檢驗科生物安全柜操作與防護行為規(guī)范演講人2026-01-08

04/操作中：標準化流程與關鍵行為控制03/操作前：從環(huán)境確認到個人防護的全方位準備02/生物安全柜的核心功能與風險認知01/引言：生物安全柜——檢驗科生物安全的核心屏障06/操作后：清潔消毒與設備維護的閉環(huán)管理05/應急處置：從突發(fā)狀況到風險阻斷的快速響應08/總結：規(guī)范為基，責任為魂，筑牢生物安全防線07/人員培訓與意識提升：安全行為的根基目錄

檢驗科生物安全柜操作與防護行為規(guī)范01ONE引言：生物安全柜——檢驗科生物安全的核心屏障

引言：生物安全柜——檢驗科生物安全的核心屏障作為一名在檢驗科工作十余年的專業(yè)人員，我深知實驗室生物安全是檢驗質量的基石，而生物安全柜（BiologicalSafetyCabinet,BSC）作為實驗室中handling感染性樣本的核心設備，其操作規(guī)范與防護行為直接關系到實驗人員、樣本及環(huán)境的三重安全。猶記2018年，某科室因未嚴格遵循生物安全柜操作流程，導致一例布魯菌樣本疑似氣溶膠擴散，造成2名工作人員出現(xiàn)發(fā)熱、乏力等臨床癥狀，雖及時干預未引發(fā)嚴重后果，但這一事件讓我深刻意識到：生物安全柜的操作絕非簡單的“開關機器”，而是需要系統(tǒng)認知、規(guī)范動作與責任意識共同支撐的“生命工程”。本文將從生物安全柜的核心功能與風險認知出發(fā)，系統(tǒng)梳理操作前準備、操作中規(guī)范、應急處置、維護保養(yǎng)及人員培訓全流程要點，旨在為檢驗科同仁提供一套“可執(zhí)行、可追溯、可優(yōu)化”的操作與防護行為規(guī)范，筑牢實驗室生物安全防線。02ONE生物安全柜的核心功能與風險認知

1生物安全柜的定義與分類生物安全柜是一種負壓過濾排風柜，通過高效空氣過濾器（HEPA）對操作區(qū)域空氣進行過濾，實現(xiàn)對操作人員、實驗樣本及環(huán)境的保護。根據《生物安全實驗室建筑技術規(guī)范》（GB50346-2011），生物安全柜分為I級、II級和III級，其中檢驗科最常用的是II級生物安全柜（A1/A2型）和部分III級生物安全柜（手套箱型）。-I級生物安全柜：僅保護操作人員和環(huán)境，樣本不保護，適用于對樣本無揮發(fā)性毒害物質的操作；-II級生物安全柜：同時保護人員、樣本和環(huán)境，是目前檢驗科處理臨床樣本（如血液、體液、分泌物）的主流設備；-III級生物安全柜：提供最高級別防護，全密閉操作，適用于高致病性病原體（如埃博拉病毒、炭疽桿菌）的操作。

2生物安全柜的核心功能01生物安全柜的核心功能通過“三重保護”實現(xiàn)：02-人員保護：通過操作區(qū)負壓設計，使柜內氣流從操作人員方向流向柜內，結合HEPA過濾器過濾可能攜帶病原體的氣溶膠；03-樣本保護：通過HEPA過濾器送入潔凈空氣，避免外界微生物污染樣本；04-環(huán)境保護：通過HEPA過濾器過濾排風，避免柜內病原體擴散至實驗室環(huán)境。

3檢驗科常見風險點識別結合多年工作經驗，檢驗科生物安全柜操作中的風險主要集中在以下四類：-管理流程風險：如未定期進行設備認證、操作人員無資質培訓、應急處置預案缺失等，增加事故發(fā)生概率；-設備本身風險：如HEPA濾器泄漏、風機故障、紫外燈失效等，導致保護功能喪失；-操作行為風險：如物品擺放遮擋回風區(qū)、操作動作幅度過大產生氣溶膠、未及時消毒等，直接破壞氣流平衡；-樣本特性風險：如處理高濃度菌液、離心后樣本、具有傳染性的臨床標本時，若操作不規(guī)范，極易引發(fā)暴露事件。010203040503ONE操作前：從環(huán)境確認到個人防護的全方位準備

操作前：從環(huán)境確認到個人防護的全方位準備操作前的充分準備是保障生物安全柜功能發(fā)揮的“第一道關口”，任何環(huán)節(jié)的疏漏都可能埋下安全隱患。根據《臨床實驗室質量保證》（CLSI指南）要求，操作前需完成“環(huán)境-設備-人員-物品”四維確認。

1環(huán)境評估與準備-3.1.1實驗室布局要求：生物安全柜應放置在遠離人員頻繁走動區(qū)域、門窗及通風口的位置，避免氣流干擾。理想情況下，安全柜周圍應留有≥30cm的維護空間，頂部留有≥30cm的排風空間。我曾見過某實驗室將安全柜緊貼墻壁放置，導致排風不暢，風機頻繁報警，經調整位置后才恢復正常。-3.1.2電力與通風系統(tǒng)檢查：確認生物安全柜電源為獨立專用回路，避免與其他大功率設備共用，防止電壓波動影響風機運行。同時，實驗室應具備獨立的通風系統(tǒng)，確保生物安全柜排風可直排室外或通過高效過濾后排放，嚴禁將排風管道接入實驗室空調系統(tǒng)。

2生物安全柜狀態(tài)檢查-3.2.1開機預檢流程：（1）紫外燈消毒：操作前30分鐘開啟紫外燈，對操作區(qū)進行表面消毒（注意：紫外燈消毒僅對物體表面有效，不能替代空氣過濾，且人員不得在紫外燈開啟時進入操作區(qū)）；（2）風機運行測試：開啟風機，運行5分鐘后，用風速儀檢測操作區(qū)平均風速（II級生物安全柜標準風速為0.35-0.54m/s），若風速異常需停機檢修；（3）氣密性檢查：對于III級生物安全柜，需每月進行氣密性測試，確保在500Pa壓差下，泄漏率＜0.5%/min；（4）HEPA濾器完整性測試：每年至少一次，采用DOP（鄰苯二甲酸二辛酯）氣溶膠或PAO（鄰苯二甲酸辛酯）進行掃描檢測，濾器無泄漏為合格。-3.2.2常見故障識別：如風機啟動后噪音異常、操作區(qū)玻璃門無法正常升降、紫外燈不亮等，需立即停止操作，聯(lián)系設備工程師維修，嚴禁“帶故障運行”。

3個人防護裝備（PPE）的選擇與穿脫-3.3.1PPE配置原則：根據樣本的生物危害等級（BSL-1至BSL-3）選擇相應防護級別。檢驗科常規(guī)操作（如血清檢測、普通細菌培養(yǎng)）至少需佩戴：-一次性乳膠手套（或丁腈手套，需無粉、耐酸堿）；-防護服（長袖、防水、無紐扣）；-醫(yī)用外科口罩（或N95口罩，若操作產生氣溶膠）；-護目鏡/防護面屏（處理具有噴濺風險的樣本時）。-3.3.2穿脫規(guī)范：（1）穿戴順序：先洗手→戴口罩→穿防護服→戴護目鏡→戴手套（手套袖口需覆蓋防護服袖口）；（2）脫卸順序：先脫手套→消毒雙手→脫防護服（反面朝外）→脫護目鏡→脫口罩→洗手

3個人防護裝備（PPE）的選擇與穿脫。特別強調：脫卸過程中需避免手套接觸面部或防護服外表面，全程保持“內uncontaminated、外contaminated”原則。

4樣品與試劑預處理-3.4.1樣品標識與分類：所有樣本需清晰標注“生物危害標識”（如BSL-2標識），并按檢測項目分類存放，避免交叉污染。-3.4.2試劑與耗材準備：將實驗所需試劑、耗材（如移液管、離心管、培養(yǎng)皿）提前放入生物安全柜內，用75%乙醇擦拭表面消毒。需注意：-避免一次性放入過多物品，確保操作區(qū)留有足夠空間；-液體試劑應放置在操作區(qū)后部，固體試劑放置在前部，減少手臂移動幅度；-移液管、tip槍頭等需拆除外包裝后放入，避免包裝材料污染操作區(qū)。04ONE操作中：標準化流程與關鍵行為控制

操作中：標準化流程與關鍵行為控制操作過程中的行為規(guī)范是保障生物安全的核心環(huán)節(jié)，任何不規(guī)范動作都可能破壞生物安全柜的氣流平衡，導致暴露風險。根據WHO《生物安全實驗室操作手冊》，操作中需遵循“最小化動作、單向流動、及時消毒”三大原則。

1標準操作流程（SOP）制定與執(zhí)行-4.1.1開機與參數確認：（1）完成操作前檢查后，開啟風機和照明燈，運行10-15分鐘，待操作區(qū)氣流穩(wěn)定；（2）將風速儀放置在操作區(qū)中央及四角，確認風速在標準范圍內（II級安全柜0.35-0.54m/s）；（3）將裝有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿敞開15分鐘，蓋上后置于37℃培養(yǎng)24小時，監(jiān)測無菌狀況（若有菌落生長，提示HEPA濾器可能泄漏或操作區(qū)消毒不徹底）。-4.1.2樣本操作規(guī)范：（1）樣本開蓋：將樣本管傾斜45，用鑷子或移液管輕輕開蓋，避免垂直開蓋產生氣溶膠；

1標準操作流程（SOP）制定與執(zhí)行231（2）移液操作：使用正向移液法（慢吸快排），避免反復吹打；若需混勻，應渦旋振蕩而非劇烈震蕩；（3）離心處理：離心管需加蓋密封，離心后靜置1分鐘再開蓋，開蓋時管口朝向遠離操作者的方向；（4）陽性樣本處理：對HIV、HBV等陽性樣本，需在生物安全柜內加入含有效氯5000mg/L的消毒劑作用30分鐘后，再移出處理。

2操作行為“紅線”與“底線”（1）在生物安全柜內進行樣本離心、劇烈震蕩等可能產生大量氣溶膠的操作（除非使用安全離心杯）；在右側編輯區(qū)輸入內容（3）在生物安全柜內放置與實驗無關的物品（如手機、個人衣物）；在右側編輯區(qū)輸入內容（1）采用“無接觸操作”：如使用三用槍頭吸取液體，避免手直接接觸移液管尖端；在右側編輯區(qū)輸入內容（3）及時清理污染物：若有樣本潑灑，立即用吸水紙覆蓋，倒入5000mg/L含氯消毒劑作用30分鐘后擦拭。在右側編輯區(qū)輸入內容-4.2.1嚴禁行為：在右側編輯區(qū)輸入內容（2）將手臂伸入操作區(qū)上方或操作區(qū)外進行操作（如取用遠處試劑）；在右側編輯區(qū)輸入內容（4）使用明火（如酒精燈）消毒，破壞氣流平衡并可能損壞HEPA濾器。-4.2.2推薦行為：（2）減少手臂移動幅度：操作時肘部貼近身體，動作緩慢平穩(wěn)；在右側編輯區(qū)輸入內容

3氣溶膠產生風險的控制氣溶膠是實驗室感染的主要途徑，直徑1-5μm的顆?？蛇M入肺泡并導致感染。檢驗科常見氣溶膠產生場景包括：-樣本混勻時劇烈震蕩；-離心管破裂或未加蓋；-移液時槍頭尖端觸碰管壁；-開蓋時液體飛濺?？刂拼胧?使用帶濾芯的移液器（如正壓移液器）；-離心前確認離心管平衡，使用密封離心罐；-在生物安全柜內操作時，將樣本管置于帶網格的架子上，減少晃動；-定期進行氣溶膠發(fā)生實驗（如用熒光素標記樣本），評估操作規(guī)范性。05ONE應急處置：從突發(fā)狀況到風險阻斷的快速響應

應急處置：從突發(fā)狀況到風險阻斷的快速響應即使嚴格遵循操作規(guī)范，突發(fā)情況仍可能發(fā)生（如樣本泄漏、設備故障、人員暴露）。完善的應急處置機制是降低事故后果的關鍵。

1常見突發(fā)情況分類與處置流程在右側編輯區(qū)輸入內容-5.1.1樣本泄漏或潑灑：在右側編輯區(qū)輸入內容（1）立即停止操作，關閉生物安全柜風機（若泄漏為大量傳染性物質，可保持風機運行以防止擴散）；在右側編輯區(qū)輸入內容（2）佩戴雙層手套，穿上防水圍裙和鞋套，用吸水紙覆蓋泄漏區(qū)域；在右側編輯區(qū)輸入內容（3）傾倒含氯5000-10000mg/L消毒液，作用30分鐘后，用鑷子將污染廢棄物放入生物危害垃圾袋；在右側編輯區(qū)輸入內容（4）用消毒液擦拭操作區(qū)表面，開啟風機運行30分鐘后重新消毒；-5.1.2人員暴露（如黏膜接觸、皮膚破損）：（5）記錄泄漏事件（時間、樣本類型、處置過程），上報實驗室負責人。

1常見突發(fā)情況分類與處置流程（1）黏膜暴露：立即用大量生理鹽水或流動清水沖洗15分鐘（如眼睛沖洗需翻開眼瞼）；在右側編輯區(qū)輸入內容（2）皮膚破損：立即從傷口近心端向遠心端擠壓，排出污染物，再用肥皂水和流動水沖洗15分鐘；在右側編輯區(qū)輸入內容（3）及時就醫(yī)，告知醫(yī)生暴露樣本的生物危害信息，并填寫職業(yè)暴露報告表。-5.1.3生物安全柜故障（如風機停轉、紫外燈失效）：（1）立即停止操作，將柜內物品用75%乙醇擦拭后移出；在右側編輯區(qū)輸入內容（2）若為風機停轉，關閉電源，防止外界空氣進入；若為紫外燈失效，暫停使用需要紫外消毒的操作；在右側編輯區(qū)輸入內容（3）聯(lián)系設備工程師維修，維修后需重新進行風速、HEPA濾器檢測，合格方可使用。在右側編輯區(qū)輸入內容

2應急物資儲備與演練-5.2.1應急物資配置：檢驗科應配備應急藥箱（含生理鹽水、碘伏、消毒棉簽）、個人防護裝備（備用防護服、口罩、手套）、消毒劑（含氯消毒液、75%乙醇）及生物危害垃圾袋等，并定期檢查物資有效期。-5.2.2定期演練：每季度組織一次應急演練，模擬樣本泄漏、人員暴露等場景，檢驗人員處置能力及流程有效性，演練后需總結問題并改進預案。06ONE操作后：清潔消毒與設備維護的閉環(huán)管理

操作后：清潔消毒與設備維護的閉環(huán)管理操作后的清潔消毒與設備維護是確保生物安全柜長期穩(wěn)定運行的“最后一公里”，需形成“操作-清潔-檢測-記錄”的閉環(huán)。

1清潔消毒流程在右側編輯區(qū)輸入內容-6.1.1物品清理：在右側編輯區(qū)輸入內容（1）將實驗廢棄物分類放入專用容器：生物危害垃圾（污染耗材、樣本）放入黃色垃圾袋，銳器放入利器盒；-6.1.2操作區(qū)消毒：（2）可重復使用的器材（如鑷子、離心管架）用含氯2000mg/L消毒液浸泡30分鐘后，清洗干凈烘干備用。在右側編輯區(qū)輸入內容（1）用75%乙醇從內到外、從上至下擦拭操作區(qū)表面（包括玻璃門、側壁、工作臺面）；在右側編輯區(qū)輸入內容（2）對格柵回風口用軟毛刷清除灰塵，再用消毒液擦拭；在右側編輯區(qū)輸入內容（3）開啟紫外燈消毒30分鐘，關閉風機和照明燈，鎖好生物安全柜。

2設備定期維護與認證-6.2.1日常維護：（1）每日記錄風機運行時間、紫外燈使用時間；（2）每周清潔生物安全柜外表面及防塵網；（3）每月檢查風機皮帶松緊度，必要時更換。-6.2.2定期認證：（1）每年由具備資質的第三方機構進行生物安全柜性能檢測（包括風速、HEPA濾器完整性、沉降菌、浮游菌等）；（2）若設備移動、維修或更換濾器后，需重新進行認證；（3）認證報告需存檔保存，確保設備狀態(tài)可追溯。

3記錄與追溯管理建立生物安全柜使用記錄表，內容包括：使用日期、使用人、操作項目、設備運行狀態(tài)、清潔消毒情況、異常事件及處置措施等。記錄需保存至少3年，便于追溯問題事件及分析改進。07ONE人員培訓與意識提升：安全行為的根基

人員培訓與意識提升：安全行為的根基再完善的設備與流程，若缺乏具備安全意識的人員，也無法發(fā)揮有效作用。人員培訓與意識提升是生物安全管理的“靈魂工程”。

1培訓體系構建21-7.1.1崗前培訓：新入職人員需完成生物安全理論培訓（包括生物安全柜原理、操作規(guī)范、應急處置）和實操考核（物品擺放、PPE穿脫、樣本處理），考核合格后方可獨立操作。-7.1.3專項培訓：針對高致病性樣本操作、應急演練等場景，開展小班化、實操性專項培訓，提升人員應對復雜情況的能力。-7.1.2在崗培訓：每年至少組織2次生物安全知識更新培訓，內容包括新頒布的法規(guī)（如