3T/JSQGXHXXXX—2025化妝品中對苯二胺等40種染發(fā)劑測定高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法本文件規(guī)定了化妝品中對苯二胺等40種染發(fā)劑測定的測定方法。本文件適用于化妝品中對苯二胺等40種染發(fā)劑測定的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4原理試樣經(jīng)甲醇-2g/L亞硫酸氫鈉水溶液超聲提取、離心后用10%甲醇稀釋，0.22μm的濾膜過濾，濾液注入高效液相色譜質(zhì)譜儀檢測，基質(zhì)空白標(biāo)準(zhǔn)曲線外標(biāo)法定量。5儀器與試劑5.1試劑5.1.1水，GB/T6682，一級。5.1.2甲醇（CH3OH）：色譜純。5.1.3乙腈：色譜純。5.1.4乙酸銨：質(zhì)譜純。5.1.5亞硫酸氫鈉：分析純。5.2試劑配劑5.2.110%甲醇溶液：量取100mL甲醇溶液至1L容量瓶中，用純水定容至刻度線。5.2.210mmol/L乙酸銨溶液（pH=8）：精確稱量0.7708g乙酸銨固體，950mL純水溶解，用氨水調(diào)節(jié)pH=8，轉(zhuǎn)移至1L容量瓶，用純水定容至1L。5.2.32g/L亞硫酸氫鈉水溶液：精確稱量0.2000g亞硫酸氫鈉固體，用純水溶解，并定容至100mL。5.2.4甲醇-2g/L亞硫酸氫鈉水溶液（體積比1:1）：量取50mL甲醇溶液至100mL容量瓶中，用2g/L亞硫酸氫鈉水溶液定容。5.3標(biāo)準(zhǔn)品5.3.140種染料的標(biāo)準(zhǔn)品：純度大于95%，名稱、CAS號、分子式、相對分子質(zhì)量見附錄A中表1。5.4標(biāo)準(zhǔn)溶液配制T/JSQGXHXXXX—202545.4.140種染發(fā)劑的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液：分別準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)品20mg,精確至0.001mg，于20mL的棕色容量瓶中，用甲醇-2g/L亞硫酸氫鈉水溶液（體積比1:15.2.4)溶解并定容至刻度，即得質(zhì)量濃度為1000mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲備液。4℃冰箱冷藏可保存24h，宜現(xiàn)配現(xiàn)用，每次取用前需超聲助溶5min。5.5儀器和設(shè)備5.5.1高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀：配有電噴霧離子源（ESI）。5.5.2渦旋振蕩器。5.5.3移液槍：50μL、200μL、1000μL。5.5.4分析天平：感量0.0001g。5.5.5具塞離心刻度試管：15mL或50mL。5.5.6離心機(jī)：轉(zhuǎn)速≥8000r/min。5.5.7超聲振蕩器：功率不小于500W，頻率53kHz。5.5.80.22μm濾膜針式過濾器。6試驗步驟6.1樣品處理供試品溶液：精密稱取樣品2g，置于10mL試管中，加入10mL70%甲醇溶液，渦旋混勻后，用70%甲醇定容至刻度；超聲提取20min，經(jīng)0.22μm濾膜過濾，收集續(xù)濾液作為供試品儲備液，避光于-20℃保存。精密量取供試品儲備液1mL，置于10mL容量瓶中，用20%甲醇溶液定容至10mL，混勻得到供試品溶液，用于測定。若稀釋后樣品中染料成分濃度超出線性范圍上限，需用對應(yīng)溶劑進(jìn)一步稀釋。6.2測定參考條件6.2.1液相色譜測定參考條件a)色譜柱：Poroshell120Bomus-RP（2.1mm×100mm，2.7μm），或性能相當(dāng)者；b)流動相：A:10mmoL/L乙酸銨溶液（pH=8）,B:乙腈，梯度洗脫步驟見表1；c)流速：0.2mL/min；d)柱溫：40℃;f)后運行：2min表1液相色譜梯度洗脫條件0020820307059559506.2.2質(zhì)譜測定參考條件如下a)電離方式：電噴霧電離。T/JSQGXHXXXX—20255b)離子源接口電壓:2.0kV(正離子模式)，一2.5kV(負(fù)離子模式)；c)鞘氣溫度：400℃;d)鞘氣流量：12L/min;e)干燥氣溫度：350℃;f)干燥氣流量：11L/min；g)掃描模式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM)，定量、定性離子，預(yù)桿偏差電壓和碰撞能量見表2。表2質(zhì)譜參數(shù)N,N-雙(2-羥乙基)對苯二392-氨基-92.1*/65.19.4594.7143.8362.1506.4246.5407.3033.0185.174++++++++++++++++++6N,N-N,N-二乙基對苯二胺硫酸鹽+N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺+++++----------------6.2.3標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制混合標(biāo)準(zhǔn)溶液：分別按表3取不同量的標(biāo)準(zhǔn)儲備液（5.8)于100mL的棕色容量瓶中，用甲醇定容，每次取用前需超聲助溶5min，現(xiàn)配現(xiàn)用。表3混合標(biāo)準(zhǔn)溶液和基質(zhì)空白標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的濃度T/JSQGXHXXXX—202572N,N-雙(2-羥乙44苯444酮4啶242444424N-苯基對苯二胺1N,N-二乙基對苯48442244酚4444242鹽44T/JSQGXHXXXX—202596.2.4空白試驗空白試驗是指除不加試樣外，采用完全相同的分析步驟、試劑和用量，進(jìn)行上機(jī)檢測。7分析結(jié)果的表述7.1定性判定在相同試驗條件下，試樣中待測物質(zhì)的保留時間與標(biāo)準(zhǔn)溶液中對應(yīng)的保留時間偏差在±2.5%之內(nèi)：且試樣中各組分定性離子的相對豐度與濃度接近的標(biāo)準(zhǔn)溶液中對應(yīng)的定性離子的相對豐度進(jìn)行比較，若偏差不超過表4規(guī)定的范圍，可判定為試樣中含有對應(yīng)的待測物。40種染發(fā)劑的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜圖見附錄A中圖A.1。表4定性離子相對豐度的最大允許偏差離子相對豐度K/%K＞5050≥K＞2020≥K＞10K≤10最大允許偏差/%7.2定量測定本文件采用外標(biāo)校準(zhǔn)曲線法定量測定。以各染發(fā)劑的基質(zhì)空白標(biāo)準(zhǔn)工作溶液濃度為橫坐標(biāo)，各自定量離子的峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。所測樣品中染發(fā)劑的峰面積應(yīng)在儀器的線性范圍內(nèi)，從標(biāo)準(zhǔn)曲線可計算得樣品溶液中各染發(fā)劑的含量，如超過線性范圍則用10%甲醇溶液適當(dāng)稀釋后重新測定。7.3實驗數(shù)據(jù)處理12試樣中染發(fā)劑的含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）按公式（1)計算：w=×k…(1）式中：w——試樣中染發(fā)劑的含量，單位為毫克每千克（mg/kgP——從標(biāo)準(zhǔn)曲線中計算出的染發(fā)劑質(zhì)量濃度，單位為毫克每升（mg/L)；Po——空白試驗得到的空白值，單位為毫克每升（mg/L）；V——試樣溶液的定容體積，此處為50，單位為毫升（mL)；m——試樣質(zhì)量，單位為克（g)；k——稀釋倍數(shù)。計算結(jié)果以兩次平行測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，保留三位有效數(shù)字。8回收率在不同添加濃度的范圍內(nèi)，回收率在80%~115%之間。9精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。T/JSQGXHXXXX—2025（資料性）表140種染發(fā)劑標(biāo)準(zhǔn)品信息序號名稱CAS號分子式相對分子質(zhì)量1對苯二胺106-50-3C6H8N2108.142對氨基苯酚123-30-8C6H7NO109.133N,N-雙(2-羥乙基)對苯二胺硫酸鹽54381-16-7C10H16N2O2·H2SO4294.334間氨基苯酚591-27-5C6H7NO109.1354-氨基-2-羥基甲苯2835-95-2C7H9NO123.1564-氨基間甲酚2835-99-6C7H9NO123.157甲苯-2,5-二胺硫酸鹽615-50-9C7H12N2O4S220.258苯基甲基吡唑啉酮89-25-8C10H10N2O92-氨基-3-羥基吡啶16867-03-1C5H6N2O2,4-二氨基苯氧基乙醇鹽酸鹽66422-95-5C8H14CL2N2O2241.112,6-二氨基吡啶141-86-6C5H7N3109.132-氯對苯二胺硫酸鹽61702-44-1C6H9CLN2O4S240.672-硝基對苯二胺5307-14-2C6H7N3O2153.146-氨基間甲酚2835-98-5C7H9NO123.15對甲基氨基苯酚硫酸鹽55-55-0C14H20N2O6S344.39間苯二胺108-45-2C6H8N2108.14鄰苯二胺95-54-5C6H8N2108.14N-苯基對苯二胺101-54-2C12H12N4184.24N,N-二乙基對苯二胺硫酸鹽6283-63-2C10H18N2O4S262.3320N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺鹽酸鹽2051-79-8C11H18N2214.74T/JSQGXHXXXX—202521甲苯-3,4-二胺496-72-0C7H10N2122.17224-硝基鄰苯二胺99-56-9C6H7N3O2153.14236-羥基吲哚2380-86-1C8H7NO133.1524鄰氨基苯酚95-55-6C6H7NO109.13252,7-萘二酚582-17-2C10H8O2160.17261,5-萘二酚83-56-7C10H8O2160.17274-氨基-3-硝基苯酚610-81-1C6H6N2O3154.122890-15-3C10H8O144.17294-氯間苯二酚95-88-5C6H5CLO2144.56302-甲基間苯二酚608-25-3C7H8O2124.1431對苯二酚123-31-9C6H6O232間苯二酚108-46-3C6H6O2332-氨基-4-羥乙氨基茴香醚94158-14-2217.65342,6-二羥乙基氨甲苯92952-1-3C9H12N2O4212.2035羥乙基3,4亞甲二氧基苯胺鹽酸鹽100418-33-5C9H12N2O3