativeanimalmodel）是指特定的疾病不會(huì)在某種動(dòng)物身上發(fā)生。因此可借以探討為何該種動(dòng)物對(duì)該疾病有天然的抵抗力。如哺乳類動(dòng)物均感染血吸蟲病，而洞庭湖流域的東方地鼠卻不能復(fù)制血吸蟲病，故可用于血吸蟲感染和抗病的研究。4、生物醫(yī)學(xué)動(dòng)物模型（biomedicalanimalmodel）是指利用健康正常的動(dòng)物生物學(xué)特征來提供人類疾病相似表現(xiàn)的疾病模型。如沙鼠缺乏完整的腦基底Willis動(dòng)脈環(huán)，動(dòng)脈環(huán)后交通支，可用來結(jié)扎一側(cè)頸動(dòng)脈制備腦梗塞、腦缺血模型鹿的正常紅細(xì)胞是鐮刀形的，多年來一直用于鐮刀形紅細(xì)胞貧血研究。(1)整體動(dòng)物(2)離體器官和組織(3)細(xì)胞株(4)數(shù)學(xué)模型

3.按系統(tǒng)范圍分

(1)疾病的基本病理過程動(dòng)物模型

各種疾病共同性的一些病理變化過程模型是指致病因素在一定條件下作用于動(dòng)物后，所出現(xiàn)的共同性的功能、代謝和形態(tài)結(jié)構(gòu)某些改變的動(dòng)物模型。這種動(dòng)物模型的致病因素不是某種疾病所特有的，而是各種疾病都可能共同發(fā)生的。如炎癥、發(fā)熱、休克等是研究疾病機(jī)理和藥物篩選理想的方法。(2)各系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型

與人類各系統(tǒng)疾病相應(yīng)的人類疾病動(dòng)物模型

中醫(yī)證候動(dòng)物模型陰虛、陽虛，氣虛、血虛，脾虛、腎虛、厥脫癥等已形成獨(dú)特的較完整的體系。如獨(dú)特的理論體系“辨證論治”；獨(dú)特的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：證、病、癥；獨(dú)特的認(rèn)識(shí)特色：審證求因。第二節(jié)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用自發(fā)性疾病動(dòng)物模型1、自發(fā)性高血壓動(dòng)物模型2、自發(fā)性糖尿病動(dòng)物模型

3、自發(fā)性腫瘤動(dòng)物模型

4、免疫缺陷動(dòng)物5、自發(fā)性小鼠系統(tǒng)性紅斑狼瘡模型一、自發(fā)性高血壓動(dòng)物模型（14題）有8個(gè)品系的遺傳性高血壓大鼠:遺傳性高血壓品系（GH）自發(fā)性高血壓品系（SHR）中風(fēng)型高血壓品系（SHR/SP）鹽敏感品系（DS）米蘭種高血壓品系（MHS）Munster品系（SHM）Sabra高血壓品系（SBH）Lyon高血壓品系（LH）

此類動(dòng)物模型與人類高血壓的相似之處：①由遺傳因素產(chǎn)生；②高血壓早期無明顯器官病變；③血壓隨鼠齡增長(zhǎng)而增加；④血管總外周阻力明顯升高；⑤隨著疾病發(fā)展可出現(xiàn)心、腦、腎等并發(fā)癥，使用降壓藥等治療措施可以預(yù)防和減輕疾病進(jìn)展和并發(fā)癥的發(fā)生；⑥應(yīng)激和高鹽飲食等因素可加速高血壓的發(fā)展并加重并發(fā)癥。乙烯雌酚可引起B(yǎng)ALB／c小鼠的睪丸瘤，而C3H小鼠則不能。4、小鼠白血?。篊58、AKR、Afb等品系小鼠的白血病多發(fā)，8～9月齡的AKR小鼠白血病發(fā)生率高達(dá)80％～90％。[培訓(xùn)內(nèi)容]

1．醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)課題的設(shè)計(jì)原則和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的基本要求

2．影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響因素解剖、生理特點(diǎn)和特殊生理反應(yīng)動(dòng)物的反應(yīng)：R＝(A+B+C)×D±E維生素C缺乏的豚鼠對(duì)麻醉藥很敏感。3、目前國(guó)內(nèi)品系不全，使用多SHR、DS和MHS已有多家單位進(jìn)行飼養(yǎng)繁殖。喂高能飼料,或給予金硫葡萄糖,或?qū)敕逝只?則出現(xiàn)肥胖癥.1、改良動(dòng)物品種和生產(chǎn)性能，生產(chǎn)人藥用蛋白和營(yíng)養(yǎng)保健蛋白1、自發(fā)性乳腺腫瘤：在各品系小鼠中，C3H系雌性小鼠乳腺腫瘤發(fā)生率最高，達(dá)99％～100％；與兒童碳水化合物、氨基酸代謝失調(diào)相似的貓；裸鼠：肺癌、淋巴肉瘤、白血病等等。是指特定的疾病不會(huì)在某種動(dòng)物身上發(fā)生。四、中醫(yī)證候動(dòng)物模型研制概況論文寫作中常出現(xiàn)的有關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)問題；主要差異在于：1、它是通過選擇性繁殖得到的，與人類發(fā)病有一定區(qū)別；2、甲狀腺和免疫功能存在異常。3、目前國(guó)內(nèi)品系不全，使用多SHR、DS和MHS已有多家單位進(jìn)行飼養(yǎng)繁殖。高血壓:SHR,WKY癥狀:有許多亞系,生育,壽命均正常.體重增長(zhǎng)率較WKY差,老齡前外觀無差異.壽命:♂430d,♀550d血壓早期即有差異,并引發(fā)各種臨床癥狀.SHR:2月前:150mmHg以上,4~5月180~210WKY:成年♂135mmHg,♀123mmHg發(fā)病時(shí),末梢動(dòng)脈變狹窄,彎曲,心臟漸漸肥大.以心重與體重比率增加為顯著(以左心房為顯著).肼酞嗪或甲基多巴加入飲水,可預(yù)防高血壓發(fā)生.應(yīng)用:病態(tài)與人原發(fā)性高血壓極為相似.發(fā)病率近100%.常用于發(fā)病機(jī)制,預(yù)防,治療和診斷等.與其它特性大鼠雜交:二、自發(fā)性糖尿病動(dòng)物模型

自發(fā)性糖尿病模型NOD小鼠:1型BB大鼠：1型ob/ob小鼠：2型KK糖尿病小鼠：2型db小鼠：2型GK大鼠：

2型1、原發(fā)性糖尿病BBWistar大鼠是I型糖尿病的良好模型。其發(fā)病與自身免疫性毀壞胰島β細(xì)胞引發(fā)胰腺炎和胰島素缺乏有關(guān)。大鼠通常在60～120日齡時(shí)發(fā)病，數(shù)天后就出現(xiàn)嚴(yán)重的高血糖、低胰島素和酮血癥。給予免疫抑制劑、切除新生鼠胸腺等方法可預(yù)防糖尿病的發(fā)生，說明自身免疫參與發(fā)病過程。

類似年輕型（I型）糖尿病.多基因遺傳,起病突然,58~123日齡發(fā)病.體重減輕，高血糖，胰島素缺乏尸檢:胰島區(qū)有淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)胰島炎，β-細(xì)胞顆粒喪失與壞死，胰島變小，基本由а-細(xì)胞組成。慢性非胰島素依賴性:應(yīng)用:研究發(fā)病的遺傳,環(huán)境因素,β-C損害免疫學(xué)因素，病態(tài),治療等.2、NOD小鼠小鼠是I型糖尿病的良好模型。發(fā)病初期就表現(xiàn)出高血糖、尿糖，多飲、多尿，消瘦，胰島素低下等癥狀。如果沒有外源胰島素治療，1～2個(gè)月死亡，通常死于酮血癥。免疫系統(tǒng)在糖尿病的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用，β細(xì)胞損傷繼發(fā)于自身免疫過程，引起低胰島素血癥。雌性NOD小鼠的發(fā)病率顯著高于雄性，且發(fā)病早。3.KK小鼠是糖尿病典型的多基因疾病動(dòng)物模型。表現(xiàn)Ⅱ型糖尿病特征。具有高血糖癥、高胰島素血癥、胰島素抵抗等癥狀。如果將黃色肥胖基因?qū)隟K小鼠，其肥胖和糖尿病癥狀更為明顯。病理:正常飼養(yǎng),很少出現(xiàn)尿糖或高血糖癥.耐糖試驗(yàn):糖尿性狀(非肥胖型)喂高能飼料,或給予金硫葡萄糖,或?qū)敕逝只?則出現(xiàn)肥胖癥.常伴有高胰島素血癥的高血糖癥(肥胖KK小鼠).糖尿病變化與成年人相似.腎小球系膜細(xì)胞増生,基底膜肥厚.4、db小鼠是近交系C57BL/KS小鼠單隱性基因突變后培育出來。具有肥胖、胰島素抵抗、高血糖、高胰島素血癥、高甘油三酯血癥等特征，其表現(xiàn)類似于人類的Ⅱ型糖尿病。5、ob/ob小鼠為Ⅱ型糖尿病模型。純合子動(dòng)物表現(xiàn)肥胖、高血糖和高胰島素血癥。該小鼠因Leptin(ob基因產(chǎn)物)缺乏而引起肝脂肪生成和肝糖原異生，高血糖又刺激胰島素分泌，引起胰島素抵抗的惡性循環(huán)。6.GK大鼠該鼠由Goto等1975年通過對(duì)Wistar進(jìn)行口服葡萄糖耐量試驗(yàn)并篩選高血糖的個(gè)體進(jìn)行培育而來。表現(xiàn)為胰島素分泌不全、胰島素抵抗、胰島纖維化、非肥胖等典型Ⅱ型糖尿病特征。大鼠在長(zhǎng)期糖尿病后會(huì)出現(xiàn)各種并發(fā)癥，如腎病和神經(jīng)系統(tǒng)疾病三、自發(fā)性腫瘤動(dòng)物模型1、自發(fā)性乳腺腫瘤：在各品系小鼠中，C3H系雌性小鼠乳腺腫瘤發(fā)生率最高，達(dá)99％～100％；A系經(jīng)產(chǎn)雌鼠乳腺腫瘤發(fā)生率約為60％～80％參照Dunn分類，小鼠乳腺腫瘤分為A、B、C三型：A型為典型乳腺腺瘤。B型包括乳頭狀囊腺瘤、單純瘤及導(dǎo)管內(nèi)瘤等。C型又稱纖維瘤和腺纖維瘤。2、自發(fā)性肺腫瘤：小鼠自發(fā)性肺腫瘤主要見于18月齡以上的A系、SWR系小鼠其肺自發(fā)瘤發(fā)生率分別達(dá)90％和80％。經(jīng)產(chǎn)PRA小鼠發(fā)生率也很高（77％）。病理學(xué)類型主要是腺瘤，有良性和惡性之分。3、自發(fā)性肝腫瘤：自發(fā)性肝腫瘤多見于小鼠小鼠自發(fā)性肝腫瘤常見于肝細(xì)胞，膽管細(xì)胞腫瘤罕見。14月齡以上雄性C3Hf系、C3H系及C3H/He小鼠發(fā)生率分別為72%、85%和80%左右，CBA/J雄鼠發(fā)病率為65%，而C57BL/6J、A/J等品系則為肝臟腫瘤低發(fā)病系。

4、小鼠白血病：C58、AKR、Afb等品系小鼠的白血病多發(fā)，8～9月齡的AKR小鼠白血病發(fā)生率高達(dá)80％～90％。形成的白血病以淋巴細(xì)胞性白血病為主。5、自發(fā)性卵巢腫瘤：BALB/c、C3H系小鼠均為卵巢瘤高發(fā)品系，其中BALB/c生產(chǎn)雌鼠發(fā)病率為75.8%；C3H系中C3HeB/Fe19月齡生產(chǎn)雌鼠發(fā)病率為64%，育成雌鼠為22%；C3HeB/De亞系24月齡未生育雌鼠發(fā)病率為47%，21月齡生育雌鼠為37%，多產(chǎn)者為29%。（2）其它動(dòng)物自發(fā)瘤1、大鼠內(nèi)分泌腫瘤和惡性淋巴瘤，跟品系和年齡有關(guān)。2、金黃倉鼠是實(shí)驗(yàn)性腫瘤研究中常用的一種動(dòng)物，自發(fā)瘤發(fā)生率的（0.5％～17％），主要發(fā)生于神經(jīng)系統(tǒng)和膀胱以外的組織和器官。3、兔類自發(fā)瘤發(fā)生率很低，僅為0.8％～2.6％，以乳頭狀瘤和子宮腺瘤最為常見。4、兩棲類自發(fā)瘤：以蛙的實(shí)驗(yàn)性腫瘤最常用。如豹蛙腎腫瘤（發(fā)生率約2.7％）5、鳥類的自發(fā)性腫瘤也比較常見，特別是雞腫瘤最常見，發(fā)身率約10％～20％，且多屬惡性，以肌原性肉瘤和白血病為多。如發(fā)生上皮源性腫瘤，則幾乎均為鱗狀上皮瘤。1.概念：由于先天性遺傳突變或用人工方法造成一種或多種免疫系統(tǒng)組成成分缺陷的動(dòng)物。2.分類：Ｔ淋巴細(xì)胞、Ｂ淋巴細(xì)胞、ＮＫ細(xì)胞功能缺陷動(dòng)物，聯(lián)合免疫缺陷動(dòng)物，獲得性免疫缺陷動(dòng)物。(一).裸小鼠:先天性無胸腺,無毛隱性突變基因在11號(hào)染色體上一個(gè)基因兩種表現(xiàn)已導(dǎo)入到不同的遺傳背景體液免疫正常(1)無毛：毛囊發(fā)育不良，外觀上看幾乎沒有被毛(2)壽命短,死亡率高(3)發(fā)育不良,新生鼠生長(zhǎng)明顯遲緩(4)繁殖能力差:♀nu/+×♂nu/nu(5)有肝臟疾病(1)先天性胸腺缺失：僅有胸腺殘跡或異常的胸腺上皮。故不能分泌胸腺素，不能使T細(xì)胞正常分化(2)胸腺依存免疫功能(T細(xì)胞)喪失(3)B細(xì)胞生理功能正常,T細(xì)胞依存性B細(xì)胞功能底下.(4)巨噬細(xì)胞活性比對(duì)照組(nu/+)高(5)NK細(xì)胞在弱陽性細(xì)胞中可能有T前驅(qū)細(xì)胞(1)微生物(2)免疫學(xué)(3)寄生蟲(4)遺傳學(xué)(5)臨床醫(yī)學(xué):腫瘤學(xué),皮膚病,異種移植(二).裸大鼠一般特征與裸小鼠相似軀干部仍有稀少被毛易患呼吸道疾病（三）B淋巴細(xì)胞缺陷動(dòng)物（性連鎖免疫缺陷小鼠(XID）B淋巴細(xì)胞缺陷,xid基因位于X性染色體上起源于CBA/N品系臨床表現(xiàn):免疫球蛋白缺失,無丙種球蛋白,細(xì)胞免疫正常,體液免疫異常血清中IgM,IgG3底下xid/xid♀,xid/Y♂對(duì)II型抗原無體液免疫反應(yīng),對(duì)B細(xì)胞分裂素缺乏反應(yīng)（非胸腺依賴性抗原如葡聚糖、肺炎球菌脂多糖以及雙鏈DNA等沒有反應(yīng)）。(四)Beige小鼠

NK細(xì)胞活性缺陷（由于細(xì)胞溶解作用的識(shí)別過程受損傷所致。）隱性突變基因bg位于第13號(hào)染色體上純合體小鼠bg/bg:被毛完整,毛色變淺.粒細(xì)胞趨化性和殺菌活性降低,溶酶體功能缺陷,對(duì)各種病原因子較敏感繁殖方式:純合子(五)嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷(SCID)小鼠1.SCID小鼠-17近交系小鼠隱性突變基因scid在16號(hào)染色體上.所有T和B淋巴細(xì)胞功能測(cè)試均為陰性，對(duì)外源性抗原無細(xì)胞免疫及抗體反應(yīng)，體內(nèi)缺乏攜帶前B細(xì)胞、B細(xì)胞和T細(xì)胞表面標(biāo)志的細(xì)胞。但是，其非淋巴性造血細(xì)胞分化不受突變基因的影響，巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞、巨核細(xì)胞、紅細(xì)胞等呈正常狀態(tài)。T,B細(xì)胞大大減少.臨床表現(xiàn)為低球蛋白血癥,低淋巴細(xì)胞血癥.細(xì)胞和體液免疫功能均缺失,但巨噬細(xì)胞和NK細(xì)胞功能未受影響.有滲漏現(xiàn)象:主要與DNA修復(fù),抗原刺激,年齡品系,飼養(yǎng)環(huán)境有關(guān).飼養(yǎng)繁殖:SPF環(huán)境,兩性均可生育,每胎產(chǎn)子3~5只2.Motheaten小鼠Motheaten小鼠突變基因（me）位于第6對(duì)染色體上，出生后2h內(nèi)即可出現(xiàn)皮膚膿腫，有嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷，表現(xiàn)為對(duì)胸腺依賴和不依賴抗原均無反應(yīng)。對(duì)T、B細(xì)胞分裂素的增殖反應(yīng)嚴(yán)重受損，細(xì)胞毒和NK細(xì)胞活性減低。（六）T、B、NK細(xì)胞功能三聯(lián)免疫缺陷小鼠國(guó)外將分布于3種小鼠的3個(gè)隱性突變基因即NK細(xì)胞缺陷的beige基因、T細(xì)胞缺陷的nu基因以及B細(xì)胞缺陷的xid基因經(jīng)過雜交、篩選并導(dǎo)入，育成了T、B、NK細(xì)胞三聯(lián)免疫缺陷的beige-nude-xid小鼠（BNX小鼠）。五、自發(fā)性小鼠系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）模型現(xiàn)國(guó)內(nèi)常用的自發(fā)性小鼠系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）有NZB/W（雜交1代）小鼠、BXSB小鼠及MRL/lpr小鼠三個(gè)品系。1、NZB/W小鼠是由黑色的NZB小鼠與白色NZW小鼠雜交產(chǎn)生的雜交1代鼠，NZB/W小鼠雌性發(fā)生SLE樣表現(xiàn)較早，半數(shù)病死率月齡為8個(gè)月，雄性發(fā)病晚，為15個(gè)月。2、BXSB小鼠是由米黃色雄性SB/Le小鼠與黑色雌性C57BL/6J小鼠雜交而來，因?yàn)閅染色體上有加重自身免疫的基因位點(diǎn)，故雄鼠發(fā)病早且重，其半數(shù)病死率為5.5個(gè)月，雌鼠發(fā)病晚，半數(shù)病死率為20個(gè)月。3、MRL/lpr小鼠的遺傳背景較復(fù)雜，其基因組成75%來源于LG小鼠，13%來源于AKP小鼠，12%來源于C3H小鼠，0.3%來源于C57BL/6小鼠，lpr為淋巴細(xì)胞增殖（1ymphoidproliferation）基因的縮寫，本品系小鼠無論雌雄，均發(fā)病較早，半數(shù)病死率為4.5個(gè)月。這些自發(fā)性小鼠SLE模型不足之處在于SlE發(fā)病均較晚，周期長(zhǎng)，不容易控制實(shí)驗(yàn)過程第三節(jié)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用誘發(fā)性疾病動(dòng)物模型一、心血管系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型二、消化系統(tǒng)疾動(dòng)物模型性三、呼吸系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型四、泌尿系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型五、內(nèi)分泌疾病動(dòng)物模型六、血液系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型

七、神經(jīng)系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型八、誘發(fā)性腫瘤動(dòng)物模型

一、心血管系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型

1、心肌炎動(dòng)物模型：柯薩奇病毒感染引起的小鼠心肌炎模型2、心肌梗死動(dòng)物模型：結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支所致的急性心肌梗塞模型3、高血壓動(dòng)物模型（1）結(jié)扎腎動(dòng)脈腎血管性高血壓模型（2）應(yīng)激性高血壓模型4、動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型（1）高脂高膽固醇飼料致兔動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型（2）高脂+內(nèi)皮損傷致小型豬頸動(dòng)脈粥樣硬化模型

二、消化系統(tǒng)疾動(dòng)物模型性1、急性胃潰瘍動(dòng)物模型2、脂肪肝動(dòng)物模型（1）高脂飼料誘發(fā)脂肪肝模型（2）乙醇性肝病動(dòng)物模型3、肝纖維化動(dòng)物模型（1）四氯化碳誘發(fā)肝纖維化動(dòng)物模型（2）硫代乙酰胺（TAA）誘發(fā)肝纖維化模型4、肝硬化動(dòng)物模型三、呼吸系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型1、哮喘動(dòng)物模型（1）卵白蛋白激發(fā)豚鼠哮喘動(dòng)物模型（2）卵白蛋白激發(fā)大鼠哮喘動(dòng)物模型2、慢性阻塞性肺病動(dòng)物模型3、肺纖維化動(dòng)物模型

四、泌尿系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型1、腎小球腎炎動(dòng)物模型2、腎代謝紊亂動(dòng)物模型（1）高血肌酐動(dòng)物模型（2）糖尿病腎病動(dòng)物模型3、腎功能衰竭動(dòng)物模型

五、內(nèi)分泌疾病動(dòng)物模型1．誘發(fā)性糖尿病動(dòng)物模型（1）脂肪乳加四氧嘧啶誘發(fā)大鼠糖尿病模型（2）鏈脲佐菌素誘發(fā)大鼠糖尿病模型：1型為主，采用微量加高脂可誘發(fā)2型2．甲狀腺疾病動(dòng)物模型3．銀屑病動(dòng)物模型六、血液系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型1．再生障礙性貧血?jiǎng)游锬Ｐ兔庖呓閷?dǎo)法、射線損傷法等2．急性白血病動(dòng)物模型七、神經(jīng)系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型1．腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ停?）大鼠局灶性腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ停壕€栓法（2）全腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ?．老年癡呆癥動(dòng)物模型：D-半乳糖損害模型3．癲癇動(dòng)物模型4．帕金森病動(dòng)物模型八、誘發(fā)性腫瘤模型

誘發(fā)性腫瘤模型是使用致癌因素(Carcinogens)在實(shí)驗(yàn)條件下誘發(fā)動(dòng)物發(fā)生腫瘤的動(dòng)物模型，原理是利用外源性致癌因素引起細(xì)胞遺傳特性異常而呈現(xiàn)出異常生長(zhǎng)和高增殖活性，形成腫瘤。外源性致痛因素主要有化學(xué)性、物理性及生物性致癌物，其中化學(xué)性致癌物(Chemicalcarcinogens)，最常見化學(xué)性致癌物(Chemicalcarcinogens)苯并芘（benzpyrene）甲基膽蒽（MC）聯(lián)苯胺（benzidine）亞硝胺類（nitrosamine）黃曲霉素類（aflatoxin

物理性方法主要是放射性物質(zhì)致瘤，用放射線照射或局部注射放射性同位素。生物學(xué)方法是用能誘發(fā)動(dòng)物腫瘤的病毒致癌，如：小鼠白血病病毒（Murineleukovirus，MLV），Rous雞肉瘤病毒，SV40病毒。以及用轉(zhuǎn)基因的方法誘發(fā)動(dòng)物產(chǎn)生腫瘤，可根據(jù)啟動(dòng)子類型的不同選擇不同的發(fā)瘤器官，如用乳球蛋白啟動(dòng)子的SV40T抗原的轉(zhuǎn)基因小鼠，可誘發(fā)乳腺癌或胰腺癌。MMTV-Wnt-1轉(zhuǎn)基因小鼠高發(fā)乳腺癌用于誘發(fā)實(shí)驗(yàn)性腫瘤的動(dòng)物種類很多，以嚙齒動(dòng)物的使用最多、應(yīng)用最廣，包括各種大鼠、小鼠、豚鼠等誘發(fā)方法誘發(fā)性動(dòng)物腫瘤的誘發(fā)方式包括原位誘發(fā)和異位誘發(fā)。原位誘發(fā)是指將致癌物直接與動(dòng)物靶組織或靶器官接觸而誘發(fā)該組織或器官發(fā)生腫瘤。異位誘發(fā)是將與致癌物接觸后的動(dòng)物組織或器官埋置于該動(dòng)物或另一正常動(dòng)物皮下而產(chǎn)生的該組織或器官的腫瘤。1.涂抹法（皮膚癌）2.經(jīng)口給藥法（消化道或消化腺)4.氣管灌注法（肺癌）（二）常見的誘發(fā)性腫瘤動(dòng)物模型1．食管癌模型2．肝癌模型3．胃癌模型4．大腸癌模型5．肺癌模型6．鼻咽癌模型7．腦腫癌模型8．胰腺癌模型

9．白血病模型第四節(jié)中醫(yī)證候動(dòng)物模型

1、中醫(yī)證候動(dòng)物模型的研究?jī)?nèi)容2、中醫(yī)證候動(dòng)物模型的分類3、建立中醫(yī)證候動(dòng)物模型的目的和意義4、中醫(yī)證候動(dòng)物模型研制概況5、中醫(yī)證候動(dòng)物模型的研制方法

一、中醫(yī)證候動(dòng)物模型學(xué)的研究?jī)?nèi)容

1.復(fù)制中醫(yī)證候動(dòng)物模型，包括單純中醫(yī)證候的動(dòng)物模型研制（如脾虛證的動(dòng)物模型、腎陽虛證的動(dòng)物模型等）和中醫(yī)病證結(jié)合的動(dòng)物模型研制（如肝郁型胃潰瘍動(dòng)物模型、腎血管性高血壓血瘀證動(dòng)物模型等）。2.從實(shí)驗(yàn)研究角度，探討中醫(yī)臟象本質(zhì)及證候發(fā)生的病理生理機(jī)制。3.以證候動(dòng)物模型為研究對(duì)象，探討中醫(yī)治法方藥的作用機(jī)理及其療效的物質(zhì)基礎(chǔ)。4.研究中醫(yī)證候動(dòng)物模型合理性、可行性的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，目前實(shí)行的主要評(píng)價(jià)指標(biāo)包括：模型制作所采用的病因、病理方法、動(dòng)物模型的癥狀、體征、舌脈象、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)（包括一些特殊檢查）以及藥物反證等。二、中醫(yī)證候動(dòng)物模型的分類

1.單純的中醫(yī)證候動(dòng)物模型如用貓嚇鼠制作的“恐傷腎”腎虛模型就屬于病因模型，以可的松制作的腎虛模型則為病理模型。2.病證結(jié)合的動(dòng)物模型如肝郁型胃潰瘍動(dòng)物模型、腎血管性高血壓血瘀證動(dòng)物模型、潰瘍性結(jié)腸炎脾虛證動(dòng)物模型等等。3.狀態(tài)反應(yīng)性動(dòng)物模型如中醫(yī)“怒傷肝”動(dòng)物模型、“恐傷腎”動(dòng)物模型等等。4.自然病態(tài)性動(dòng)物模型或證候純系動(dòng)物模型如自然衰老腎虛模型等等。三、建立中醫(yī)證候動(dòng)物模型的目的和意義1.驗(yàn)證傳統(tǒng)中醫(yī)基礎(chǔ)理論的實(shí)質(zhì)內(nèi)涵及其科學(xué)性，實(shí)現(xiàn)中醫(yī)宏觀與微觀、結(jié)構(gòu)和功能的有機(jī)結(jié)合，促進(jìn)中醫(yī)理論實(shí)現(xiàn)現(xiàn)代化，如臟象本質(zhì)的研究、證候發(fā)生機(jī)理的研究、中醫(yī)病因致病機(jī)理的研究以及同病異證、異病同證的發(fā)生機(jī)理的研究等等；2.發(fā)現(xiàn)新問題，探求新規(guī)律，從而豐富和創(chuàng)新中醫(yī)基礎(chǔ)理論，如腎陽虛定位研究等；

3.與中醫(yī)臨床研究相互補(bǔ)充，為中醫(yī)治法方藥的療效及其作用機(jī)理提供科學(xué)客觀的依據(jù)。如同病異治、異病同治的機(jī)理、中醫(yī)治則治法及其復(fù)方、中藥單體以及針灸的療效及治療機(jī)理的研究等；4.為中藥新藥的研制開發(fā)以及進(jìn)入國(guó)際市場(chǎng)提供科學(xué)依據(jù)，如中藥復(fù)方的劑型、質(zhì)量控制研究等。四、中醫(yī)證候動(dòng)物模型研制概況5.“八綱”動(dòng)物模型的研制概況此外，對(duì)溫病、傷寒以及舌脈等證候動(dòng)物模型的復(fù)制也取得了一些成果。五、中醫(yī)證候動(dòng)物模型研制的方法3.采用人工方法，改變動(dòng)物的生活環(huán)境造模第五節(jié)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型（15題）一、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的基本原理

二、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的基本方法

三、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用

一、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的基本原理

轉(zhuǎn)基因動(dòng)物：通過基因工程對(duì)DNA進(jìn)行體外操作，添加或刪除一個(gè)特殊的DNA序列，然后導(dǎo)入早期的胚胎細(xì)胞中，產(chǎn)生遺傳結(jié)構(gòu)得以修飾的動(dòng)物，其改變的性狀可以遺傳給后代。（染色體基因組中整合有外源基因并能遺傳給后代的一種動(dòng)物。）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型:利用轉(zhuǎn)基因技術(shù),將人類疾病基因分離出來,再轉(zhuǎn)移到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,獲得相應(yīng)疾病的動(dòng)物模型.轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的基本原理是將改建后的目的基因（或基因組片段）用顯微注射等方法注入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的受精卵（Ferrtillzedeggs）或著床前胚胎細(xì)胞，然后將此受精卵或著床前胚胎細(xì)胞再植入受體動(dòng)物的輸卵管（Oviduct）或子宮中，使其發(fā)育成攜帶有外源基因的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，人們可以通過分析轉(zhuǎn)入基因和動(dòng)物表型的關(guān)系，從而揭示外源基因的功能，也可以通過轉(zhuǎn)入外源基因培育優(yōu)良品種的工程動(dòng)物等二、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的基本方法目前轉(zhuǎn)基因的方法很多1、顯微注射法2、通過動(dòng)物體細(xì)胞克隆生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物3、反轉(zhuǎn)錄病毒載體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移法4、胚胎干細(xì)胞介導(dǎo)法5、精子介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移技術(shù)顯微注射法是建立得最早的轉(zhuǎn)基因方法，也是目前使用最為廣泛、最為有效的方法。其所具有的優(yōu)點(diǎn)是:基因的轉(zhuǎn)移率高，整合效率可達(dá)30%:可直接用不含有原核載體DNA片段的外源基因進(jìn)行轉(zhuǎn)移;外源基因的長(zhǎng)度不受限制，可達(dá)幾百kb;常常能得到純系動(dòng)物;實(shí)驗(yàn)周期相對(duì)比較短。三、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用1、改良動(dòng)物品種和生產(chǎn)性能，生產(chǎn)人藥用蛋白和營(yíng)養(yǎng)保健蛋白2、生產(chǎn)人用器官移植的異種供體3、建立疾病和藥物篩選模型4、生產(chǎn)新型生物材料5、建立診斷、治療人類疾病及新藥篩選的動(dòng)物模型超數(shù)排卵(1)常用激素PMSGHCGFSHLH(2)超排方法第一天腹腔注射PMSG第三或第四天腹腔注射HCG(3)劑量:小鼠5~20IU兔30~60IU(4)影響因素:動(dòng)物,激素生物活性,發(fā)情期,氣候季節(jié)使用動(dòng)物模型應(yīng)注意（一）注意環(huán)境因素對(duì)模型動(dòng)物的影響

復(fù)制模型的成敗往往與環(huán)境的改變有密切關(guān)系。擁擠、飲食改變、過度光照、噪音、屏障系統(tǒng)的破壞等，任何一項(xiàng)被忽視都可能給模型動(dòng)物帶來嚴(yán)重影響。除此以外，復(fù)制過程中固定、出血、麻醉、手術(shù)、藥物和并發(fā)癥等處理不當(dāng)，同樣會(huì)產(chǎn)生難以估量的惡果。因此，要求盡可能使模型動(dòng)物處于最小的變動(dòng)和最少的干擾之中。（二）不能盲目使用近交系動(dòng)物，不然會(huì)導(dǎo)致不能控制因素進(jìn)入實(shí)驗(yàn)

例如自發(fā)性糖尿病大鼠(BB、Wistar)除具有糖尿病臨床特征外，還發(fā)現(xiàn)多種病理變化（外周神經(jīng)系統(tǒng)嚴(yán)重病變、睪丸萎縮、甲狀腺炎、胃潰瘍、惡性淋巴瘤等）。因此要有目的地選擇。半個(gè)世紀(jì)以來，近交系的開發(fā)不斷提供著新的動(dòng)物模型材料，大、小鼠疾病作為模型在醫(yī)學(xué)使用量已高達(dá)70～90%。（三）動(dòng)物進(jìn)化的高級(jí)程度并不意味著所有器官和功能接近于人的程度

復(fù)制動(dòng)物模型時(shí)，在條件允許的情況下，應(yīng)盡量考慮選用與人相似、進(jìn)化程度高的動(dòng)物作模型。但不能因此就認(rèn)為進(jìn)化程度越高等的動(dòng)物其所有器官和功能越接近于人。例如，非人靈長(zhǎng)類誘發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化時(shí)，病變部位經(jīng)常在小動(dòng)脈、即使出現(xiàn)在大動(dòng)脈也與人類分布不同。據(jù)報(bào)導(dǎo)用鴿（WhiteGameauPigeon）作這類模型時(shí)，胸主動(dòng)脈出現(xiàn)的黃斑面積可達(dá)10%，鏡下變化與人也比較相似，因此也廣泛被研究者使用。（四）正確地評(píng)估動(dòng)物疾病模型

應(yīng)該懂得沒有一種動(dòng)物模型能完全復(fù)制人類疾病真實(shí)情況，動(dòng)物畢竟不是人體的縮影。模型實(shí)驗(yàn)只是一種間接性研究，只可能在一個(gè)局部或幾個(gè)方面與人類疾病相似。因此，模型實(shí)驗(yàn)結(jié)論的正確性只是相對(duì)的，最終必須在人體身上得到驗(yàn)證。復(fù)制過程中一旦出現(xiàn)與人類疾病不同的情況，必須分析其分岐范圍和程度，找到相平行的共同點(diǎn)，正確評(píng)估哪些是有價(jià)值的。(五)動(dòng)物模型的制作方法1、查找文獻(xiàn)并咨詢動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所需動(dòng)物和條件是否可行，了解前人所積累的經(jīng)驗(yàn)，避免低水平的重復(fù)或缺乏科學(xué)依據(jù)的盲動(dòng)所造成人力物力的浪費(fèi)；2、從動(dòng)物品種品系年齡性別體重生物學(xué)特點(diǎn)動(dòng)物微生物污染級(jí)別等方面選取最可比擬的動(dòng)物，不可認(rèn)為選越高級(jí)動(dòng)物可比性越高。

第六章

醫(yī)學(xué)課題動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)及影響其效果的因素[培訓(xùn)內(nèi)容]

1．醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)課題的設(shè)計(jì)原則和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的基本要求

2．影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響因素[培訓(xùn)目標(biāo)]

1．掌握醫(yī)學(xué)科學(xué)研究設(shè)計(jì)的基本原則和基本程序；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的要素、原則

2．熟悉動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的方法和步驟；干擾動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響因素

3．了解動(dòng)物實(shí)驗(yàn)記錄的規(guī)范要求；論文寫作中常出現(xiàn)的有關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)問題；實(shí)驗(yàn)結(jié)果的描述和解釋動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果動(dòng)物的反應(yīng)：R＝(A+B+C)×D±E式中：R——實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的總反應(yīng)A——實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種的共同反應(yīng)B——?jiǎng)游锲贩N及品系特有的反應(yīng)C——?jiǎng)游飩€(gè)體反應(yīng)（個(gè)體差異）D——環(huán)境的影響（包括實(shí)驗(yàn)處理）E——實(shí)驗(yàn)誤差動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響因素*動(dòng)物因素環(huán)境因素飼料營(yíng)養(yǎng)因素技術(shù)因素?fù)頂D、飲食改變、過度光照、噪音、屏障系統(tǒng)的破壞等，任何一項(xiàng)被忽視都可能給模型動(dòng)物帶來嚴(yán)重影響。二、中醫(yī)證候動(dòng)物模型的分類經(jīng)產(chǎn)PRA小鼠發(fā)生率也很高（77％）。三、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用可研究平時(shí)不易見到的疾病.兔出生2周后，肝臟開始有解毒活性，3周后活性更高，4周后已與成年兔接近。3、MRL/lpr小鼠的遺傳背景較復(fù)雜，其基因組成75%來源于LG小鼠，13%來源于AKP小鼠，12%來源于C3H小鼠，0.大鼠在長(zhǎng)期糖尿病后會(huì)出現(xiàn)各種并發(fā)癥，如腎病和神經(jīng)系統(tǒng)疾病研究中醫(yī)證候動(dòng)物模型合理性、可行性的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，目前實(shí)行的主要評(píng)價(jià)指標(biāo)包括：模型制作所采用的病因、病理方法、動(dòng)物模型的癥狀、體征、舌脈象、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)（包括一些特殊檢查）以及藥物反證等。2．甲狀腺疾病動(dòng)物模型與其它特性大鼠雜交:獨(dú)特的認(rèn)識(shí)特色：審證求因。B淋巴細(xì)胞缺陷,xid基因位于X性染色體上(2)各系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型半個(gè)世紀(jì)以來，近交系的開發(fā)不斷提供著新的動(dòng)物模型材料，大、小鼠疾病作為模型在醫(yī)學(xué)使用量已高達(dá)70～90%。動(dòng)物因素種屬（品種）、品系結(jié)構(gòu)、機(jī)能、代謝、發(fā)病機(jī)理與人類相似性解剖、生理特點(diǎn)和特殊生理反應(yīng)年齡與體重性別生理狀態(tài)健康狀況潛在感染實(shí)驗(yàn)動(dòng)的物標(biāo)準(zhǔn)化程度種屬的影響激素反應(yīng)水平的不同：雌激素能終止大鼠和小鼠的早期妊娠，但不能終止人的妊娠，因此，在大鼠和小鼠篩選帶有雌激素活性的藥物時(shí)，常常會(huì)發(fā)現(xiàn)這些藥物能終止妊娠，似乎可能是有效的避孕藥，但一旦用于人則并不成功，所以，如果知道一個(gè)化合物具有雌激素活性，用這