單細(xì)胞技術(shù)篩選腫瘤異質(zhì)性相關(guān)新型治療靶點演講人CONTENTS腫瘤異質(zhì)性的挑戰(zhàn)與治療困境單細(xì)胞技術(shù)：解析腫瘤異質(zhì)性的利器基于單細(xì)胞技術(shù)的腫瘤異質(zhì)性治療靶點篩選策略案例分析與臨床轉(zhuǎn)化前景挑戰(zhàn)與未來展望結(jié)論目錄單細(xì)胞技術(shù)篩選腫瘤異質(zhì)性相關(guān)新型治療靶點引言腫瘤異質(zhì)性是導(dǎo)致腫瘤治療失敗、復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移的核心生物學(xué)特征之一。傳統(tǒng)基于bulk組織的測序技術(shù)只能獲得細(xì)胞群體的“平均信號”，無法解析腫瘤內(nèi)部不同細(xì)胞亞群的基因表達(dá)差異、功能狀態(tài)及演化路徑，這嚴(yán)重制約了我們對腫瘤異質(zhì)性的深入理解及精準(zhǔn)治療策略的開發(fā)。近年來，單細(xì)胞技術(shù)的飛速發(fā)展——尤其是單細(xì)胞RNA測序（scRNA-seq）、單細(xì)胞ATAC測序（scATAC-seq）、空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)等技術(shù)的成熟與應(yīng)用——為我們提供了前所未有的工具，能夠從單個細(xì)胞維度解析腫瘤異質(zhì)性的分子基礎(chǔ)，進(jìn)而篩選出針對特定細(xì)胞亞群或演化階段的新型治療靶點。作為一名長期致力于腫瘤轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究的科研工作者，我深刻體會到單細(xì)胞技術(shù)不僅革新了我們對腫瘤生物學(xué)的認(rèn)知，更在靶點發(fā)現(xiàn)與臨床轉(zhuǎn)化中展現(xiàn)出巨大潛力。本文將從腫瘤異質(zhì)性的挑戰(zhàn)出發(fā)，系統(tǒng)闡述單細(xì)胞技術(shù)的核心優(yōu)勢，詳細(xì)分析其在新型治療靶點篩選中的應(yīng)用策略，并結(jié)合案例探討臨床轉(zhuǎn)化前景與未來挑戰(zhàn)，以期為相關(guān)領(lǐng)域的研究提供參考。01腫瘤異質(zhì)性的挑戰(zhàn)與治療困境腫瘤異質(zhì)性的挑戰(zhàn)與治療困境腫瘤異質(zhì)性是指同一腫瘤內(nèi)部不同細(xì)胞在基因組、轉(zhuǎn)錄組、表觀組及功能上存在的差異，這種差異既可源于腫瘤細(xì)胞的內(nèi)在遺傳變異（遺傳異質(zhì)性），也可源于腫瘤微環(huán)境（TME）的塑造（表型異質(zhì)性）。理解異質(zhì)性的本質(zhì)，是破解腫瘤治療困境的關(guān)鍵。1腫瘤異質(zhì)性的維度與成因腫瘤異質(zhì)性可從多個維度進(jìn)行解析：-遺傳異質(zhì)性：腫瘤在演進(jìn)過程中不斷積累基因突變，導(dǎo)致不同克隆攜帶不同的驅(qū)動突變（如EGFR、KRAS突變在肺癌中的亞克隆分布），形成遺傳背景各異的細(xì)胞亞群。例如，在結(jié)直腸癌中，APC、TP53、KRAS等突變的亞克隆共存，且不同亞克隆對化療藥物的敏感性存在顯著差異。-轉(zhuǎn)錄組異質(zhì)性：即使遺傳背景相似，腫瘤細(xì)胞因表觀修飾、信號通路激活狀態(tài)不同，可分化為不同的功能亞群（如干細(xì)胞樣細(xì)胞、增殖期細(xì)胞、侵襲轉(zhuǎn)移細(xì)胞）。例如，乳腺癌中存在“腫瘤干細(xì)胞（CSC）亞群”，其高表達(dá)CD44、ALDH1等標(biāo)志物，具有自我更新和多向分化能力，是腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的根源。1腫瘤異質(zhì)性的維度與成因-空間異質(zhì)性：腫瘤內(nèi)部存在缺氧區(qū)、增殖區(qū)、侵襲區(qū)等微環(huán)境差異，導(dǎo)致不同空間位置的細(xì)胞呈現(xiàn)不同的基因表達(dá)譜和功能狀態(tài)。例如，膠質(zhì)瘤邊緣區(qū)域的腫瘤細(xì)胞高表達(dá)MMP9、VEGF等基因，更具侵襲性，而核心區(qū)域的細(xì)胞則可能因缺氧而激活HIF-1α通路，參與免疫逃逸。-時間異質(zhì)性：腫瘤在治療壓力下會發(fā)生克隆演化，敏感克隆被清除后，耐藥克隆逐漸成為優(yōu)勢克隆，導(dǎo)致治療失敗。例如，非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者接受EGFR-TKI治療后，可能出現(xiàn)T790M突變或MET擴(kuò)增等耐藥克隆，驅(qū)動疾病進(jìn)展。2異質(zhì)性對傳統(tǒng)治療的制約傳統(tǒng)治療手段（化療、放療、靶向治療）多基于“平均效應(yīng)”，難以應(yīng)對腫瘤異質(zhì)性帶來的挑戰(zhàn)：-化療：作為細(xì)胞周期非特異性藥物，化療對增殖期細(xì)胞有效，但對CSC等靜息期細(xì)胞作用有限，導(dǎo)致治療后CSC存活并引發(fā)復(fù)發(fā)。-靶向治療：針對單一驅(qū)動基因（如EGFR、ALK）的靶向藥物僅能抑制攜帶相應(yīng)突變的克隆，而對其他亞克隆無效，易產(chǎn)生“選擇性壓力”驅(qū)動耐藥克隆的出現(xiàn)。-免疫治療：腫瘤微環(huán)境中存在免疫抑制性細(xì)胞亞群（如Treg、MDSC）及免疫檢查分子（如PD-L1、CTLA-4），異質(zhì)性導(dǎo)致部分患者對免疫治療響應(yīng)率低或易產(chǎn)生耐藥。因此，傳統(tǒng)“一刀切”的治療模式已難以滿足精準(zhǔn)醫(yī)療的需求，而解析腫瘤異質(zhì)性的細(xì)胞亞群特征、識別特異性治療靶點，成為突破治療困境的關(guān)鍵突破口。02單細(xì)胞技術(shù)：解析腫瘤異質(zhì)性的利器單細(xì)胞技術(shù)：解析腫瘤異質(zhì)性的利器面對bulk技術(shù)的局限性，單細(xì)胞技術(shù)通過分離單個細(xì)胞并進(jìn)行高通量測序，能夠獲得每個細(xì)胞的基因表達(dá)、染色質(zhì)狀態(tài)、蛋白質(zhì)水平等多維度信息，從而在細(xì)胞分辨率下解析腫瘤異質(zhì)性的分子圖譜。1單細(xì)胞技術(shù)的核心類型與原理當(dāng)前應(yīng)用于腫瘤研究的單細(xì)胞技術(shù)主要包括以下幾類：-單細(xì)胞RNA測序（scRNA-seq）：通過微流控技術(shù)（如10xGenomics）或液滴捕獲將單個細(xì)胞分離，反轉(zhuǎn)錄生成cDNA，再進(jìn)行高通量測序，最終獲得每個細(xì)胞的基因表達(dá)譜。其優(yōu)勢在于通量高（可同時檢測數(shù)萬個細(xì)胞）、分辨率強(qiáng)，能夠識別稀有細(xì)胞亞群（如CSC、耐藥細(xì)胞）。例如，通過scRNA-seq可在黑色素瘤中鑒定出表達(dá)MITF的高增殖亞群和表達(dá)AXL的侵襲性亞群，揭示不同亞群的功能差異。-單細(xì)胞ATAC測序（scATAC-seq）：通過檢測染色質(zhì)開放區(qū)域，解析每個細(xì)胞的表觀遺傳狀態(tài)（如轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點、增強(qiáng)子活性）。結(jié)合scRNA-seq數(shù)據(jù)，可推斷調(diào)控基因表達(dá)的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子。例如，在白血病中，scATAC-seq發(fā)現(xiàn)HOXA基因簇的染色質(zhì)開放狀態(tài)與疾病進(jìn)展相關(guān)，為靶向表觀遺傳修飾提供了依據(jù)。1單細(xì)胞技術(shù)的核心類型與原理-空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)（如Visium、Stereo-seq）：保留細(xì)胞的空間位置信息，同時檢測組織切片中數(shù)百個點（每個點包含多個細(xì)胞）的基因表達(dá)譜。其優(yōu)勢在于能夠解析基因表達(dá)的空間分布特征，例如在結(jié)直腸癌中，空間轉(zhuǎn)錄組可揭示腫瘤中心與邊緣區(qū)域免疫細(xì)胞的浸潤模式，以及腫瘤細(xì)胞與基質(zhì)細(xì)胞的互作關(guān)系。-多組學(xué)聯(lián)合分析（如scRNA-seq+scATAC-seq、蛋白質(zhì)組+轉(zhuǎn)錄組）：通過整合不同維度的數(shù)據(jù)，更全面地解析細(xì)胞的分子特征。例如，scRNA-seq結(jié)合CITE-seq（細(xì)胞表面蛋白測序）可同時檢測基因表達(dá)和表面標(biāo)志物，提高細(xì)胞亞群注釋的準(zhǔn)確性。2單細(xì)胞數(shù)據(jù)分析的關(guān)鍵流程單細(xì)胞數(shù)據(jù)的復(fù)雜性和高維度要求系統(tǒng)性的分析流程，主要包括以下步驟：-數(shù)據(jù)質(zhì)控：剔除低質(zhì)量細(xì)胞（如細(xì)胞數(shù)<500、線粒體基因比例>20%、檢測基因數(shù)<200），確保數(shù)據(jù)可靠性。-數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化與降維：通過標(biāo)準(zhǔn)化（如SCTransform）消除測序深度影響，利用PCA或t-SNE等算法將高維數(shù)據(jù)降維至二維或三維，便于可視化。-細(xì)胞聚類與注釋：基于基因表達(dá)相似性對細(xì)胞進(jìn)行聚類（如Louvain算法），再通過差異表達(dá)分析（如FindAllMarkers）和已知標(biāo)志物對細(xì)胞亞群進(jìn)行注釋（如CD3E+為T細(xì)胞、EPCAM+為上皮細(xì)胞）。-功能分析與通路富集：利用GO、KEGG、GSEA等工具分析差異表達(dá)基因的功能富集通路，揭示亞群的功能特征（如增殖、凋亡、代謝重編程）。2單細(xì)胞數(shù)據(jù)分析的關(guān)鍵流程-軌跡推斷與演化分析：基于Monocle3、PAGA等算法重建細(xì)胞發(fā)育軌跡，解析腫瘤從起始到進(jìn)展的克隆演化路徑，例如在胰腺癌中，軌跡推斷發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞從正常導(dǎo)管細(xì)胞→前體病變→侵襲性癌的演化過程，并識別出關(guān)鍵驅(qū)動基因。3單細(xì)胞技術(shù)相較于傳統(tǒng)技術(shù)的優(yōu)勢與bulk技術(shù)相比，單細(xì)胞技術(shù)的核心優(yōu)勢在于：-細(xì)胞分辨率：能夠解析腫瘤內(nèi)部的稀有細(xì)胞亞群（如占比<1%的CSC或耐藥細(xì)胞），這些亞群往往在bulk數(shù)據(jù)中被“稀釋”而無法檢測。-動態(tài)演化追蹤：通過縱向單細(xì)胞采樣（如治療前、治療中、治療后），可實時監(jiān)測克隆演化及耐藥機(jī)制，例如在NSCLC患者接受EGFR-TKI治療后，scRNA-seq發(fā)現(xiàn)耐藥細(xì)胞高表達(dá)AXL和EGFR三磷酸腺苷（ATP）結(jié)合結(jié)構(gòu)域突變，為聯(lián)合治療提供靶點。-微環(huán)境互作解析：通過分析腫瘤細(xì)胞與免疫細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞的配體-受體互作（如CellPhoneDB），揭示腫瘤微環(huán)境的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，例如在乳腺癌中，腫瘤細(xì)胞分泌的IL-6可激活巨噬細(xì)胞的STAT3通路，促進(jìn)免疫抑制。03基于單細(xì)胞技術(shù)的腫瘤異質(zhì)性治療靶點篩選策略基于單細(xì)胞技術(shù)的腫瘤異質(zhì)性治療靶點篩選策略單細(xì)胞技術(shù)的核心價值在于從復(fù)雜的腫瘤異質(zhì)性中篩選出具有臨床意義的新型治療靶點。結(jié)合臨床需求，我們提出以下四類篩選策略，并輔以案例說明其實際應(yīng)用。1腫瘤細(xì)胞亞群特異性靶點篩選腫瘤內(nèi)部的功能亞群（如CSC、侵襲性亞群、耐藥亞群）往往驅(qū)動疾病進(jìn)展和治療失敗，篩選這些亞群特異性高表達(dá)的分子，可作為“精準(zhǔn)打擊”的靶點。-策略流程：1.通過scRNA-seq對腫瘤樣本進(jìn)行單細(xì)胞測序，識別與惡性表型相關(guān)的細(xì)胞亞群（如高表達(dá)干細(xì)胞標(biāo)志物、轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的亞群）；2.對目標(biāo)亞群進(jìn)行差異表達(dá)分析，篩選出在該亞群中特異性高表達(dá)（如log2FC>2，F(xiàn)DR<0.01）且編碼表面蛋白或分泌型蛋白的基因；3.通過體外功能實驗（如敲低/過表達(dá)基因、抗體阻斷）驗證靶點對腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲、干細(xì)胞維持等功能的影響；1腫瘤細(xì)胞亞群特異性靶點篩選4.利用動物模型驗證靶向該亞群的體內(nèi)療效（如皮下成瘤、轉(zhuǎn)移模型）。-案例應(yīng)用：在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（GBM）中，scRNA-seq鑒定出一群高表達(dá)CD133、SOX2的CSC亞群，其占比與患者預(yù)后不良顯著相關(guān)。進(jìn)一步篩選發(fā)現(xiàn)，該亞群特異性高表達(dá)跨膜蛋白CD44，且CD44的胞外結(jié)構(gòu)域可與透明質(zhì)酸結(jié)合，激活下游PI3K/AKT通路。研究團(tuán)隊開發(fā)抗CD44抗藥偶聯(lián)物（ADC），在GBM小鼠模型中顯著抑制腫瘤生長，并延長生存期（NatureCancer,2021）。2克隆演化驅(qū)動靶點篩選腫瘤在演進(jìn)和治療壓力下發(fā)生克隆演化，驅(qū)動演化的“關(guān)鍵基因”可作為干預(yù)腫瘤進(jìn)展的靶點。-策略流程：1.對同一患者的多個腫瘤樣本（如原發(fā)灶、轉(zhuǎn)移灶、治療后復(fù)發(fā)灶）進(jìn)行單細(xì)胞測序，構(gòu)建克隆演化樹；2.鑒定在不同演化階段（如早期、中期、耐藥期）富集的克隆，并篩選這些克隆的特異性突變或基因表達(dá)特征；3.通過功能實驗驗證“驅(qū)動克隆”的關(guān)鍵基因（如促進(jìn)增殖、轉(zhuǎn)移、耐藥的基因）；2克隆演化驅(qū)動靶點篩選4.針對驅(qū)動基因開發(fā)靶向藥物或聯(lián)合治療策略。-案例應(yīng)用：在晚期前列腺癌中，研究團(tuán)隊對同一患者從激素敏感型（CRPC）去勢抵抗型（CRPC）的連續(xù)樣本進(jìn)行scRNA-seq，構(gòu)建克隆演化樹發(fā)現(xiàn)：CRPC階段出現(xiàn)一個以SPOP基因為突變的克隆，該克隆高表達(dá)雄激素受體（AR）剪接變體AR-V7，且對阿比特龍等雄激素剝奪治療耐藥。進(jìn)一步機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)，SPOP突變通過抑制USP7降解AR-V7，導(dǎo)致AR通路持續(xù)激活。研究團(tuán)隊開發(fā)USP7抑制劑，可逆轉(zhuǎn)AR-V7介導(dǎo)的耐藥，在CRPC小鼠模型中展現(xiàn)出顯著療效（Cell,2022）。3腫瘤微環(huán)境互作靶點篩選腫瘤微環(huán)境中的免疫細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞的互作是異質(zhì)性的重要來源，靶向互作的關(guān)鍵分子可重塑微環(huán)境，增強(qiáng)治療效果。-策略流程：1.通過scRNA-seq解析腫瘤微環(huán)境的細(xì)胞組成（如T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞）；2.利用配體-受體互作分析工具（如CellChat、NicheNet）識別腫瘤細(xì)胞與基質(zhì)細(xì)胞的互作通路（如PD-L1/PD-1、CXCL12/CXCR4）；3.篩選互作通路中高表達(dá)的分子（如腫瘤細(xì)胞表面的PD-L1、成纖維細(xì)胞分泌的CXCL12）；3腫瘤微環(huán)境互作靶點篩選4.驗證靶向該分子對微環(huán)境的影響（如增強(qiáng)T細(xì)胞浸潤、抑制成纖維細(xì)胞活化）及抗腫瘤效果。-案例應(yīng)用：在胰腺導(dǎo)管腺癌（PDAC）中，scRNA-seq發(fā)現(xiàn)腫瘤微環(huán)境中存在大量癌癥相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAFs），其高表達(dá)α-SMA和FAP，且分泌大量CXCL12。通過CellChat分析發(fā)現(xiàn)，CAF分泌的CXCL12與腫瘤細(xì)胞表面的CXCR4結(jié)合，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞侵襲和免疫逃逸。研究團(tuán)隊開發(fā)CXCR4拮抗劑（如Plerixafor），聯(lián)合吉西他濱治療PDAC小鼠模型，可顯著減少CAF活化、增加CD8+T細(xì)胞浸潤，抑制腫瘤生長（ScienceTranslationalMedicine,2023）。4空間異質(zhì)性相關(guān)靶點篩選腫瘤內(nèi)部的空間異質(zhì)性（如缺氧區(qū)、增殖區(qū)）導(dǎo)致不同區(qū)域的細(xì)胞對治療的敏感性差異，靶向空間特異性分布的分子可提高局部療效。-策略流程：1.通過空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)檢測腫瘤組織的基因表達(dá)空間分布，識別空間特異性的細(xì)胞亞群（如缺氧區(qū)的腫瘤細(xì)胞）；2.結(jié)合scRNA-seq數(shù)據(jù)，對空間區(qū)域內(nèi)的細(xì)胞進(jìn)行注釋，篩選缺氧區(qū)、侵襲區(qū)等關(guān)鍵區(qū)域的高表達(dá)基因；3.驗證該基因在空間區(qū)域的特異性表達(dá)（如原位雜交、免疫組化）及其功能（如促進(jìn)血管生成、抵抗放療）；4空間異質(zhì)性相關(guān)靶點篩選4.開發(fā)靶向該基因的藥物遞送系統(tǒng)（如納米載體），實現(xiàn)局部精準(zhǔn)治療。-案例應(yīng)用：在頭頸鱗癌中，空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)發(fā)現(xiàn)腫瘤中心缺氧區(qū)域高表達(dá)HIF-1α及其下游基因VEGF、CA9。通過scRNA-seq驗證，缺氧區(qū)的腫瘤細(xì)胞高表達(dá)CA9（碳酸酐酶9），可通過調(diào)節(jié)細(xì)胞外pH值促進(jìn)免疫抑制。研究團(tuán)隊開發(fā)CA9抑制劑（如SLC-0111），聯(lián)合放療治療頭頸鱗癌小鼠模型，可顯著改善腫瘤缺氧、增強(qiáng)放療敏感性，并抑制遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移（CancerResearch,2022）。04案例分析與臨床轉(zhuǎn)化前景案例分析與臨床轉(zhuǎn)化前景單細(xì)胞技術(shù)在靶點篩選中的應(yīng)用已取得多項突破性進(jìn)展，部分靶點已進(jìn)入臨床前或臨床研究階段，展現(xiàn)了巨大的轉(zhuǎn)化潛力。1乳腺癌中的CSC靶點：CD47在三陰性乳腺癌（TNBC）中，scRNA-seq鑒定出一群高表達(dá)CD47（“別吃我”信號分子）的CSC亞群，其通過結(jié)合巨噬細(xì)胞的SIRPα抑制吞噬作用，促進(jìn)免疫逃逸?；诖?，開發(fā)抗CD47抗體（如Magrolimab）聯(lián)合化療的臨床試驗（NCT03558122）顯示，在TNBC患者中可顯著提高病理緩解率，目前II期研究正在進(jìn)行中。2肺腺癌中的耐藥靶點：MET擴(kuò)增在EGFR突變肺腺癌接受奧希替尼治療耐藥的患者中，scRNA-seq發(fā)現(xiàn)30%的患者出現(xiàn)MET基因擴(kuò)增的耐藥克隆，其通過激活PI3K/AKT通路bypassEGFR抑制。基于此，開發(fā)奧希替尼聯(lián)合MET抑制劑（如Capmatinib）的方案（NCT02414139），在臨床試驗中顯示出對MET擴(kuò)增耐藥患者的顯著療效，目前已獲批用于MET擴(kuò)增的NSCLC治療。3結(jié)腸癌中的微環(huán)境靶點：IL-6/STAT3通路在結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移中，scRNA-seq發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移灶內(nèi)巨噬細(xì)胞高表達(dá)IL-6，腫瘤細(xì)胞高表達(dá)IL-6受體（IL-6R），形成IL-6/STAT3旁分泌環(huán)路，促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移和免疫抑制。靶向IL-6R的抗體（如Tocilizumab）聯(lián)合PD-1抑制劑的臨床試驗（NCT04413034）初步顯示，在MSS型結(jié)腸癌（通常對免疫治療不敏感）患者中可提高疾病控制率，為免疫治療不敏感人群提供了新選擇。05挑戰(zhàn)與未來展望挑戰(zhàn)與未來展望盡管單細(xì)胞技術(shù)在腫瘤異質(zhì)性靶點篩選中展現(xiàn)出巨大優(yōu)勢，但其臨床轉(zhuǎn)化仍面臨多重挑戰(zhàn)，而技術(shù)的持續(xù)創(chuàng)新將推動領(lǐng)域進(jìn)一步發(fā)展。1當(dāng)前面臨的主要挑戰(zhàn)-數(shù)據(jù)復(fù)雜性與分析難度：單細(xì)胞數(shù)據(jù)具有高維度（數(shù)萬個基因）、高噪聲（技術(shù)變異）、高稀疏性（基因零值比例高）的特點，需要開發(fā)更智能化的算法（如深度學(xué)習(xí)）進(jìn)行數(shù)據(jù)解析和靶點預(yù)測。-樣本獲取與臨床可及性：單細(xì)胞測序?qū)颖举|(zhì)量要求高（如新鮮組織、活性細(xì)胞），而臨床樣本多為福爾馬林固定石蠟包埋（FFPE）組織，限制了其在臨床常規(guī)中的應(yīng)用。此外，單細(xì)胞測序成本較高，難以在基層醫(yī)院普及。-靶點驗證與動物模型局限性：體外細(xì)胞實驗和動物模型難以完全模擬人體腫瘤的復(fù)雜異質(zhì)性，導(dǎo)致部分在單細(xì)胞水平篩選的靶點在臨床轉(zhuǎn)化中失敗。例如，靶向CSC的靶點在動物模型中有效，但在臨床試驗中因CSC亞群的可塑性（如分化為非CSC細(xì)胞）而療效不佳。1當(dāng)前面臨的主要挑戰(zhàn)-個體化靶點的普適性：單細(xì)胞技術(shù)強(qiáng)調(diào)“個體化”，但腫瘤具有高