甲狀腺結(jié)節(jié)細(xì)針穿刺的細(xì)胞塊制備技術(shù)_第1頁
甲狀腺結(jié)節(jié)細(xì)針穿刺的細(xì)胞塊制備技術(shù)_第2頁
甲狀腺結(jié)節(jié)細(xì)針穿刺的細(xì)胞塊制備技術(shù)_第3頁
甲狀腺結(jié)節(jié)細(xì)針穿刺的細(xì)胞塊制備技術(shù)_第4頁
甲狀腺結(jié)節(jié)細(xì)針穿刺的細(xì)胞塊制備技術(shù)_第5頁
已閱讀5頁,還剩48頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

202X甲狀腺結(jié)節(jié)細(xì)針穿刺的細(xì)胞塊制備技術(shù)演講人2026-01-09XXXX有限公司202X目錄01.引言07.未來發(fā)展方向與挑戰(zhàn)03.核心操作流程與技術(shù)要點(diǎn)05.臨床應(yīng)用價(jià)值與拓展02.技術(shù)背景與發(fā)展歷程04.質(zhì)量控制與標(biāo)準(zhǔn)化管理06.常見問題與解決方案08.總結(jié)甲狀腺結(jié)節(jié)細(xì)針穿刺的細(xì)胞塊制備技術(shù)XXXX有限公司202001PART.引言引言在甲狀腺結(jié)節(jié)診療領(lǐng)域,細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)檢查(Fine-NeedleAspirationCytology,FNAC)目前被公認(rèn)為術(shù)前診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”。其通過獲取少量細(xì)胞樣本進(jìn)行形態(tài)學(xué)評(píng)估,可有效鑒別結(jié)節(jié)良惡性,指導(dǎo)臨床決策。然而,傳統(tǒng)FNAC涂片技術(shù)存在局限性:細(xì)胞易重疊、分布不均,血液及黏液成分干擾觀察,且難以滿足后續(xù)免疫組化(IHC)、分子檢測(cè)等精準(zhǔn)診斷需求。在此背景下,細(xì)胞塊(CellBlock,CB)制備技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生,它將穿刺獲取的細(xì)胞和組織碎片通過物理或化學(xué)方法聚集成塊,制成類似組織學(xué)石蠟塊的結(jié)構(gòu),不僅彌補(bǔ)了涂片技術(shù)的不足,更拓展了FNAC的診斷維度。作為一名長期從事甲狀腺病理診斷的從業(yè)者,我深刻體會(huì)到細(xì)胞塊制備技術(shù)是連接細(xì)胞形態(tài)學(xué)與組織病理學(xué)、分子病理學(xué)的橋梁,其標(biāo)準(zhǔn)化操作與質(zhì)量控制直接影響診斷的準(zhǔn)確性。本文將系統(tǒng)闡述甲狀腺結(jié)節(jié)細(xì)針穿刺細(xì)胞塊制備技術(shù)的原理、流程、質(zhì)量控制、臨床應(yīng)用及未來發(fā)展方向,以期為同行提供技術(shù)參考與實(shí)踐指導(dǎo)。XXXX有限公司202002PART.技術(shù)背景與發(fā)展歷程1傳統(tǒng)FNAC涂片技術(shù)的局限性傳統(tǒng)FNAC涂片依賴細(xì)胞學(xué)醫(yī)師的經(jīng)驗(yàn),其局限性主要體現(xiàn)在三方面:(1)細(xì)胞學(xué)形態(tài)特征不充分:涂片細(xì)胞多呈單層分布,但甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞常因重疊導(dǎo)致核細(xì)節(jié)(如核溝、核內(nèi)包涵體)難以觀察;此外,膠質(zhì)、血液及炎性背景易掩蓋細(xì)胞異型性,增加診斷難度。(2)診斷重復(fù)性欠佳:不同醫(yī)師對(duì)涂片細(xì)胞的解讀存在主觀差異,尤其在意義不明的非典型性病變(AUS/FLUS)范疇,診斷一致性僅約50%-60%。(3)后續(xù)檢測(cè)受限:涂片樣本量有限,難以支持需大樣本量的分子檢測(cè)(如BRAF、RAS基因突變檢測(cè)),而甲狀腺癌的精準(zhǔn)分型與預(yù)后評(píng)估increasingly依賴分子標(biāo)志物。2細(xì)胞塊技術(shù)的提出與演進(jìn)細(xì)胞塊技術(shù)的雛形可追溯至20世紀(jì)50年代,但直至21世紀(jì)初才在FNAC領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。其核心目標(biāo)是將液態(tài)或半液態(tài)的穿刺樣本轉(zhuǎn)化為固態(tài)組織塊,實(shí)現(xiàn)“類組織學(xué)”觀察。技術(shù)發(fā)展歷經(jīng)三個(gè)階段:01-早期手工制備階段:采用血漿凝血塊法,將樣本與患者血漿混合后離心,利用纖維蛋白原形成凝集塊,但該方法細(xì)胞收縮明顯,結(jié)構(gòu)保存差。02-改良包埋階段:引入瓊脂、明膠等支持介質(zhì),通過物理包裹固定細(xì)胞,提升細(xì)胞塊結(jié)構(gòu)完整性,但仍存在包埋不均勻問題。03-標(biāo)準(zhǔn)化與自動(dòng)化階段:隨著液基細(xì)胞學(xué)(LBC)技術(shù)的普及,細(xì)胞塊制備與LBC流程結(jié)合,采用專用沉淀管、自動(dòng)化離心設(shè)備及組織處理系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)了樣本處理標(biāo)準(zhǔn)化、流程化。043當(dāng)前主流細(xì)胞塊制備方法比較目前國內(nèi)外公認(rèn)的細(xì)胞塊制備方法主要包括以下四類,其原理、優(yōu)缺點(diǎn)及適用場(chǎng)景各有側(cè)重:|方法類型|原理|優(yōu)點(diǎn)|缺點(diǎn)|適用場(chǎng)景||--------------------|-------------------------------------------|-------------------------------------------|-------------------------------------------|-------------------------------------------||血漿凝血塊法|樣本與血漿混合,凝血酶激活纖維蛋白原形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)|操作簡(jiǎn)單、成本低|細(xì)胞收縮明顯,結(jié)構(gòu)易破壞,不適合分子檢測(cè)|基層醫(yī)院、樣本量極少的緊急情況|3當(dāng)前主流細(xì)胞塊制備方法比較|瓊脂包埋法|瓊脂加熱后與樣本混合,冷卻后形成固態(tài)凝膠包埋|細(xì)胞結(jié)構(gòu)保存好,切片質(zhì)量高|操作繁瑣,溫度控制要求嚴(yán)格|需要高質(zhì)量形態(tài)學(xué)觀察及IHC檢測(cè)的樣本||液基細(xì)胞學(xué)沉淀法|LBC處理后剩余沉淀物,經(jīng)固定、脫水、透明、浸蠟|與LBC流程兼容,標(biāo)準(zhǔn)化程度高,適合分子檢測(cè)|依賴LBC設(shè)備,成本較高|有LBC設(shè)備的中心醫(yī)院,需同時(shí)進(jìn)行涂片和細(xì)胞塊制備||組織膠法|樣本與組織膠(如HistoGel)混合,離心后膠體固化|操作便捷,細(xì)胞分布均勻,切片不易破碎|膠體可能影響部分抗原表達(dá)|需要快速制備且兼顧形態(tài)學(xué)與IHC的樣本|注:實(shí)際工作中,需根據(jù)樣本類型(如囊性實(shí)性混合、血供豐富)、實(shí)驗(yàn)室條件及檢測(cè)需求選擇合適方法,其中液基沉淀法與組織膠法因標(biāo)準(zhǔn)化程度高,已成為目前主流推薦方案。XXXX有限公司202003PART.核心操作流程與技術(shù)要點(diǎn)核心操作流程與技術(shù)要點(diǎn)細(xì)胞塊制備技術(shù)是一門“細(xì)節(jié)決定成敗”的操作藝術(shù),每個(gè)步驟均需嚴(yán)格遵循標(biāo)準(zhǔn)化流程,以確保細(xì)胞塊的質(zhì)量滿足診斷需求。以下以臨床應(yīng)用最廣泛的液基細(xì)胞學(xué)沉淀法和組織膠法為例,分步驟闡述關(guān)鍵操作要點(diǎn)。1樣本獲取與初步處理1.1穿刺操作規(guī)范甲狀腺結(jié)節(jié)FNAC通常使用21-25G注射器,在超聲引導(dǎo)下進(jìn)行穿刺,以獲取足夠的細(xì)胞量(建議至少6-8個(gè)pass)。操作需注意:-避免血液過度稀釋:穿刺時(shí)盡量避開結(jié)節(jié)內(nèi)血管豐富的區(qū)域,若樣本血性明顯,可立即更換針筒,棄去前1-2ml血液后再收集樣本;-保證組織碎片完整性:對(duì)于實(shí)性結(jié)節(jié),可采用“提插式”穿刺,避免單純負(fù)壓吸引導(dǎo)致細(xì)胞破碎;-樣本分裝:若需同時(shí)進(jìn)行涂片和細(xì)胞塊制備,可將每個(gè)pass的樣本分別滴于載玻片(涂片2-4張,自然干燥或95%乙醇固定)和含細(xì)胞保存液(如ThinPrep保存液)的LBC管中,避免交叉污染。1樣本獲取與初步處理1.2LBC樣本處理流程采用LBC系統(tǒng)(如ThinPrep或AutoCytePrep)處理樣本時(shí),需嚴(yán)格按照儀器說明書操作,核心步驟包括:-細(xì)胞采集:將穿刺樣本直接注入含有保存液的LBC管中,保存液中的乙醇可迅速固定細(xì)胞,防止自溶;-細(xì)胞清洗:儀器通過梯度離心和過濾去除血液、黏液及雜質(zhì),保留有形成分;-細(xì)胞轉(zhuǎn)移:清洗后的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至沉淀管,準(zhǔn)備后續(xù)細(xì)胞塊制備。個(gè)人經(jīng)驗(yàn)分享:在臨床工作中,曾遇一例甲狀腺淋巴瘤患者,穿刺樣本血性極重,初涂片因背景干擾難以診斷,后通過LBC系統(tǒng)充分清洗,細(xì)胞塊中成功保留大量異型淋巴細(xì)胞,結(jié)合CD20、CD3等IHC染色,明確診斷。這一案例讓我深刻認(rèn)識(shí)到,樣本前處理的徹底性直接關(guān)系到后續(xù)診斷的準(zhǔn)確性。2固定與保存固定是細(xì)胞塊制備的關(guān)鍵步驟,其目的是保持細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)及抗原完整性,防止腐敗。常用固定液及選擇原則如下:|固定液類型|濃度|作用機(jī)制|適用場(chǎng)景|注意事項(xiàng)||------------------|----------------|-------------------------------------------|-------------------------------------------|-------------------------------------------||95%乙醇|95%-100%|使蛋白質(zhì)變性沉淀,保持細(xì)胞結(jié)構(gòu)|LBC樣本沉淀物、組織膠混合樣本|固定時(shí)間需≥2小時(shí),避免過度干燥|2固定與保存|10%中性福爾馬林|10%緩沖甲醛溶液|交聯(lián)蛋白質(zhì),保存抗原表位|需進(jìn)行長期保存或分子檢測(cè)的樣本|固定時(shí)間≤24小時(shí),過久固定可能影響DNA提取||Carnoy液|氯仿:乙醇:冰醋酸=6:3:1|適合富含糖原的細(xì)胞(如甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞)|需要良好保存糖原或核結(jié)構(gòu)的樣本|毒性較強(qiáng),需在通風(fēng)櫥中使用|操作要點(diǎn):-固定液體積需確保樣本完全浸沒,一般固定液與樣本體積比例≥10:1;-避免使用含有重金屬的固定液(如Bouin液),以免干擾后續(xù)IHC染色;-固定后的樣本可在4℃保存,但需在1周內(nèi)完成包埋,以防抗原降解。3細(xì)胞塊包埋技術(shù)包埋是將固定后的細(xì)胞轉(zhuǎn)化為固態(tài)組織塊的核心步驟,不同方法的操作細(xì)節(jié)差異顯著。3細(xì)胞塊包埋技術(shù)3.1液基沉淀法包埋流程(1)離心沉淀:將LBC處理后的沉淀管放入離心機(jī),以1500-2000rpm離心10分鐘,棄上清液,底部可見細(xì)胞沉淀;(2)脫水透明:依次加入80%乙醇(2ml,離心5分鐘)、95%乙醇(2ml,離心5分鐘)、100%乙醇Ⅰ(2ml,離心5分鐘)、100%乙醇Ⅱ(2ml,離心5分鐘),每次棄上清液后加入新的乙醇,徹底去除水分;(3)浸蠟:加入60℃的warmed石蠟(2ml),混勻后離心5分鐘,棄上清液,重復(fù)1-2次,使細(xì)胞完全浸透石蠟;3細(xì)胞塊包埋技術(shù)3.1液基沉淀法包埋流程關(guān)鍵質(zhì)控點(diǎn):1-浸蠟溫度不宜超過65℃,以免細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞;3-脫水不徹底會(huì)導(dǎo)致切片時(shí)細(xì)胞脫落,需確保每步乙醇更換完全;2-包埋時(shí)避免產(chǎn)生氣泡,可在石蠟中加入少量表面活性劑(如Tween-80)減少氣泡產(chǎn)生。4(4)包埋:將石蠟-細(xì)胞混合物倒入包埋模具中,冷卻凝固后即形成細(xì)胞塊。3細(xì)胞塊包埋技術(shù)3.2組織膠法包埋流程(1)樣本與膠混合:將固定后的細(xì)胞沉淀與預(yù)熱的HistoGel(50-60℃)按1:1比例混合,用移液器輕輕吹打混勻,避免劇烈震蕩導(dǎo)致細(xì)胞破碎;(2)離心固化:混合液倒入離心管,離心(800-1000rpm,5分鐘),使膠體包裹細(xì)胞并沉淀于管底;(3)脫蠟處理:將離心管放入冰水中冷卻10分鐘,使膠體凝固;取出膠塊,置于包埋紙中,按常規(guī)組織學(xué)流程進(jìn)行脫水、透明、浸蠟(因膠體已固定,脫水時(shí)間可較組織縮短);(4)包埋切片:浸蠟后的膠塊包埋于石蠟中,制成細(xì)胞塊。個(gè)人經(jīng)驗(yàn)總結(jié):組織膠法操作相對(duì)簡(jiǎn)便,尤其適合樣本量較少(如僅1個(gè)pass)的情況,但需注意膠體與細(xì)胞的比例需嚴(yán)格控制——膠體過多會(huì)導(dǎo)致切片時(shí)“膠層過厚”,細(xì)胞分布稀疏;膠體過少則細(xì)胞易聚集成團(tuán),影響觀察。我曾通過反復(fù)試驗(yàn),確定“細(xì)胞沉淀+膠體體積=100μl”的最佳比例,顯著提升了細(xì)胞塊的切片質(zhì)量。4切片與染色技術(shù)細(xì)胞塊的切片厚度與染色質(zhì)量直接影響形態(tài)學(xué)觀察及IHC檢測(cè)的準(zhǔn)確性。4切片與染色技術(shù)4.1切片制備-裱片:切片后立即置于45℃的純水展片,撈片于防脫載玻片上,60℃烘烤30分鐘,防止脫片。03-切片工具:使用一次性刀片或一次性切片刀,避免組織刀反復(fù)使用造成的切片卷曲;02-切片厚度:推薦2-4μm,過厚(>5μm)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞重疊,觀察困難;過?。?lt;2μm)易切片破損,細(xì)胞丟失;014切片與染色技術(shù)4.2常規(guī)染色與特殊染色0102030405-HE染色:作為基礎(chǔ)染色,需細(xì)胞核(藍(lán)紫色)、細(xì)胞質(zhì)(紅色)對(duì)比清晰,膠質(zhì)呈淡粉紅色;-特殊染色:-PAS染色:顯示糖原,用于甲狀腺濾泡性腫瘤的鑒別。-剛果紅染色:用于淀粉樣變性的診斷,甲狀腺髓樣癌中常伴淀粉樣物質(zhì)沉積;-鐵染色:鑒別含鐵血黃素沉積(如陳舊性出血)與黑色素;4切片與染色技術(shù)4.3免疫組化染色細(xì)胞塊的最大優(yōu)勢(shì)是支持IHC檢測(cè),甲狀腺結(jié)節(jié)常用IHC抗體及意義如下:|抗體名稱|陽性意義|應(yīng)用場(chǎng)景||----------------|-------------------------------------------|-------------------------------------------||TTF-1|甲狀腺濾泡上皮起源|鑒別甲狀腺癌與轉(zhuǎn)移性癌(如肺腺癌)||PAX8|甲狀腺、腎、Müller管上皮起源|鑒別甲狀腺癌與乳腺癌等轉(zhuǎn)移性癌|4切片與染色技術(shù)4.3免疫組化染色|Galectin-3|甲狀腺癌相關(guān)標(biāo)志物(敏感性80%-90%)|輔助診斷甲狀腺乳頭狀癌(PTC)||CK19|濾泡上皮細(xì)胞表達(dá),PTC常彌漫陽性|鑒別PTC與良性濾泡性病變||CgA/Syn|神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)志物|診斷甲狀腺髓樣癌(MTC)||CT|降鈣素,MTC特異性標(biāo)志物|確診MTC,術(shù)前評(píng)估及術(shù)后隨訪|IHC染色質(zhì)控要點(diǎn):-設(shè)置陽性對(duì)照(如甲狀腺癌組織)和陰性對(duì)照(PBS代替一抗);-優(yōu)化抗體稀釋濃度和孵育時(shí)間,避免非特異性染色;-使用自動(dòng)染色儀可減少操作誤差,提高重復(fù)性。XXXX有限公司202004PART.質(zhì)量控制與標(biāo)準(zhǔn)化管理質(zhì)量控制與標(biāo)準(zhǔn)化管理細(xì)胞塊制備的質(zhì)量控制(QC)是保障診斷準(zhǔn)確性的核心環(huán)節(jié),需覆蓋從樣本采集到報(bào)告發(fā)出的全流程。根據(jù)美國病理學(xué)家協(xié)會(huì)(CAP)及國際細(xì)胞病理學(xué)會(huì)(IAC)指南,建議建立以下QC體系:1樣本前QC-樣本量評(píng)估:每個(gè)甲狀腺結(jié)節(jié)FNAC至少獲取6個(gè)pass,涂片細(xì)胞量≥10個(gè)高倍視野(HPF)的良性細(xì)胞,或≥5個(gè)HPF的異型細(xì)胞,否則視為“不滿意樣本”,需重新穿刺;-樣本拒收標(biāo)準(zhǔn):樣本明顯干涸、容器破損、標(biāo)簽信息不全(如無患者ID、穿刺日期)時(shí),需與臨床溝通重新采集。2制備過程QC1-操作人員資質(zhì):細(xì)胞塊制備需由經(jīng)過培訓(xùn)的技術(shù)人員完成,掌握離心、包埋、切片等基本技能,定期參加技術(shù)培訓(xùn)與考核;2-儀器設(shè)備維護(hù):離心機(jī)、包埋機(jī)、切片機(jī)等設(shè)備需定期校準(zhǔn),確保參數(shù)準(zhǔn)確(如離心轉(zhuǎn)速、溫度控制);3-質(zhì)控樣本監(jiān)測(cè):每月使用已知陽性和陰性的細(xì)胞樣本(如正常甲狀腺細(xì)胞系、PTC細(xì)胞系)進(jìn)行制備流程測(cè)試,評(píng)估細(xì)胞塊結(jié)構(gòu)完整性、染色效果及IHC符合率。3細(xì)胞塊質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)合格的細(xì)胞塊需滿足以下標(biāo)準(zhǔn):-形態(tài)學(xué)質(zhì)量:HE染色切片中細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰,無大片紅細(xì)胞或炎性背景干擾,細(xì)胞分布均勻;-細(xì)胞量充足:切片中可見≥50個(gè)甲狀腺上皮細(xì)胞(或根據(jù)診斷需求足夠的異型細(xì)胞);-切片質(zhì)量:無切片折疊、破碎,裱片牢固,脫片率<5%;-IHC有效性:陽性對(duì)照染色陽性,陰性對(duì)照無著色,目標(biāo)抗體呈現(xiàn)特異性染色(如TTF-1在甲狀腺細(xì)胞核陽性)。4不滿意樣本的處理與改進(jìn)當(dāng)細(xì)胞塊質(zhì)量不達(dá)標(biāo)時(shí),需分析原因并采取改進(jìn)措施:-細(xì)胞量不足:與臨床溝通調(diào)整穿刺針型號(hào)(如使用25G細(xì)針獲取更精準(zhǔn)樣本)或增加穿刺次數(shù);-背景干擾嚴(yán)重:優(yōu)化LBC清洗參數(shù),或采用組織膠法減少血液影響;-切片質(zhì)量差:檢查切片刀鋒利度,調(diào)整切片厚度,或更換包埋模具。臨床案例反思:曾有一例“甲狀腺濾泡性腫瘤”患者,細(xì)胞塊因脫水不徹底導(dǎo)致切片大量細(xì)胞脫落,僅少量細(xì)胞可供觀察,最終報(bào)告為“細(xì)胞量不足,無法診斷”。后經(jīng)分析,發(fā)現(xiàn)LBC沉淀物在100%乙醇中離心時(shí)間不足,通過延長離心至10分鐘并增加一次100%乙醇清洗,后續(xù)細(xì)胞塊切片質(zhì)量顯著改善,成功檢出濾泡性癌。這一教訓(xùn)讓我深刻認(rèn)識(shí)到,QC不是“走過場(chǎng)”,而是需落實(shí)到每個(gè)具體操作的細(xì)節(jié)中。XXXX有限公司202005PART.臨床應(yīng)用價(jià)值與拓展臨床應(yīng)用價(jià)值與拓展細(xì)胞塊制備技術(shù)已從單純的輔助診斷工具,發(fā)展為甲狀腺結(jié)節(jié)精準(zhǔn)診療體系的重要組成部分,其臨床價(jià)值主要體現(xiàn)在以下方面:1提升診斷準(zhǔn)確性,減少重復(fù)穿刺傳統(tǒng)FNAC對(duì)甲狀腺乳頭狀癌(PTC)的診斷敏感性約70%-85%,特異性約90%-95%,但對(duì)濾泡性腫瘤(如濾泡性腺瘤、濾泡性癌)的診斷特異性僅約60%,因?yàn)V泡性癌需血管或包膜侵犯才能確診,而FNAC難以獲取完整結(jié)構(gòu)。細(xì)胞塊通過連續(xù)切片可觀察細(xì)胞排列方式、濾泡結(jié)構(gòu)及包膜情況,結(jié)合IHC(如Ki-67、p53)檢測(cè),可提升濾泡性腫瘤的診斷準(zhǔn)確性,使重復(fù)穿刺率降低20%-30%。2支持分子病理檢測(cè),指導(dǎo)精準(zhǔn)治療約70%-80%的甲狀腺癌存在驅(qū)動(dòng)基因突變,如BRAFV600E突變(PTC,發(fā)生率40%-45%)、RAS突變(濾泡性癌,發(fā)生率40%-50%)、RET/PTC重排等。細(xì)胞塊因含有足夠量的DNA/RNA,可滿足分子檢測(cè)需求:-BRAFV600E突變檢測(cè):采用PCR或一代測(cè)序(Sanger),突變提示PTC高風(fēng)險(xiǎn),需行甲狀腺全切+淋巴結(jié)清掃;-BRAF與RAS聯(lián)合檢測(cè):若BRAF陰性而RAS突變,提示濾泡性腫瘤,需結(jié)合術(shù)中冰凍決定手術(shù)范圍;-分子分型檢測(cè):對(duì)于難治性甲狀腺癌(如未分化癌、轉(zhuǎn)移性MTC),細(xì)胞塊可進(jìn)行NGS檢測(cè),指導(dǎo)靶向藥物(如索拉非尼、侖伐替尼)選擇。2支持分子病理檢測(cè),指導(dǎo)精準(zhǔn)治療臨床應(yīng)用實(shí)例:一例45歲男性患者,甲狀腺結(jié)節(jié)FNAC初診為“AUS/FLUS”,細(xì)胞塊檢測(cè)出BRAFV600E突變,結(jié)合IHC(Galectin-3+、CK19+),修正診斷為“PTC”,臨床行甲狀腺全切+中央?yún)^(qū)淋巴結(jié)清掃,術(shù)后病理證實(shí)為微小癌(0.3cm)。這一案例充分體現(xiàn)了細(xì)胞塊分子檢測(cè)對(duì)臨床決策的指導(dǎo)價(jià)值。3疑難病例會(huì)診與遠(yuǎn)程病理細(xì)胞塊切片具有可重復(fù)性、易儲(chǔ)存和運(yùn)輸?shù)奶攸c(diǎn),適合疑難病例的遠(yuǎn)程會(huì)診。例如,基層醫(yī)院可將細(xì)胞塊切片寄送至上級(jí)醫(yī)院,由專家進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察及IHC復(fù)核,避免了涂片易損壞、信息丟失的問題。此外,細(xì)胞塊還可建立“病理生物庫”,長期保存樣本,為回顧性研究及新標(biāo)志物開發(fā)提供資源。4教學(xué)與科研價(jià)值細(xì)胞塊作為“類組織學(xué)”樣本,是細(xì)胞學(xué)教學(xué)的優(yōu)質(zhì)工具,初學(xué)者可通過觀察細(xì)胞塊的濾泡結(jié)構(gòu)、細(xì)胞異型性,快速理解甲狀腺細(xì)胞病理學(xué)特征。在科研方面,細(xì)胞塊結(jié)合激光捕獲顯微切割(LCM)技術(shù),可精準(zhǔn)分離目標(biāo)細(xì)胞群(如癌巢、間質(zhì)細(xì)胞),進(jìn)行基因表達(dá)譜分析、蛋白質(zhì)組學(xué)研究,推動(dòng)甲狀腺癌發(fā)病機(jī)制與靶向治療的研究進(jìn)展。XXXX有限公司202006PART.常見問題與解決方案常見問題與解決方案盡管細(xì)胞塊制備技術(shù)已相對(duì)成熟,但在實(shí)際操作中仍會(huì)遇到各類問題,以下總結(jié)常見問題及其解決策略:1細(xì)胞塊中細(xì)胞量不足原因:穿刺樣本量少、離心不徹底、包埋時(shí)細(xì)胞丟失。-穿刺時(shí)采用“快速提插法”,每個(gè)pass旋轉(zhuǎn)針芯180后退出,增加細(xì)胞獲取量;-組織膠法中減少膠體比例,確保細(xì)胞濃度。-離心時(shí)增加轉(zhuǎn)速(2000rpm)或延長離心時(shí)間(10分鐘);解決方案:2細(xì)胞塊切片時(shí)細(xì)胞脫落原因:脫水不徹底、切片過厚、載玻片防脫處理不當(dāng)。01解決方案:02-增加乙醇清洗次數(shù),確保無水乙醇步驟徹底脫水;03-調(diào)整切片厚度至3μm,使用一次性刀片;04-采用多聚賴氨酸或APES防脫載玻片,裱片后60℃烘烤1小時(shí)。053IHC染色結(jié)果假陰性-優(yōu)化抗原修復(fù)方法(如TGF-β修復(fù)液修復(fù)10分鐘,pH6.0);04-更換新批次抗體,設(shè)置陽性對(duì)照驗(yàn)證抗體活性。05-避免固定超過24小時(shí),優(yōu)先使用95%乙醇固定;03解決方案:02原因:固定時(shí)間過長、抗原修復(fù)不充分、抗體效價(jià)降低。014細(xì)胞塊中出現(xiàn)大量氣泡原因:浸蠟時(shí)震蕩過度、石蠟溫度過高。解決方案:-浸蠟時(shí)輕輕混勻,避免劇烈渦旋;-控制石蠟溫度在58-60℃,防止石蠟汽化產(chǎn)生氣泡;-包埋前靜置5分鐘,讓氣泡浮出表面。XXXX有限公司202007PART.未來發(fā)展方向與挑戰(zhàn)未來發(fā)展方向與挑戰(zhàn)隨著精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展,甲狀腺結(jié)節(jié)細(xì)針穿刺細(xì)胞塊制備技術(shù)將向以下方向演進(jìn):1自動(dòng)化與標(biāo)準(zhǔn)化傳統(tǒng)手工制備存在操作差異大、效率低等問題,自動(dòng)化細(xì)胞塊制備系統(tǒng)(如ThyroCell?)正逐步應(yīng)用于臨床。該系統(tǒng)通過自動(dòng)化離心、固定、包埋流程,減少人為誤差,提高制備效率,尤其適合樣本量大的中心醫(yī)院。未來,人工智能(AI)輔助的細(xì)胞塊

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論