基因編輯設備輔助運維技師（中級）考試試卷及答案一、填空題（每題1分，共10分）1.CRISPR-Cas9系統(tǒng)中切割目標DNA的核心酶是______。2.基因編輯設備校準周期一般不超過______個月。3.一次性耗材需經______處理后方可使用。4.生物安全柜操作區(qū)域保持______狀態(tài)（正壓/負壓）。5.PCR儀溫度控制精度誤差不超過______℃。6.設備維護記錄保存至少______年。7.防設備靜電的常用措施是______。8.廢棄耗材需按______分類處理。9.校準設備需用______的標準物質。10.故障排查第一步應先______（詢問/拆卸）使用情況。二、單項選擇題（每題2分，共20分）1.Cas9發(fā)揮切割功能的必需輔助酶是？A.Taq酶B.向導RNA合成酶C.RNaseHD.逆轉錄酶2.設備定期維護的核心目的是？A.延長壽命B.降采購成本C.簡化操作D.減培訓3.防止設備交叉污染的關鍵是？A.清潔臺面B.用一次性吸頭C.開紫外燈D.換過濾器4.導致PCR無條帶的故障是？A.溫度傳感器偏差B.電源接觸不良C.吸頭未裝緊D.以上都是5.設備校準的主要依據是？A.廠家說明書B.行業(yè)標準C.實驗室經驗D.客戶要求6.生物安全柜風速要求一般為？A.0.2-0.3m/sB.0.5-0.7m/sC.1.0-1.2m/sD.1.5-2.0m/s7.耗材滅菌常用方法是？A.干熱滅菌B.高壓蒸汽滅菌C.紫外滅菌D.化學滅菌8.設備數據存儲應符合？A.內部規(guī)范B.國家生物安全標準C.廠家推薦D.個人習慣9.故障排查第一步是？A.查電源B.問操作人員C.拆組件D.看記錄10.PCR儀溫度梯度范圍通常是？A.30-65℃B.40-72℃C.50-80℃D.60-90℃三、多項選擇題（每題2分，共20分）1.需定期校準的模塊包括？A.PCR儀溫度B.離心機轉速C.移液器體積D.生物安全柜風速2.實驗室安全防護設備有？A.生物安全柜B.防護服C.護目鏡D.手套3.故障排查需記錄的信息有？A.故障現象B.排查時間C.處理方法D.操作人員4.耗材驗收關鍵指標有？A.滅菌有效性B.規(guī)格匹配C.保質期D.包裝完整5.設備維護記錄應包含？A.維護日期B.內容C.人員D.下次維護時間6.生物安全柜使用前需檢查？A.紫外燈狀態(tài)B.風速C.HEPA完整性D.臺面清潔7.數據備份方式有？A.本地硬盤B.云端C.移動硬盤D.紙質記錄8.防靜電措施有？A.接地B.防靜電手環(huán)C.防靜電墊D.遠離熱源9.gRNA設計要點包括？A.靶序列20-22ntB.緊鄰PAMC.無脫靶D.與模板互補10.設備報廢流程包括？A.申請報廢B.評估殘值C.安全處置D.記錄備案四、判斷題（每題2分，共20分）1.Cas9僅識別PAM即可切割DNA。（）2.設備校準周期固定為每年一次。（）3.無菌操作可直接用手接觸滅菌耗材。（）4.PCR儀溫度誤差允許≤±0.5℃。（）5.運維記錄保存≥5年。（）6.HEPA過濾器每半年更換一次。（）7.滅菌耗材需標注有效期。（）8.故障排查可先拆卸核心組件。（）9.gRNA長度通常20-22nt。（）10.運維人員每年需安全培訓。（）五、簡答題（每題5分，共20分）1.簡述PCR儀日常維護要點。2.說明生物安全柜使用前檢查步驟。3.簡述設備故障排查基本流程。4.說明耗材驗收主要內容。六、討論題（每題5分，共10分）1.討論如何有效預防基因編輯設備交叉污染。2.討論設備運維中數據安全管理關鍵措施。---答案部分一、填空題答案1.Cas9酶2.63.滅菌4.負壓5.±0.56.57.接地/防靜電手環(huán)8.生物危險等級9.溯源性（或有證）10.詢問二、單項選擇題答案1.B2.A3.B4.D5.B6.A7.B8.B9.B10.A三、多項選擇題答案1.ABCD2.ABCD3.ABCD4.ABCD5.ABCD6.ABCD7.ABC8.ABC9.ABCD10.ABCD四、判斷題答案1.×2.×3.×4.√5.√6.×7.√8.×9.√10.√五、簡答題答案1.PCR儀日常維護：①每日清潔加熱模塊及臺面，去除殘留液體；②每周檢查溫度傳感器連接；③每月校準溫度精度（≤±0.5℃）；④定期更換導熱硅脂；⑤長期不用斷開電源、蓋防塵罩；⑥記錄維護內容。2.生物安全柜檢查：①提前30分鐘開紫外，使用前關閉；②測風速（0.2-0.3m/s）；③查HEPA完整性；④確認臺面清潔干燥；⑤檢查電源/照明；⑥操作窗口高度（15-20cm）。3.故障排查流程：①詢問操作人員（故障現象/操作過程）；②初步查電源/接口/指示燈；③逐步排查（簡單→復雜模塊）；④記錄分析；⑤維修/換件；⑥重啟驗證。4.耗材驗收：①包裝無破損、密封好；②規(guī)格與訂單一致；③滅菌指示條變色；④未過期；⑤抽樣測性能（如吸頭密封性）；⑥記錄簽字。六、討論題答案1.防交叉污染：①環(huán)境：每日75%酒精清潔，定期紫外滅菌；②耗材：用一次性無菌耗材，不重復使用；③操作：換手套、分樣本處理；④設備：清潔PCR模塊/離心機轉子，換過濾器；⑤樣本：隔離陽性/陰性樣本；⑥記錄：追溯處理流程。2.