2025年大學(xué)生物技術(shù)（基因克?。┰囶}及答案

（考試時間：90分鐘滿分100分）班級______姓名______第I卷（選擇題，共40分）答題要求：每題只有一個正確答案，請將正確答案的序號填在括號內(nèi)。(總共20題，每題2分)1.基因克隆的核心技術(shù)是（）A.DNA提取B.載體構(gòu)建C.目的基因的獲取與重組D.轉(zhuǎn)化2.以下哪種方法常用于從基因組文庫中篩選目的基因（）A.核酸分子雜交B.蛋白質(zhì)免疫印跡C.酶活性測定D.細胞功能檢測3.用于構(gòu)建基因表達載體的工具酶是（）A.限制性核酸內(nèi)切酶B.DNA連接酶C.逆轉(zhuǎn)錄酶D.Taq酶4.基因克隆中常用的載體不包括（）A.質(zhì)粒B.噬菌體C.人工染色體D.核糖體5.以下關(guān)于限制性核酸內(nèi)切酶的說法錯誤的是（）A.能識別特定的核苷酸序列B.切割DNA分子產(chǎn)生粘性末端或平末端C.只能從原核生物中獲取D.是基因克隆的重要工具6.從cDNA文庫中獲取目的基因的方法屬于（）A.化學(xué)合成法B.基因組文庫篩選法C.逆轉(zhuǎn)錄法D.PCR擴增法7.基因克隆過程中，轉(zhuǎn)化的受體細胞通常不包括（）A.大腸桿菌B.酵母細胞C.植物細胞D.紅細胞8.以下哪種技術(shù)可用于檢測基因克隆產(chǎn)物的正確性（）A.凝膠電泳B.質(zhì)譜分析C.測序D.以上都是9.構(gòu)建基因表達載體時，啟動子的作用是（）A.編碼蛋白質(zhì)B.提供轉(zhuǎn)錄起始信號C.終止轉(zhuǎn)錄D.調(diào)控基因表達水平10.基因克隆中，常用于篩選陽性克隆的方法是（）A.藍白斑篩選B.抗生素抗性篩選C.熒光篩選D.以上都是11.以下關(guān)于PCR技術(shù)的說法正確的是（）A.不需要引物B.只能擴增已知序列的基因C.可用于目的基因的大量擴增D.反應(yīng)體系中不需要DNA模板12.基因克隆過程中，載體與目的基因連接的方式主要是（）A.氫鍵連接B.共價連接C.粘性末端互補連接和平末端連接D.離子鍵連接13.從基因組DNA中直接擴增目的基因的方法是（）A.RT-PCRB.PCRC.原位PCRD.巢式PCR14.以下哪種載體常用于植物基因克?。ǎ〢.Ti質(zhì)粒B.噬菌體載體C.酵母人工染色體D.細菌質(zhì)粒15.基因克隆中，感受態(tài)細胞的制備是為了（）A.提高細胞的代謝活性B.增加細胞對DNA的攝取能力C.促進細胞生長D.便于細胞計數(shù)16.用于檢測基因表達水平的技術(shù)不包括（）A.NorthernblotB.WesternblotC.RT-PCRD.基因測序17.基因克隆過程中，目的基因與載體連接后，導(dǎo)入受體細胞的過程稱為（）A.轉(zhuǎn)化B.轉(zhuǎn)導(dǎo)C.感染D.接合18.以下關(guān)于基因文庫的說法正確的是（）A.基因組文庫包含了生物體的全部基因B.cDNA文庫只包含編碼蛋白質(zhì)的基因C.構(gòu)建基因文庫是基因克隆的重要步驟D.以上都是19.基因克隆中，常用的DNA聚合酶是（）A.Taq酶B.DNA連接酶C.逆轉(zhuǎn)錄酶D.限制性核酸內(nèi)切酶20.從動物組織中提取DNA時，常用的方法是（）A.酚氯仿抽提法B.乙醇沉淀法C.離子交換法D.親和層析法第II卷（非選擇題，共60分）（一）填空題（每題2分，共10分）1.基因克隆的基本步驟包括目的基因的獲取、______、______和目的基因的表達與鑒定四個主要環(huán)節(jié)。2.限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的末端類型有______和______。3.基因表達載體通常包含______、______、______和______等元件。4.從細胞中提取RNA時，常用的方法有______和______。5.用于檢測蛋白質(zhì)表達水平的常用技術(shù)是______。（二）簡答題（每題10分，共30分）1.簡述基因克隆的基本原理。2.比較基因組文庫和cDNA文庫的異同點。3.簡述PCR技術(shù)的基本原理和反應(yīng)體系的組成。（三）實驗設(shè)計題（20分）請設(shè)計一個從植物組織中克隆某一目的基因的實驗方案，包括實驗材料、主要實驗步驟和預(yù)期結(jié)果。（四）材料分析題（10分）材料：在基因克隆實驗中，某同學(xué)通過PCR擴增目的基因后，進行凝膠電泳檢測，發(fā)現(xiàn)擴增條帶與預(yù)期大小不符。問題：請分析可能導(dǎo)致這種結(jié)果的原因，并提出相應(yīng)的解決措施。（五）論述題（10分）論述基因克隆技術(shù)在生物技術(shù)領(lǐng)域的應(yīng)用及前景。答案：1.C2.A3.B4.D更多答案見底部：5.C6.C7.D8.D9.B10.D11.C12.C13.B14.A15.B16.D17.A18.D19.A20.A填空題答案：1.載體構(gòu)建、導(dǎo)入受體細胞2.粘性末端、平末端3.啟動子、終止子、多克隆位點、標記基因4.異硫氰酸胍法、TRIzol法5.Westernblot簡答題答案：1.基因克隆基本原理是通過體外重組技術(shù)將目的基因與載體連接，導(dǎo)入受體細胞，使其在受體細胞中復(fù)制和表達。首先獲取目的基因，然后與載體連接構(gòu)建重組載體，導(dǎo)入受體細胞，篩選陽性克隆并進行鑒定和表達分析。2.相同點：都是基因文庫，用于保存和篩選基因。不同點：基因組文庫包含生物體全部基因，cDNA文庫只含編碼蛋白質(zhì)的基因；基因組文庫從基因組DNA構(gòu)建，cDNA文庫從mRNA逆轉(zhuǎn)錄構(gòu)建。3.PCR技術(shù)基本原理是在體外通過引物介導(dǎo)的DNA聚合酶反應(yīng)擴增特定DNA片段。反應(yīng)體系組成包括模板DNA、引物、DNA聚合酶、dNTP、緩沖液等。實驗設(shè)計題答案：實驗材料：植物組織、相關(guān)試劑和儀器。步驟：提取植物基因組DNA，設(shè)計引物PCR擴增目的基因，將擴增產(chǎn)物與載體連接，導(dǎo)入大腸桿菌感受態(tài)細胞，藍白斑篩選陽性克隆，提取質(zhì)粒測序鑒定。預(yù)期結(jié)果：獲得含目的基因的陽性克隆，測序結(jié)果與預(yù)期相符。材料分析題答案：原因可能有引物設(shè)計錯誤、模