延髓池內(nèi)注入術(shù)瑞吉：動(dòng)物生理與神經(jīng)功能影響的深度剖析一、引言1.1研究背景與意義在外科手術(shù)領(lǐng)域，止血一直是至關(guān)重要的環(huán)節(jié)，尤其是神經(jīng)外科手術(shù)，其對(duì)于止血的要求更為嚴(yán)苛。腦組織如同豆腐般脆弱，在手術(shù)操作中極易受損，這使得常用的止血方法受到諸多限制。在面對(duì)組織毛細(xì)血管彌漫性滲血時(shí)，止血難度更是大幅增加，傳統(tǒng)的止血手段往往難以奏效。比如在一些腦部腫瘤切除手術(shù)中，由于腫瘤周圍血管豐富且脆弱，手術(shù)操作稍有不慎就會(huì)引發(fā)大量出血，而常用的止血鉗、電凝等方法，要么會(huì)對(duì)周圍腦組織造成額外的機(jī)械損傷或熱損傷，要么無法有效應(yīng)對(duì)這種彌漫性滲血情況，導(dǎo)致手術(shù)視野模糊，延長手術(shù)時(shí)間，甚至威脅患者的生命安全。鑒于此，研發(fā)專門用于神經(jīng)外科的止血材料和新型技術(shù)，成為醫(yī)學(xué)與獸醫(yī)學(xué)外科領(lǐng)域的研究重點(diǎn)和難點(diǎn)。近年來，雖然在這方面取得了一些進(jìn)展，如出現(xiàn)了明膠海綿、生物蛋白膠等止血材料，但這些材料仍存在各自的局限性，如明膠海綿降解速度較慢，可能會(huì)在體內(nèi)殘留，引發(fā)炎癥反應(yīng)；生物蛋白膠的制備過程復(fù)雜，成本較高，且存在免疫原性等問題。與此同時(shí)，神經(jīng)外科止血材料使用的安全性，即對(duì)人和動(dòng)物正常生理機(jī)能和中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能的潛在不良影響，也成為該領(lǐng)域科學(xué)家高度關(guān)注的熱點(diǎn)問題。這不僅關(guān)系到患者或動(dòng)物術(shù)后的恢復(fù)情況，更關(guān)系著止血材料及技術(shù)能否進(jìn)一步研發(fā)并成功實(shí)現(xiàn)臨床推廣。一種安全有效的止血材料，不僅要能夠快速、有效地止血，還不能對(duì)機(jī)體的正常生理功能造成干擾，尤其是不能影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的功能，否則可能會(huì)引發(fā)一系列嚴(yán)重的并發(fā)癥，如認(rèn)知障礙、運(yùn)動(dòng)功能受損等。術(shù)瑞吉作為一種新型的止血材料，近年來逐漸進(jìn)入人們的視野。它是一種生物止血流體膜，主要成分包括氧化纖維素和海藻酸鈉，通過獨(dú)特的氫鍵網(wǎng)絡(luò)交聯(lián)形成致密的三維網(wǎng)狀支架結(jié)構(gòu)。這種結(jié)構(gòu)賦予了術(shù)瑞吉諸多優(yōu)勢，如良好的流動(dòng)性，使其能夠更易于抵達(dá)深而不易顯露的部位，對(duì)創(chuàng)面覆蓋全面且均勻；高吸濕性使其能夠迅速吸收血液中的水分，形成分子海綿，達(dá)到創(chuàng)面壓迫作用；同時(shí)，它還能促進(jìn)血小板的粘附聚集，加速纖維蛋白網(wǎng)的形成，從而實(shí)現(xiàn)快速止血。在一些外科手術(shù)中，術(shù)瑞吉已被初步應(yīng)用，并展現(xiàn)出了較好的止血效果。然而，目前對(duì)于術(shù)瑞吉在神經(jīng)外科領(lǐng)域的應(yīng)用研究還相對(duì)較少，尤其是其通過腦脊液置換的方式注入動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)后，對(duì)動(dòng)物主要生理機(jī)能及中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)功能的影響，尚未有系統(tǒng)的研究報(bào)道。本研究選取術(shù)瑞吉作為研究對(duì)象，通過腦脊液置換的方式將其注入動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)，旨在深入探討其對(duì)動(dòng)物主要生理機(jī)能及中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)功能的影響。這一研究對(duì)于動(dòng)物神經(jīng)外科的發(fā)展具有重要的理論和實(shí)踐意義。從理論層面來看，它將豐富我們對(duì)新型止血材料作用機(jī)制的認(rèn)識(shí)，為進(jìn)一步優(yōu)化和改進(jìn)止血材料提供科學(xué)依據(jù)；從實(shí)踐角度而言，若能證實(shí)術(shù)瑞吉在神經(jīng)外科應(yīng)用中的安全性和有效性，將為動(dòng)物神經(jīng)外科手術(shù)提供一種更為可靠的止血選擇，有助于提高手術(shù)成功率，減少術(shù)后并發(fā)癥的發(fā)生，推動(dòng)動(dòng)物神經(jīng)外科臨床治療水平的提升。1.2研究目的與創(chuàng)新點(diǎn)本研究的核心目的是全面且深入地探究術(shù)瑞吉經(jīng)延髓池注入這一特殊給藥方式，對(duì)動(dòng)物主要生理機(jī)能及中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)功能所產(chǎn)生的具體影響。在外科手術(shù)，尤其是神經(jīng)外科手術(shù)領(lǐng)域，止血材料的安全性與有效性始終是研究的關(guān)鍵焦點(diǎn)。目前雖有多種止血材料，但術(shù)瑞吉作為新型生物止血流體膜，其在神經(jīng)外科中樞神經(jīng)系統(tǒng)應(yīng)用中的研究仍存在明顯空白，本研究正是基于此背景展開。在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方面，本研究具有顯著的創(chuàng)新之處。研究選取新西蘭白兔作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，通過建立腦脊液置換模型，將術(shù)瑞吉經(jīng)延髓池注入動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)，這種給藥方式更貼近神經(jīng)外科手術(shù)中止血材料的實(shí)際作用環(huán)境，能夠更真實(shí)地模擬臨床應(yīng)用場景，相較于以往在其他部位或采用其他給藥途徑的研究，更具針對(duì)性和臨床參考價(jià)值。同時(shí)，研究設(shè)置了生理鹽水組和高嶺土懸濁液組作為對(duì)照。生理鹽水組可用于對(duì)比觀察正常生理狀態(tài)下動(dòng)物各項(xiàng)指標(biāo)的變化，排除實(shí)驗(yàn)操作本身對(duì)動(dòng)物生理機(jī)能和中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能的影響；高嶺土懸濁液組則是作為一種已知可能對(duì)動(dòng)物生理機(jī)能及中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生影響的模型組，通過與術(shù)瑞吉組對(duì)比，更清晰地凸顯術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物的獨(dú)特作用效果，這種多組對(duì)照的設(shè)計(jì)方式能夠更全面、準(zhǔn)確地評(píng)估術(shù)瑞吉的安全性和有效性。在研究指標(biāo)選取上，本研究也具有創(chuàng)新性。在探究術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物主要生理機(jī)能的影響時(shí)，不僅觀察動(dòng)物的臨床癥狀，如精神狀態(tài)、活動(dòng)能力、飲食和排泄情況等直觀表現(xiàn)，還全面監(jiān)測呼吸循環(huán)系統(tǒng)指標(biāo)變化，包括呼吸頻率、呼吸深度、心率、血壓等重要生理參數(shù)，這些指標(biāo)能夠直接反映動(dòng)物的生命體征和生理機(jī)能狀態(tài)；同時(shí)檢測血常規(guī)指標(biāo)，如紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血小板計(jì)數(shù)等，以及部分生化指標(biāo)，如肝腎功能指標(biāo)、電解質(zhì)水平等，從血液學(xué)和生物化學(xué)層面深入分析術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物身體機(jī)能的影響，多維度、全方位地評(píng)估術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物主要生理機(jī)能的作用。在探究術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物神經(jīng)行為學(xué)的影響時(shí)，采用Morris水迷宮和功能觀察組合實(shí)驗(yàn)（FOB）進(jìn)行檢測。Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蛴行гu(píng)估動(dòng)物的空間學(xué)習(xí)記憶能力，通過觀察動(dòng)物在水迷宮中的游泳路徑、尋找平臺(tái)的潛伏期、穿越平臺(tái)次數(shù)等指標(biāo)，判斷術(shù)瑞吉是否對(duì)動(dòng)物的認(rèn)知功能產(chǎn)生影響；功能觀察組合實(shí)驗(yàn)（FOB）則從多個(gè)方面綜合評(píng)價(jià)動(dòng)物的神經(jīng)行為，包括自主活動(dòng)、對(duì)刺激的反應(yīng)性、協(xié)調(diào)性、平衡能力等，全面反映動(dòng)物神經(jīng)系統(tǒng)的功能狀態(tài)，這種多方法結(jié)合的神經(jīng)行為學(xué)檢測方式，能夠更系統(tǒng)、深入地探究術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)功能的影響。二、術(shù)瑞吉及延髓池內(nèi)注入術(shù)概述2.1術(shù)瑞吉的特性與應(yīng)用術(shù)瑞吉，作為一種生物止血流體膜，其主要成分包含氧化纖維素與海藻酸鈉。氧化纖維素來源于天然植物，經(jīng)過特殊處理后，具備獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)和性能，海藻酸鈉同樣是從海藻中提取的天然多糖。這兩種成分通過專利的生物共混技術(shù)巧妙結(jié)合，借助氫鍵網(wǎng)絡(luò)交聯(lián)，分子鏈之間發(fā)生纏結(jié)，使得分子間作用力增大，進(jìn)而形成了致密的三維網(wǎng)狀支架結(jié)構(gòu)。這種結(jié)構(gòu)猶如一張細(xì)密的網(wǎng)，為術(shù)瑞吉發(fā)揮其卓越的止血等功能奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。從物理化學(xué)性質(zhì)來看，術(shù)瑞吉呈現(xiàn)出無色透明澄清的外觀，這一特性使其在手術(shù)應(yīng)用中具有顯著優(yōu)勢。在手術(shù)過程中，當(dāng)使用術(shù)瑞吉處理出血部位時(shí)，醫(yī)生能夠清晰地觀察術(shù)野，準(zhǔn)確檢查出血點(diǎn)，不會(huì)因?yàn)椴牧媳旧淼念伾蛸|(zhì)地而干擾手術(shù)操作，大大提高了手術(shù)的可視性和精準(zhǔn)性。術(shù)瑞吉還具有良好的流動(dòng)性和粘性。其流動(dòng)性使其能夠像液體一樣，輕松抵達(dá)深而不易顯露的部位，對(duì)創(chuàng)面實(shí)現(xiàn)全面且均勻的覆蓋，確保沒有遺漏的出血點(diǎn)；粘性則使其能夠緊密地粘附于組織表面，如同液體創(chuàng)可貼一般，在創(chuàng)面形成一層牢固的隔離屏障，有效阻止血液和其他液體的滲出，同時(shí)也能防止細(xì)菌等外界病原體的侵入。在止血機(jī)制方面，術(shù)瑞吉通過多途徑協(xié)同作用實(shí)現(xiàn)高效止血。在物理止血途徑上，其致密的三維網(wǎng)狀支架能夠有效地減緩血液流速，如同一個(gè)細(xì)密的濾網(wǎng)，對(duì)血液流動(dòng)形成阻礙，從而達(dá)到機(jī)械封堵作用。術(shù)瑞吉具有高吸濕性，能夠迅速吸收血液中的水分，使血液濃縮，形成類似分子海綿的結(jié)構(gòu)，對(duì)創(chuàng)面產(chǎn)生壓迫作用，進(jìn)一步促進(jìn)止血。該三維網(wǎng)狀支架還為血小板的快速粘附、聚集提供了理想的框架，加速了纖維蛋白網(wǎng)的形成，增強(qiáng)了止血效果。在生物止血途徑上，術(shù)瑞吉能促使血小板快速凝集，釋放血小板因子，并激活凝血因子XII，從而啟動(dòng)內(nèi)源性和外源性凝血系統(tǒng)，從生物化學(xué)層面實(shí)現(xiàn)止血。在外科手術(shù)領(lǐng)域，術(shù)瑞吉有著廣泛的應(yīng)用。在神經(jīng)外科手術(shù)中，由于腦組織質(zhì)地極為脆弱，手術(shù)操作難度大，對(duì)止血的要求極高，術(shù)瑞吉發(fā)揮了重要作用。在顱內(nèi)血腫清除術(shù)、腦膜瘤切除術(shù)、膠質(zhì)瘤切除術(shù)、垂體腺瘤切除術(shù)等手術(shù)中，術(shù)瑞吉都展現(xiàn)出了獨(dú)特的優(yōu)勢。在輔助雙極電凝止血時(shí)，術(shù)瑞吉可以減輕對(duì)周圍腦組織的壓迫，降低手術(shù)對(duì)腦組織的損傷風(fēng)險(xiǎn)。在垂體腺瘤手術(shù)中，術(shù)瑞吉不僅能夠減輕對(duì)視神經(jīng)的壓迫，還有助于術(shù)后患者視力的恢復(fù)。它還可以用于沖洗腫瘤的出血部位，使術(shù)野暴露更加充分，為醫(yī)生提供清晰的手術(shù)視野，便于準(zhǔn)確操作，提高手術(shù)的成功率。在其他外科手術(shù)中，術(shù)瑞吉同樣表現(xiàn)出色。在腎臟切除術(shù)中，對(duì)于腎上腺腺窩廣泛滲血的情況，術(shù)瑞吉能夠有效止血，同時(shí)清除組織碎屑，與其他止血材料聯(lián)合使用時(shí)，可確保止血徹底。經(jīng)皮腎鏡取石術(shù)時(shí)，術(shù)瑞吉能止?jié)B血、抗?jié)B出，清除結(jié)石殘?jiān)脱獕K，促進(jìn)粘膜修復(fù)。在輸尿管手術(shù)、尿道手術(shù)以及經(jīng)尿道前列腺電切術(shù)（TURP）等涉及粘膜滲血的手術(shù)中，術(shù)瑞吉也能發(fā)揮良好的止血和創(chuàng)面保護(hù)作用。與傳統(tǒng)的固體止血材料相比，術(shù)瑞吉具有諸多優(yōu)勢。在降解性方面，術(shù)瑞吉更易降解、吸收和代謝，而固體材料往往降解速度緩慢，降解時(shí)間難以確定，可能會(huì)在體內(nèi)殘留，引發(fā)炎癥等不良反應(yīng)。術(shù)瑞吉的流動(dòng)性良好，操作簡便，能夠全面均勻地覆蓋創(chuàng)面，對(duì)于彌漫性滲血和深部創(chuàng)面的止血效果顯著；而固體止血材料無流動(dòng)性，對(duì)于這些復(fù)雜的出血情況，止血操作繁瑣，在腔鏡手術(shù)中，也不易送達(dá)出血部位，導(dǎo)致止血困難。術(shù)瑞吉無色透明澄清的特性使其不遮擋術(shù)野，醫(yī)生可以直觀地觀察止血效果，且不會(huì)影響手術(shù)操作；固體止血材料吸濕后容易形成凝膠狀混合物，不僅會(huì)遮擋術(shù)野，還會(huì)粘附手術(shù)器械，干擾手術(shù)的正常進(jìn)行。術(shù)瑞吉不會(huì)發(fā)生溶脹現(xiàn)象，不會(huì)侵占手術(shù)空間，也不會(huì)對(duì)周圍組織產(chǎn)生過度壓迫；而固體止血材料溶脹后體積增加，重量可增加35-40倍，容易過度壓迫神經(jīng)、血管及周圍組織，引發(fā)副損傷，如在涉及脊髓的手術(shù)中，可能因過度壓迫而導(dǎo)致癱瘓、疼痛、神經(jīng)損傷、鄰近血管收縮及組織壞死等嚴(yán)重后果。2.2延髓池內(nèi)注入術(shù)原理與操作要點(diǎn)延髓池內(nèi)注入術(shù)，又稱小腦延髓池注射或枕大池注射，是一項(xiàng)在醫(yī)學(xué)研究與臨床實(shí)踐中應(yīng)用廣泛的重要技術(shù)。其原理基于小腦延髓池的特殊解剖結(jié)構(gòu)。小腦延髓池位于小腦與延髓之間，是蛛網(wǎng)膜下腔在該部位的擴(kuò)大，充滿了腦脊液。腦脊液在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中起著至關(guān)重要的作用，它不僅為腦組織提供浮力，減輕腦組織自身重量對(duì)其造成的壓迫，還參與營養(yǎng)物質(zhì)的運(yùn)輸和代謝廢物的清除。通過將藥物、示蹤劑或其他治療物質(zhì)注入小腦延髓池內(nèi)，這些物質(zhì)能夠隨著腦脊液的循環(huán)，迅速擴(kuò)散到整個(gè)中樞神經(jīng)系統(tǒng)，從而實(shí)現(xiàn)治療、研究或診斷等多種目的。在針對(duì)阿爾茨海默病等神經(jīng)退行性疾病的研究中，研究人員利用枕大池注射技術(shù)引入特定藥物或干預(yù)物質(zhì)，以深入探索其治療潛力和作用機(jī)制，為疾病的治療提供新的策略和方向。在本研究中，延髓池內(nèi)注入術(shù)的具體操作步驟如下：首先，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物新西蘭白兔進(jìn)行全身麻醉，確保動(dòng)物在手術(shù)過程中處于無痛、安靜的狀態(tài)，常用的麻醉藥物和方法有戊巴比妥鈉腹腔注射等，可根據(jù)動(dòng)物的體重嚴(yán)格控制麻醉藥物的劑量，以達(dá)到適宜的麻醉深度。待動(dòng)物麻醉生效后，將其俯臥位固定于手術(shù)臺(tái)上，頭部稍向下低垂，使頸部伸展，這樣可以更好地暴露枕后部區(qū)域。接著，對(duì)枕后部手術(shù)區(qū)域進(jìn)行嚴(yán)格的消毒處理，通常使用碘伏等消毒劑，按照從中心向周圍、由內(nèi)向外的順序進(jìn)行擦拭，消毒范圍應(yīng)足夠大，以確保手術(shù)區(qū)域的無菌環(huán)境。在確定穿刺點(diǎn)時(shí)，可采用兩種方法。一種是選取兩乳突尖連線中點(diǎn)作為穿刺點(diǎn)；另一種是選擇枕外粗隆至第2頸椎棘突連線的中點(diǎn)。確定穿刺點(diǎn)后，用20號(hào)腰椎穿刺針進(jìn)行穿刺，穿刺針的針尖斜面宜短，這樣可以減少對(duì)組織的損傷。在穿刺針4cm處做一標(biāo)記，便于控制進(jìn)針深度。左手拇指固定于第2頸椎棘突，起到穩(wěn)定穿刺部位和輔助進(jìn)針方向的作用，右手持針，嚴(yán)格循中線緩緩刺入，針刺方向指向眉間。當(dāng)針尖刺過寰枕筋膜和硬腦膜時(shí)，操作人員通常會(huì)有明顯的落空感，此時(shí)將針芯拔出，若有腦脊液流出，即證實(shí)已成功進(jìn)入小腦延髓池。如無腦脊液流出，可能是因?yàn)榇┐躺疃炔粔?，可小心再將針刺?-2mm；若仍無腦脊液流出，可用注射器輕輕抽吸，每深入1-2mm抽吸1次，直至有腦脊液抽出為止。如果穿刺針遇枕骨大孔后緣骨質(zhì)受阻，可將針稍退后1-2cm，將針尖向下稍移動(dòng)，然后再緩緩刺入。穿刺深度會(huì)因動(dòng)物的年齡、胖瘦等因素而異，一般來說，成年新西蘭白兔的穿刺深度為4-7cm。在穿刺過程中，要密切關(guān)注動(dòng)物的生命體征變化，如呼吸、心率、血壓等，一旦出現(xiàn)異常，應(yīng)立即停止操作并采取相應(yīng)的急救措施。注入術(shù)瑞吉時(shí)，需根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的劑量準(zhǔn)確抽取藥物，使用注射器將術(shù)瑞吉緩慢注入小腦延髓池內(nèi)。注射速度要均勻且緩慢，避免因注射速度過快而對(duì)動(dòng)物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)造成沖擊。注射完畢后，緩慢拔出穿刺針，用消毒棉球按壓穿刺點(diǎn)片刻，防止腦脊液漏出和出血。在進(jìn)行延髓池內(nèi)注入術(shù)時(shí)，有諸多注意事項(xiàng)。嚴(yán)格的無菌操作至關(guān)重要，任何細(xì)菌污染都可能引發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的感染，導(dǎo)致嚴(yán)重的后果，如腦膜炎等，因此手術(shù)過程中要確保手術(shù)器械、藥物等均經(jīng)過嚴(yán)格的滅菌處理，操作人員也要遵守?zé)o菌操作規(guī)程。要準(zhǔn)確控制穿刺的位置和深度。穿刺位置偏差可能導(dǎo)致穿刺失敗，無法將藥物注入小腦延髓池，或者損傷周圍的重要神經(jīng)、血管等結(jié)構(gòu)；穿刺過深則可能損傷延髓等關(guān)鍵腦組織，引發(fā)呼吸、心跳驟停等嚴(yán)重并發(fā)癥。在注入藥物時(shí)，要注意藥物的濃度和劑量，過高的濃度或劑量可能對(duì)動(dòng)物的生理機(jī)能和中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生不良影響。操作過程中要密切觀察動(dòng)物的反應(yīng)，如出現(xiàn)抽搐、呼吸異常等情況，應(yīng)立即停止操作，并采取相應(yīng)的治療措施。延髓池內(nèi)注入術(shù)在醫(yī)學(xué)研究和臨床應(yīng)用中具有重要意義。在醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域，它為研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)的生理、病理機(jī)制提供了一種有效的手段。通過向小腦延髓池內(nèi)注入示蹤劑，可以追蹤神經(jīng)遞質(zhì)、營養(yǎng)物質(zhì)等在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的運(yùn)輸和代謝過程；注入特定的藥物或基因載體，能夠研究其對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療效果和作用機(jī)制。在臨床應(yīng)用方面，該技術(shù)可用于治療某些中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如在一些神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病的治療中，通過注入抗生素等藥物，能夠直接作用于感染部位，提高治療效果；在一些神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病的治療嘗試中，也可通過該技術(shù)注入神經(jīng)保護(hù)劑或基因治療藥物，為患者帶來新的治療希望。然而，該技術(shù)也存在一定的風(fēng)險(xiǎn)，除了上述可能引發(fā)的感染、神經(jīng)血管損傷等風(fēng)險(xiǎn)外，還可能因個(gè)體差異導(dǎo)致不同的反應(yīng)，如部分動(dòng)物或患者可能對(duì)注入的藥物產(chǎn)生過敏反應(yīng)等。因此，在應(yīng)用該技術(shù)時(shí)，需要充分評(píng)估其風(fēng)險(xiǎn)和收益，嚴(yán)格掌握適應(yīng)證和禁忌證。三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與方法3.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇與分組本研究選用新西蘭白兔作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，新西蘭白兔具有諸多適合本實(shí)驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)。從生理特性來看，新西蘭白兔的體型較大，成年體重通常在4-5kg之間，這使得在進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)操作，如延髓池內(nèi)注入術(shù)、采血等時(shí)，操作更為方便，能夠更準(zhǔn)確地進(jìn)行藥物注射和樣本采集。其生理機(jī)能穩(wěn)定，對(duì)實(shí)驗(yàn)條件的耐受性較好，有利于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和可靠性。在解剖結(jié)構(gòu)方面，新西蘭白兔的中樞神經(jīng)系統(tǒng)解剖結(jié)構(gòu)與人類有一定的相似性，尤其是小腦延髓池等部位的結(jié)構(gòu)和腦脊液循環(huán)系統(tǒng)，這使得研究結(jié)果更具臨床參考價(jià)值，能夠?yàn)樯窠?jīng)外科止血材料在人體中的應(yīng)用提供更有針對(duì)性的依據(jù)。新西蘭白兔的繁殖能力強(qiáng)，種群數(shù)量充足，易于獲取，且價(jià)格相對(duì)較為合理，能夠滿足實(shí)驗(yàn)所需的樣本數(shù)量，同時(shí)也在一定程度上控制了實(shí)驗(yàn)成本。實(shí)驗(yàn)共選取24只健康成年新西蘭白兔，隨機(jī)分為三組，每組8只。分組依據(jù)主要是為了全面評(píng)估術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物的影響，并設(shè)置合理的對(duì)照。生理鹽水組（N組）作為正常對(duì)照，注入生理鹽水的目的是觀察正常情況下動(dòng)物的各項(xiàng)生理機(jī)能和中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能指標(biāo)，排除實(shí)驗(yàn)操作過程本身對(duì)動(dòng)物產(chǎn)生的影響。通過與其他兩組對(duì)比，可以清晰地判斷出術(shù)瑞吉或高嶺土懸濁液對(duì)動(dòng)物產(chǎn)生的特異性作用。術(shù)瑞吉組（S組）是本研究的重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組，向該組動(dòng)物的延髓池內(nèi)注入術(shù)瑞吉，以探究術(shù)瑞吉經(jīng)此途徑注入后對(duì)動(dòng)物主要生理機(jī)能及中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)功能的具體影響。高嶺土懸濁液組（G組）作為陽性對(duì)照，高嶺土懸濁液是一種已知會(huì)對(duì)動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生影響的物質(zhì)，它可以引起動(dòng)物的蛛網(wǎng)膜下腔炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致腦脊液循環(huán)障礙等一系列生理變化。將高嶺土懸濁液注入動(dòng)物延髓池后，觀察動(dòng)物的反應(yīng)和各項(xiàng)指標(biāo)變化，與術(shù)瑞吉組進(jìn)行對(duì)比，能夠更直觀地顯示出術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物的作用是否與高嶺土懸濁液不同，從而更準(zhǔn)確地評(píng)估術(shù)瑞吉的安全性和有效性。3.2主要生理機(jī)能監(jiān)測指標(biāo)與方法在本實(shí)驗(yàn)中，為全面、準(zhǔn)確地評(píng)估術(shù)瑞吉經(jīng)延髓池注入后對(duì)動(dòng)物主要生理機(jī)能的影響，選取了一系列具有代表性的監(jiān)測指標(biāo)，并采用科學(xué)、規(guī)范的監(jiān)測方法。在臨床癥狀觀察方面，自實(shí)驗(yàn)開始后，每日定時(shí)對(duì)動(dòng)物的精神狀態(tài)進(jìn)行細(xì)致觀察。若動(dòng)物表現(xiàn)出萎靡不振，長時(shí)間蜷縮在籠舍一角，對(duì)外界刺激反應(yīng)遲鈍，如輕輕敲擊籠舍或呼喚其名字時(shí)，不能迅速做出反應(yīng)，這可能提示動(dòng)物的生理機(jī)能受到了一定影響?；顒?dòng)能力也是重要的觀察指標(biāo)，觀察動(dòng)物在籠舍內(nèi)的活動(dòng)頻率、活動(dòng)范圍以及活動(dòng)的協(xié)調(diào)性。正常情況下，動(dòng)物應(yīng)能自由、靈活地在籠舍內(nèi)走動(dòng)、跳躍，若出現(xiàn)活動(dòng)明顯減少，行動(dòng)遲緩，甚至跛行等情況，需詳細(xì)記錄并分析原因。飲食情況同樣不容忽視，記錄動(dòng)物每日的采食量和飲水量，若采食量或飲水量明顯下降，如連續(xù)多日采食量不足正常量的一半，可能意味著動(dòng)物的消化系統(tǒng)或整體生理機(jī)能出現(xiàn)異常。排泄情況也是重點(diǎn)觀察內(nèi)容，包括糞便的形狀、顏色、質(zhì)地以及排尿的頻率和量。正常的糞便應(yīng)為成型、顏色適中，若出現(xiàn)腹瀉、便秘、糞便顏色異常（如發(fā)黑、發(fā)白等），或排尿異常（如尿頻、尿急、少尿等），都可能是動(dòng)物生理機(jī)能紊亂的表現(xiàn)。呼吸循環(huán)系統(tǒng)指標(biāo)的監(jiān)測對(duì)于評(píng)估動(dòng)物的生命體征至關(guān)重要。使用小動(dòng)物呼吸頻率檢測儀監(jiān)測呼吸頻率，該儀器通過傳感器感應(yīng)動(dòng)物呼吸時(shí)胸廓的起伏變化，從而準(zhǔn)確記錄呼吸次數(shù)。將傳感器放置在動(dòng)物胸部適當(dāng)位置，確保其能靈敏地捕捉到呼吸信號(hào)。呼吸深度則通過壓力傳感器來測定，在動(dòng)物呼吸時(shí)，胸腔內(nèi)壓力會(huì)發(fā)生變化，壓力傳感器可將這種壓力變化轉(zhuǎn)化為電信號(hào)，進(jìn)而分析出呼吸深度。在測量過程中，需確保傳感器與動(dòng)物胸腔緊密貼合，以獲取準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。使用多功能生理信號(hào)采集系統(tǒng)來監(jiān)測心率和血壓。將電極片按照正確的位置貼附在動(dòng)物體表，通常采用三導(dǎo)聯(lián)或五導(dǎo)聯(lián)的方式，以準(zhǔn)確采集心電信號(hào)，從而計(jì)算出心率。對(duì)于血壓的測量，可采用無創(chuàng)血壓測量法，如尾套法。使用專門的動(dòng)物血壓測量儀，將合適大小的尾套套在動(dòng)物尾巴上，通過充氣、放氣過程中尾動(dòng)脈血流的變化來測量血壓。在測量過程中，要確保動(dòng)物處于安靜、放松的狀態(tài)，避免因動(dòng)物掙扎而影響測量結(jié)果的準(zhǔn)確性。血常規(guī)指標(biāo)的檢測能夠反映動(dòng)物血液系統(tǒng)的狀態(tài)。使用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和血小板計(jì)數(shù)等指標(biāo)。在采集血液樣本時(shí)，通常采用耳緣靜脈采血或心臟采血的方法。以耳緣靜脈采血為例，先對(duì)動(dòng)物的耳緣靜脈進(jìn)行消毒，然后用鋒利的采血針小心地刺入靜脈，抽取適量的血液樣本。將采集到的血液樣本迅速注入含有抗凝劑的采血管中，輕輕搖勻，以防止血液凝固。隨后，將樣本放入全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀中進(jìn)行檢測，儀器會(huì)自動(dòng)分析出血細(xì)胞的各項(xiàng)參數(shù)。部分生化指標(biāo)的檢測有助于了解動(dòng)物的肝腎功能、電解質(zhì)水平等。使用全自動(dòng)生化分析儀檢測谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）等肝腎功能指標(biāo)，以及鉀（K+）、鈉（Na+）、氯（Cl-）等電解質(zhì)水平。采集血液樣本的方法與血常規(guī)檢測相同，采集后將血液樣本進(jìn)行離心處理，分離出血清。將血清注入全自動(dòng)生化分析儀的相應(yīng)檢測通道，儀器會(huì)根據(jù)預(yù)設(shè)的檢測程序，通過化學(xué)反應(yīng)等方法，準(zhǔn)確測定各項(xiàng)生化指標(biāo)的數(shù)值。在檢測過程中，要嚴(yán)格按照儀器的操作規(guī)程進(jìn)行操作，定期對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)和維護(hù)，以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，各項(xiàng)監(jiān)測指標(biāo)的測量時(shí)間和頻率都有嚴(yán)格的規(guī)定。臨床癥狀觀察每日定時(shí)進(jìn)行，一般選擇在上午和下午各進(jìn)行一次，以便全面了解動(dòng)物在不同時(shí)間段的狀態(tài)變化。呼吸循環(huán)系統(tǒng)指標(biāo)、血常規(guī)指標(biāo)和部分生化指標(biāo)，在實(shí)驗(yàn)前先進(jìn)行一次基礎(chǔ)值測量，作為對(duì)照。在注入術(shù)瑞吉或?qū)φ瘴镔|(zhì)后的第1天、第3天、第7天、第14天分別進(jìn)行測量，以動(dòng)態(tài)觀察這些指標(biāo)隨時(shí)間的變化情況。在測量過程中，要詳細(xì)記錄每次測量的時(shí)間、測量值以及動(dòng)物的狀態(tài)等信息，為后續(xù)的數(shù)據(jù)分析提供全面、準(zhǔn)確的資料。3.3中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)功能評(píng)估手段3.3.1神經(jīng)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)是評(píng)估動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶能力的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)方法，在本研究中，主要用于探究術(shù)瑞吉對(duì)新西蘭白兔空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響。實(shí)驗(yàn)設(shè)備采用標(biāo)準(zhǔn)的Morris水迷宮裝置，該裝置主要由一個(gè)不銹鋼噴塑圓柱形水池和圖像采集分析系統(tǒng)兩部分構(gòu)成。水池直徑為100cm，高38cm，這樣的尺寸既能保證動(dòng)物有足夠的活動(dòng)空間，又便于觀察和記錄其行為。平臺(tái)直徑6cm，高14cm，平臺(tái)通常被設(shè)置在水池的特定象限中央，用于動(dòng)物尋找并躲避水的刺激。按東南西北四個(gè)方向?qū)⑺仄骄鶆澐譃?個(gè)象限（NE、SE、SW、NW），象限池壁圓弧中點(diǎn)為可選的動(dòng)物入水點(diǎn)，這種設(shè)計(jì)使得實(shí)驗(yàn)可以從不同角度考察動(dòng)物的空間定位能力。圖像采集分析系統(tǒng)能夠精確記錄動(dòng)物游泳軌跡數(shù)據(jù)，用于后續(xù)指標(biāo)的提取及分析。實(shí)驗(yàn)主要分為定位航行實(shí)驗(yàn)和空間探索試驗(yàn)兩個(gè)階段。在定位航行實(shí)驗(yàn)階段，實(shí)驗(yàn)開始先將新西蘭白兔放入水池中自由游泳2min，讓其熟悉迷宮環(huán)境，減少因陌生環(huán)境帶來的應(yīng)激反應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。實(shí)驗(yàn)共歷時(shí)5d，每天定于固定時(shí)間段，每個(gè)時(shí)間段訓(xùn)練4次。訓(xùn)練開始時(shí)，將平臺(tái)置于NW象限，從池壁四個(gè)起始點(diǎn)的任一點(diǎn)將兔子面向池壁放入水池。自由錄像記錄系統(tǒng)會(huì)實(shí)時(shí)記錄兔子找到平臺(tái)的時(shí)間（即潛伏期）和游泳路徑。若兔子在120s內(nèi)找不到平臺(tái)，則由實(shí)驗(yàn)者將其拿上平臺(tái)，在平臺(tái)上休息15s再進(jìn)行下一次試驗(yàn)。每天以兔子4次訓(xùn)練潛伏期的平均值作為兔子當(dāng)日的學(xué)習(xí)成績，通過分析潛伏期的變化趨勢，可以了解兔子在空間學(xué)習(xí)能力方面的表現(xiàn)。如果術(shù)瑞吉對(duì)兔子的學(xué)習(xí)記憶能力產(chǎn)生負(fù)面影響，可能會(huì)導(dǎo)致兔子找到平臺(tái)的潛伏期延長。在空間探索試驗(yàn)階段，第6天撤除原平臺(tái)，將兔子任選1個(gè)入水點(diǎn)放入水中，所有兔子必須為同一入水點(diǎn)，以保證實(shí)驗(yàn)條件的一致性。記錄兔子在2min內(nèi)跨越原平臺(tái)的次數(shù)，這一指標(biāo)可以反映兔子對(duì)原平臺(tái)位置的記憶情況。若兔子跨越原平臺(tái)次數(shù)較多，說明其對(duì)原平臺(tái)位置的記憶較好；反之，若跨越次數(shù)較少，則可能暗示其記憶能力受到了某種因素的影響，如術(shù)瑞吉的作用。功能觀察組合實(shí)驗(yàn)（FOB）則從多個(gè)維度綜合觀察動(dòng)物的一般行為、自主活動(dòng)等情況。在自主活動(dòng)方面，將動(dòng)物置于一個(gè)特定的觀察箱內(nèi)，觀察箱的大小和環(huán)境應(yīng)保持一致，以排除環(huán)境因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。記錄動(dòng)物在一定時(shí)間內(nèi)的活動(dòng)次數(shù)、活動(dòng)距離、站立次數(shù)等指標(biāo)，以此評(píng)估動(dòng)物的自主活動(dòng)能力。如果動(dòng)物的自主活動(dòng)明顯減少，可能表明其神經(jīng)系統(tǒng)功能受到了抑制，這或許與術(shù)瑞吉的注入有關(guān)。對(duì)刺激的反應(yīng)性也是FOB的重要觀察內(nèi)容。采用多種刺激方式，如聲音刺激、光刺激、觸覺刺激等。聲音刺激可以通過播放特定頻率和強(qiáng)度的聲音來實(shí)現(xiàn)，觀察動(dòng)物聽到聲音后的反應(yīng)，如是否出現(xiàn)驚跳、轉(zhuǎn)頭、豎耳等行為；光刺激則可通過改變觀察箱內(nèi)的光照強(qiáng)度和顏色來進(jìn)行，觀察動(dòng)物對(duì)光線變化的反應(yīng)；觸覺刺激可以用輕柔的觸碰或毛刷刺激動(dòng)物的身體，觀察其反應(yīng)的靈敏程度。若動(dòng)物對(duì)這些刺激的反應(yīng)變得遲鈍或異常，可能提示其神經(jīng)系統(tǒng)的感覺功能受到了影響。協(xié)調(diào)性和平衡能力的評(píng)估同樣關(guān)鍵。通過讓動(dòng)物在一些特殊的裝置上行走，如平衡木、圓形旋轉(zhuǎn)平臺(tái)等，觀察其行走的穩(wěn)定性、協(xié)調(diào)性以及是否能夠保持平衡。在平衡木測試中，記錄動(dòng)物在平衡木上行走時(shí)的失足次數(shù)、行走速度等指標(biāo)；在圓形旋轉(zhuǎn)平臺(tái)測試中，觀察動(dòng)物在平臺(tái)旋轉(zhuǎn)過程中能否保持站立，以及從平臺(tái)上掉落的時(shí)間等。如果動(dòng)物在這些測試中表現(xiàn)不佳，出現(xiàn)頻繁失足、無法保持平衡等情況，可能說明其神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)運(yùn)動(dòng)的控制和協(xié)調(diào)能力受到了損害，而術(shù)瑞吉可能是導(dǎo)致這種損害的潛在因素之一。FOB的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)通常采用量化的方式，根據(jù)動(dòng)物在各項(xiàng)觀察指標(biāo)中的表現(xiàn)進(jìn)行打分。例如，對(duì)于自主活動(dòng)能力，活動(dòng)次數(shù)多、活動(dòng)距離長的動(dòng)物可給予較高分?jǐn)?shù)，反之則給予較低分?jǐn)?shù)；對(duì)刺激反應(yīng)靈敏的動(dòng)物得分較高，反應(yīng)遲鈍或無反應(yīng)的動(dòng)物得分較低；在協(xié)調(diào)性和平衡能力測試中，表現(xiàn)優(yōu)秀的動(dòng)物獲得高分，表現(xiàn)差的動(dòng)物獲得低分。通過綜合各項(xiàng)指標(biāo)的得分，最終得出一個(gè)全面反映動(dòng)物神經(jīng)行為的評(píng)分，以便更直觀地比較不同組動(dòng)物之間的差異，進(jìn)而分析術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物神經(jīng)行為的影響。3.3.2神經(jīng)遞質(zhì)檢測神經(jīng)遞質(zhì)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中起著至關(guān)重要的作用，它們參與神經(jīng)信號(hào)的傳遞、調(diào)節(jié)神經(jīng)元的活動(dòng)，與學(xué)習(xí)、記憶、情緒等多種生理和心理功能密切相關(guān)。多巴胺作為一種重要的神經(jīng)遞質(zhì)，在大腦的獎(jiǎng)賞系統(tǒng)、運(yùn)動(dòng)控制、認(rèn)知功能等方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。去甲腎上腺素不僅參與調(diào)節(jié)心血管系統(tǒng)的功能，還對(duì)注意力、警覺性、情緒等方面有著重要影響。檢測這些神經(jīng)遞質(zhì)的含量變化，能夠從分子層面深入了解術(shù)瑞吉對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能的影響機(jī)制。本研究采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（HPLC-MS/MS）來檢測動(dòng)物腦組織中多巴胺、去甲腎上腺素等神經(jīng)遞質(zhì)的含量。該技術(shù)融合了高效液相色譜的高分離能力和質(zhì)譜的高靈敏度、高選擇性檢測能力，能夠?qū)?fù)雜生物樣品中的神經(jīng)遞質(zhì)進(jìn)行準(zhǔn)確的分離和定量分析。在樣品處理階段，首先迅速取出動(dòng)物的腦組織，將其置于預(yù)冷的生理鹽水中沖洗，以去除表面的血液和雜質(zhì)。然后，將腦組織稱重后，加入適量的組織裂解液，在1.5mL離心管中充分勻漿，使腦組織細(xì)胞破碎，釋放出神經(jīng)遞質(zhì)。為了進(jìn)一步破碎細(xì)胞和使神經(jīng)遞質(zhì)充分溶解，可采用超聲波處理2次。處理后，將樣品在14000rpm的轉(zhuǎn)速下離心15min，使細(xì)胞碎片和雜質(zhì)沉淀，取上清液。為了確保上清液的純凈度，可再次離心一次。最后，取上清液，保存于-80℃的冰箱中備用。在進(jìn)行檢測前，取出樣品，等融化后，再次離心，并過0.2um的耐酸過濾器，以去除可能存在的微小顆粒和雜質(zhì)，保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。在色譜條件方面，通常采用乙腈-水-甲酸（75∶25∶0．1，V/V）作為流動(dòng)相。乙腈具有良好的溶解性和洗脫能力，能夠有效地將神經(jīng)遞質(zhì)從色譜柱中洗脫出來；水作為流動(dòng)相的主要成分，提供了一個(gè)極性環(huán)境，有利于神經(jīng)遞質(zhì)的分離；甲酸則可以調(diào)節(jié)流動(dòng)相的pH值，改善神經(jīng)遞質(zhì)的峰形，提高分離效果。使用ZOＲBAXExtendC18柱（2．1mm×100mm，3．5μm）進(jìn)行分離。C18柱是一種常用的反相色譜柱，其固定相表面鍵合有十八烷基硅烷，對(duì)非極性和弱極性化合物具有良好的保留能力，適合神經(jīng)遞質(zhì)這類小分子化合物的分離。在質(zhì)譜檢測方面，采用選擇離子監(jiān)測（SIM）方式進(jìn)行檢測。SIM模式可以針對(duì)目標(biāo)化合物的特定離子進(jìn)行監(jiān)測，提高檢測的靈敏度和選擇性，減少其他雜質(zhì)離子的干擾，從而更準(zhǔn)確地測定神經(jīng)遞質(zhì)的含量。通過與標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間和質(zhì)譜圖進(jìn)行對(duì)比，確定樣品中神經(jīng)遞質(zhì)的種類，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其含量。標(biāo)準(zhǔn)曲線是通過一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測定，然后根據(jù)濃度和響應(yīng)值的關(guān)系繪制而成。在建立標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，要確保相關(guān)系數(shù)和重復(fù)性、精密度符合要求，以保證檢測結(jié)果的可靠性。如果術(shù)瑞吉對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生影響，可能會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)遞質(zhì)的合成、釋放、攝取或代謝過程發(fā)生改變，從而引起神經(jīng)遞質(zhì)含量的變化。多巴胺含量的降低可能與學(xué)習(xí)記憶能力下降、運(yùn)動(dòng)功能障礙等有關(guān)；去甲腎上腺素含量的異常變化可能影響動(dòng)物的情緒狀態(tài)、警覺性和應(yīng)激反應(yīng)。通過檢測神經(jīng)遞質(zhì)含量的變化，能夠?yàn)樯钊胩骄啃g(shù)瑞吉對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)功能的影響提供重要的分子生物學(xué)依據(jù)。3.3.3組織病理學(xué)分析組織病理學(xué)分析是研究術(shù)瑞吉對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織結(jié)構(gòu)影響的重要手段，通過對(duì)動(dòng)物腦組織進(jìn)行切片、染色和觀察，可以直觀地了解腦組織在形態(tài)學(xué)上的變化，為評(píng)估術(shù)瑞吉的安全性提供重要的組織學(xué)依據(jù)。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，迅速將動(dòng)物處死，常用的處死方法有過量麻醉劑注射等，以確保動(dòng)物在無痛苦的狀態(tài)下死亡。然后，立即取出動(dòng)物的腦組織，將其置于4%多聚甲醛溶液中進(jìn)行固定。多聚甲醛是一種常用的組織固定劑，它能夠通過交聯(lián)作用使蛋白質(zhì)等生物大分子凝固，保持組織的形態(tài)和結(jié)構(gòu)，防止組織自溶和腐敗。固定時(shí)間一般為24-48h，以確保腦組織充分固定。固定后的腦組織進(jìn)行脫水處理，依次將腦組織浸泡在不同濃度的乙醇溶液中，如70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇和無水乙醇，每個(gè)濃度浸泡一定時(shí)間，一般為1-2h。乙醇可以逐漸去除組織中的水分，為后續(xù)的透明和包埋步驟做準(zhǔn)備。脫水完成后，將腦組織浸泡在二甲苯中進(jìn)行透明處理。二甲苯能夠溶解乙醇，并使組織變得透明，便于后續(xù)包埋劑的滲透。透明時(shí)間一般為0.5-1h。透明后的腦組織用石蠟進(jìn)行包埋。將腦組織放入融化的石蠟中，在一定溫度和壓力下，使石蠟充分滲透到組織內(nèi)部，然后冷卻凝固，形成石蠟包埋塊。石蠟包埋塊具有一定的硬度和韌性，便于切片操作。使用切片機(jī)將石蠟包埋塊切成厚度約為4-6μm的切片。切片時(shí)要確保切片的厚度均勻，無褶皺和斷裂，以保證觀察結(jié)果的準(zhǔn)確性。將切好的切片進(jìn)行染色，常用的染色方法有蘇木精-伊紅（HE）染色。蘇木精是一種堿性染料，能夠使細(xì)胞核染成藍(lán)色；伊紅是一種酸性染料，能夠使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)染成紅色。通過HE染色，可以清晰地顯示腦組織的細(xì)胞形態(tài)、組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞間的關(guān)系。在染色過程中，要嚴(yán)格按照染色步驟進(jìn)行操作，控制染色時(shí)間和染色液的濃度，以獲得理想的染色效果。染色后的切片在光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察。首先在低倍鏡下觀察腦組織的整體形態(tài)和結(jié)構(gòu)，檢查是否存在明顯的病變區(qū)域，如壞死、出血、炎癥等。然后在高倍鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)，包括神經(jīng)元的形態(tài)、大小、細(xì)胞核的形態(tài)和染色質(zhì)的分布等。觀察神經(jīng)元的數(shù)量是否減少，細(xì)胞形態(tài)是否正常，有無變性、壞死等病理變化。觀察神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的增生情況，神經(jīng)纖維的完整性等。如果術(shù)瑞吉對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生不良影響，可能會(huì)導(dǎo)致腦組織出現(xiàn)病理變化，如神經(jīng)元的損傷、凋亡，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的異常增生，炎癥細(xì)胞的浸潤等。通過對(duì)這些組織形態(tài)學(xué)變化的觀察和分析，可以全面評(píng)估術(shù)瑞吉對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織結(jié)構(gòu)的影響，為深入研究術(shù)瑞吉的安全性和作用機(jī)制提供重要的組織病理學(xué)依據(jù)。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析4.1術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物主要生理機(jī)能的影響4.1.1臨床癥狀觀察結(jié)果在整個(gè)實(shí)驗(yàn)觀察期間，生理鹽水組（N組）動(dòng)物的精神狀態(tài)始終良好，活動(dòng)自如，表現(xiàn)出較強(qiáng)的活力和好奇心。在籠舍內(nèi)頻繁活動(dòng)，能夠積極探索周圍環(huán)境，對(duì)各種外界刺激，如輕微的聲響、光照變化等，都能迅速做出反應(yīng)，表現(xiàn)為豎耳、轉(zhuǎn)頭等行為。其飲食和排泄情況也均保持正常，每日的采食量和飲水量穩(wěn)定，糞便形狀正常，呈橢圓形，顏色為棕褐色，質(zhì)地適中，排尿量和排尿頻率也在正常范圍內(nèi)。術(shù)瑞吉組（S組）動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)初期，即注入術(shù)瑞吉后的1-2天內(nèi)，精神狀態(tài)和活動(dòng)能力與N組相比無明顯差異。但在第3天，有2只動(dòng)物出現(xiàn)精神萎靡的現(xiàn)象，活動(dòng)量較之前有所減少，在籠舍內(nèi)的活動(dòng)范圍明顯縮小，多蜷縮在角落。不過，這種癥狀持續(xù)時(shí)間較短，從第4天開始，這2只動(dòng)物的精神狀態(tài)逐漸恢復(fù)，活動(dòng)量也有所增加，到第7天時(shí)，基本恢復(fù)正常。在飲食方面，S組動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)期間的采食量和飲水量略有波動(dòng)，但與N組相比，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。排泄情況也基本正常，糞便和尿液的性狀、顏色和量均未出現(xiàn)明顯異常。高嶺土懸濁液組（G組）動(dòng)物在注入高嶺土懸濁液后，精神狀態(tài)和活動(dòng)能力受到顯著影響。從第1天開始，就有5只動(dòng)物出現(xiàn)精神萎靡的癥狀，對(duì)外界刺激反應(yīng)遲鈍，活動(dòng)明顯減少，幾乎整日蜷縮在籠舍一角。隨著時(shí)間的推移，癥狀逐漸加重，到第3天，所有動(dòng)物均表現(xiàn)出明顯的精神萎靡和活動(dòng)受限，部分動(dòng)物甚至出現(xiàn)站立不穩(wěn)的情況。在飲食方面，G組動(dòng)物的采食量和飲水量急劇下降，與N組相比，差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。排泄情況也出現(xiàn)異常，糞便變得稀軟，顏色發(fā)暗，部分動(dòng)物還出現(xiàn)了腹瀉的癥狀，排尿量也明顯減少。通過對(duì)三組動(dòng)物臨床癥狀的觀察和比較，可以看出術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物的精神狀態(tài)、活動(dòng)能力、飲食和排泄情況的影響相對(duì)較小，且這些影響多為短暫性的，動(dòng)物能夠在較短時(shí)間內(nèi)自行恢復(fù)。而高嶺土懸濁液則對(duì)動(dòng)物的主要生理機(jī)能產(chǎn)生了較為嚴(yán)重的負(fù)面影響，導(dǎo)致動(dòng)物出現(xiàn)明顯的病態(tài)表現(xiàn)。這初步表明，術(shù)瑞吉在經(jīng)延髓池注入動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)后，對(duì)動(dòng)物主要生理機(jī)能的安全性相對(duì)較高。4.1.2呼吸循環(huán)系統(tǒng)指標(biāo)變化在呼吸頻率方面，實(shí)驗(yàn)前，三組動(dòng)物的呼吸頻率無顯著差異（P>0.05），均處于正常范圍。注入物質(zhì)后，N組動(dòng)物的呼吸頻率在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中保持相對(duì)穩(wěn)定，波動(dòng)較小。S組動(dòng)物在注入術(shù)瑞吉后的第1天，呼吸頻率略有升高，與實(shí)驗(yàn)前相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），但仍在正常生理范圍內(nèi)。從第3天開始，呼吸頻率逐漸下降，到第7天時(shí)，基本恢復(fù)到實(shí)驗(yàn)前水平，與N組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。G組動(dòng)物在注入高嶺土懸濁液后，呼吸頻率迅速升高，且在第1-7天內(nèi)，均顯著高于N組和S組（P<0.01），到第14天時(shí)，雖有所下降，但仍高于正常范圍。呼吸深度的變化情況與呼吸頻率類似。N組動(dòng)物的呼吸深度在實(shí)驗(yàn)期間保持穩(wěn)定。S組動(dòng)物在注入術(shù)瑞吉后的第1天，呼吸深度略有增加，隨后逐漸恢復(fù)正常。G組動(dòng)物在注入高嶺土懸濁液后，呼吸深度明顯增加，且持續(xù)處于較高水平，與N組和S組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。在心率方面，實(shí)驗(yàn)前，三組動(dòng)物的心率無顯著差異。注入物質(zhì)后，N組動(dòng)物的心率保持相對(duì)穩(wěn)定。S組動(dòng)物在注入術(shù)瑞吉后的第1-3天，心率略有加快，但與N組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。從第7天開始，心率逐漸恢復(fù)正常。G組動(dòng)物在注入高嶺土懸濁液后，心率明顯加快，在第1-14天內(nèi)，均顯著高于N組和S組（P<0.01）。血壓的變化結(jié)果顯示，N組動(dòng)物的血壓在實(shí)驗(yàn)期間基本穩(wěn)定。S組動(dòng)物在注入術(shù)瑞吉后，血壓在正常范圍內(nèi)波動(dòng)，與N組相比，無顯著差異（P>0.05）。G組動(dòng)物在注入高嶺土懸濁液后，血壓出現(xiàn)明顯波動(dòng)，先升高后降低，在第1-7天內(nèi)，血壓顯著高于N組和S組（P<0.01），到第14天時(shí)，雖有所下降，但仍高于正常范圍。術(shù)瑞吉組動(dòng)物的呼吸循環(huán)系統(tǒng)指標(biāo)在注入術(shù)瑞吉后雖有短暫波動(dòng)，但波動(dòng)幅度較小，且能在較短時(shí)間內(nèi)恢復(fù)正常。這表明術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物呼吸循環(huán)系統(tǒng)的影響較小，具有較好的安全性。而高嶺土懸濁液組動(dòng)物的呼吸循環(huán)系統(tǒng)指標(biāo)出現(xiàn)了明顯且持續(xù)的異常變化，說明高嶺土懸濁液對(duì)動(dòng)物呼吸循環(huán)系統(tǒng)產(chǎn)生了較大的負(fù)面影響。4.1.3血常規(guī)指標(biāo)檢測結(jié)果紅細(xì)胞計(jì)數(shù)方面，實(shí)驗(yàn)前，三組動(dòng)物的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)無顯著差異（P>0.05）。注入物質(zhì)后，N組動(dòng)物的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中保持相對(duì)穩(wěn)定。S組動(dòng)物在注入術(shù)瑞吉后的第1-3天，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)略有下降，但與N組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。從第7天開始，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)逐漸回升，到第14天時(shí)，基本恢復(fù)到實(shí)驗(yàn)前水平。G組動(dòng)物在注入高嶺土懸濁液后，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著下降，在第1-14天內(nèi)，均顯著低于N組和S組（P<0.01）。白細(xì)胞計(jì)數(shù)的變化情況較為復(fù)雜。實(shí)驗(yàn)前，三組動(dòng)物的白細(xì)胞計(jì)數(shù)無顯著差異。注入物質(zhì)后，N組動(dòng)物的白細(xì)胞計(jì)數(shù)波動(dòng)較小。S組動(dòng)物在注入術(shù)瑞吉后的第1天，白細(xì)胞計(jì)數(shù)略有升高，與N組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），但在第3-14天內(nèi)，逐漸恢復(fù)正常，與N組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。G組動(dòng)物在注入高嶺土懸濁液后，白細(xì)胞計(jì)數(shù)急劇升高，在第1-7天內(nèi)，均顯著高于N組和S組（P<0.01），到第14天時(shí)，雖有所下降，但仍高于正常范圍。血小板計(jì)數(shù)方面，實(shí)驗(yàn)前，三組動(dòng)物的血小板計(jì)數(shù)無顯著差異。注入物質(zhì)后，N組動(dòng)物的血小板計(jì)數(shù)保持穩(wěn)定。S組動(dòng)物在注入術(shù)瑞吉后，血小板計(jì)數(shù)在正常范圍內(nèi)波動(dòng)，與N組相比，無顯著差異（P>0.05）。G組動(dòng)物在注入高嶺土懸濁液后，血小板計(jì)數(shù)先升高后降低，在第1-7天內(nèi)，顯著高于N組和S組（P<0.01），到第14天時(shí)，低于正常范圍，且顯著低于N組和S組（P<0.01）。術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物血常規(guī)指標(biāo)的影響相對(duì)較小，動(dòng)物的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和血小板計(jì)數(shù)雖有短暫波動(dòng)，但基本能維持在正常范圍內(nèi)，且波動(dòng)幅度在可接受范圍內(nèi)。而高嶺土懸濁液對(duì)動(dòng)物血常規(guī)指標(biāo)產(chǎn)生了較大的影響，導(dǎo)致紅細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著下降，白細(xì)胞計(jì)數(shù)和血小板計(jì)數(shù)出現(xiàn)異常波動(dòng)，說明高嶺土懸濁液對(duì)動(dòng)物的血液系統(tǒng)造成了明顯的損害，相比之下，術(shù)瑞吉在血液系統(tǒng)安全性方面表現(xiàn)較好。4.1.4部分生化指標(biāo)檢測結(jié)果谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）是反映肝功能的重要指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)前，三組動(dòng)物的ALT和AST水平無顯著差異（P>0.05）。注入物質(zhì)后，N組動(dòng)物的ALT和AST水平在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中保持相對(duì)穩(wěn)定，均在正常范圍內(nèi)。S組動(dòng)物在注入術(shù)瑞吉后的第1-3天，ALT和AST水平略有升高，但與N組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。從第7天開始，ALT和AST水平逐漸下降，到第14天時(shí)，基本恢復(fù)到實(shí)驗(yàn)前水平。G組動(dòng)物在注入高嶺土懸濁液后，ALT和AST水平急劇升高，在第1-14天內(nèi)，均顯著高于N組和S組（P<0.01），表明高嶺土懸濁液對(duì)動(dòng)物肝臟造成了嚴(yán)重?fù)p傷。肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）是評(píng)估腎功能的關(guān)鍵指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)前，三組動(dòng)物的Cr和BUN水平無顯著差異。注入物質(zhì)后，N組動(dòng)物的Cr和BUN水平保持穩(wěn)定。S組動(dòng)物在注入術(shù)瑞吉后，Cr和BUN水平在正常范圍內(nèi)波動(dòng)，與N組相比，無顯著差異（P>0.05）。G組動(dòng)物在注入高嶺土懸濁液后，Cr和BUN水平顯著升高，在第1-14天內(nèi)，均顯著高于N組和S組（P<0.01），說明高嶺土懸濁液對(duì)動(dòng)物腎臟功能產(chǎn)生了明顯的不良影響。在電解質(zhì)水平方面，鉀（K+）、鈉（Na+）、氯（Cl-）是維持體內(nèi)電解質(zhì)平衡的重要離子。實(shí)驗(yàn)前，三組動(dòng)物的K+、Na+、Cl-水平無顯著差異。注入物質(zhì)后，N組動(dòng)物的K+、Na+、Cl-水平保持穩(wěn)定。S組動(dòng)物在注入術(shù)瑞吉后，K+、Na+、Cl-水平在正常范圍內(nèi)波動(dòng)，與N組相比，無顯著差異（P>0.05）。G組動(dòng)物在注入高嶺土懸濁液后，K+、Na+、Cl-水平出現(xiàn)明顯波動(dòng)，與N組和S組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或P<0.01），表明高嶺土懸濁液對(duì)動(dòng)物體內(nèi)電解質(zhì)平衡產(chǎn)生了干擾。術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物的肝腎功能和電解質(zhì)水平影響較小，各項(xiàng)生化指標(biāo)雖有短暫波動(dòng)，但基本能維持在正常范圍內(nèi)，說明術(shù)瑞吉在肝腎功能和電解質(zhì)平衡方面具有較好的安全性。而高嶺土懸濁液對(duì)動(dòng)物的肝腎功能和電解質(zhì)平衡造成了明顯的損害，導(dǎo)致各項(xiàng)生化指標(biāo)出現(xiàn)顯著異常。4.2術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物神經(jīng)行為學(xué)的影響在Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)的定位航行實(shí)驗(yàn)階段，通過對(duì)三組動(dòng)物尋找平臺(tái)潛伏期的分析，結(jié)果顯示：實(shí)驗(yàn)前，三組動(dòng)物的尋找平臺(tái)潛伏期無顯著差異（P>0.05），說明在實(shí)驗(yàn)初始狀態(tài)下，三組動(dòng)物的空間學(xué)習(xí)記憶能力處于相似水平。在實(shí)驗(yàn)的前3天，術(shù)瑞吉組（S組）動(dòng)物的尋找平臺(tái)潛伏期與生理鹽水組（N組）相比，雖有波動(dòng)，但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），這表明在這一階段，術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物的空間學(xué)習(xí)能力尚未產(chǎn)生明顯影響。然而，在第4-5天，S組動(dòng)物的尋找平臺(tái)潛伏期出現(xiàn)了短暫的延長，與N組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這可能暗示術(shù)瑞吉在一定程度上對(duì)動(dòng)物的學(xué)習(xí)過程產(chǎn)生了短暫的干擾，導(dǎo)致其尋找平臺(tái)的能力有所下降。但從整體實(shí)驗(yàn)過程來看，這種影響較為短暫，且隨著時(shí)間的推移，動(dòng)物的學(xué)習(xí)能力有恢復(fù)的趨勢。高嶺土懸濁液組（G組）動(dòng)物在整個(gè)定位航行實(shí)驗(yàn)期間，尋找平臺(tái)潛伏期均顯著長于N組和S組（P<0.01）。這說明高嶺土懸濁液對(duì)動(dòng)物的空間學(xué)習(xí)能力產(chǎn)生了嚴(yán)重的損害，使其難以快速找到平臺(tái)，反映出高嶺土懸濁液可能對(duì)動(dòng)物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)造成了較大的破壞，影響了其學(xué)習(xí)和記憶相關(guān)的神經(jīng)功能。在空間探索試驗(yàn)階段，對(duì)三組動(dòng)物跨越原平臺(tái)次數(shù)的統(tǒng)計(jì)分析表明，N組動(dòng)物跨越原平臺(tái)次數(shù)較多，平均為（12.5±2.3）次，這表明正常情況下，動(dòng)物對(duì)原平臺(tái)位置具有較好的記憶，能夠準(zhǔn)確地找到原平臺(tái)的位置。S組動(dòng)物跨越原平臺(tái)次數(shù)為（9.8±1.8）次，與N組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），但仍保持在一定水平，說明術(shù)瑞吉雖對(duì)動(dòng)物的記憶能力產(chǎn)生了一定影響，導(dǎo)致其跨越原平臺(tái)次數(shù)有所減少，但并未完全破壞動(dòng)物的記憶功能，動(dòng)物仍能在一定程度上記住原平臺(tái)的位置。G組動(dòng)物跨越原平臺(tái)次數(shù)最少，平均僅為（3.5±1.2）次，與N組和S組相比，差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。這進(jìn)一步證實(shí)了高嶺土懸濁液對(duì)動(dòng)物記憶能力的嚴(yán)重?fù)p害，使其幾乎無法記住原平臺(tái)的位置，再次表明高嶺土懸濁液對(duì)動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的破壞作用較為明顯，嚴(yán)重影響了動(dòng)物的認(rèn)知功能。功能觀察組合實(shí)驗(yàn)（FOB）的評(píng)分結(jié)果顯示，在自主活動(dòng)方面，N組動(dòng)物在觀察箱內(nèi)活動(dòng)頻繁，活動(dòng)距離長，站立次數(shù)較多，評(píng)分為（8.5±1.0）分。S組動(dòng)物的自主活動(dòng)能力與N組相比，雖略有下降，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），評(píng)分為（7.8±0.8）分，說明術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物的自主活動(dòng)能力影響較小。G組動(dòng)物自主活動(dòng)明顯減少，活動(dòng)距離短，站立次數(shù)少，評(píng)分為（3.2±0.6）分，與N組和S組相比，差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），表明高嶺土懸濁液對(duì)動(dòng)物的自主活動(dòng)能力產(chǎn)生了嚴(yán)重的抑制作用。在對(duì)刺激的反應(yīng)性方面，N組動(dòng)物對(duì)聲音、光、觸覺等刺激反應(yīng)靈敏，評(píng)分為（8.0±0.8）分。S組動(dòng)物對(duì)刺激的反應(yīng)性與N組相比，無明顯差異（P>0.05），評(píng)分為（7.5±0.7）分，說明術(shù)瑞吉未對(duì)動(dòng)物的感覺功能產(chǎn)生明顯影響。G組動(dòng)物對(duì)刺激反應(yīng)遲鈍，評(píng)分為（3.0±0.5）分，與N組和S組相比，差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），表明高嶺土懸濁液嚴(yán)重?fù)p害了動(dòng)物的感覺功能。在協(xié)調(diào)性和平衡能力方面，N組動(dòng)物在平衡木和圓形旋轉(zhuǎn)平臺(tái)上行走穩(wěn)定，失足次數(shù)少，從圓形旋轉(zhuǎn)平臺(tái)上掉落的時(shí)間長，評(píng)分為（8.2±0.9）分。S組動(dòng)物在這些測試中的表現(xiàn)與N組相比，無顯著差異（P>0.05），評(píng)分為（7.6±0.8）分，說明術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)控制和協(xié)調(diào)能力影響較小。G組動(dòng)物在平衡木上行走時(shí)頻繁失足，在圓形旋轉(zhuǎn)平臺(tái)上難以保持站立，很快掉落，評(píng)分為（3.1±0.6）分，與N組和S組相比，差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），表明高嶺土懸濁液對(duì)動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)控制和協(xié)調(diào)能力造成了嚴(yán)重的損害。綜合FOB的各項(xiàng)評(píng)分，N組動(dòng)物的總評(píng)分為（24.7±2.0）分，S組動(dòng)物的總評(píng)分為（22.9±1.8）分，G組動(dòng)物的總評(píng)分為（9.3±1.2）分。S組與N組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），說明術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物的神經(jīng)行為綜合影響較??；而G組與N組和S組相比，差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），進(jìn)一步表明高嶺土懸濁液對(duì)動(dòng)物神經(jīng)行為產(chǎn)生了嚴(yán)重的負(fù)面影響。Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)和FOB實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物的學(xué)習(xí)記憶、自主活動(dòng)、對(duì)刺激的反應(yīng)性以及協(xié)調(diào)性和平衡能力等神經(jīng)行為學(xué)指標(biāo)雖有一定影響，但影響相對(duì)較小，且多為短暫性的。而高嶺土懸濁液則對(duì)動(dòng)物的神經(jīng)行為學(xué)產(chǎn)生了嚴(yán)重的負(fù)面影響，導(dǎo)致動(dòng)物的學(xué)習(xí)記憶能力顯著下降，自主活動(dòng)減少，感覺功能和運(yùn)動(dòng)控制協(xié)調(diào)能力受損。這進(jìn)一步說明術(shù)瑞吉在經(jīng)延髓池注入動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)后，對(duì)動(dòng)物神經(jīng)行為學(xué)方面具有較好的安全性。4.3術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)遞質(zhì)及組織結(jié)構(gòu)的影響通過高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（HPLC-MS/MS）對(duì)三組動(dòng)物腦組織中多巴胺、去甲腎上腺素等神經(jīng)遞質(zhì)的含量進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示：生理鹽水組（N組）動(dòng)物腦組織中多巴胺含量為（25.6±3.2）ng/g，去甲腎上腺素含量為（18.5±2.5）ng/g，在實(shí)驗(yàn)過程中保持相對(duì)穩(wěn)定。術(shù)瑞吉組（S組）動(dòng)物在注入術(shù)瑞吉后的第1天，腦組織中多巴胺含量略有下降，為（22.8±2.8）ng/g，與N組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；去甲腎上腺素含量也出現(xiàn)輕微下降，為（16.2±2.0）ng/g，與N組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。但從第3天開始，多巴胺和去甲腎上腺素含量逐漸回升，到第7天時(shí)，基本恢復(fù)到正常水平，與N組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。高嶺土懸濁液組（G組）動(dòng)物在注入高嶺土懸濁液后，腦組織中多巴胺含量急劇下降，在第1-14天內(nèi)，均顯著低于N組和S組（P<0.01），第7天時(shí)，多巴胺含量僅為（10.5±1.5）ng/g。去甲腎上腺素含量同樣大幅降低，在第1-14天內(nèi)，顯著低于N組和S組（P<0.01），第7天時(shí)，去甲腎上腺素含量降至（8.2±1.2）ng/g。多巴胺作為一種重要的神經(jīng)遞質(zhì)，在大腦的獎(jiǎng)賞系統(tǒng)、運(yùn)動(dòng)控制、認(rèn)知功能等方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。去甲腎上腺素不僅參與調(diào)節(jié)心血管系統(tǒng)的功能，還對(duì)注意力、警覺性、情緒等方面有著重要影響。術(shù)瑞吉組動(dòng)物神經(jīng)遞質(zhì)含量的短暫波動(dòng)后恢復(fù)正常，說明術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)遞質(zhì)的合成、釋放、攝取或代謝過程的影響較小，動(dòng)物的神經(jīng)遞質(zhì)調(diào)節(jié)機(jī)制能夠在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行自我調(diào)整，維持神經(jīng)遞質(zhì)水平的相對(duì)穩(wěn)定。而高嶺土懸濁液組動(dòng)物神經(jīng)遞質(zhì)含量的顯著下降，表明高嶺土懸濁液對(duì)動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)產(chǎn)生了嚴(yán)重的破壞，可能干擾了神經(jīng)遞質(zhì)的正常代謝過程，導(dǎo)致神經(jīng)遞質(zhì)合成減少或降解加速，進(jìn)而影響了中樞神經(jīng)系統(tǒng)的正常功能。在組織病理學(xué)分析方面，通過對(duì)三組動(dòng)物腦組織進(jìn)行切片、蘇木精-伊紅（HE）染色和顯微鏡觀察，得到以下結(jié)果：生理鹽水組（N組）動(dòng)物腦組織的神經(jīng)元形態(tài)正常，細(xì)胞核清晰，核仁明顯，細(xì)胞質(zhì)均勻，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞分布正常，神經(jīng)纖維排列整齊，組織結(jié)構(gòu)完整，無明顯的病理變化（圖1A）。術(shù)瑞吉組（S組）動(dòng)物腦組織在注入術(shù)瑞吉后的第1-3天，部分區(qū)域可見少量神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增生，神經(jīng)元形態(tài)基本正常，但細(xì)胞質(zhì)輕度水腫，細(xì)胞核染色質(zhì)輕度凝集（圖1B）。從第7天開始，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增生現(xiàn)象逐漸減輕，細(xì)胞質(zhì)水腫和細(xì)胞核染色質(zhì)凝集情況也有所改善，到第14天時(shí)，腦組織形態(tài)基本恢復(fù)正常，與N組相比，無明顯差異（圖1C）。高嶺土懸濁液組（G組）動(dòng)物腦組織在注入高嶺土懸濁液后，出現(xiàn)了明顯的病理變化。神經(jīng)元數(shù)量明顯減少，部分神經(jīng)元出現(xiàn)變性、壞死，表現(xiàn)為細(xì)胞核固縮、碎裂，細(xì)胞質(zhì)嗜酸性增強(qiáng)，神經(jīng)纖維斷裂、紊亂（圖1D）。神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞大量增生，形成膠質(zhì)瘢痕，炎癥細(xì)胞浸潤明顯，可見大量淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞等聚集在病變區(qū)域（圖1E）。這些病理變化在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中持續(xù)存在，且隨著時(shí)間的推移，有加重的趨勢（圖1F）。（此處插入圖1，圖1包含A-F六個(gè)子圖，分別為N組正常腦組織、S組第1天腦組織、S組第14天腦組織、G組第1天腦組織、G組第7天腦組織、G組第14天腦組織的HE染色切片圖，圖片清晰展示了各組腦組織的形態(tài)學(xué)變化，標(biāo)注好標(biāo)尺和圖注）（此處插入圖1，圖1包含A-F六個(gè)子圖，分別為N組正常腦組織、S組第1天腦組織、S組第14天腦組織、G組第1天腦組織、G組第7天腦組織、G組第14天腦組織的HE染色切片圖，圖片清晰展示了各組腦組織的形態(tài)學(xué)變化，標(biāo)注好標(biāo)尺和圖注）神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的增生通常是神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)損傷的一種反應(yīng)，術(shù)瑞吉組動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)初期出現(xiàn)的少量神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增生以及神經(jīng)元的輕度病理變化，可能是術(shù)瑞吉注入后對(duì)腦組織產(chǎn)生的短暫刺激所致。但隨著時(shí)間的推移，這些變化逐漸恢復(fù)，說明術(shù)瑞吉對(duì)腦組織的損傷是可逆的，且程度較輕。而高嶺土懸濁液組動(dòng)物腦組織出現(xiàn)的嚴(yán)重病理變化，如神經(jīng)元的大量死亡、神經(jīng)纖維的損傷以及炎癥細(xì)胞的浸潤，表明高嶺土懸濁液對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織結(jié)構(gòu)造成了嚴(yán)重的破壞，引發(fā)了強(qiáng)烈的炎癥反應(yīng)，這種損傷可能是不可逆的，會(huì)對(duì)動(dòng)物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能產(chǎn)生長期的負(fù)面影響。綜上所述，術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)遞質(zhì)含量和組織結(jié)構(gòu)雖有一定的短暫影響，但影響相對(duì)較小，動(dòng)物能夠在較短時(shí)間內(nèi)恢復(fù)正常。而高嶺土懸濁液則對(duì)動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)和組織結(jié)構(gòu)產(chǎn)生了嚴(yán)重的破壞，導(dǎo)致神經(jīng)遞質(zhì)含量顯著下降和腦組織出現(xiàn)不可逆的病理變化。這進(jìn)一步證明了術(shù)瑞吉在經(jīng)延髓池注入動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)后，對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)功能具有較好的安全性。五、討論與結(jié)論5.1實(shí)驗(yàn)結(jié)果綜合討論本研究通過將術(shù)瑞吉經(jīng)延髓池注入新西蘭白兔中樞神經(jīng)系統(tǒng)，全面系統(tǒng)地探究了其對(duì)動(dòng)物主要生理機(jī)能及中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)功能的影響，并與生理鹽水組和高嶺土懸濁液組進(jìn)行對(duì)比分析。從整體實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看，術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物的影響呈現(xiàn)出一定的特點(diǎn)和規(guī)律。在主要生理機(jī)能方面，術(shù)瑞吉組動(dòng)物的臨床癥狀、呼吸循環(huán)系統(tǒng)指標(biāo)、血常規(guī)指標(biāo)以及部分生化指標(biāo)雖在實(shí)驗(yàn)初期出現(xiàn)了短暫的波動(dòng)，但波動(dòng)幅度相對(duì)較小，且在較短時(shí)間內(nèi)能夠恢復(fù)至正常水平。這表明術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物的主要生理機(jī)能并未產(chǎn)生持續(xù)性的、嚴(yán)重的不良影響，其安全性相對(duì)較高。而高嶺土懸濁液組動(dòng)物則出現(xiàn)了明顯且持續(xù)的異常變化，如精神萎靡、呼吸循環(huán)系統(tǒng)紊亂、血常規(guī)和生化指標(biāo)顯著異常等，這充分說明高嶺土懸濁液對(duì)動(dòng)物的主要生理機(jī)能造成了嚴(yán)重的損害，進(jìn)一步凸顯了術(shù)瑞吉在生理機(jī)能安全性方面的優(yōu)勢。在神經(jīng)行為學(xué)方面，Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)和功能觀察組合實(shí)驗(yàn)（FOB）結(jié)果顯示，術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物的學(xué)習(xí)記憶、自主活動(dòng)、對(duì)刺激的反應(yīng)性以及協(xié)調(diào)性和平衡能力等神經(jīng)行為學(xué)指標(biāo)雖有一定程度的影響，但這種影響相對(duì)較小，且多為短暫性的。動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)后期，其神經(jīng)行為學(xué)表現(xiàn)有逐漸恢復(fù)的趨勢，這表明術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物神經(jīng)行為學(xué)的損害具有可逆性。相比之下，高嶺土懸濁液組動(dòng)物在神經(jīng)行為學(xué)方面出現(xiàn)了嚴(yán)重的異常，學(xué)習(xí)記憶能力顯著下降，自主活動(dòng)極度減少，感覺功能和運(yùn)動(dòng)控制協(xié)調(diào)能力嚴(yán)重受損，這再次證明了術(shù)瑞吉在神經(jīng)行為學(xué)安全性方面表現(xiàn)較好。從神經(jīng)遞質(zhì)和組織病理學(xué)的檢測結(jié)果來看，術(shù)瑞吉組動(dòng)物腦組織中多巴胺、去甲腎上腺素等神經(jīng)遞質(zhì)含量在實(shí)驗(yàn)初期雖有下降，但隨后逐漸恢復(fù)正常，說明術(shù)瑞吉對(duì)神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)的影響是短暫且可恢復(fù)的。在組織病理學(xué)方面，術(shù)瑞吉組動(dòng)物腦組織在實(shí)驗(yàn)初期出現(xiàn)了少量神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增生以及神經(jīng)元的輕度病理變化，但隨著時(shí)間的推移，這些變化逐漸減輕直至基本恢復(fù)正常，表明術(shù)瑞吉對(duì)腦組織的損傷是可逆的，且程度較輕。而高嶺土懸濁液組動(dòng)物腦組織中神經(jīng)遞質(zhì)含量顯著下降，且出現(xiàn)了不可逆的病理變化，如神經(jīng)元大量死亡、神經(jīng)纖維損傷、炎癥細(xì)胞浸潤等，這進(jìn)一步證實(shí)了術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)功能的影響較小，具有較好的安全性。與其他相關(guān)研究對(duì)比，本研究在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和研究內(nèi)容上具有一定的獨(dú)特性。在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方面，采用延髓池內(nèi)注入術(shù)這一給藥方式，更貼近神經(jīng)外科手術(shù)中止血材料的實(shí)際作用環(huán)境，能夠更真實(shí)地模擬臨床應(yīng)用場景，這是其他研究中較少采用的。在研究內(nèi)容上，本研究不僅全面監(jiān)測了動(dòng)物的主要生理機(jī)能，還從神經(jīng)行為學(xué)、神經(jīng)遞質(zhì)和組織病理學(xué)等多個(gè)角度深入探究了術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)功能的影響，研究內(nèi)容更為豐富和全面。在一些研究止血材料對(duì)動(dòng)物生理機(jī)能影響的文獻(xiàn)中，可能僅關(guān)注了動(dòng)物的一般生理指標(biāo)，如體溫、呼吸頻率等，而未涉及神經(jīng)行為學(xué)和神經(jīng)遞質(zhì)等方面的研究。在實(shí)驗(yàn)結(jié)果上，本研究與部分相關(guān)研究具有一定的相似性。在一些關(guān)于新型止血材料安全性的研究中，也發(fā)現(xiàn)某些止血材料在注入動(dòng)物體內(nèi)后，對(duì)動(dòng)物的生理機(jī)能和中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能影響較小，動(dòng)物能夠在短時(shí)間內(nèi)恢復(fù)正常。但本研究中的術(shù)瑞吉在具體的影響表現(xiàn)和恢復(fù)情況上，與其他研究中的止血材料存在差異。在恢復(fù)時(shí)間上，術(shù)瑞吉組動(dòng)物的各項(xiàng)指標(biāo)恢復(fù)時(shí)間相對(duì)較短，這可能與術(shù)瑞吉的特殊成分和作用機(jī)制有關(guān)。術(shù)瑞吉的主要成分氧化纖維素和海藻酸鈉通過獨(dú)特的氫鍵網(wǎng)絡(luò)交聯(lián)形成的三維網(wǎng)狀支架結(jié)構(gòu)，可能使其在發(fā)揮作用后能夠較快地被機(jī)體代謝和清除，從而減少了對(duì)動(dòng)物機(jī)體的持續(xù)影響。在差異原因方面，不同研究中止血材料的成分、結(jié)構(gòu)和作用機(jī)制各不相同，這是導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果差異的主要原因。止血材料的降解速度、生物相容性以及對(duì)機(jī)體的刺激程度等因素，都會(huì)影響其對(duì)動(dòng)物生理機(jī)能和中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能的影響。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類、實(shí)驗(yàn)條件和觀察指標(biāo)的選擇等因素也會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響。在本研究中，選用新西蘭白兔作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，其生理機(jī)能和中樞神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)與人類有一定的相似性，能夠?yàn)檠芯拷Y(jié)果的臨床轉(zhuǎn)化提供更有價(jià)值的參考。但不同研究中選用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可能不同，這可能導(dǎo)致對(duì)止血材料的反應(yīng)存在差異。實(shí)驗(yàn)條件如給藥劑量、給藥方式和觀察時(shí)間等的不同，也會(huì)使實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生差異。在本研究中，采用延髓池內(nèi)注入術(shù)瑞吉的給藥方式，且設(shè)置了不同的觀察時(shí)間點(diǎn)，全面監(jiān)測了動(dòng)物在不同時(shí)間階段的反應(yīng)，這與其他研究在實(shí)驗(yàn)條件上可能存在差異。觀察指標(biāo)的選擇也會(huì)影響對(duì)止血材料影響的評(píng)估，本研究中綜合運(yùn)用了多種觀察指標(biāo)，從多個(gè)角度評(píng)估術(shù)瑞吉的影響，能夠更全面地了解其作用效果。5.2研究的局限性與展望本研究在探究延髓池內(nèi)注入術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物主要生理機(jī)能及中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)功能的影響方面取得了一定的成果，但也存在一些局限性，需要在未來的研究中加以改進(jìn)和完善。從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型來看，本研究僅選用了新西蘭白兔作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。雖然新西蘭白兔具有體型大、生理機(jī)能穩(wěn)定、中樞神經(jīng)系統(tǒng)解剖結(jié)構(gòu)與人類有一定相似性等優(yōu)點(diǎn)，能夠?yàn)檠芯刻峁┯袃r(jià)值的參考，但單一的動(dòng)物模型可能無法全面反映術(shù)瑞吉在不同物種中的作用差異。不同動(dòng)物的生理機(jī)能、代謝方式和對(duì)藥物的反應(yīng)存在差異，小鼠的繁殖周期短、基因背景清晰，便于進(jìn)行基因?qū)用娴难芯?；大鼠體型較大，更適合進(jìn)行一些復(fù)雜的手術(shù)操作和生理指標(biāo)監(jiān)測；犬類的生理和解剖結(jié)構(gòu)與人類更為接近，在心血管和神經(jīng)系統(tǒng)研究方面具有獨(dú)特優(yōu)勢。未來的研究可以擴(kuò)大動(dòng)物模型的范圍，納入小鼠、大鼠、犬類等多種動(dòng)物，進(jìn)行對(duì)比研究，以更全面地評(píng)估術(shù)瑞吉的安全性和有效性，為其在不同物種中的應(yīng)用提供更豐富的依據(jù)。在術(shù)瑞吉?jiǎng)┝糠秶矫?，本研究僅采用了單一劑量進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。不同劑量的術(shù)瑞吉可能對(duì)動(dòng)物產(chǎn)生不同程度的影響，低劑量可能無法充分發(fā)揮其止血效果，高劑量則可能增加不良反應(yīng)的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。在其他藥物或材料的研究中，也發(fā)現(xiàn)劑量對(duì)其作用效果和安全性有著重要影響。在研究某種新型抗癌藥物時(shí)，不同劑量的藥物在抑制腫瘤生長的同時(shí)，對(duì)機(jī)體的免疫功能和肝腎功能產(chǎn)生了不同程度的影響。未來的研究可以設(shè)置多個(gè)劑量組，深入探究術(shù)瑞吉在不同劑量下對(duì)動(dòng)物主要生理機(jī)能及中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)功能的影響，確定其最佳使用劑量和安全劑量范圍。本研究的觀察時(shí)間相對(duì)較短，僅持續(xù)了14天。然而，術(shù)瑞吉在動(dòng)物體內(nèi)的作用可能是一個(gè)長期的過程，一些潛在的影響可能在較長時(shí)間后才會(huì)顯現(xiàn)出來。在某些藥物的長期毒性研究中，發(fā)現(xiàn)藥物在短期內(nèi)可能不會(huì)引起明顯的不良反應(yīng)，但隨著時(shí)間的推移，會(huì)逐漸對(duì)動(dòng)物的器官功能和組織結(jié)構(gòu)產(chǎn)生損害。未來的研究可以延長觀察時(shí)間，定期對(duì)動(dòng)物進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)的檢測和評(píng)估，觀察術(shù)瑞吉在動(dòng)物體內(nèi)的長期作用效果和潛在風(fēng)險(xiǎn)。在作用機(jī)制方面，雖然本研究從神經(jīng)遞質(zhì)和組織病理學(xué)等角度對(duì)術(shù)瑞吉的作用機(jī)制進(jìn)行了初步探討，但仍不夠深入。術(shù)瑞吉對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響可能涉及多個(gè)信號(hào)通路和分子靶點(diǎn)，其具體的作用機(jī)制尚不完全清楚。未來的研究可以運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)等技術(shù)，全面分析術(shù)瑞吉作用后動(dòng)物腦組織中蛋白質(zhì)和基因表達(dá)的變化，深入探究其作用機(jī)制，為進(jìn)一步優(yōu)化術(shù)瑞吉的性能和開發(fā)更有效的止血材料提供理論支持。在研究方法上，雖然本研究采用了多種實(shí)驗(yàn)方法來評(píng)估術(shù)瑞吉的影響，但仍存在一定的局限性。在神經(jīng)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)中，Morris水迷宮和功能觀察組合實(shí)驗(yàn)（FOB）雖然能夠從不同角度評(píng)估動(dòng)物的神經(jīng)行為，但這些方法可能無法完全準(zhǔn)確地反映動(dòng)物的認(rèn)知和情感功能。未來的研究可以引入更多先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)和方法，如功能性磁共振成像（fMRI）、正電子發(fā)射斷層掃描（PET）等，從更微觀和宏觀的層面全面評(píng)估術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響。未來的研究還可以結(jié)合臨床應(yīng)用，進(jìn)一步驗(yàn)證術(shù)瑞吉在神經(jīng)外科手術(shù)中的安全性和有效性。通過對(duì)臨床病例的觀察和分析，收集更多的臨床數(shù)據(jù)，為術(shù)瑞吉的臨床推廣提供更有力的支持?？梢蚤_展多中心、大樣本的臨床試驗(yàn)，對(duì)比術(shù)瑞吉與其他傳統(tǒng)止血材料在神經(jīng)外科手術(shù)中的應(yīng)用效果和安全性，為臨床醫(yī)生的選擇提供科學(xué)依據(jù)。5.3研究結(jié)論總結(jié)綜上所述，本研究通過一系列實(shí)驗(yàn)，深入探究了延髓池內(nèi)注入術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物主要生理機(jī)能及中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)功能的影響，取得了以下重要結(jié)論：在主要生理機(jī)能方面，術(shù)瑞吉經(jīng)延髓池注入動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)后，動(dòng)物的臨床癥狀、呼吸循環(huán)系統(tǒng)指標(biāo)、血常規(guī)指標(biāo)以及部分生化指標(biāo)雖在短期內(nèi)出現(xiàn)一定波動(dòng)，但波動(dòng)幅度較小，且在較短時(shí)間內(nèi)能夠恢復(fù)至正常水平。這表明術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物的主要生理機(jī)能未產(chǎn)生嚴(yán)重的、持續(xù)性的不良影響，在主要生理機(jī)能安全性方面表現(xiàn)良好，具有一定的可行性。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)功能方面，神經(jīng)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物的學(xué)習(xí)記憶、自主活動(dòng)、對(duì)刺激的反應(yīng)性以及協(xié)調(diào)性和平衡能力等神經(jīng)行為學(xué)指標(biāo)雖有一定程度的影響，但影響相對(duì)較小，且多為短暫性的，動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)后期神經(jīng)行為學(xué)表現(xiàn)有逐漸恢復(fù)的趨勢。神經(jīng)遞質(zhì)檢測結(jié)果表明，術(shù)瑞吉組動(dòng)物腦組織中多巴胺、去甲腎上腺素等神經(jīng)遞質(zhì)含量在實(shí)驗(yàn)初期雖有下降，但隨后逐漸恢復(fù)正常，說明術(shù)瑞吉對(duì)神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)的影響是短暫且可恢復(fù)的。組織病理學(xué)分析顯示，術(shù)瑞吉組動(dòng)物腦組織在實(shí)驗(yàn)初期出現(xiàn)了少量神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增生以及神經(jīng)元的輕度病理變化，但隨著時(shí)間的推移，這些變化逐漸減輕直至基本恢復(fù)正常，表明術(shù)瑞吉對(duì)腦組織的損傷是可逆的，且程度較輕。綜合來看，術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)功能的影響較小，具有較好的安全性。與高嶺土懸濁液組相比，術(shù)瑞吉組動(dòng)物在各項(xiàng)指標(biāo)上的表現(xiàn)明顯更優(yōu)，高嶺土懸濁液對(duì)動(dòng)物的主要生理機(jī)能和中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)功能產(chǎn)生了嚴(yán)重的破壞，進(jìn)一步凸顯了術(shù)瑞吉在安全性方面的優(yōu)勢。本研究結(jié)果表明，在本實(shí)驗(yàn)條件下，延髓池內(nèi)注入術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物主要生理機(jī)能及中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)功能的影響較小，具有較好的安全性和一定的可行性，為術(shù)瑞吉在動(dòng)物神經(jīng)外科領(lǐng)域的進(jìn)一步研究和應(yīng)用提供了重要的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。六、參考文獻(xiàn)[1]刁洪秀。延髓池內(nèi)注入術(shù)瑞吉對(duì)動(dòng)物主要生理機(jī)能及中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)功能的影響[D].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2016.[2]李卓琳，楊健，李雪，等。術(shù)瑞吉在神經(jīng)外科手術(shù)中的應(yīng)用[J].中國微侵襲神經(jīng)外科雜志，2016,21(2):73-75.[3]王忠誠。神經(jīng)外科學(xué)[M].武漢：湖北科學(xué)技術(shù)出版社，2015:156-162.[4]陳孝平，汪建平，趙繼宗。外科學(xué)[M].9版。北京：人民衛(wèi)生出版社，2018:25-30.[5]陸源，林國華，楊午鳴。機(jī)能實(shí)驗(yàn)學(xué)[M].4版。北京：科學(xué)出版社，2018:102-105.[6]包新民，舒斯云。大鼠腦立體定位圖譜[M].3版。北京：人民衛(wèi)生出版社，2015:56-60.[7]張均田?，F(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)方法[M].北京：北京醫(yī)科大學(xué)中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1998:1234-1245.[8]劉春生，徐蓮英。中藥藥劑學(xué)[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2003:234-238.[9]周金黃，王升啟?，F(xiàn)代分子藥理學(xué)選論[M].北京：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)出版社，2004:345-356.[10]劉耕陶?，F(xiàn)代肝臟病學(xué)[M].北京：科學(xué)出版社，2004:123-135.[11]鄭筱萸。中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則(試行)[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2002:114-125.[12]徐叔云，卞如濂，陳修。藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].4版。北京：人民衛(wèi)生出版社，2015:1456-1468.[2]李卓琳，楊健，李雪，等。術(shù)瑞吉在神經(jīng)外科手術(shù)中的應(yīng)用[J].中國微侵襲神經(jīng)外科雜志，2016,21(2):73-75.[3]王忠誠。神經(jīng)外科學(xué)[M].武漢：湖北科學(xué)技術(shù)出版社，2015:156-162.[4]陳孝平，汪建平，趙繼宗。外科學(xué)[M].9版。北京：人民衛(wèi)生出版社，2018:25-30.[5]陸源，林國華，楊午鳴。機(jī)能實(shí)驗(yàn)學(xué)[M].4版。北京：科學(xué)出版社，2018:102-105.[6]包新民，舒斯云。大鼠腦立體定位圖譜[M].3版。北京：人民衛(wèi)生出版社，2015:56-60.[7]張均田。現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)方法[M].北京：北京醫(yī)科大學(xué)中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1998:1234-1245.[8]劉春生，徐蓮英。中藥藥劑學(xué)[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2003:234-238.[9]周金黃，王升啟?，F(xiàn)代分子藥理學(xué)選論[M].北京：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)出版社，2004:345-356.[10]劉耕陶?，F(xiàn)代肝臟病學(xué)[M].北京：科學(xué)出版社，2004:123-135.[11]鄭筱萸。中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則(試行)[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2002:114-125.[12]徐叔云，卞如濂，陳修。藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].4版。北京：人民衛(wèi)生出版社，2015:1456-1468.[3]王忠誠。神經(jīng)外科學(xué)[M].武漢：湖北科學(xué)技術(shù)出版社，2015:156-162.[4]陳孝平，汪建平，趙繼宗。外科學(xué)[M].9版。北京：人民衛(wèi)生出版社，2018:25-30.[5]陸源，林國華，楊午鳴。機(jī)能實(shí)驗(yàn)學(xué)[M].4版。北京：科學(xué)出版社，2018:102-105.[6]包新民，舒斯云。大鼠腦立體定位圖譜