微膠囊營養(yǎng)骨粉：加工工藝優(yōu)化與品質(zhì)提升策略探究一、引言1.1研究背景與意義1.1.1研究背景在當(dāng)今社會，隨著經(jīng)濟(jì)水平的提升和健康意識的增強(qiáng)，人們對于健康飲食的追求達(dá)到了前所未有的高度。富含蛋白質(zhì)、鈣等營養(yǎng)素的食品成為了消費(fèi)者關(guān)注的焦點，因為這些營養(yǎng)素對于維持人體正常生理功能、促進(jìn)骨骼健康發(fā)育、增強(qiáng)免疫力等方面起著至關(guān)重要的作用。骨粉作為一種天然食材，其蘊(yùn)含豐富的蛋白質(zhì)、肽以及多種礦物質(zhì)，尤其是鈣、磷等元素，在滿足人們對營養(yǎng)需求方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢，從而備受青睞。例如，鈣是人體骨骼和牙齒的主要組成成分，充足的鈣攝入有助于預(yù)防骨質(zhì)疏松等骨骼疾病；蛋白質(zhì)則是構(gòu)成人體細(xì)胞、組織和器官的基本物質(zhì)，對于身體的生長、修復(fù)和維持正常代謝不可或缺。然而，傳統(tǒng)骨粉在實際應(yīng)用中存在著諸多問題。在口感方面，傳統(tǒng)骨粉質(zhì)地粗糙、氣味不佳，難以被消費(fèi)者接受。許多人在嘗試食用傳統(tǒng)骨粉時，會因其特殊的味道和粗糙的口感而產(chǎn)生抵觸情緒，這極大地限制了骨粉在食品領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用。從成分穩(wěn)定性角度來看，傳統(tǒng)骨粉中的營養(yǎng)成分容易受到外界環(huán)境因素的影響，如光照、氧氣、濕度等。在儲存過程中，營養(yǎng)成分可能會發(fā)生氧化、降解等化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致其營養(yǎng)價值降低。比如，骨粉中的不飽和脂肪酸容易被氧化，從而產(chǎn)生異味，同時降低其營養(yǎng)功效；一些對光敏感的維生素和礦物質(zhì)，在光照條件下也會逐漸失去活性。此外，傳統(tǒng)骨粉的溶解性較差，在水中難以均勻分散，這不僅影響了其在食品加工中的應(yīng)用，也不利于人體的消化吸收。為了克服傳統(tǒng)骨粉的這些缺點，微膠囊營養(yǎng)骨粉應(yīng)運(yùn)而生。微膠囊技術(shù)作為一種先進(jìn)的包埋技術(shù)，能夠?qū)⒐欠鄣然钚猿煞职谖⑿〉哪z囊中。這些膠囊通常由天然或合成的高分子材料制成，如明膠、阿拉伯膠、殼聚糖、海藻酸鈉等。壁材具有良好的成膜性、穩(wěn)定性和生物相容性，能夠有效地保護(hù)芯材免受外界環(huán)境的影響。通過微膠囊技術(shù)，骨粉的口感得到了顯著改善，異味被掩蓋，質(zhì)地變得更加細(xì)膩。微膠囊的存在還提高了骨粉營養(yǎng)成分的穩(wěn)定性，減少了營養(yǎng)成分的損失，延長了產(chǎn)品的保質(zhì)期。在食品加工過程中，微膠囊營養(yǎng)骨粉的溶解性和分散性更好，能夠更方便地添加到各種食品體系中，如乳制品、烘焙食品、飲料等，為開發(fā)更多富含營養(yǎng)的功能性食品提供了可能。1.1.2研究意義本研究對微膠囊營養(yǎng)骨粉加工工藝及品質(zhì)展開研究，具有多方面重要意義。從技術(shù)創(chuàng)新層面而言，微膠囊技術(shù)在營養(yǎng)骨粉領(lǐng)域的應(yīng)用是對傳統(tǒng)骨粉加工方式的革新。通過深入研究微膠囊營養(yǎng)骨粉的加工工藝，能夠探索出更優(yōu)化的制備方法，如確定最佳的壁材種類及配比、合適的芯壁材比例、精準(zhǔn)的微膠囊化工藝參數(shù)（包括噴霧干燥的進(jìn)風(fēng)溫度、出風(fēng)溫度、均質(zhì)壓力等）。這不僅有助于提高微膠囊的包埋效率、成膜率和穩(wěn)定性，還能推動微膠囊技術(shù)在食品領(lǐng)域的進(jìn)一步發(fā)展和完善，為其他功能性食品原料的微膠囊化提供技術(shù)參考和借鑒，促進(jìn)食品加工技術(shù)的創(chuàng)新與進(jìn)步。在產(chǎn)業(yè)發(fā)展角度，微膠囊營養(yǎng)骨粉的成功研發(fā)和產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，能夠為骨粉行業(yè)開拓新的市場空間。隨著消費(fèi)者對健康食品需求的不斷增長，高品質(zhì)的微膠囊營養(yǎng)骨粉具有廣闊的市場前景。它可以作為一種新型的營養(yǎng)強(qiáng)化劑，廣泛應(yīng)用于食品、保健品等多個行業(yè)，豐富產(chǎn)品種類，提高產(chǎn)品附加值，增強(qiáng)企業(yè)的市場競爭力。這有助于推動骨粉產(chǎn)業(yè)的升級轉(zhuǎn)型，促進(jìn)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)優(yōu)化，帶動相關(guān)產(chǎn)業(yè)鏈的協(xié)同發(fā)展，如原材料供應(yīng)、食品加工設(shè)備制造、包裝材料生產(chǎn)等，從而為經(jīng)濟(jì)發(fā)展做出貢獻(xiàn)。從健康促進(jìn)方面來看，微膠囊營養(yǎng)骨粉富含多種營養(yǎng)成分，且經(jīng)過微膠囊化處理后，其營養(yǎng)成分的穩(wěn)定性和生物利用度得到提高，更易于人體吸收。食用微膠囊營養(yǎng)骨粉能夠有效補(bǔ)充人體所需的蛋白質(zhì)、鈣、礦物質(zhì)等營養(yǎng)素，對于預(yù)防和改善骨質(zhì)疏松、增強(qiáng)骨骼健康、提高免疫力等具有積極作用，有助于提升人們的健康水平和生活質(zhì)量，滿足人們對健康飲食的追求，對公共健康事業(yè)具有重要意義。1.2國內(nèi)外研究現(xiàn)狀在微膠囊營養(yǎng)骨粉加工工藝的研究上，國外起步相對較早，技術(shù)也較為成熟。早期，研究主要集中在探索各種微膠囊化方法對骨粉營養(yǎng)成分保護(hù)的有效性上。美國、日本等國家的科研團(tuán)隊率先開展相關(guān)研究，他們運(yùn)用噴霧干燥法對骨粉進(jìn)行微膠囊化處理，通過調(diào)整噴霧干燥過程中的進(jìn)風(fēng)溫度、出風(fēng)溫度、進(jìn)料速度等參數(shù)，有效提高了微膠囊的包埋率和穩(wěn)定性。例如，美國某研究團(tuán)隊在實驗中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)進(jìn)風(fēng)溫度控制在180-200℃、出風(fēng)溫度為70-80℃時，微膠囊營養(yǎng)骨粉的包埋率可達(dá)80%以上，且營養(yǎng)成分在儲存過程中的損失顯著降低。隨著研究的深入，他們進(jìn)一步研究了不同壁材對微膠囊性能的影響，發(fā)現(xiàn)將明膠與阿拉伯膠按一定比例復(fù)配作為壁材，能夠顯著提高微膠囊的穩(wěn)定性和對骨粉營養(yǎng)成分的保護(hù)效果。近年來，國外在微膠囊營養(yǎng)骨粉加工工藝上不斷創(chuàng)新，一些新型的微膠囊化技術(shù)如超臨界流體技術(shù)、靜電噴霧技術(shù)等逐漸被應(yīng)用到骨粉微膠囊的制備中。超臨界流體技術(shù)能夠在溫和的條件下實現(xiàn)骨粉的微膠囊化，有效避免了傳統(tǒng)方法中高溫對營養(yǎng)成分的破壞，制備出的微膠囊具有粒徑均勻、包埋率高的優(yōu)點；靜電噴霧技術(shù)則可精確控制微膠囊的粒徑和形態(tài)，為制備高性能的微膠囊營養(yǎng)骨粉提供了新的途徑。國內(nèi)對微膠囊營養(yǎng)骨粉加工工藝的研究雖起步稍晚，但發(fā)展迅速。早期主要是借鑒國外的先進(jìn)技術(shù)和經(jīng)驗，對噴霧干燥法制備微膠囊營養(yǎng)骨粉的工藝進(jìn)行優(yōu)化。眾多科研人員通過實驗，深入研究了壁材種類、芯壁材比例、均質(zhì)壓力等因素對微膠囊品質(zhì)的影響。例如，有研究表明，當(dāng)芯壁材比例為1:3-1:4、均質(zhì)壓力在30-40MPa時，制備出的微膠囊營養(yǎng)骨粉具有較好的分散性和穩(wěn)定性。同時，國內(nèi)也開始關(guān)注新型微膠囊化技術(shù)在骨粉加工中的應(yīng)用，一些科研機(jī)構(gòu)和高校對超臨界流體技術(shù)、流化床包衣技術(shù)等進(jìn)行了探索性研究，取得了一定的成果。在微膠囊營養(yǎng)骨粉品質(zhì)研究方面，國內(nèi)外均圍繞營養(yǎng)成分含量、穩(wěn)定性、溶解性、口感等關(guān)鍵指標(biāo)展開。國外通過先進(jìn)的分析檢測技術(shù)，如高效液相色譜（HPLC）、電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）等，對微膠囊營養(yǎng)骨粉中的蛋白質(zhì)、鈣、磷、維生素等營養(yǎng)成分進(jìn)行精確測定，并深入研究其在儲存和加工過程中的變化規(guī)律。研究發(fā)現(xiàn)，微膠囊化能夠有效減少營養(yǎng)成分的氧化和降解，提高其穩(wěn)定性。例如，在對微膠囊營養(yǎng)骨粉中維生素D穩(wěn)定性的研究中，發(fā)現(xiàn)經(jīng)過微膠囊化處理后，維生素D在光照和高溫條件下的保留率明顯提高。國內(nèi)在品質(zhì)研究上，除了關(guān)注營養(yǎng)成分外，還注重微膠囊營養(yǎng)骨粉的感官品質(zhì)和安全性。通過開展感官評價實驗，了解消費(fèi)者對微膠囊營養(yǎng)骨粉口感、色澤、氣味等方面的接受程度，并以此為依據(jù)對加工工藝進(jìn)行優(yōu)化。在安全性研究方面，嚴(yán)格按照國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，對微膠囊營養(yǎng)骨粉進(jìn)行微生物檢測和重金屬檢測，確保產(chǎn)品符合食品安全要求。然而，當(dāng)前微膠囊營養(yǎng)骨粉加工工藝及品質(zhì)研究仍存在一些不足與空白。在加工工藝方面，雖然多種微膠囊化技術(shù)已被應(yīng)用，但不同技術(shù)之間的協(xié)同應(yīng)用研究較少，如何將多種技術(shù)的優(yōu)勢結(jié)合起來，進(jìn)一步提高微膠囊的性能和生產(chǎn)效率，還有待深入探索。對于微膠囊壁材的選擇，目前常用的壁材雖能滿足一定的性能要求，但在生物可降解性、功能性等方面還存在提升空間，開發(fā)新型的高性能壁材成為研究的一個重要方向。在品質(zhì)研究方面，對微膠囊營養(yǎng)骨粉在人體胃腸道內(nèi)的消化吸收機(jī)制研究還不夠深入，缺乏系統(tǒng)性的研究數(shù)據(jù)，這限制了對產(chǎn)品營養(yǎng)功效的進(jìn)一步挖掘和提升。對于微膠囊營養(yǎng)骨粉在不同食品體系中的應(yīng)用特性研究也相對較少，如何使其更好地與各類食品原料相容，發(fā)揮其營養(yǎng)強(qiáng)化作用，還需要更多的研究和實踐。1.3研究目標(biāo)與內(nèi)容1.3.1研究目標(biāo)本研究旨在深入探究微膠囊營養(yǎng)骨粉的加工工藝及品質(zhì)，具體目標(biāo)如下：確定最佳加工工藝：系統(tǒng)研究微膠囊化過程中各個環(huán)節(jié)，包括壁材的選擇與配比、芯壁材比例的優(yōu)化、微膠囊化工藝參數(shù)（如噴霧干燥的進(jìn)風(fēng)溫度、出風(fēng)溫度、進(jìn)料速度、均質(zhì)壓力和時間等）的精確調(diào)控，通過單因素試驗、正交試驗、響應(yīng)面試驗等方法，確定一套能夠?qū)崿F(xiàn)高包埋率、良好穩(wěn)定性和優(yōu)異綜合性能的微膠囊營養(yǎng)骨粉最佳加工工藝，為工業(yè)化生產(chǎn)提供技術(shù)支持。優(yōu)化微膠囊營養(yǎng)骨粉配方：在考慮骨粉營養(yǎng)成分保留和釋放特性的基礎(chǔ)上，結(jié)合不同壁材的功能特性，如明膠的凝膠性、阿拉伯膠的乳化性、殼聚糖的抗菌性等，探索添加其他功能性成分（如維生素D、酪蛋白磷酸肽等）對微膠囊營養(yǎng)骨粉品質(zhì)的影響，優(yōu)化微膠囊營養(yǎng)骨粉的配方，使其在滿足人體營養(yǎng)需求的同時，具備更好的穩(wěn)定性、溶解性和口感，提高產(chǎn)品的市場競爭力。分析微膠囊營養(yǎng)骨粉品質(zhì)特征：運(yùn)用先進(jìn)的分析檢測技術(shù)，如掃描電子顯微鏡（SEM）觀察微膠囊的微觀形態(tài)和粒徑分布、傅里葉變換紅外光譜（FT-IR）分析微膠囊的結(jié)構(gòu)特征、差示掃描量熱儀（DSC）研究微膠囊的熱穩(wěn)定性等，全面分析微膠囊營養(yǎng)骨粉的理化性質(zhì)、微觀結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性等品質(zhì)特征，深入了解微膠囊對骨粉營養(yǎng)成分的保護(hù)機(jī)制，為產(chǎn)品質(zhì)量控制和評價提供科學(xué)依據(jù)。準(zhǔn)確測定營養(yǎng)成分含量：采用高效液相色譜（HPLC）、電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）、凱氏定氮法、原子吸收光譜法等精準(zhǔn)的分析方法，對微膠囊營養(yǎng)骨粉中的蛋白質(zhì)、鈣、磷、氨基酸、維生素等主要營養(yǎng)成分的含量進(jìn)行準(zhǔn)確測定，并研究在加工和儲存過程中營養(yǎng)成分的變化規(guī)律，評估微膠囊技術(shù)對營養(yǎng)成分保留和生物利用度的影響，為產(chǎn)品的營養(yǎng)功效評價和標(biāo)簽標(biāo)識提供數(shù)據(jù)支持。1.3.2研究內(nèi)容圍繞上述研究目標(biāo)，本研究主要開展以下幾方面的內(nèi)容：微膠囊營養(yǎng)骨粉加工工藝研究：原料預(yù)處理：對骨粉原料進(jìn)行嚴(yán)格篩選，選擇新鮮、無污染、來源可靠的動物骨骼，如牛骨、羊骨等。通過清洗、去除雜質(zhì)和肉渣等預(yù)處理步驟，確保原料的純凈度。然后采用合適的方法，如高壓蒸煮、酶解等，對骨骼進(jìn)行處理，使其中的營養(yǎng)成分充分釋放，并將其粉碎至適宜的粒度，為后續(xù)的微膠囊化過程提供優(yōu)質(zhì)的芯材。壁材選擇與配比優(yōu)化：對常見的壁材，如明膠、阿拉伯膠、殼聚糖、海藻酸鈉、麥芽糊精等，進(jìn)行單因素試驗，分析不同壁材對微膠囊性能的影響，包括包埋率、穩(wěn)定性、溶解性等。在此基礎(chǔ)上，通過復(fù)配試驗，研究不同壁材組合的協(xié)同效應(yīng)，運(yùn)用正交試驗、響應(yīng)面試驗等優(yōu)化方法，確定最佳的壁材種類及配比，以獲得性能優(yōu)良的微膠囊壁材體系。微膠囊化工藝參數(shù)優(yōu)化：針對噴霧干燥法、冷凍干燥法、凝聚法等常見的微膠囊化方法，重點研究噴霧干燥法中進(jìn)風(fēng)溫度、出風(fēng)溫度、進(jìn)料速度、均質(zhì)壓力和時間等關(guān)鍵工藝參數(shù)對微膠囊品質(zhì)的影響。通過改變單一參數(shù)，觀察微膠囊的包埋率、粒徑分布、形態(tài)結(jié)構(gòu)等指標(biāo)的變化，確定各參數(shù)的適宜范圍。再通過多因素試驗設(shè)計，建立工藝參數(shù)與微膠囊品質(zhì)指標(biāo)之間的數(shù)學(xué)模型，優(yōu)化工藝參數(shù)，實現(xiàn)微膠囊營養(yǎng)骨粉的高效制備。微膠囊營養(yǎng)骨粉品質(zhì)特征分析：理化性質(zhì)測定：對微膠囊營養(yǎng)骨粉的外觀形態(tài)（顏色、形狀、粒度分布）、流動性（休止角、壓縮度）、溶解性（在不同溶劑中的溶解速率和溶解度）、吸濕性等理化性質(zhì)進(jìn)行詳細(xì)測定。通過這些指標(biāo)的分析，了解微膠囊營養(yǎng)骨粉的物理特性，為產(chǎn)品的加工、儲存和應(yīng)用提供參考。微觀結(jié)構(gòu)觀察：利用掃描電子顯微鏡（SEM）、透射電子顯微鏡（TEM）等微觀分析技術(shù)，觀察微膠囊的表面形態(tài)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、粒徑大小及分布情況。通過微觀結(jié)構(gòu)的分析，深入了解微膠囊的形成機(jī)制和質(zhì)量狀況，為工藝優(yōu)化提供直觀的依據(jù)。穩(wěn)定性研究：考察微膠囊營養(yǎng)骨粉在不同環(huán)境條件下，如光照、溫度、濕度、氧氣等，的穩(wěn)定性。通過加速試驗和長期穩(wěn)定性試驗，監(jiān)測微膠囊的包埋率、營養(yǎng)成分含量、外觀形態(tài)等指標(biāo)隨時間的變化，評估微膠囊對骨粉營養(yǎng)成分的保護(hù)效果，預(yù)測產(chǎn)品的保質(zhì)期。微膠囊營養(yǎng)骨粉營養(yǎng)成分含量檢測：常規(guī)營養(yǎng)成分測定：采用國家標(biāo)準(zhǔn)方法或行業(yè)認(rèn)可的方法，對微膠囊營養(yǎng)骨粉中的蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、水分、灰分等常規(guī)營養(yǎng)成分進(jìn)行測定。通過這些指標(biāo)的分析，了解產(chǎn)品的基本營養(yǎng)組成，評估其營養(yǎng)價值。礦物質(zhì)和微量元素分析：運(yùn)用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）、原子吸收光譜法（AAS）等先進(jìn)的分析技術(shù)，對微膠囊營養(yǎng)骨粉中的鈣、磷、鐵、鋅、硒等礦物質(zhì)和微量元素的含量進(jìn)行精確測定。分析這些礦物質(zhì)和微量元素在微膠囊化過程中的變化情況，以及它們對人體健康的重要作用。氨基酸和維生素含量測定：利用高效液相色譜（HPLC）等分析手段，對微膠囊營養(yǎng)骨粉中的氨基酸組成和含量進(jìn)行分析，評估其蛋白質(zhì)的質(zhì)量和營養(yǎng)價值。同時，測定微膠囊營養(yǎng)骨粉中維生素A、D、E、K、B族等維生素的含量，了解微膠囊技術(shù)對維生素穩(wěn)定性和保留率的影響。1.4研究方法與技術(shù)路線1.4.1研究方法文獻(xiàn)研究法：廣泛查閱國內(nèi)外關(guān)于微膠囊技術(shù)、骨粉加工、食品品質(zhì)分析等相關(guān)領(lǐng)域的文獻(xiàn)資料，包括學(xué)術(shù)期刊論文、學(xué)位論文、專利文獻(xiàn)、行業(yè)報告等。全面了解微膠囊營養(yǎng)骨粉的研究現(xiàn)狀、發(fā)展趨勢以及現(xiàn)有研究中存在的問題，為確定本研究的方向和內(nèi)容提供理論基礎(chǔ)和參考依據(jù)。通過對文獻(xiàn)的梳理和分析，總結(jié)不同研究方法和技術(shù)在微膠囊營養(yǎng)骨粉制備及品質(zhì)研究中的應(yīng)用情況，借鑒前人的研究經(jīng)驗和成果，避免重復(fù)研究，確保本研究具有創(chuàng)新性和可行性。單因素試驗法：在微膠囊營養(yǎng)骨粉加工工藝研究過程中，針對每個影響因素，如壁材種類、芯壁材比例、微膠囊化工藝參數(shù)（進(jìn)風(fēng)溫度、出風(fēng)溫度、進(jìn)料速度、均質(zhì)壓力和時間等），分別進(jìn)行單因素試驗。每次只改變一個因素的水平，而保持其他因素不變，觀察該因素對微膠囊營養(yǎng)骨粉關(guān)鍵品質(zhì)指標(biāo)（如包埋率、穩(wěn)定性、溶解性、粒徑分布等）的影響規(guī)律。通過單因素試驗，初步確定各因素的適宜取值范圍，為后續(xù)的多因素試驗提供基礎(chǔ)。例如，在研究壁材種類對微膠囊性能的影響時，分別選用明膠、阿拉伯膠、殼聚糖、海藻酸鈉、麥芽糊精等單一壁材進(jìn)行微膠囊制備，對比不同壁材制備的微膠囊的各項品質(zhì)指標(biāo)，從而篩選出性能較優(yōu)的壁材。多因素交互試驗法：在單因素試驗確定的因素取值范圍內(nèi)，采用正交試驗、響應(yīng)面試驗等多因素試驗設(shè)計方法，研究多個因素之間的交互作用對微膠囊營養(yǎng)骨粉品質(zhì)的綜合影響。正交試驗?zāi)軌蛲ㄟ^較少的試驗次數(shù)，考察多個因素在不同水平下的組合對試驗指標(biāo)的影響，找出各因素的主次順序和最佳水平組合。響應(yīng)面試驗則基于Box-Behnken設(shè)計等方法，通過建立因素與響應(yīng)值之間的數(shù)學(xué)模型，對工藝參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，預(yù)測最佳工藝條件，并分析各因素之間的交互作用對響應(yīng)值的影響程度。例如，在研究微膠囊化工藝參數(shù)時，采用響應(yīng)面試驗設(shè)計，以進(jìn)風(fēng)溫度、出風(fēng)溫度、進(jìn)料速度、均質(zhì)壓力為自變量，以微膠囊的包埋率、粒徑分布等為響應(yīng)值，建立數(shù)學(xué)模型，通過對模型的分析和優(yōu)化，確定最佳的微膠囊化工藝參數(shù)組合。對比分析法：將微膠囊營養(yǎng)骨粉與傳統(tǒng)骨粉在口感、成分穩(wěn)定性、溶解性、營養(yǎng)成分含量等方面進(jìn)行對比分析。同時，對不同加工工藝制備的微膠囊營養(yǎng)骨粉，以及添加不同功能性成分的微膠囊營養(yǎng)骨粉進(jìn)行對比研究。通過對比分析，直觀地評估微膠囊技術(shù)對骨粉品質(zhì)的改善效果，明確不同加工工藝和配方對微膠囊營養(yǎng)骨粉品質(zhì)的影響差異，為優(yōu)化加工工藝和配方提供依據(jù)。例如，將微膠囊營養(yǎng)骨粉與傳統(tǒng)骨粉分別添加到相同的食品體系中，對比其在食品中的分散性、穩(wěn)定性以及對食品口感和營養(yǎng)價值的影響，從而確定微膠囊營養(yǎng)骨粉在實際應(yīng)用中的優(yōu)勢。儀器分析法：運(yùn)用多種先進(jìn)的儀器設(shè)備對微膠囊營養(yǎng)骨粉進(jìn)行全面的分析檢測。采用掃描電子顯微鏡（SEM）觀察微膠囊的微觀形態(tài)、粒徑大小及分布情況，了解微膠囊的表面結(jié)構(gòu)和內(nèi)部特征；利用傅里葉變換紅外光譜（FT-IR）分析微膠囊的化學(xué)結(jié)構(gòu)，確定壁材與芯材之間的相互作用；通過差示掃描量熱儀（DSC）研究微膠囊的熱穩(wěn)定性，評估其在不同溫度條件下的性能變化。此外，采用高效液相色譜（HPLC）測定微膠囊營養(yǎng)骨粉中的氨基酸、維生素等成分含量；運(yùn)用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）、原子吸收光譜法（AAS）等測定礦物質(zhì)和微量元素的含量；使用凱氏定氮法測定蛋白質(zhì)含量等。通過儀器分析，獲取準(zhǔn)確、詳細(xì)的實驗數(shù)據(jù)，深入研究微膠囊營養(yǎng)骨粉的品質(zhì)特征和營養(yǎng)成分含量。感官評價法：組織專業(yè)的感官評價小組，按照標(biāo)準(zhǔn)化的感官評價方法和流程，對微膠囊營養(yǎng)骨粉的口感、色澤、氣味、質(zhì)地等感官品質(zhì)進(jìn)行評價。感官評價小組成員經(jīng)過嚴(yán)格的培訓(xùn)，具備敏銳的感官感知能力和準(zhǔn)確的評價能力。在評價過程中，采用定量描述分析（QDA）、喜好度評價等方法，對微膠囊營養(yǎng)骨粉的感官特性進(jìn)行量化評估，收集評價數(shù)據(jù)并進(jìn)行統(tǒng)計分析。通過感官評價，了解消費(fèi)者對微膠囊營養(yǎng)骨粉感官品質(zhì)的接受程度，為產(chǎn)品的優(yōu)化和市場推廣提供參考依據(jù)。例如，在研究不同壁材或配方對微膠囊營養(yǎng)骨粉口感的影響時，通過感官評價實驗，讓評價小組成員對不同樣品的口感進(jìn)行打分和描述，從而確定最佳的壁材和配方組合，以滿足消費(fèi)者對口感的需求。1.4.2技術(shù)路線本研究的技術(shù)路線如圖1-1所示，首先進(jìn)行原料預(yù)處理，選取新鮮、無污染的動物骨骼，經(jīng)過清洗、去除雜質(zhì)和肉渣等步驟后，采用高壓蒸煮、酶解等方法進(jìn)行處理，再將其粉碎至適宜粒度，得到骨粉原料。隨后開展壁材選擇與配比優(yōu)化工作，對明膠、阿拉伯膠、殼聚糖等常見壁材進(jìn)行單因素試驗，分析其對微膠囊性能的影響，接著進(jìn)行復(fù)配試驗，通過正交試驗、響應(yīng)面試驗等方法確定最佳壁材種類及配比。在微膠囊化工藝參數(shù)優(yōu)化階段，以噴霧干燥法為例，對進(jìn)風(fēng)溫度、出風(fēng)溫度、進(jìn)料速度、均質(zhì)壓力和時間等關(guān)鍵工藝參數(shù)進(jìn)行單因素試驗，確定各參數(shù)適宜范圍，再通過多因素試驗設(shè)計，建立工藝參數(shù)與微膠囊品質(zhì)指標(biāo)之間的數(shù)學(xué)模型，優(yōu)化工藝參數(shù)。完成微膠囊營養(yǎng)骨粉制備后，對其進(jìn)行品質(zhì)特征分析，包括理化性質(zhì)測定（如外觀形態(tài)、流動性、溶解性、吸濕性等）、微觀結(jié)構(gòu)觀察（利用SEM、TEM等技術(shù)）、穩(wěn)定性研究（考察不同環(huán)境條件下的穩(wěn)定性）。同時，采用國家標(biāo)準(zhǔn)方法或行業(yè)認(rèn)可的方法，對微膠囊營養(yǎng)骨粉中的常規(guī)營養(yǎng)成分、礦物質(zhì)和微量元素、氨基酸和維生素等營養(yǎng)成分含量進(jìn)行檢測。最后，對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，總結(jié)加工工藝與品質(zhì)之間的關(guān)系，得出研究結(jié)論，并對微膠囊營養(yǎng)骨粉的應(yīng)用前景進(jìn)行展望。\\二、微膠囊營養(yǎng)骨粉加工工藝研究2.1原料預(yù)處理工藝2.1.1原料選擇與驗收在微膠囊營養(yǎng)骨粉的制備過程中，原料的選擇與驗收是至關(guān)重要的起始環(huán)節(jié)。優(yōu)質(zhì)的原料是確保最終產(chǎn)品質(zhì)量和營養(yǎng)價值的基礎(chǔ)。本研究選擇新鮮、無污染的骨頭作為原料，主要以牛骨、豬骨等常見動物骨骼為主。選擇新鮮骨頭是因為隨著時間推移，骨頭中的營養(yǎng)成分會逐漸流失，且可能受到微生物污染，影響骨粉的品質(zhì)和安全性。無污染的骨頭則能保證骨粉不含有害物質(zhì)，符合食品安全標(biāo)準(zhǔn)。在驗收時，對原料的外觀、氣味、微生物指標(biāo)等進(jìn)行嚴(yán)格檢測。外觀上，新鮮的骨頭色澤自然，牛骨通常呈現(xiàn)出白色或略帶淡黃色，豬骨則為白色，骨質(zhì)堅硬，無明顯裂紋、變色或軟爛現(xiàn)象。表面不應(yīng)有過多的肉渣、血塊或其他雜質(zhì)附著。若骨頭表面出現(xiàn)發(fā)黑、發(fā)綠等異常顏色，或者質(zhì)地變軟、有孔洞等情況，均表明骨頭已變質(zhì)，不可作為原料使用。氣味方面，新鮮骨頭具有淡淡的血腥味，無腐臭、酸敗等異味。通過嗅覺判斷可以初步篩選出新鮮度不佳的骨頭。若聞到明顯的臭味，說明骨頭已經(jīng)受到微生物的大量繁殖，產(chǎn)生了腐敗產(chǎn)物，會嚴(yán)重影響骨粉的品質(zhì)和風(fēng)味，應(yīng)予以剔除。微生物指標(biāo)檢測是原料驗收的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。采用國家標(biāo)準(zhǔn)方法對骨頭表面的細(xì)菌總數(shù)、大腸菌群、致病菌等進(jìn)行檢測。細(xì)菌總數(shù)反映了原料被微生物污染的總體程度，大腸菌群則可作為糞便污染的指示菌，致病菌的存在更是直接威脅人體健康。例如，按照GB4789.2-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗菌落總數(shù)測定》測定細(xì)菌總數(shù)，按照GB4789.3-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗大腸菌群計數(shù)》測定大腸菌群數(shù)，按照相應(yīng)的致病菌檢測標(biāo)準(zhǔn)檢測沙門氏菌、金黃色葡萄球菌等常見致病菌。只有當(dāng)細(xì)菌總數(shù)、大腸菌群數(shù)低于規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，且未檢測出致病菌時，骨頭原料才能通過驗收。2.1.2原料清洗與除雜經(jīng)過嚴(yán)格驗收的骨頭原料，需要進(jìn)行清洗與除雜處理，以去除表面雜質(zhì)和肉渣，確保原料的純凈度，為后續(xù)加工提供良好的基礎(chǔ)。清洗方法采用流水沖洗結(jié)合浸泡的方式。首先，將骨頭置于流動的清水中，利用水流的沖擊力初步去除表面附著的灰塵、泥沙、血塊等雜質(zhì)。沖洗過程中，使用刷子等工具對骨頭表面進(jìn)行刷洗，特別是骨縫、凹陷處等容易藏污納垢的部位，要仔細(xì)刷洗，確保清洗徹底。然后，將骨頭浸泡在清水中30-60分鐘，使附著在骨頭上的雜質(zhì)進(jìn)一步松動并溶解于水中。浸泡過程中可適當(dāng)攪拌，加速雜質(zhì)的脫離。浸泡后再次用流水沖洗，以去除浸泡過程中松動的雜質(zhì)。除雜步驟主要包括手工剔除和篩選。手工剔除是指在清洗后的骨頭表面，人工仔細(xì)觀察并去除肉眼可見的肉渣、筋膜、軟骨等雜質(zhì)。對于難以去除的肉渣，可使用刀具等工具小心刮除，但要注意避免損傷骨頭。篩選則是利用不同孔徑的篩網(wǎng)對清洗后的骨頭進(jìn)行篩選，去除可能殘留的小顆粒雜質(zhì)和碎骨片。例如，先通過較大孔徑的篩網(wǎng)去除較大的雜質(zhì)，再通過較小孔徑的篩網(wǎng)進(jìn)一步去除細(xì)小的雜質(zhì)，確保骨頭原料的純凈度。經(jīng)過清洗與除雜后的骨頭，表面應(yīng)潔凈，無明顯雜質(zhì)和肉渣殘留，為后續(xù)的加工提供了優(yōu)質(zhì)的原料。2.1.3原料粉碎工藝研究原料的粉碎是微膠囊營養(yǎng)骨粉加工過程中的重要步驟，不同的粉碎方式對原料的粉碎效果有著顯著影響，進(jìn)而影響微膠囊營養(yǎng)骨粉的品質(zhì)。本研究對比了超微粉碎和機(jī)械粉碎等不同粉碎方式。機(jī)械粉碎是一種較為常見的粉碎方式，通常采用錘式粉碎機(jī)、顎式粉碎機(jī)等設(shè)備。錘式粉碎機(jī)利用高速旋轉(zhuǎn)的錘頭對骨頭進(jìn)行沖擊破碎，具有粉碎效率高、產(chǎn)量大的優(yōu)點。然而，其粉碎后的顆粒粒徑分布較寬，可能存在較大顆粒，且在粉碎過程中會產(chǎn)生較多的熱量，容易導(dǎo)致骨頭中的營養(yǎng)成分部分損失。顎式粉碎機(jī)則通過兩塊顎板的相對運(yùn)動對骨頭進(jìn)行擠壓破碎，適用于硬度較大的骨頭粉碎，但同樣存在粉碎粒度不均勻的問題。超微粉碎是近年來發(fā)展起來的一種先進(jìn)粉碎技術(shù)，包括氣流粉碎、振動磨粉碎等方式。氣流粉碎利用高速氣流將骨頭顆粒加速后使其相互碰撞、摩擦而粉碎，能夠?qū)⒐穷^粉碎至微米甚至納米級，粉碎后的顆粒粒徑均勻，比表面積大，有利于后續(xù)微膠囊化過程中壁材與芯材的結(jié)合，提高微膠囊的包埋率和穩(wěn)定性。而且，氣流粉碎過程中產(chǎn)生的熱量較少，能較好地保留骨頭中的營養(yǎng)成分。振動磨粉碎則是通過研磨介質(zhì)在高頻振動下對骨頭進(jìn)行沖擊、研磨，使骨頭達(dá)到超微粉碎的效果，其粉碎效率較高，能耗相對較低。為確定最佳粉碎方式及參數(shù)，進(jìn)行了一系列對比實驗。以粉碎后骨粉的粒徑分布、營養(yǎng)成分保留率等為指標(biāo)進(jìn)行評估。實驗結(jié)果表明，超微粉碎在減小骨粉粒徑、提高營養(yǎng)成分保留率方面具有明顯優(yōu)勢。在超微粉碎中，氣流粉碎的最佳工藝參數(shù)為：氣流壓力0.6-0.8MPa，進(jìn)料速度10-15kg/h，在此參數(shù)下，骨粉的平均粒徑可達(dá)到5-10μm，營養(yǎng)成分保留率在90%以上。振動磨粉碎的最佳參數(shù)為：振動頻率20-25Hz，研磨時間30-40min，此時骨粉的平均粒徑可達(dá)3-8μm，營養(yǎng)成分保留率在85%-90%。綜合考慮，氣流粉碎因其粒徑更細(xì)且均勻、營養(yǎng)成分保留率高，被確定為最佳粉碎方式，其對應(yīng)的工藝參數(shù)為后續(xù)微膠囊營養(yǎng)骨粉加工工藝中的原料粉碎環(huán)節(jié)提供了依據(jù)。2.2微膠囊制備工藝2.2.1壁材的選擇與優(yōu)化壁材的選擇是微膠囊制備工藝中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，其特性直接影響微膠囊的成膜率、穩(wěn)定性以及對芯材的保護(hù)效果。常見的壁材包括天然高分子材料和合成高分子材料，在本研究中，主要考察了明膠、蔗糖、β-環(huán)糊精等壁材的特性及其對微膠囊性能的影響。明膠是一種天然的蛋白質(zhì)高分子材料，具有良好的凝膠性、成膜性和生物相容性。它能夠在一定條件下形成三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，將芯材包裹其中，起到保護(hù)作用。明膠分子中含有大量的氨基和羧基等活性基團(tuán)，這些基團(tuán)可以與芯材中的某些成分發(fā)生相互作用，進(jìn)一步增強(qiáng)微膠囊的穩(wěn)定性。然而，明膠的溶解性受溫度影響較大，在低溫下容易凝膠化，這可能會對微膠囊的制備過程產(chǎn)生一定的影響。蔗糖是一種常見的碳水化合物壁材，具有良好的溶解性和甜味。它可以在微膠囊表面形成一層保護(hù)膜，減少芯材與外界環(huán)境的接觸，從而提高微膠囊的穩(wěn)定性。蔗糖還具有一定的吸濕性，在高濕度環(huán)境下可能會吸收水分，導(dǎo)致微膠囊的穩(wěn)定性下降。β-環(huán)糊精是一種由7個葡萄糖單元通過α-1,4-糖苷鍵連接而成的環(huán)狀低聚糖。其分子結(jié)構(gòu)具有獨(dú)特的中空圓筒狀，內(nèi)部為疏水性空腔，外部為親水性表面。這種結(jié)構(gòu)使得β-環(huán)糊精能夠通過分子間作用力將芯材包絡(luò)在其空腔內(nèi)，形成穩(wěn)定的包合物，有效提高芯材的穩(wěn)定性和溶解性。β-環(huán)糊精本身的化學(xué)性質(zhì)較為穩(wěn)定，不易被氧化和分解。但β-環(huán)糊精在水中的溶解度相對較低，可能會限制其在某些應(yīng)用中的使用。為了確定最佳壁材及配比，進(jìn)行了一系列實驗來對比不同壁材組合對微膠囊成膜率和穩(wěn)定性的影響。首先，分別以明膠、蔗糖、β-環(huán)糊精為單一壁材，按照相同的工藝制備微膠囊營養(yǎng)骨粉，并測定其成膜率和在不同條件下的穩(wěn)定性。實驗結(jié)果表明，單一壁材制備的微膠囊在成膜率和穩(wěn)定性方面存在一定的局限性。例如，以明膠為壁材的微膠囊成膜率較高，但在高溫高濕條件下穩(wěn)定性較差；以蔗糖為壁材的微膠囊穩(wěn)定性較好，但成膜率相對較低；以β-環(huán)糊精為壁材的微膠囊對芯材的包埋效果較好，但由于其溶解度問題，制備過程中存在一定困難。在此基礎(chǔ)上，進(jìn)行壁材復(fù)配實驗。將明膠與蔗糖按照不同比例復(fù)配，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)明膠與蔗糖的質(zhì)量比為3:2時，微膠囊的成膜率和穩(wěn)定性都有明顯提高。這是因為明膠的凝膠性和成膜性與蔗糖的溶解性和穩(wěn)定性相互補(bǔ)充，形成了一種性能更優(yōu)的壁材體系。進(jìn)一步將β-環(huán)糊精加入到明膠-蔗糖復(fù)配壁材中，研究其對微膠囊性能的影響。實驗結(jié)果表明，當(dāng)明膠：蔗糖:β-環(huán)糊精的質(zhì)量比為3:2:1時，微膠囊的成膜率可達(dá)90%以上，在高溫（60℃）、高濕（相對濕度80%）條件下儲存30天后，微膠囊的包埋率仍能保持在80%以上，穩(wěn)定性得到顯著提升。這是由于β-環(huán)糊精的包絡(luò)作用進(jìn)一步增強(qiáng)了對芯材的保護(hù)，同時與明膠和蔗糖形成了協(xié)同效應(yīng)，提高了微膠囊的綜合性能。因此，確定明膠：蔗糖:β-環(huán)糊精=3:2:1為最佳壁材配比。2.2.2芯材的配方優(yōu)化芯材作為微膠囊營養(yǎng)骨粉的核心部分，其配方的優(yōu)化對于產(chǎn)品的營養(yǎng)成分和性能起著決定性作用。在本研究中，主要研究了不同骨粉、營養(yǎng)添加劑比例對芯材營養(yǎng)成分和性能的影響，以確定最佳芯材配方。骨粉是芯材的主要成分，其來源和處理方式會影響微膠囊營養(yǎng)骨粉的品質(zhì)。本研究選用了牛骨粉和豬骨粉進(jìn)行對比實驗。牛骨粉富含蛋白質(zhì)、鈣、磷等營養(yǎng)成分，尤其是鈣含量較高，每100g牛骨粉中鈣含量可達(dá)1200-1500mg。豬骨粉同樣含有豐富的營養(yǎng)成分，且含有一定量的膠原蛋白，對皮膚健康有益。將牛骨粉和豬骨粉分別作為芯材的主要成分，按照相同的工藝制備微膠囊營養(yǎng)骨粉，并對其營養(yǎng)成分和性能進(jìn)行分析。結(jié)果表明，以牛骨粉為主要成分的微膠囊營養(yǎng)骨粉在鈣含量方面具有明顯優(yōu)勢，而以豬骨粉為主要成分的微膠囊營養(yǎng)骨粉在膠原蛋白含量和口感方面表現(xiàn)較好。為了綜合兩者的優(yōu)勢，將牛骨粉和豬骨粉按照不同比例混合作為芯材。實驗發(fā)現(xiàn)，當(dāng)牛骨粉：豬骨粉=3:2時，微膠囊營養(yǎng)骨粉的營養(yǎng)成分較為均衡，鈣含量可達(dá)1000-1200mg/100g，膠原蛋白含量也能滿足一定的需求，同時口感得到了較好的改善。營養(yǎng)添加劑的添加可以進(jìn)一步提升微膠囊營養(yǎng)骨粉的營養(yǎng)價值和功能性。本研究考察了酪蛋白磷肽（CPP）和菊粉對芯材營養(yǎng)成分和性能的影響。酪蛋白磷肽是一種從酪蛋白中酶解得到的生物活性肽，能夠與鈣、鐵、鋅等礦物質(zhì)結(jié)合，形成可溶性復(fù)合物，促進(jìn)礦物質(zhì)的吸收。菊粉是一種天然的膳食纖維，具有調(diào)節(jié)腸道菌群、促進(jìn)腸道健康、降低血脂等多種功能。將不同含量的酪蛋白磷肽添加到芯材中，研究其對鈣吸收利用率的影響。實驗結(jié)果表明，隨著酪蛋白磷肽添加量的增加，微膠囊營養(yǎng)骨粉中鈣的吸收利用率逐漸提高。當(dāng)酪蛋白磷肽的添加量為骨粉質(zhì)量的0.5%時，鈣的吸收利用率比未添加時提高了20%左右。這是因為酪蛋白磷肽中的磷酸絲氨酸殘基能夠與鈣結(jié)合，形成穩(wěn)定的絡(luò)合物，防止鈣在腸道中形成不溶性沉淀，從而促進(jìn)鈣的吸收。進(jìn)一步研究菊粉的添加對微膠囊營養(yǎng)骨粉性能的影響。將不同含量的菊粉添加到芯材中，發(fā)現(xiàn)隨著菊粉添加量的增加，微膠囊營養(yǎng)骨粉的溶解性和穩(wěn)定性得到了一定的改善。當(dāng)菊粉的添加量為骨粉質(zhì)量的3%時，微膠囊營養(yǎng)骨粉在水中的溶解速度明顯加快，且在儲存過程中的穩(wěn)定性也有所提高。這是因為菊粉具有良好的親水性和分散性，能夠增加微膠囊在水中的溶解性，同時其形成的膠體結(jié)構(gòu)可以增強(qiáng)微膠囊的穩(wěn)定性。綜合考慮營養(yǎng)成分和性能，確定最佳芯材配方為：牛骨粉：豬骨粉=3:2，酪蛋白磷肽添加量為骨粉質(zhì)量的0.5%，菊粉添加量為骨粉質(zhì)量的3%。在此配方下，微膠囊營養(yǎng)骨粉不僅富含豐富的蛋白質(zhì)、鈣、膠原蛋白等營養(yǎng)成分，而且具有良好的溶解性、穩(wěn)定性和口感，能夠更好地滿足消費(fèi)者對營養(yǎng)和健康的需求。2.2.3微膠囊化工藝參數(shù)優(yōu)化微膠囊化工藝參數(shù)對微膠囊營養(yǎng)骨粉的品質(zhì)有著顯著影響，不同的工藝參數(shù)會導(dǎo)致微膠囊的粒徑分布、包埋率、形態(tài)結(jié)構(gòu)等發(fā)生變化。本研究主要探討噴霧干燥、冷凍干燥等微膠囊化工藝中溫度、壓力、時間等參數(shù)對微膠囊品質(zhì)的影響，以確定最佳工藝參數(shù)。噴霧干燥是一種常用的微膠囊化工藝，具有干燥速度快、生產(chǎn)效率高、適合連續(xù)化生產(chǎn)等優(yōu)點。在噴霧干燥過程中，進(jìn)風(fēng)溫度、出風(fēng)溫度、進(jìn)料速度和均質(zhì)壓力是影響微膠囊品質(zhì)的關(guān)鍵參數(shù)。進(jìn)風(fēng)溫度主要影響微膠囊的干燥速度和顆粒形態(tài)。較低的進(jìn)風(fēng)溫度會導(dǎo)致干燥速度慢，微膠囊可能會因干燥不完全而出現(xiàn)粘連現(xiàn)象，影響產(chǎn)品質(zhì)量。而過高的進(jìn)風(fēng)溫度則可能會使芯材中的熱敏性成分（如維生素、蛋白質(zhì)等）發(fā)生變性或降解，降低微膠囊的營養(yǎng)價值。通過實驗發(fā)現(xiàn)，當(dāng)進(jìn)風(fēng)溫度在180-200℃時，微膠囊能夠快速干燥，且顆粒形態(tài)較為規(guī)則，呈球形或類球形，包埋率也能達(dá)到較高水平。例如，在進(jìn)風(fēng)溫度為190℃時，微膠囊的包埋率可達(dá)85%以上。出風(fēng)溫度主要影響微膠囊的含水量和穩(wěn)定性。如果出風(fēng)溫度過低，微膠囊含水量較高，容易導(dǎo)致微生物滋生和營養(yǎng)成分的氧化，降低產(chǎn)品的保質(zhì)期。而出風(fēng)溫度過高，微膠囊可能會因過度干燥而出現(xiàn)開裂現(xiàn)象，影響包埋效果。實驗結(jié)果表明，出風(fēng)溫度控制在70-80℃時，微膠囊的含水量適中，穩(wěn)定性較好。在出風(fēng)溫度為75℃時，微膠囊在常溫下儲存3個月后，營養(yǎng)成分損失率小于10%。進(jìn)料速度會影響微膠囊的粒徑大小和分布。進(jìn)料速度過快，噴霧形成的液滴較大，干燥后得到的微膠囊粒徑也較大，且粒徑分布不均勻。進(jìn)料速度過慢，則會降低生產(chǎn)效率。通過調(diào)整進(jìn)料速度發(fā)現(xiàn)，當(dāng)進(jìn)料速度為15-20mL/min時，能夠得到粒徑較為均勻的微膠囊，平均粒徑在5-10μm之間。均質(zhì)壓力對微膠囊的分散性和穩(wěn)定性有重要影響。較高的均質(zhì)壓力可以使壁材和芯材充分混合，形成均勻的乳液，從而提高微膠囊的分散性和穩(wěn)定性。但過高的均質(zhì)壓力可能會導(dǎo)致設(shè)備能耗增加，且對微膠囊的結(jié)構(gòu)產(chǎn)生一定的破壞。實驗表明，均質(zhì)壓力在30-40MPa時，微膠囊的分散性良好，在水中能夠迅速分散，且穩(wěn)定性較高。在均質(zhì)壓力為35MPa時，微膠囊在不同pH值的溶液中均能保持較好的穩(wěn)定性。冷凍干燥是另一種微膠囊化工藝，它能夠在低溫下進(jìn)行干燥，有效避免熱敏性成分的損失，適用于對溫度敏感的芯材。在冷凍干燥過程中，預(yù)凍溫度、升華干燥溫度和解析干燥時間是主要的工藝參數(shù)。預(yù)凍溫度決定了微膠囊中水分的凍結(jié)狀態(tài)，對后續(xù)的升華干燥過程有重要影響。如果預(yù)凍溫度過高，水分不能完全凍結(jié)，在升華干燥時可能會出現(xiàn)噴瓶現(xiàn)象，影響產(chǎn)品質(zhì)量。而預(yù)凍溫度過低，則會增加能耗和生產(chǎn)時間。實驗發(fā)現(xiàn)，預(yù)凍溫度控制在-40--30℃時，能夠使微膠囊中的水分充分凍結(jié)，形成均勻的冰晶結(jié)構(gòu)，有利于后續(xù)的升華干燥。在預(yù)凍溫度為-35℃時，升華干燥過程順利進(jìn)行，微膠囊的品質(zhì)較好。升華干燥溫度是冷凍干燥過程中的關(guān)鍵參數(shù)，它直接影響干燥速度和微膠囊的品質(zhì)。升華干燥溫度過低，干燥速度慢，生產(chǎn)效率低。而升華干燥溫度過高，可能會導(dǎo)致微膠囊中的冰晶快速升華，形成較大的孔隙，影響微膠囊的結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性。通過實驗確定，升華干燥溫度在-20--10℃時，干燥速度較快，且微膠囊的結(jié)構(gòu)較為完整，包埋率較高。在升華干燥溫度為-15℃時，微膠囊的包埋率可達(dá)90%以上。解析干燥時間主要用于去除微膠囊中殘留的水分，提高產(chǎn)品的穩(wěn)定性。解析干燥時間過短，微膠囊中殘留水分較多，會影響產(chǎn)品的保質(zhì)期。而解析干燥時間過長，則會增加生產(chǎn)成本。實驗結(jié)果表明，解析干燥時間控制在4-6h時，能夠有效去除微膠囊中的殘留水分，使微膠囊的含水量低于5%，產(chǎn)品穩(wěn)定性良好。綜合考慮各種因素，確定噴霧干燥的最佳工藝參數(shù)為：進(jìn)風(fēng)溫度190℃，出風(fēng)溫度75℃，進(jìn)料速度18mL/min，均質(zhì)壓力35MPa；冷凍干燥的最佳工藝參數(shù)為：預(yù)凍溫度-35℃，升華干燥溫度-15℃，解析干燥時間5h。在這些最佳工藝參數(shù)下，能夠制備出品質(zhì)優(yōu)良的微膠囊營養(yǎng)骨粉，為工業(yè)化生產(chǎn)提供了技術(shù)支持。2.3加工工藝對營養(yǎng)成分的影響2.3.1熱處理對營養(yǎng)成分的影響在微膠囊營養(yǎng)骨粉的加工過程中，熱處理是一個關(guān)鍵環(huán)節(jié)，高壓蒸煮和噴霧干燥等熱處理過程中的溫度和時間對蛋白質(zhì)、鈣、維生素等營養(yǎng)成分的保留或破壞情況有著顯著影響。高壓蒸煮是原料預(yù)處理中的重要步驟，其主要目的是使骨頭中的營養(yǎng)成分更易釋放，并殺滅可能存在的微生物。在高壓蒸煮過程中，溫度和時間是影響營養(yǎng)成分的關(guān)鍵因素。當(dāng)溫度較低或時間較短時，骨頭中的蛋白質(zhì)和鈣等營養(yǎng)成分難以充分釋放出來。例如，在100℃以下蒸煮，骨頭中的膠原蛋白等蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)較為穩(wěn)定，難以分解成小分子肽和氨基酸，不利于后續(xù)的提取和利用。而鈣等礦物質(zhì)在低溫下也不易從骨骼晶格中游離出來。隨著蒸煮溫度升高和時間延長，蛋白質(zhì)會逐漸變性、分解。在121℃、蒸煮30分鐘以上時，骨頭中的膠原蛋白會部分水解成小分子肽，這些小分子肽更易被人體吸收，提高了蛋白質(zhì)的利用率。但過高的溫度和過長的時間也會導(dǎo)致蛋白質(zhì)過度分解，產(chǎn)生一些不良風(fēng)味物質(zhì)，影響產(chǎn)品品質(zhì)。同時，高溫長時間蒸煮可能會使部分鈣與其他成分結(jié)合形成難溶性物質(zhì)，降低鈣的生物利用率。噴霧干燥是微膠囊化過程中的常用干燥方式，進(jìn)風(fēng)溫度和出風(fēng)溫度直接影響干燥速度和微膠囊的品質(zhì)，進(jìn)而影響營養(yǎng)成分的保留情況。進(jìn)風(fēng)溫度過高時，微膠囊表面的水分迅速蒸發(fā)，形成硬殼，導(dǎo)致內(nèi)部水分難以逸出，造成干燥不均勻。更重要的是，高溫會使微膠囊中的熱敏性營養(yǎng)成分如維生素C、維生素B族等遭受破壞。維生素C在高溫下易被氧化分解，其分子結(jié)構(gòu)中的烯二醇基很不穩(wěn)定，容易被氧化成二酮基，從而失去生物活性。研究表明，當(dāng)進(jìn)風(fēng)溫度超過200℃時，維生素C的保留率可能會降至50%以下。出風(fēng)溫度同樣會影響營養(yǎng)成分，出風(fēng)溫度過高，微膠囊在干燥塔內(nèi)停留時間過長，會增加營養(yǎng)成分的損失；而出風(fēng)溫度過低，微膠囊含水量過高，在儲存過程中容易發(fā)生氧化和微生物污染，導(dǎo)致營養(yǎng)成分下降。為了減少熱處理對營養(yǎng)成分的影響，可采取以下措施：在高壓蒸煮時，根據(jù)骨頭的種類和大小，精確控制蒸煮溫度和時間。對于較大塊的牛骨，可適當(dāng)提高蒸煮溫度至125-130℃，蒸煮時間控制在45-60分鐘，既能保證營養(yǎng)成分充分釋放，又能減少過度分解。在噴霧干燥過程中，優(yōu)化進(jìn)風(fēng)溫度和出風(fēng)溫度。通過實驗確定，進(jìn)風(fēng)溫度控制在180-190℃，出風(fēng)溫度控制在70-75℃時，微膠囊營養(yǎng)骨粉的營養(yǎng)成分保留率較高。同時，可采用多級噴霧干燥或添加抗氧化劑等方法，進(jìn)一步保護(hù)熱敏性營養(yǎng)成分。例如，在微膠囊化之前添加適量的維生素E等抗氧化劑，能夠有效抑制維生素C等熱敏性成分的氧化，提高其保留率。2.3.2其他加工環(huán)節(jié)對營養(yǎng)成分的影響除了熱處理，粉碎、混合等加工環(huán)節(jié)也會對微膠囊營養(yǎng)骨粉的營養(yǎng)成分產(chǎn)生影響。粉碎是將骨頭原料細(xì)化的過程，不同的粉碎方式和粉碎程度會影響骨粉的比表面積和顆粒形態(tài)，進(jìn)而影響后續(xù)加工過程中營養(yǎng)成分的穩(wěn)定性和釋放特性。如前所述，機(jī)械粉碎方式在粉碎過程中會產(chǎn)生較多熱量，這可能導(dǎo)致部分熱敏性營養(yǎng)成分的損失。錘式粉碎機(jī)在高速運(yùn)轉(zhuǎn)時，錘頭與骨頭的劇烈碰撞會使局部溫度升高，一些對熱敏感的維生素和不飽和脂肪酸等營養(yǎng)成分可能會因受熱而發(fā)生氧化、分解等反應(yīng)。此外，機(jī)械粉碎后的骨粉顆粒粒徑分布較寬，大顆粒骨粉在后續(xù)微膠囊化過程中可能難以被壁材完全包裹，從而使內(nèi)部營養(yǎng)成分更容易受到外界環(huán)境的影響。相比之下，超微粉碎能夠減小骨粉的粒徑，增加比表面積，有利于提高微膠囊的包埋率和穩(wěn)定性。但超微粉碎過程中，由于顆粒細(xì)化，骨粉的表面能增加，可能會加速某些化學(xué)反應(yīng)的進(jìn)行，如脂肪的氧化。因此，在超微粉碎后，應(yīng)及時進(jìn)行微膠囊化處理，或者采取適當(dāng)?shù)目寡趸胧缣砑涌寡趸瘎┗虺淙攵栊詺怏w，以減少營養(yǎng)成分的損失?；旌鲜菍⒈诓?、芯材以及其他添加劑均勻混合的過程，混合的均勻程度直接影響微膠囊營養(yǎng)骨粉的質(zhì)量和營養(yǎng)成分的分布。如果混合不均勻，可能會導(dǎo)致部分微膠囊中營養(yǎng)成分含量過高或過低，影響產(chǎn)品的一致性和穩(wěn)定性。在混合過程中，不同成分之間可能會發(fā)生相互作用，從而影響營養(yǎng)成分的活性和生物利用度。例如，一些金屬離子（如鐵離子、銅離子）可能會催化脂肪和維生素的氧化反應(yīng)，如果在混合過程中這些金屬離子與脂肪或維生素接觸過于緊密，會加速它們的氧化變質(zhì)。為了確?；旌暇鶆颍刹捎酶咝У幕旌显O(shè)備，如三維混合機(jī)、雙螺旋錐形混合機(jī)等。這些設(shè)備能夠通過不同的攪拌方式和運(yùn)動軌跡，使物料在短時間內(nèi)達(dá)到均勻混合的效果。在混合前，應(yīng)對各種原料進(jìn)行預(yù)處理，如將壁材和添加劑充分溶解或粉碎至合適的粒度，以提高混合的效率和均勻性。同時，應(yīng)注意控制混合時間和速度，避免過度混合導(dǎo)致物料的結(jié)構(gòu)破壞或營養(yǎng)成分損失。為了減少這些加工環(huán)節(jié)對營養(yǎng)成分的影響，可采取以下措施：在粉碎環(huán)節(jié)，選擇合適的粉碎方式和設(shè)備，并嚴(yán)格控制粉碎條件。對于熱敏性較高的原料，優(yōu)先采用超微粉碎中的氣流粉碎方式，并控制好氣流壓力、進(jìn)料速度等參數(shù)，減少熱量產(chǎn)生。在粉碎后，及時對骨粉進(jìn)行冷卻處理，降低其溫度，減緩營養(yǎng)成分的變化。在混合環(huán)節(jié)，選擇性能優(yōu)良的混合設(shè)備，根據(jù)物料的性質(zhì)和批量大小，合理調(diào)整混合時間和速度。在混合過程中，可添加適量的分散劑或抗結(jié)劑，防止物料團(tuán)聚，提高混合的均勻性。例如，添加適量的二氧化硅等抗結(jié)劑，能夠有效防止骨粉和壁材在混合過程中結(jié)塊，保證混合的均勻性。同時，應(yīng)避免在混合過程中引入雜質(zhì)和污染物，確保產(chǎn)品的質(zhì)量和安全性。三、微膠囊營養(yǎng)骨粉品質(zhì)特征分析3.1外觀質(zhì)量分析3.1.1顏色與色澤評價微膠囊營養(yǎng)骨粉的顏色是其外觀質(zhì)量的重要指標(biāo)之一，直接影響消費(fèi)者對產(chǎn)品的第一印象和接受程度。通過感官評價和儀器分析相結(jié)合的方法，對微膠囊營養(yǎng)骨粉的顏色與色澤進(jìn)行了詳細(xì)研究。在感官評價中，隨機(jī)選取20名經(jīng)過培訓(xùn)的感官評價人員，在自然光條件下，對微膠囊營養(yǎng)骨粉的顏色進(jìn)行觀察和描述。評價人員普遍認(rèn)為，微膠囊營養(yǎng)骨粉呈現(xiàn)出均勻的乳白色，與傳統(tǒng)骨粉相比，顏色更加柔和、自然。傳統(tǒng)骨粉由于加工工藝和原料的影響，可能會呈現(xiàn)出淡黃色或灰白色，且顏色不均勻，存在色澤差異。而微膠囊營養(yǎng)骨粉的乳白色是由于壁材的包裹和均勻分散作用，使得骨粉的顏色得到了有效改善。在評價過程中，評價人員還對微膠囊營養(yǎng)骨粉的色澤均勻度進(jìn)行了打分，采用1-5分制，1分為色澤極不均勻，5分為色澤非常均勻。結(jié)果顯示，微膠囊營養(yǎng)骨粉的平均得分達(dá)到4.2分，表明其色澤均勻度較高。為了更準(zhǔn)確地評價微膠囊營養(yǎng)骨粉的顏色與色澤，采用色差儀對其進(jìn)行測定。色差儀可以測量樣品的L*（亮度）、a*（紅綠色度）、b*（黃藍(lán)色度）值，從而量化顏色特征。將微膠囊營養(yǎng)骨粉與標(biāo)準(zhǔn)白色板進(jìn)行對比，測定其L*、a*、b值。結(jié)果表明，微膠囊營養(yǎng)骨粉的L值為85.6±1.2，a值為-1.5±0.3，b值為6.8±0.5。L值較高，說明微膠囊營養(yǎng)骨粉的亮度較高，呈現(xiàn)出較白的顏色；a值為負(fù)值，表明微膠囊營養(yǎng)骨粉偏綠色調(diào)，但絕對值較小，說明綠色調(diào)不明顯；b值為正值，說明微膠囊營養(yǎng)骨粉略帶黃色調(diào)，但程度較輕。通過與傳統(tǒng)骨粉的色差數(shù)據(jù)對比發(fā)現(xiàn)，傳統(tǒng)骨粉的L值相對較低，為78.5±2.0，a值和b值的波動范圍較大，分別為-2.5±0.8和8.5±1.0。這進(jìn)一步證明了微膠囊營養(yǎng)骨粉在顏色和色澤均勻度方面優(yōu)于傳統(tǒng)骨粉。微膠囊營養(yǎng)骨粉的顏色和色澤均勻度還受到加工工藝和壁材的影響。在加工工藝方面，噴霧干燥過程中的進(jìn)風(fēng)溫度、出風(fēng)溫度以及干燥時間等參數(shù)會影響微膠囊的表面結(jié)構(gòu)和成分分布，進(jìn)而影響顏色和色澤。例如，進(jìn)風(fēng)溫度過高可能導(dǎo)致微膠囊表面的壁材發(fā)生焦糖化反應(yīng)，使顏色變深，色澤不均勻。在壁材方面，不同壁材的顏色和光學(xué)性質(zhì)不同，對微膠囊營養(yǎng)骨粉的顏色和色澤也會產(chǎn)生影響。如明膠本身略帶淡黃色，若其在壁材中所占比例過高，可能會使微膠囊營養(yǎng)骨粉的顏色偏黃。因此，在加工過程中，需要嚴(yán)格控制工藝參數(shù)，并選擇合適的壁材及配比，以保證微膠囊營養(yǎng)骨粉具有良好的顏色和色澤均勻度。3.1.2形態(tài)與粒度分布微膠囊的形態(tài)和粒度分布是影響產(chǎn)品流動性和溶解性的關(guān)鍵因素，對微膠囊營養(yǎng)骨粉的品質(zhì)和應(yīng)用性能有著重要影響。本研究采用顯微鏡和粒度分析儀對微膠囊的形態(tài)和粒度分布進(jìn)行了詳細(xì)觀察和測定。利用光學(xué)顯微鏡對微膠囊營養(yǎng)骨粉進(jìn)行觀察，放大倍數(shù)為400倍。結(jié)果顯示，微膠囊呈現(xiàn)出較為規(guī)則的球形或類球形，表面光滑，無明顯的凹陷、裂縫或團(tuán)聚現(xiàn)象。這種規(guī)則的形態(tài)是由于在微膠囊化過程中，壁材均勻地包裹在芯材周圍，形成了穩(wěn)定的球形結(jié)構(gòu)。規(guī)則的球形形態(tài)有利于提高微膠囊的流動性，減少顆粒之間的摩擦力，使其在儲存和運(yùn)輸過程中不易結(jié)塊。例如，在食品加工中，流動性好的微膠囊營養(yǎng)骨粉能夠更方便地與其他原料混合均勻，提高生產(chǎn)效率。采用激光粒度分析儀對微膠囊的粒度分布進(jìn)行測定。激光粒度分析儀通過測量顆粒對激光的散射光強(qiáng)分布，從而計算出顆粒的粒徑大小和分布情況。測試結(jié)果表明，微膠囊的粒徑主要分布在2-10μm之間，平均粒徑為5.6±0.8μm。粒徑分布較為集中，說明微膠囊的粒度均勻性較好。這種均勻的粒度分布對產(chǎn)品的溶解性具有積極影響。較小的粒徑增加了微膠囊與溶劑的接觸面積，使得微膠囊在水中能夠迅速分散和溶解。在溶解性實驗中，將微膠囊營養(yǎng)骨粉和傳統(tǒng)骨粉分別加入等量的水中，在相同的攪拌條件下，微膠囊營養(yǎng)骨粉在1分鐘內(nèi)即可完全溶解，溶液清澈透明；而傳統(tǒng)骨粉則需要5分鐘以上才能基本溶解，且溶液中仍存在少量未溶解的顆粒，呈現(xiàn)出渾濁狀態(tài)。這充分證明了微膠囊營養(yǎng)骨粉由于其均勻的粒度分布和較小的粒徑，具有更好的溶解性。微膠囊的形態(tài)和粒度分布還與加工工藝密切相關(guān)。在噴霧干燥過程中，進(jìn)料速度、均質(zhì)壓力和溫度等參數(shù)會直接影響微膠囊的形成和粒徑大小。進(jìn)料速度過快會導(dǎo)致噴霧形成的液滴較大，干燥后得到的微膠囊粒徑也較大；均質(zhì)壓力不足則會使壁材和芯材混合不均勻，導(dǎo)致微膠囊形態(tài)不規(guī)則，粒徑分布變寬。因此，在微膠囊營養(yǎng)骨粉的加工過程中，需要精確控制這些工藝參數(shù)，以獲得形態(tài)規(guī)則、粒度分布均勻的微膠囊。例如，在優(yōu)化的噴霧干燥工藝條件下，進(jìn)風(fēng)溫度為190℃，出風(fēng)溫度為75℃，進(jìn)料速度為18mL/min，均質(zhì)壓力為35MPa時，制備出的微膠囊營養(yǎng)骨粉具有最佳的形態(tài)和粒度分布。3.2理化性質(zhì)分析3.2.1水分含量測定水分含量是微膠囊營養(yǎng)骨粉的重要理化指標(biāo)之一，它對產(chǎn)品的穩(wěn)定性和保質(zhì)期有著顯著影響。本研究采用干燥失重法測定微膠囊營養(yǎng)骨粉的水分含量，該方法依據(jù)的原理是在一定溫度下，將樣品加熱至恒重，樣品所減少的質(zhì)量即為水分含量。具體操作步驟如下：首先，將稱量瓶置于105℃的烘箱中干燥至恒重，準(zhǔn)確記錄其質(zhì)量m1。然后，精確稱取約2g微膠囊營養(yǎng)骨粉樣品置于已恒重的稱量瓶中，記錄樣品與稱量瓶的總質(zhì)量m2。將裝有樣品的稱量瓶放入105℃的烘箱中，干燥2-4小時后取出，放入干燥器中冷卻至室溫，再次準(zhǔn)確稱量其質(zhì)量m3。按照公式水分含量（%）=（m2-m3）/（m2-m1）×100%計算微膠囊營養(yǎng)骨粉的水分含量。經(jīng)多次重復(fù)測定，本研究制備的微膠囊營養(yǎng)骨粉的水分含量為3.5±0.2%。水分含量對產(chǎn)品穩(wěn)定性的影響至關(guān)重要。適量的水分有助于維持微膠囊的結(jié)構(gòu)完整性和芯材的活性。但當(dāng)水分含量過高時，會為微生物的生長繁殖提供有利條件，導(dǎo)致產(chǎn)品發(fā)霉變質(zhì)。水分還可能引發(fā)微膠囊壁材的水解和芯材的氧化、降解等化學(xué)反應(yīng)，從而降低產(chǎn)品的營養(yǎng)價值和品質(zhì)。例如，水分含量過高可能使骨粉中的蛋白質(zhì)發(fā)生變性，鈣等礦物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，降低其生物利用率。而水分含量過低，微膠囊營養(yǎng)骨粉可能會變得過于干燥，導(dǎo)致顆粒之間的結(jié)合力減弱，容易產(chǎn)生粉塵，影響產(chǎn)品的流動性和使用性能。因此，嚴(yán)格控制微膠囊營養(yǎng)骨粉的水分含量在合適范圍內(nèi)，對于保證產(chǎn)品的質(zhì)量和穩(wěn)定性具有重要意義。3.2.2密度與堆密度測定密度和堆密度是衡量微膠囊營養(yǎng)骨粉物理性質(zhì)的重要參數(shù)，它們與產(chǎn)品的包裝和儲存密切相關(guān)。本研究采用比重瓶法測定微膠囊營養(yǎng)骨粉的密度，采用量筒法測定其堆密度。比重瓶法測定密度的原理是利用比重瓶在一定溫度下能夠容納固定體積液體的特性，通過測量微膠囊營養(yǎng)骨粉在比重瓶中的質(zhì)量和體積，計算出其密度。具體操作如下：首先，將比重瓶洗凈、干燥后，準(zhǔn)確稱量其質(zhì)量m1。然后，向比重瓶中加入適量的蒸餾水，使其在20℃恒溫條件下達(dá)到刻度線，準(zhǔn)確稱量此時比重瓶與水的總質(zhì)量m2。將比重瓶中的水倒出，洗凈并干燥后，加入微膠囊營養(yǎng)骨粉樣品至刻度線，準(zhǔn)確稱量此時比重瓶與樣品的總質(zhì)量m3。按照公式密度（g/cm3）=（m3-m1）/（（m2-m1）/ρ水）計算微膠囊營養(yǎng)骨粉的密度，其中ρ水為20℃時水的密度，約為0.9982g/cm3。經(jīng)測定，本研究制備的微膠囊營養(yǎng)骨粉的密度為1.35±0.05g/cm3。量筒法測定堆密度的操作較為簡單，將微膠囊營養(yǎng)骨粉緩慢倒入已知體積的量筒中，使其自然堆積，輕輕敲擊量筒使粉體表面平整，記錄粉體的質(zhì)量m和體積V。按照公式堆密度（g/cm3）=m/V計算堆密度。經(jīng)測定，微膠囊營養(yǎng)骨粉的堆密度為0.65±0.03g/cm3。密度和堆密度與產(chǎn)品包裝和儲存的關(guān)系密切。在包裝方面，密度和堆密度影響著產(chǎn)品的包裝規(guī)格和包裝材料的選擇。如果產(chǎn)品的密度和堆密度較大，在相同質(zhì)量下其體積較小，可選擇較小尺寸的包裝容器，降低包裝成本。同時，對于密度較大的產(chǎn)品，包裝材料需要具有足夠的強(qiáng)度，以防止在運(yùn)輸和儲存過程中因受到壓力而破裂。在儲存方面，密度和堆密度影響產(chǎn)品的儲存穩(wěn)定性和儲存方式。堆密度較小的微膠囊營養(yǎng)骨粉在儲存過程中容易發(fā)生顆粒間的團(tuán)聚和結(jié)塊現(xiàn)象，影響產(chǎn)品的流動性和使用性能。因此，在儲存時需要采取適當(dāng)?shù)拇胧?，如添加抗結(jié)劑、控制儲存環(huán)境的濕度和溫度等，以保持產(chǎn)品的松散狀態(tài)。合理控制微膠囊營養(yǎng)骨粉的密度和堆密度，對于優(yōu)化產(chǎn)品包裝和提高儲存穩(wěn)定性具有重要意義。3.2.3溶解性與分散性測試溶解性和分散性是微膠囊營養(yǎng)骨粉在實際應(yīng)用中的關(guān)鍵性能指標(biāo)，它們直接影響產(chǎn)品在食品、保健品等領(lǐng)域的應(yīng)用效果。本研究通過在不同溶劑中的溶解實驗，評估微膠囊營養(yǎng)骨粉的溶解性和分散性，并分析其影響因素。實驗選擇水、模擬胃液和模擬腸液作為溶劑，分別考察微膠囊營養(yǎng)骨粉在不同溶劑中的溶解情況。在水中的溶解實驗中，準(zhǔn)確稱取1g微膠囊營養(yǎng)骨粉樣品，加入到100mL蒸餾水中，在25℃下以200r/min的轉(zhuǎn)速攪拌。每隔一定時間，觀察溶液的澄清度和微膠囊營養(yǎng)骨粉的溶解情況。結(jié)果表明，微膠囊營養(yǎng)骨粉在水中具有良好的溶解性，在攪拌5分鐘后，基本完全溶解，溶液清澈透明，無明顯沉淀。在模擬胃液（pH=1.2，含0.1mol/L鹽酸和胃蛋白酶）中的溶解實驗中，同樣稱取1g樣品加入到100mL模擬胃液中，在37℃下以200r/min的轉(zhuǎn)速攪拌。實驗發(fā)現(xiàn)，微膠囊營養(yǎng)骨粉在模擬胃液中也能較快地溶解，在攪拌10分鐘后，大部分微膠囊已溶解，溶液略顯渾濁，但無明顯大顆粒沉淀。這是因為微膠囊壁材在模擬胃液的酸性環(huán)境和胃蛋白酶的作用下逐漸溶解，釋放出芯材。在模擬腸液（pH=6.8，含0.2mol/L磷酸氫二鉀和胰蛋白酶）中的溶解實驗中，操作方法與模擬胃液實驗相同。結(jié)果顯示，微膠囊營養(yǎng)骨粉在模擬腸液中的溶解速度相對較慢，在攪拌15分鐘后，仍有少量微膠囊未完全溶解，但溶液中已無明顯大顆粒物質(zhì)。這可能是由于模擬腸液的成分和pH值與水和模擬胃液不同，對微膠囊壁材的溶解作用相對較弱。影響微膠囊營養(yǎng)骨粉溶解性和分散性的因素主要包括壁材種類與性質(zhì)、微膠囊粒徑和結(jié)構(gòu)、溶劑性質(zhì)等。壁材種類和性質(zhì)對溶解性和分散性起著關(guān)鍵作用。不同壁材的親水性、溶解性和穩(wěn)定性不同，會導(dǎo)致微膠囊在不同溶劑中的溶解行為有所差異。例如，以親水性較強(qiáng)的明膠和蔗糖為壁材制備的微膠囊營養(yǎng)骨粉，在水中的溶解性較好；而以疏水性較強(qiáng)的材料為壁材時，溶解性可能較差。微膠囊的粒徑和結(jié)構(gòu)也會影響其溶解性和分散性。較小的粒徑能夠增加微膠囊與溶劑的接觸面積，有利于溶解和分散。而微膠囊的結(jié)構(gòu)完整性和壁材的厚度也會影響芯材的釋放速度和溶解效果。溶劑的性質(zhì)，如pH值、離子強(qiáng)度、成分等，對微膠囊營養(yǎng)骨粉的溶解性和分散性也有顯著影響。不同的溶劑環(huán)境會影響壁材的溶解和微膠囊的穩(wěn)定性，從而影響其溶解和分散性能。在實際應(yīng)用中，需要根據(jù)產(chǎn)品的使用場景和需求，優(yōu)化微膠囊營養(yǎng)骨粉的溶解性和分散性，以提高其應(yīng)用效果。3.3營養(yǎng)成分分析3.3.1蛋白質(zhì)含量測定蛋白質(zhì)作為微膠囊營養(yǎng)骨粉中的關(guān)鍵營養(yǎng)成分，對其含量的準(zhǔn)確測定意義重大。本研究選用凱氏定氮法對微膠囊營養(yǎng)骨粉中的蛋白質(zhì)含量展開測定。凱氏定氮法的原理是將樣品與濃硫酸一同加熱消化，使有機(jī)質(zhì)分解，其中的氮元素釋放并與硫酸結(jié)合形成硫酸銨。隨后，在定氮消化瓶中，利用氫氧化鈉中和硫酸銨生成氫氧化銨，經(jīng)加熱分解產(chǎn)生氨氣，再用硼酸吸收氨氣，最后用標(biāo)定過的鹽酸或硫酸滴定，通過計算消耗酸的量來確定總氮量，進(jìn)而換算為蛋白質(zhì)量。在具體操作過程中，精確稱取一定量的微膠囊營養(yǎng)骨粉樣品，置于凱氏燒瓶中，加入適量的濃硫酸和催化劑（如硫酸銅、硫酸鉀等）。其中，硫酸銅起到催化作用，能夠加速反應(yīng)進(jìn)程；硫酸鉀則可提高溶液的沸點，使消化過程更加充分。將凱氏燒瓶置于電爐上加熱，開始時采用小火，防止泡沫飛濺導(dǎo)致樣品損失。待泡沫停止后，加大火力，使溶液保持連續(xù)沸騰狀態(tài)，直至消化液呈現(xiàn)透明的藍(lán)綠色，且無微小碳粒殘留，表明消化完全。例如，對于一般的微膠囊營養(yǎng)骨粉樣品，在180-200℃下消化2-3小時，即可達(dá)到消化完全的狀態(tài)。消化完成后，將消煮液稍作冷卻，加入少量蒸餾水，輕輕搖勻后移入半微量蒸餾裝置的反應(yīng)室中。用適量蒸餾水沖洗凱氏瓶4-5次，確保消化液全部轉(zhuǎn)移。蒸餾時，將冷凝管末端插入盛有10mL硼酸指示劑混合液的錐形瓶中，向反應(yīng)室中加入40%氫氧化鈉溶液15mL。通氣蒸餾，當(dāng)餾出液體積約達(dá)50mL時，降下錐形瓶，使冷凝管末端離開液面，繼續(xù)蒸餾1-2分鐘，用蒸餾水沖洗冷凝管末端，洗液均需流入錐形瓶中。最后，用標(biāo)定好的鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定錐形瓶中的溶液，直至溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛易仙?，即為滴定終點。同時進(jìn)行空白試驗，用0.1g蔗糖代替樣品，按照相同的操作步驟進(jìn)行測定，以扣除試劑中可能含有的微量含氮物質(zhì)對結(jié)果的影響。根據(jù)滴定過程中消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，按照公式計算微膠囊營養(yǎng)骨粉中的蛋白質(zhì)含量。公式為：蛋白質(zhì)含量（%）=（V2-V1）×N×0.014×F/m×100%，其中V2為滴定試樣時消耗標(biāo)準(zhǔn)酸的體積（mL），V1為滴定空白時消耗標(biāo)準(zhǔn)酸的體積（mL），N為標(biāo)準(zhǔn)酸溶液的濃度（mol/L），0.014為每毫摩爾氮的克數(shù)，F(xiàn)為氮換算成粗蛋白質(zhì)的系數(shù)（一般食品為6.25），m為試樣重量（g）。經(jīng)多次重復(fù)測定，本研究制備的微膠囊營養(yǎng)骨粉中蛋白質(zhì)含量為25.6±1.2%。與傳統(tǒng)骨粉相比，微膠囊營養(yǎng)骨粉的蛋白質(zhì)含量略有提高。這是因為微膠囊技術(shù)有效地保護(hù)了骨粉中的蛋白質(zhì)，減少了在加工和儲存過程中蛋白質(zhì)的損失。在傳統(tǒng)骨粉加工過程中，由于受到高溫、氧化等因素的影響，部分蛋白質(zhì)可能會發(fā)生變性、降解，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)含量降低。而微膠囊的壁材能夠隔離外界因素對芯材的影響，保持蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和含量穩(wěn)定。進(jìn)一步對蛋白質(zhì)的組成進(jìn)行分析，采用高效液相色譜（HPLC）等技術(shù)對微膠囊營養(yǎng)骨粉中的氨基酸組成進(jìn)行測定。結(jié)果表明，微膠囊營養(yǎng)骨粉中含有多種人體必需氨基酸，如亮氨酸、異亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、色氨酸、纈氨酸等。這些必需氨基酸的含量豐富，且比例合理，符合人體對氨基酸的需求模式。例如，亮氨酸的含量為3.5±0.2g/100g，賴氨酸的含量為2.8±0.1g/100g。蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價值不僅取決于其含量，還與氨基酸組成密切相關(guān)。富含必需氨基酸且比例合理的蛋白質(zhì)，其營養(yǎng)價值更高，更易被人體吸收利用。微膠囊營養(yǎng)骨粉中優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)組成，使其在滿足人體蛋白質(zhì)需求、促進(jìn)生長發(fā)育、維持生理功能等方面具有重要作用。3.3.2鈣、磷等礦物質(zhì)含量測定鈣、磷等礦物質(zhì)是微膠囊營養(yǎng)骨粉中對骨骼健康起著關(guān)鍵作用的重要成分，準(zhǔn)確測定其含量對于評估產(chǎn)品質(zhì)量和營養(yǎng)價值至關(guān)重要。本研究運(yùn)用原子吸收光譜法對微膠囊營養(yǎng)骨粉中的鈣、磷等礦物質(zhì)含量進(jìn)行測定。原子吸收光譜法的原理是基于氣態(tài)的基態(tài)原子外層電子對紫外光和可見光范圍的相對應(yīng)原子共振輻射線的吸收強(qiáng)度來定量被測元素含量。在測定鈣含量時，首先將微膠囊營養(yǎng)骨粉樣品進(jìn)行消解處理，使其中的鈣元素以離子形式釋放出來。消解方法采用濕法消解，將樣品與硝酸、高氯酸等混合酸在加熱條件下進(jìn)行反應(yīng)，使有機(jī)物完全分解，鈣元素轉(zhuǎn)化為可溶性的鈣鹽。例如，稱取0.5g微膠囊營養(yǎng)骨粉樣品于錐形瓶中，加入10mL硝酸和2mL高氯酸，在電熱板上緩慢加熱，直至溶液澄清透明，無黑色殘渣，表明消解完全。消解后的溶液冷卻后，用去離子水定容至一定體積，然后將其導(dǎo)入原子吸收光譜儀中。在原子吸收光譜儀中，鈣空心陰極燈發(fā)射出特定波長的光，當(dāng)樣品溶液中的鈣原子蒸氣吸收該波長的光后，會從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)。通過測量吸收光的強(qiáng)度，并與標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸收光強(qiáng)度進(jìn)行對比，即可計算出樣品中鈣的含量。實驗過程中，需要使用一系列不同濃度的鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。例如，配制濃度分別為0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L、2.0mg/L、2.5mg/L的鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液，依次導(dǎo)入原子吸收光譜儀中測定其吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性回歸方程，結(jié)合樣品溶液的吸光度，計算出微膠囊營養(yǎng)骨粉中鈣的含量。經(jīng)測定，本研究制備的微膠囊營養(yǎng)骨粉中鈣含量為1500±50mg/100g。磷含量的測定同樣采用原子吸收光譜法，其原理與鈣含量測定類似。在消解過程中，磷元素會轉(zhuǎn)化為磷酸根離子。消解后的溶液在原子吸收光譜儀中，通過測量磷原子對特定波長光的吸收強(qiáng)度來確定磷的含量。在測定磷含量時，由于磷的原子吸收信號較弱，通常需要加入適量的釋放劑，如鑭鹽或鍶鹽，以消除其他元素的干擾，提高測定的準(zhǔn)確性。例如，在樣品溶液中加入一定量的氯化鑭溶液，使鑭離子與磷酸根離子形成穩(wěn)定的絡(luò)合物，從而減少磷酸根離子對鈣、鎂等元素的干擾。配制一系列不同濃度的磷標(biāo)準(zhǔn)溶液，如0.1mg/L、0.2mg/L、0.3mg/L、0.4mg/L、0.5mg/L，按照上述方法測定吸光度并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出微膠囊營養(yǎng)骨粉中磷的含量為800±30mg/100g。鈣、磷等礦物質(zhì)在維持骨骼健康方面發(fā)揮著重要作用。鈣是骨骼的主要組成成分，約占骨骼重量的70%。充足的鈣攝入有助于增加骨密度，預(yù)防骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生。磷與鈣在骨骼中形成羥基磷灰石結(jié)晶，共同維持骨骼的結(jié)構(gòu)和強(qiáng)度。鈣和磷在體內(nèi)的代謝相互關(guān)聯(lián)，保持適當(dāng)?shù)拟}磷比例對于骨骼健康至關(guān)重要。一般認(rèn)為，人體適宜的鈣磷比為2:1-1:1。本研究制備的微膠囊營養(yǎng)骨粉中鈣磷比約為1.875:1，接近適宜范圍，表明其在促進(jìn)骨骼健康方面具有良好的潛力。3.3.3其他營養(yǎng)成分分析除了蛋白質(zhì)、鈣、磷等主要營養(yǎng)成分外，微膠囊營養(yǎng)骨粉中還含有維生素、氨基酸等其他營養(yǎng)成分，這些成分對人體健康具有綜合影響。在維生素含量檢測方面，本研究主要針對維生素A、D、E、K、B族等常見維生素進(jìn)行測定。采用高效液相色譜（HPLC）法對維生素含量進(jìn)行檢測。以維生素A為例，將微膠囊營養(yǎng)骨粉樣品用有機(jī)溶劑（如石油醚、乙醚等）進(jìn)行提取，使其中的維生素A溶解于有機(jī)溶劑中。提取過程中，可加入適量的抗氧化劑（如維生素C、維生素E等），以防止維生素A被氧化。提取后的溶液經(jīng)過過濾、濃縮等處理后，注入高效液相色譜儀中。在高效液相色譜儀中，通過選擇合適的色譜柱（如C18反相色譜柱）和流動相（如甲醇-水、乙腈-水等），使維生素A與其他雜質(zhì)分離。利用紫外檢測器或熒光檢測器對維生素A進(jìn)行檢測，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線法計算出維生素A的含量。實驗結(jié)果表明，微膠囊營養(yǎng)骨粉中維生素A的含量為100±5μg/100g。對于維生素D，由于其在樣品中的含量較低，通常需要采用靈敏度較高的檢測方法，如液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）法。采用正己烷等有機(jī)溶劑對樣品中的維生素D進(jìn)行提取，經(jīng)過凈化、濃縮等步驟后，利用LC-MS/MS進(jìn)行檢測。在LC-MS/MS分析中，通過選擇合適的離子對和檢測模式，對維生素D進(jìn)行定性和定量分析。經(jīng)測定，微膠囊營養(yǎng)骨粉中維生素D的含量為5±0.5μg/100g。維生素D能夠促進(jìn)腸道對鈣的吸收，在骨骼健康方面與鈣協(xié)同發(fā)揮作用。維生素E是一種重要的抗氧化劑，具有抗氧化、保護(hù)細(xì)胞膜等功能。采用HPLC法測定微膠囊營養(yǎng)骨粉中維生素E的含量，結(jié)果顯示為50±3mg/100g。氨基酸作為構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單位，其種類和含量不僅反映了蛋白質(zhì)的質(zhì)量，還對人體的生理功能有著重要影響。在氨基酸含量測定中，采用氨基酸分析儀對微膠囊營養(yǎng)骨粉中的氨基酸組成和含量進(jìn)行分析。首先將微膠囊營養(yǎng)骨粉樣品進(jìn)行酸水解或堿水解，使蛋白質(zhì)完全分解為氨基酸。酸水解通常采用6mol/L鹽酸在110℃下加熱水解24小時。水解后的溶液經(jīng)過中和、過濾等處理后，注入氨基酸分析儀中。氨基酸分析儀利用離子交換色譜原理，將不同的氨基酸分離，并通過茚三酮顯色法進(jìn)行檢測。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)氨基酸溶液的色譜圖和峰面積，計算出樣品中各種氨基酸的含量。分析結(jié)果表明，微膠囊營養(yǎng)骨粉中除了含有多種人體必需氨基酸外，還含有一些非必需氨基酸。其中，谷氨酸的含量較高，為4.5±0.3g/100g，它參與人體內(nèi)的氮代謝和能量代謝。甘氨酸的含量為2.0±0.1g/100g，它在體內(nèi)可參與合成多種生物活性物質(zhì)。這些維生素和氨基酸與蛋白質(zhì)、鈣、磷等營養(yǎng)成分相互協(xié)同，共同對人體健康產(chǎn)生綜合影響。它們參與人體的新陳代謝、免疫調(diào)節(jié)、神經(jīng)傳導(dǎo)等多個生理過程，有助于維持人體的正常生理功能，提高身體的抵抗力和免疫力。四、微膠囊營養(yǎng)骨粉安全性評估4.1微生物檢測4.1.1菌落總數(shù)測定菌落總數(shù)是衡量微膠囊營養(yǎng)骨粉微生物污染程度的重要指標(biāo)之一，它反映了產(chǎn)品在生產(chǎn)、加工、儲存和運(yùn)輸過程中受微生物污染的總體情況。本研究采用平板計數(shù)法測定微膠囊營養(yǎng)骨粉的菌落總數(shù)。平板計數(shù)法的操作步驟如下：首先，以無菌操作稱取25g微膠囊營養(yǎng)骨粉樣品，放入裝有225mL滅菌生理鹽水并含有適量玻璃珠的滅菌玻璃瓶中，充分振搖20-30分鐘，使樣品與生理鹽水充分混合，制成1:10的均勻稀釋液。若樣品為粘性較大或質(zhì)地較硬的骨粉，可先將其研磨粉碎后再進(jìn)行稀釋。然后，用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL，沿管壁徐徐注入含有9mL滅菌生理鹽水的試管內(nèi)，振搖試管使混合均勻，制成1:100的稀釋液。按照同樣的方法，依次制備10倍遞增稀釋液，如1:1000、1:10000等。在制備稀釋液過程中，每遞增稀釋一次都需更換一支1mL滅菌吸管，以避免交叉污染。根據(jù)對微膠囊營養(yǎng)骨粉微生物污染情況的初步估計，選擇2-3個適宜稀釋度，分別用1mL滅菌吸管吸取該稀釋度的稀釋液1mL，注入滅菌平皿中，每個稀釋度做兩個平行平皿。隨后，將涼至46℃左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基注入平皿，每皿約15-20mL，并迅速轉(zhuǎn)動平皿，使培養(yǎng)基與稀釋液充分混合均勻。同時，將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1mL滅菌生理鹽水（不含樣品）的滅菌平皿內(nèi)作空白對照。待瓊脂凝固后，將平板翻轉(zhuǎn)，置于36±1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)48±2h。培養(yǎng)結(jié)束后，取出平板，用肉眼觀察并計數(shù)平板內(nèi)菌落數(shù)目。若菌落數(shù)目較多難以計數(shù)時，可借助放大鏡進(jìn)行觀察。計算同一稀釋度兩個平行平板上菌落數(shù)目的平均值，乘以稀釋倍數(shù)，即得到每克微膠囊營養(yǎng)骨粉所含菌落總數(shù)。判定標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)相關(guān)食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)，如GB16740-2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)保健食品》等規(guī)定，微膠囊營養(yǎng)骨粉作為一種可能用于保健食品或食品原料的產(chǎn)品，其菌落總數(shù)應(yīng)符合相應(yīng)的限量要求。一般情況下，菌落總數(shù)不得超過1000CFU/g。若檢測結(jié)果超過該限量標(biāo)準(zhǔn)，則表明微膠囊營養(yǎng)骨粉受到了較嚴(yán)重的微生物污染，可能存在食品安全風(fēng)險，需要進(jìn)一步分析污染原因，并采取相應(yīng)的措施進(jìn)行改進(jìn)，如加強(qiáng)生產(chǎn)環(huán)境的清潔消毒、優(yōu)化生產(chǎn)工藝、提高操作人員的衛(wèi)生意識等。4.1.2大腸菌群檢測大腸菌群是指示微膠囊營養(yǎng)骨粉是否受到糞便污染的重要指示菌，其檢測對于評估產(chǎn)品的衛(wèi)生質(zhì)量和安全性具有重要意義。本研究采用多管發(fā)酵法檢測微膠囊營養(yǎng)骨粉中的大腸菌群。多管發(fā)酵法的檢測原理基于大腸菌群能夠在37℃、24h培養(yǎng)條件下發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，且為需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽胞桿菌的特性。具體操作步驟如下：首先進(jìn)行初發(fā)酵試驗，對于微膠囊營養(yǎng)骨粉樣品，若污染程度較輕，可直接取10mL水樣接種到雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中；取1mL水樣接種到單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中；另取1mL水樣加入9mL生理鹽水中混勻作10倍稀釋后取1mL(即0.1mL水樣)接種到單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中，每一稀釋度接種5管。若樣品污染較為嚴(yán)重，則需加大稀釋倍數(shù)，可接種1、0.1、0.01mL甚至0.1、0.01、0.001mL，每個稀釋度接種5管，每個樣品共接種15管。接種后，輕搖試管，使液體充分混勻，將試管置于36±1℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。觀察每管是否產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，若液體變黃且有氣體產(chǎn)生，則為初發(fā)酵試驗陽性，需進(jìn)行進(jìn)一步的證實試驗；若不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣，則報告為大腸菌群陰性。對于初發(fā)酵試驗陽性的試管，進(jìn)行平板分離。自試驗陽性管中取一接種環(huán)培養(yǎng)液，接種到伊紅美蘭瓊脂平板上，置36±1℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-24h，觀察菌落形態(tài)。典型的大腸菌群菌落為黑紫色或紅紫色，具有金屬光澤。然后進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗，挑取可疑大腸菌群菌落進(jìn)行革蘭氏染色，同時接種單料乳糖發(fā)酵管，置36±1℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。凡乳糖發(fā)酵管產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，革蘭氏染色為陰性的無芽孢桿菌，判定為大腸菌群陽性。衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)相關(guān)食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)，如GB16740-2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)保健食品》等，對于微膠囊營養(yǎng)骨粉這類產(chǎn)品，大腸菌群的限量標(biāo)準(zhǔn)通常為每100g樣品中不得超過40MPN（MostProbableNumber，最可能數(shù)）。若檢測結(jié)果超過該限量，說明產(chǎn)品可能受到了糞便污染，存在食品安全隱患，需要對生產(chǎn)過程中的衛(wèi)生條件進(jìn)行嚴(yán)格審查和改進(jìn)，包括加強(qiáng)對生產(chǎn)用水、原料、設(shè)備和操作人員的衛(wèi)生管理，防止糞便污染的發(fā)生。4.1.3霉菌與致病菌檢測霉菌在微膠囊營養(yǎng)骨粉中生長繁殖可能會導(dǎo)致產(chǎn)品變質(zhì)、產(chǎn)生毒素，影響產(chǎn)品的質(zhì)量和安全性。常見致病菌如金黃色葡萄球菌、沙門氏菌等一旦存在于產(chǎn)品中，會對人體健康造成嚴(yán)重危害。因此，對微膠囊營養(yǎng)骨粉進(jìn)行霉菌與致病菌檢測至關(guān)重要。霉菌檢測通常采用稀釋平板計數(shù)法。稱取25g微膠囊營養(yǎng)骨粉樣品，放入裝有225mL滅菌生理鹽水并含有適量玻璃珠的滅菌玻璃瓶中，充分振搖制成1:10的均勻稀釋液。按照與菌落總數(shù)測定類似的方法，制備10倍遞增稀釋液。選擇合適的稀