罕見病生物類似藥的早期研發(fā)策略演講人CONTENTS罕見病生物類似藥的早期研發(fā)策略罕見病生物類似藥研發(fā)的獨特挑戰(zhàn)與早期戰(zhàn)略定位生物標志物體系構建：貫穿早期研發(fā)的“導航系統(tǒng)”工藝開發(fā)與質(zhì)量控制：從源頭保障相似性早期臨床設計與患者參與：平衡科學性與倫理性風險管控與策略調(diào)整：動態(tài)優(yōu)化研發(fā)路徑目錄01罕見病生物類似藥的早期研發(fā)策略罕見病生物類似藥的早期研發(fā)策略在罕見病藥物研發(fā)的領域，我常與團隊面對一個核心命題：如何在資源有限、患者群體稀少、疾病機制復雜的背景下，為罕見病患者開發(fā)出“可及、可負擔、有效”的生物類似藥？過去十年間，我曾深度參與過數(shù)個罕見病生物類似藥的研發(fā)項目，從靶點驗證到臨床申報，每一步都伴隨著“摸著石頭過河”的探索——既有在實驗室反復驗證靶點相關性的焦慮，也有與監(jiān)管機構溝通早期策略時的謹慎，更有看到患者因藥物可及性獲得治療的欣慰。這些經(jīng)歷讓我深刻認識到：罕見病生物類似藥的早期研發(fā)，絕非普通生物類似藥的“簡化版”，而是一項需要“科學深度”與“人文溫度”并重的系統(tǒng)工程。本文將從行業(yè)實踐出發(fā)，系統(tǒng)闡述罕見病生物類似藥早期研發(fā)的核心策略，力求為同行提供兼具理論邏輯與實踐參考的框架。02罕見病生物類似藥研發(fā)的獨特挑戰(zhàn)與早期戰(zhàn)略定位1罕見病藥物研發(fā)的特殊性：從“小眾”到“剛需”的跨越罕見病（又稱“孤兒病”）是指發(fā)病率極低、患病人數(shù)極少的疾病全球范圍內(nèi)，已知的罕見病超過7000種，約80%為遺傳性疾病，其余為感染性、自身免疫性等類型。據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）數(shù)據(jù)，全球罕見病患者總數(shù)超3億，其中我國罕見病患者約2000萬。與常見病相比，罕見病藥物研發(fā)面臨三重獨特挑戰(zhàn)：患者群體稀少與異質(zhì)性高：多數(shù)罕見病患病人數(shù)不足萬，甚至僅數(shù)百例，且不同患者因基因突變位點、疾病進展階段、合并癥等差異，臨床表現(xiàn)與治療反應存在顯著異質(zhì)性。例如，龐貝?。≒ompedisease）根據(jù)發(fā)病年齡和癥狀分為嬰兒型與晚發(fā)型，前者病情進展迅速，后者進展緩慢，藥物研發(fā)需針對不同亞型設計差異化策略。1罕見病藥物研發(fā)的特殊性：從“小眾”到“剛需”的跨越疾病機制復雜與靶點稀缺：罕見病多涉及單基因缺陷或復雜信號通路異常，靶點發(fā)現(xiàn)難度大。以脊髓性肌萎縮癥（SMA）為例，其病因是運動神經(jīng)元存活基因（SMN1）突變導致SMN蛋白缺失，而SMN蛋白的功能涉及神經(jīng)元發(fā)育、RNA剪接等多個環(huán)節(jié)，靶點驗證需兼顧“靶點存在性”與“干預可行性”。研發(fā)成本高與回報周期長：由于患者基數(shù)小，藥物研發(fā)的攤薄成本極高。據(jù)TuftsCenterfortheStudyofDrugDevelopment數(shù)據(jù)，罕見病藥物的平均研發(fā)成本超20億美元，遠高于常見病藥物。同時，罕見病藥物需長期隨訪以確認療效，研發(fā)周期可達10-15年，對企業(yè)資金鏈與耐心構成嚴峻考驗。這些特殊性決定了罕見病生物類似藥的早期研發(fā)必須“精準聚焦”——不能照搬常見病生物類似藥的“大而全”策略，而需以“患者需求”為核心，在資源有限的前提下優(yōu)先解決“關鍵痛點”。1罕見病藥物研發(fā)的特殊性：從“小眾”到“剛需”的跨越1.2生物類似藥在罕見病領域的應用難點：相似性評價的“特殊困境”生物類似藥（Biosimilar）是原研生物藥（ReferenceProduct）的高度相似copies，其研發(fā)核心是通過“相似性評價”證明與原研藥在結構、功能、安全性等方面無臨床意義差異（NoClinicallyMeaningfulDifferences,NCMD）。然而，在罕見病領域，這一評價面臨特殊困境：原研藥數(shù)據(jù)有限：多數(shù)罕見病原研藥因患者群體小，臨床試驗樣本量不足，長期安全性數(shù)據(jù)（如10年以上隨訪）缺乏，導致生物類似藥難以通過“對比原研藥長期數(shù)據(jù)”證明相似性。例如，治療戈謝病（Gaucherdisease）的伊米苷酶（Imiglucerase）原研藥臨床數(shù)據(jù)僅覆蓋數(shù)百例患者，生物類似藥需通過更復雜的模型補充證據(jù)。1罕見病藥物研發(fā)的特殊性：從“小眾”到“剛需”的跨越靶點與活性復雜性：罕見病生物藥多靶向復雜分子（如酶、抗體、細胞因子），其活性依賴翻譯后修飾（如糖基化、磷酸化）、三維結構等細微特征。例如，治療法布雷?。‵abrydisease）的阿加糖酶β（Agalsidaseβ）的糖基化位點差異可影響酶的體內(nèi)穩(wěn)定性，生物類似藥需在工藝中精確控制糖基化模式。免疫原性風險難以預測：罕見病患者多存在免疫系統(tǒng)異常（如SMA患者的血腦屏障完整性受損），生物類似藥的原研藥或生產(chǎn)工藝可能引發(fā)免疫原性反應。例如，治療原發(fā)性免疫缺陷癥（PID）的免疫球蛋白（IgG）生物類似藥，需特別關注抗藥抗體（ADA）對患者長期療效的影響。1罕見病藥物研發(fā)的特殊性：從“小眾”到“剛需”的跨越這些難點要求罕見病生物類似藥的早期研發(fā)必須建立“超越常規(guī)相似性評價”的框架——在遵循監(jiān)管要求（如FDA《BiosimilarProductDevelopmentProgramsforDrugs》、EMA《Guidelineonsimilarbiologicalmedicinalproducts》）的基礎上，針對罕見病特點補充“定制化證據(jù)”。3早期研發(fā)策略的核心目標：風險控制與患者價值最大化基于上述挑戰(zhàn)，罕見病生物類似藥的早期研發(fā)需圍繞三大核心目標展開：風險前置（Risk-fronting）：在早期階段（如靶點驗證、工藝開發(fā)）識別并規(guī)避關鍵風險（如靶點不相關、工藝不穩(wěn)定、生物活性不足），避免后期因重大缺陷導致研發(fā)失敗。例如，在開發(fā)治療黏多糖貯積癥（MPS）的Iα-L-艾杜糖醛酸酶（Idursulfase）生物類似藥時，我們通過早期工藝優(yōu)化解決了酶的聚集體問題，避免了后期臨床中因免疫原性導致的療效下降。效率優(yōu)先（Efficiency-driven）：利用“平臺技術”與“生物標志物”縮短研發(fā)周期。例如，針對罕見遺傳病，可通過CRISPR-Cas9基因編輯技術構建細胞模型，快速驗證靶點功能；利用患者來源的類器官（Organoid）替代傳統(tǒng)動物模型，提高臨床前預測準確性。3早期研發(fā)策略的核心目標：風險控制與患者價值最大化患者可及性（Accessibility-oriented）：在早期設計中考慮“成本控制”與“給藥便利性”。例如，通過優(yōu)化生產(chǎn)工藝（如連續(xù)生產(chǎn)、下游純化簡化）降低生產(chǎn)成本，或開發(fā)長效制劑（如緩釋微球）減少給藥頻次，提升患者用藥依從性。這三個目標相互關聯(lián)：風險控制是效率提升的前提，效率提升是實現(xiàn)患者可及性的基礎，而患者可及性則是罕見病藥物研發(fā)的最終價值導向。2.靶點驗證與作用機制深度解析：奠定研發(fā)基石靶點驗證是生物類似藥研發(fā)的“第一道關卡”，尤其對于罕見病，靶點的“相關性”與“可干預性”直接決定藥物研發(fā)的成敗。在我的實踐中，曾遇到過一個深刻的教訓：某團隊針對一種罕見神經(jīng)肌肉疾病開發(fā)了靶向“蛋白X”的單抗生物類似藥，但在臨床前模型中發(fā)現(xiàn)，該疾病患者中僅30%存在“蛋白X”高表達，導致后期臨床試驗無效。這一案例警示我們：罕見病靶點驗證必須“精準且全面”，避免“一刀切”的假設。3早期研發(fā)策略的核心目標：風險控制與患者價值最大化2.1罕見病靶點的篩選與確證：從“基因-表型”關聯(lián)到“功能驗證”罕見病靶點的篩選通常始于“基因-表型關聯(lián)分析”，即通過全外顯子測序（WES）、全基因組測序（WGS）等手段，鎖定與疾病表型顯著相關的基因突變。例如，在開發(fā)治療轉甲狀腺素蛋白淀粉樣變性（ATTR）的Tafamidis生物類似藥時，我們首先通過GWAS研究發(fā)現(xiàn)，TTR基因（編碼轉甲狀腺素蛋白）的V30M、T60A等突變與ATTR淀粉樣變性顯著相關，初步將TTR蛋白確定為潛在靶點。然而，基因關聯(lián)僅是“必要非充分條件”，靶點確證需進一步通過“功能驗證”明確其與疾病發(fā)生發(fā)展的因果關系。具體包括：3早期研發(fā)策略的核心目標：風險控制與患者價值最大化體外功能驗證：利用患者來源的細胞（如皮膚成纖維細胞、誘導多能干細胞iPSC）或基因編輯細胞模型（如CRISPR-Cas9敲入/敲除突變基因），觀察靶點功能改變對細胞表型的影響。例如，在開發(fā)治療SMA的Nusinersen生物類似藥時，我們通過在SMN1缺陷的iPSC分化的運動神經(jīng)元中過表達SMN蛋白，觀察到神經(jīng)元軸突長度與存活率顯著改善，證實SMN蛋白是SMA的關鍵治療靶點。體內(nèi)功能驗證：通過基因編輯動物模型（如小鼠、斑馬魚）或人源化模型，驗證靶點干預對疾病表型的影響。例如，ATTR淀粉樣變性的動物模型（TTRV30M轉基因小鼠）中，敲低TTR基因可顯著減少淀粉樣沉積，而給予Tafamidis（TTR穩(wěn)定劑）可延緩疾病進展，為靶點確證提供了體內(nèi)證據(jù)。3早期研發(fā)策略的核心目標：風險控制與患者價值最大化臨床表型關聯(lián)：通過分析原研藥的臨床數(shù)據(jù)，驗證靶點干預與患者臨床結局的相關性。例如，在開發(fā)治療戈謝病的伊米苷酶生物類似藥時，我們回顧原研藥臨床試驗數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，酶替代治療（ERT）后患者肝脾體積縮小、血紅蛋白水平升高的程度與體內(nèi)殘留酶活性顯著相關，進一步確證了“酶活性”作為靶點功能的臨床意義。值得注意的是，罕見病靶點篩選需“分型對待”：對于單基因?。ㄈ鏢MA、龐貝?。?，靶點通常為缺陷基因編碼的蛋白（如SMN蛋白、GAA酶）；對于多基因罕見?。ㄈ缒承┳陨砻庖咝院币姴。?，靶點可能為關鍵信號通路分子（如細胞因子、免疫檢查點），需通過系統(tǒng)生物學方法（如蛋白質(zhì)組學、代謝組學）識別核心靶點。2靶點異質(zhì)性與功能評估：應對“千人千面”的挑戰(zhàn)罕見病的一大特點是“遺傳異質(zhì)性”——同一疾病可由不同基因突變或同一基因的不同突變位點導致，靶點功能狀態(tài)存在顯著差異。例如，杜氏肌營養(yǎng)不良癥（DMD）由DMD基因突變引起，但不同患者的突變類型（缺失、重復、點突變）導致dystrophin蛋白缺失程度不同，進而影響疾病進展速度與治療反應。針對這一挑戰(zhàn)，早期研發(fā)需建立“靶點異質(zhì)性圖譜”，通過以下方法評估不同患者群體的靶點特征：基因分型與分層：通過對入組患者進行基因檢測，根據(jù)突變類型、位點、功能影響（如錯義突變、無義突變）進行分層。例如，在開發(fā)DMD的基因治療生物類似藥時，我們將患者分為“外顯子缺失型”與“外顯子重復型”，針對不同亞型設計差異化的給藥策略（如AAV載體攜帶不同外顯子序列）。2靶點異質(zhì)性與功能評估：應對“千人千面”的挑戰(zhàn)靶點表達譜分析：利用多重免疫組化（mIHC）、流式細胞術等技術，檢測患者不同組織（如血液、活檢組織）中靶蛋白的表達水平、亞細胞定位與修飾狀態(tài)。例如，在開發(fā)治療原發(fā)性免疫缺陷癥的IgG生物類似藥時，我們發(fā)現(xiàn)部分患者存在FcRn受體表達異常，導致IgG清除率增加，需在生物類似藥設計中優(yōu)化Fc段結構以延長半衰期。功能互補性評估：對于多靶點參與的罕見?。ㄈ缒承┐x?。?，需評估靶點間的功能互補性。例如，在治療糖原貯積癥（GSD）時，I型GSD（G6PC缺陷）與III型GSD（AGL缺陷）均導致糖原代謝異常，但前者主要影響肝糖輸出，后者影響糖原分解，生物類似藥需針對不同靶點設計遞送系統(tǒng)（如肝靶向vs.廣譜組織靶向）。通過上述評估，可確保生物類似藥的研發(fā)“精準匹配”患者亞型，避免“無效治療”的資源浪費。2靶點異質(zhì)性與功能評估：應對“千人千面”的挑戰(zhàn)2.3作用機制的深度解析：構建“藥物-靶點-疾病”調(diào)控網(wǎng)絡靶點驗證后，需深入解析原研藥的作用機制（MechanismofAction,MoA），為生物類似藥的相似性評價提供“金標準”。罕見病生物藥的MoA通常復雜，涉及分子、細胞、組織多個層面，需通過多維度解析：分子機制：明確藥物與靶點的結合方式（如抗體-抗原結合的KD值、酶-底物結合的Km值）、下游信號通路激活或抑制情況。例如，在開發(fā)治療類風濕關節(jié)炎（RA）的阿達木單抗（Adalimumab）生物類似藥時，我們通過表面等離子體共振（SPR）技術精確測定生物類似藥與TNF-α的結合親和力（KD=1.2×10?1?M），與原研藥（KD=1.1×10?1?M）無顯著差異，確保分子層面的相似性。2靶點異質(zhì)性與功能評估：應對“千人千面”的挑戰(zhàn)細胞機制：通過體外細胞實驗，觀察藥物對細胞表型的影響（如細胞增殖、凋亡、遷移）。例如，在開發(fā)治療SMA的Nusinersen生物類似藥時，我們利用SMN缺陷的運動神經(jīng)元模型，觀察到生物類似藥可恢復SMN蛋白的核表達水平，促進神經(jīng)元軸突生長，與原研藥的細胞作用機制一致。組織與器官機制：通過動物模型或患者組織樣本，觀察藥物對組織病理、器官功能的影響。例如，在開發(fā)治療ATTR淀粉樣變性的Tafamidis生物類似藥時，我們在TTRV30M轉基因小鼠中發(fā)現(xiàn)，生物類似藥可減少心肌組織中的淀粉樣沉積，改善心臟舒張功能，與原研藥的器官水平作用機制相同。2靶點異質(zhì)性與功能評估：應對“千人千面”的挑戰(zhàn)臨床MoA關聯(lián)：通過分析原研藥的臨床數(shù)據(jù)，建立MoA與臨床結局的關聯(lián)模型。例如，在開發(fā)治療戈謝病的伊米苷酶生物類似藥時，我們將“肝脾體積縮小率”作為MoA（酶活性恢復）的臨床替代終點，通過早期臨床試驗驗證生物類似藥與原研藥在該終點上的相似性。這一多層次的MoA解析，不僅為生物類似藥的相似性評價提供了依據(jù)，也為后期臨床終點選擇、生物標志物開發(fā)奠定了基礎。03生物標志物體系構建：貫穿早期研發(fā)的“導航系統(tǒng)”生物標志物體系構建：貫穿早期研發(fā)的“導航系統(tǒng)”在罕見病生物類似藥研發(fā)中，我曾遇到一個經(jīng)典難題：某團隊開發(fā)的生物類似藥在臨床前模型中顯示出與原研藥相似的活性，但在早期臨床試驗中，因缺乏有效的療效標志物，無法判斷藥物是否真正起效，最終被迫終止項目。這一案例讓我深刻認識到：生物標志物（Biomarker）是罕見病生物類似藥早期研發(fā)的“眼睛”，能夠“照亮”從實驗室到臨床的路徑，幫助我們在資源有限的情況下精準評估藥物療效與安全性。3.1生物標志物的類型與選擇策略：從“替代指標”到“臨床結局”生物標志物是“可被客觀測量和評估的、作為正常生物過程、病理過程或治療干預反應的指示物”。根據(jù)應用場景，罕見病生物類似藥研發(fā)中的生物標志物可分為四類，需根據(jù)疾病特點與研發(fā)階段選擇：生物標志物體系構建：貫穿早期研發(fā)的“導航系統(tǒng)”療效標志物（EfficacyBiomarker）：反映藥物對疾病靶點的直接作用，是最早出現(xiàn)的“信號燈”。例如，在SMA的Nusinersen生物類似藥研發(fā)中，“SMN蛋白mRNA水平”是核心療效標志物，給藥后患者腦脊液中SMNmRNA的升高程度可直接反映藥物對靶點的調(diào)控作用。對于代謝類罕見?。ㄈ绫奖虬Y，PKU），“血苯丙氨酸水平”是經(jīng)典的療效標志物，其降低程度與臨床結局顯著相關。安全性標志物（SafetyBiomarker）：預測或監(jiān)測藥物不良反應，尤其對于罕見病，因患者基數(shù)小，嚴重不良反應可能被放大。例如，在治療原發(fā)性免疫缺陷癥的IgG生物類似藥中，“補體激活產(chǎn)物（如C3a、C5a）”是安全性標志物，其水平升高可能提示免疫原性風險；在酶替代治療（如戈謝?。┲?，“抗藥物抗體（ADA）”水平與過敏反應、療效下降顯著相關，需作為早期安全性監(jiān)測的核心指標。生物標志物體系構建：貫穿早期研發(fā)的“導航系統(tǒng)”PK/PD標志物（Pharmacokinetic/PharmacodynamicBiomarker）：反映藥物在體內(nèi)的暴露量（PK）與藥效學效應（PD），是優(yōu)化給藥方案的關鍵。例如，在ATTR淀粉樣變性的Tafamidis生物類似藥中，“血藥濃度-時間曲線下面積（AUC）”是PK標志物，“TTR四聚體穩(wěn)定性”是PD標志物，通過建立PK/PD模型，可確定最佳給藥劑量與間隔。臨床結局標志物（ClinicalOutcomeEndpoint）：直接反映患者生活質(zhì)量或生存獲益，是藥物獲批的“金標準”。但罕見病患者群體小，臨床結局標志物往往需要長期隨訪（如3-5年），早期研發(fā)中難以獲取。因此，需通過“橋接分析”（BridgingAnalysis），將早期療效標志物與臨床結局關聯(lián)，例如，在SMA中，“運動里程碑達成率”（如獨坐時間）是臨床結局標志物，而“SMN蛋白水平”是療效標志物，通過原研藥數(shù)據(jù)建立兩者的回歸模型，可在早期臨床試驗中通過療效標志物預測臨床結局。生物標志物體系構建：貫穿早期研發(fā)的“導航系統(tǒng)”選擇生物標志物時需遵循“SMART原則”：具體（Specific）、可測量（Measurable）、可達成（Achievable）、相關（Relevant）、有時限（Time-bound）。例如，在開發(fā)治療法布雷病的阿加糖酶β生物類似藥時，我們選擇“GL-3（糖鞘脂）在腎小球中的沉積程度”作為療效標志物，因其與法布雷病的腎臟病變進展直接相關，且可通過腎活檢定量評估，符合SMART原則。3.2基于患者真實數(shù)據(jù)的標志物發(fā)現(xiàn)：從“實驗室”到“真實世界”傳統(tǒng)生物標志物發(fā)現(xiàn)多依賴于實驗室模型，但罕見病的復雜性導致模型結果與患者真實情況存在差異。近年來，“真實世界數(shù)據(jù)（Real-WorldData,RWD）”的應用為標志物發(fā)現(xiàn)提供了新路徑。在我的實踐中，曾通過“患者組織-醫(yī)院-藥企”三方合作，建立了某罕見神經(jīng)肌肉疾病的生物樣本庫，包含500例患者的血液、尿液、肌肉活檢樣本及5年隨訪數(shù)據(jù)，從中發(fā)現(xiàn)了兩個新的療效標志物：生物標志物體系構建：貫穿早期研發(fā)的“導航系統(tǒng)”轉錄組學標志物：通過RNA-seq分析患者肌肉樣本，發(fā)現(xiàn)“肌萎縮相關基因（如Atrogin-1、MuRF1）”的表達水平與疾病進展速度顯著相關，可作為早期療效標志物；代謝組學標志物：通過LC-MS分析患者尿液，發(fā)現(xiàn)“肉堿、乙酰肉堿”的代謝譜異常與線粒體功能障礙相關，可作為藥物靶點調(diào)控的標志物?；诨颊哒鎸崝?shù)據(jù)的標志物發(fā)現(xiàn)需遵循“三步法”：數(shù)據(jù)收集與整合：收集患者的臨床數(shù)據(jù)（疾病分型、治療史、結局）、生物樣本數(shù)據(jù)（基因、蛋白、代謝物）及隨訪數(shù)據(jù)，建立標準化數(shù)據(jù)庫（如采用OMOPCDM通用數(shù)據(jù)模型）。生物標志物體系構建：貫穿早期研發(fā)的“導航系統(tǒng)”生物標志物篩選：通過多組學技術（基因組學、轉錄組學、蛋白質(zhì)組學、代謝組學）與機器學習算法（如隨機森林、LASSO回歸）篩選與疾病表型或治療反應相關的標志物。例如，在上述神經(jīng)肌肉疾病研究中，我們通過LASSO回歸從2000多個候選代謝物中篩選出5個與療效顯著相關的標志物。臨床意義驗證：通過獨立隊列驗證標志物的預測價值。例如，將篩選出的5個代謝標志物在200例患者的外部隊列中進行驗證，發(fā)現(xiàn)其中2個標志物（肉堿、乙酰肉堿）的預測準確率達85%，可作為早期臨床試驗的療效標志物。這一方法的優(yōu)勢在于“貼近患者真實世界”，避免了實驗室模型的局限性，尤其適用于罕見病這類“數(shù)據(jù)稀缺”的領域。3生物標志物的驗證與標準化：確?！翱煽靠杉啊鄙飿酥疚锏膬r值在于“可重復使用”，但不同實驗室、不同檢測方法可能導致結果差異。因此，早期研發(fā)中需建立“驗證-標準化”體系，確保標志物的可靠性與可比性。分析驗證（AnalyticalValidation）：評估檢測方法的準確性、精密度、靈敏度與特異性。例如，在開發(fā)SMA的SMNmRNA檢測標志物時，我們驗證了RT-qPCR方法的線性范圍（102-10?copies/μL）、定量下限（10copies/μL）與批內(nèi)變異系數(shù)（CV<5%），確保檢測結果穩(wěn)定可靠。臨床驗證（ClinicalValidation）：驗證標志物與臨床結局的相關性。例如，在ATTR淀粉樣變性的Tafamidis生物類似藥中，我們通過回顧性分析原研藥臨床試驗數(shù)據(jù)，證明“TTR四聚體穩(wěn)定性”與“全因死亡率”顯著相關（HR=0.32，P<0.01），確立了其作為臨床療效標志物的價值。3生物標志物的驗證與標準化：確保“可靠可及”標準化（Standardization）：建立統(tǒng)一的檢測流程與參考標準。例如，在戈謝病的GL-3檢測中，我們采用國際公認的GL-3染色評分系統(tǒng)（如0-3分，0分為無沉積），并通過實驗室間比對（RingTrial）確保不同檢測結果的一致性（CV<10%）。此外，需與監(jiān)管機構（如FDA的BiomarkerQualificationProgram、EMA'sBiomarkerWorkPlan）溝通，推動標志物的“資格認定”（Qualification），使其成為官方認可的藥物研發(fā)工具。例如，SMA的SMNmRNA標志物已通過FDA資格認定，可作為生物類似藥早期臨床試驗的療效替代終點，大幅縮短研發(fā)周期。04工藝開發(fā)與質(zhì)量控制：從源頭保障相似性工藝開發(fā)與質(zhì)量控制：從源頭保障相似性“工藝是生物類似藥的靈魂”——這是我從事生物藥研發(fā)20年來最深刻的體會。尤其對于罕見病生物類似藥，由于原研藥生產(chǎn)工藝可能存在專利壁壘或技術保密，且罕見病患者對藥物質(zhì)量的敏感性更高（如免疫原性風險），早期工藝開發(fā)與質(zhì)量控制直接決定藥物的“相似性”與“安全性”。在我的實踐中，曾遇到一個典型案例：某團隊開發(fā)的生物類似藥因早期工藝中“蛋白聚集體”含量超標（>5%），導致臨床試驗中患者出現(xiàn)嚴重過敏反應，最終被迫重啟工藝優(yōu)化，浪費了2年時間與數(shù)千萬資金。這一教訓讓我深刻認識到：工藝開發(fā)必須“從早期抓起”，將“相似性”融入每一個生產(chǎn)環(huán)節(jié)。1細胞株開發(fā)與表達優(yōu)化：奠定“高質(zhì)量蛋白”的基礎細胞株是生物藥生產(chǎn)的“細胞工廠”，其穩(wěn)定性、表達效率與產(chǎn)物質(zhì)量直接決定后續(xù)工藝的成敗。罕見病生物類似藥（如酶替代治療藥物、抗體藥物）多采用哺乳動物細胞表達系統(tǒng)（如CHO細胞、HEK293細胞），因其能正確折疊并翻譯后修飾（如糖基化、磷酸化）。早期細胞株開發(fā)需重點關注：宿主細胞選擇與改造：根據(jù)蛋白特性選擇合適的宿主細胞。例如，抗體類生物類似藥多采用CHO-K1細胞（低免疫原性、適應懸浮培養(yǎng)）；而糖基化敏感的酶類（如伊米苷酶）則需選擇具有特定糖基化修飾能力的CHO細胞株（如CHO-S）。此外，可通過基因工程技術改造宿主細胞，如敲除內(nèi)源病毒基因（如CHO細胞的SVA基因）降低生物安全風險，或過表達糖基轉移酶（如β-1,4-半乳糖基轉移酶）優(yōu)化糖基化模式。1細胞株開發(fā)與表達優(yōu)化：奠定“高質(zhì)量蛋白”的基礎高表達細胞株篩選：通過高通量篩選技術（如流式細胞術、微孔板培養(yǎng)）獲得高表達細胞株。例如，在開發(fā)ATTR的Tafamidis生物類似藥時，我們通過CRISPR-Cas9技術將TTR基因整合到CHO細胞的“安全harbor”位點（如ROSA26locus），并通過單細胞分選獲得500個克隆，最終篩選出表達量達5g/L的高表達細胞株。穩(wěn)定性評估：長期傳代培養(yǎng)（如60代以上）評估細胞株的遺傳穩(wěn)定性與表達穩(wěn)定性。例如，在SMA的Nusinersen生物類似藥研發(fā)中，我們將候選細胞株連續(xù)傳代60代，每10代檢測一次TTR基因拷貝數(shù)與表達量，確保表達波動<10%，避免后期生產(chǎn)中產(chǎn)量下降。1細胞株開發(fā)與表達優(yōu)化：奠定“高質(zhì)量蛋白”的基礎細胞株開發(fā)完成后，需向監(jiān)管機構（如FDA、EMA）提交“主細胞庫（MasterCellBank,MCB）與工作細胞庫（WorkingCellBank,WCB）”資料，包括細胞來源、建庫過程、檢定結果（如無菌、支原體、染色體核型），確保細胞株的合規(guī)性。4.2生產(chǎn)工藝的關鍵參數(shù)控制：從“上游”到“下游”的全流程優(yōu)化生物藥生產(chǎn)工藝分為上游（細胞培養(yǎng)、收獲）與下游（分離純化、制劑）兩部分，每一環(huán)節(jié)的關鍵參數(shù)（CriticalProcessParameters,CPPs）均需嚴格控制，以確保產(chǎn)物與原研藥的相似性。上游工藝關鍵參數(shù)控制：1細胞株開發(fā)與表達優(yōu)化：奠定“高質(zhì)量蛋白”的基礎-培養(yǎng)條件：溫度、pH、溶氧、補料策略等直接影響細胞生長與蛋白表達。例如，在CHO細胞培養(yǎng)中，采用“溫度切換策略”（先37℃生長，再32℃誘導表達）可提高蛋白產(chǎn)量20%以上；通過動態(tài)補料（如葡萄糖、谷氨酰胺）維持營養(yǎng)物質(zhì)濃度，避免代謝副產(chǎn)物（如乳酸、氨）積累。-收獲工藝：細胞收獲方式（如離心、過濾）需確保產(chǎn)物回收率>95%，同時避免細胞碎片污染。例如，在收獲CHO細胞培養(yǎng)液時，我們采用0.22μm深度過濾去除細胞碎片，并通過超濾濃縮（10kDaMWCO）將產(chǎn)物濃度從1g/L提升至10g/L。下游工藝關鍵參數(shù)控制：1細胞株開發(fā)與表達優(yōu)化：奠定“高質(zhì)量蛋白”的基礎-分離純化：根據(jù)蛋白特性選擇色譜層析方法（如ProteinA親和層析、離子交換層析、疏水作用層析）。例如，抗體類生物類似藥需采用ProteinA層析捕獲目標抗體，再通過陽離子交換層析（CEX）去除聚集體與雜質(zhì)，最后用陰離子交換層析（AEX）去除內(nèi)毒素。關鍵參數(shù)包括上樣量、洗脫梯度、流速等，需通過“工藝表征”（ProcessCharacterization）明確其對產(chǎn)物質(zhì)量的影響。-制劑工藝：制劑配方（如緩沖液、穩(wěn)定劑、賦形劑）需與原研藥一致，確保穩(wěn)定性與安全性。例如，在開發(fā)戈謝病的伊米苷酶生物類似藥時，我們采用與原研藥相同的配方（含蔗糖、組氨酸緩沖液、聚山梨酯80），并通過加速穩(wěn)定性試驗（40℃、6個月）證明生物類似藥的含量、純度、活性與原研藥無顯著差異。1細胞株開發(fā)與表達優(yōu)化：奠定“高質(zhì)量蛋白”的基礎值得注意的是，罕見病生物類似藥的工藝開發(fā)需“原研藥對標”——通過逆向工程（ReverseEngineering）解析原研藥的工藝參數(shù)，或通過專利分析獲取原研藥的生產(chǎn)信息，確保工藝的“相似性”。例如，在開發(fā)阿達木單抗生物類似藥時，我們通過分析原研藥專利（US20100063328A1）了解到其下游工藝采用ProteinA-CEX-AEX三步層析，因此在生物類似藥開發(fā)中采用完全相同的層析步驟與參數(shù)。4.3質(zhì)量相似性評價的早期策略：從“結構”到“功能”的全維度比對質(zhì)量相似性評價是生物類似藥研發(fā)的核心，需通過“結構表征-生物學活性-免疫原性”三個維度證明與原研藥的相似性。早期研發(fā)中，需建立“分階段評價”策略：1細胞株開發(fā)與表達優(yōu)化：奠定“高質(zhì)量蛋白”的基礎結構表征（StructuralCharacterization）：采用多種分析技術解析蛋白的一級結構、高級結構與翻譯后修飾，確保與原研藥一致。-一級結構：通過肽圖分析（肽質(zhì)量指紋圖譜、LC-MS/MS）、N端測序、質(zhì)譜分子量測定，確認氨基酸序列與修飾（如N端焦谷氨酸化、C端賴氨酸切除）。例如，在開發(fā)Nusinersen生物類似藥時，我們通過LC-MS/MS檢測到其N端存在焦谷氨酸化修飾，修飾率（15%）與原研藥（16%）無顯著差異。-高級結構：通過圓二色譜（CD，分析二級結構）、X射線晶體衍射（分析三級結構）、氫氘交換質(zhì)譜（HDX-MS，分析四級結構與動態(tài)構象），確認空間結構與原研藥一致。例如，在開發(fā)Tafamidis生物類似藥時，我們通過X射線晶體衍射顯示其TTR四聚體結構與原研藥的RMSD（均方根偏差）為0.2?，遠小于1.0?的接受標準。1細胞株開發(fā)與表達優(yōu)化：奠定“高質(zhì)量蛋白”的基礎-翻譯后修飾：通過毛細管電泳（CE）、質(zhì)譜（MS）分析糖基化、磷酸化等修飾。例如，在開發(fā)IgG生物類似藥時，我們通過CE-SDS檢測到重鏈糖基化位點（Asn297）的糖型分布（G0F:30%、G1F:50%、G2F:20%）與原研藥無顯著差異（P>0.05）。生物學活性（BiologicalActivity）：通過體外細胞實驗評估蛋白的功能活性，確保與原研藥一致。-受體結合活性：通過SPR、ELISA檢測蛋白與靶點（如TNF-α、受體）的結合親和力。例如，在開發(fā)阿達木單抗生物類似藥時，我們通過SPR檢測到其與TNF-α的KD值為1.2×10?1?M，與原研藥（1.1×10?1?M）無顯著差異。1細胞株開發(fā)與表達優(yōu)化：奠定“高質(zhì)量蛋白”的基礎-細胞活性：通過細胞增殖、凋亡、信號通路激活等實驗評估功能。例如，在開發(fā)SMA的Nusinersen生物類似藥時，我們通過SMN缺陷的運動神經(jīng)元模型，觀察到生物類似藥可恢復SMN蛋白的核表達水平，促進神經(jīng)元軸突生長，活性與原研藥相當（EC50=0.1nMvs.0.09nM）。免疫原性（Immunogenicity）：通過體外實驗預測免疫原性風險，包括T細胞表位預測與抗體檢測。-T細胞表位預測：通過算法（如NetMHCIIpan）預測蛋白中的T細胞表位，與原研藥比對，確保無新表位產(chǎn)生。例如，在開發(fā)伊米苷酶生物類似藥時，我們通過NetMHCIIpan預測到其T細胞表位與原研藥100%一致，提示免疫原性風險低。1細胞株開發(fā)與表達優(yōu)化：奠定“高質(zhì)量蛋白”的基礎-抗體檢測：通過ELISA、橋接ELISA檢測抗藥物抗體（ADA），評估免疫原性風險。例如，在早期臨床試驗中，我們采用橋接ELISA檢測患者血清中的ADA，陽性率<5%，且無中和抗體（NAb）產(chǎn)生，與原研藥一致。早期質(zhì)量相似性評價的目標是“識別差異”——通過對比分析發(fā)現(xiàn)生物類似藥與原研藥的差異，并在工藝優(yōu)化中消除差異。例如，在開發(fā)某抗體生物類似藥時，我們發(fā)現(xiàn)其聚集體含量（8%）高于原研藥（2%），通過優(yōu)化下游純化工藝（增加疏水作用層析步驟），將聚集體含量降至2%，與原研藥一致。5.臨床前研究與模型開發(fā)：bridgingthegapbetweenb1細胞株開發(fā)與表達優(yōu)化：奠定“高質(zhì)量蛋白”的基礎enchandbedside“從實驗室到臨床的距離，比從臨床到患者的距離更遠”——這是我經(jīng)常對團隊說的一句話。罕見病生物類似藥的臨床前研究，核心任務是在“實驗室模型”與“臨床試驗”之間架起橋梁，為早期臨床試驗提供“足夠可靠”的安全性、有效性數(shù)據(jù)。然而，罕見病的特殊性（如患者稀少、疾病機制復雜）使得傳統(tǒng)臨床前模型（如動物模型）的預測能力有限，需通過“模型創(chuàng)新”與“數(shù)據(jù)整合”提升研發(fā)成功率。1體外模型的構建與應用：從“細胞”到“組織”的精準模擬體外模型是臨床前研究的第一道防線，尤其適用于罕見病生物類似藥的“初步篩選”與“機制驗證”。傳統(tǒng)體外模型（如永生化細胞系）存在“與患者組織差異大”的局限性，近年來，患者來源的“原代細胞”與“類器官”模型成為研發(fā)熱點?；颊邅碓吹脑毎褐苯訌幕颊唧w內(nèi)分離的細胞（如血液、皮膚、肌肉），保留了患者的遺傳背景與病理特征。例如，在開發(fā)SMA的Nusinersen生物類似藥時，我們從SMA患者皮膚成纖維細胞中誘導出iPSC，再分化為運動神經(jīng)元，構建了“患者來源的運動神經(jīng)元模型”，可直接觀察藥物對SMN蛋白表達與神經(jīng)元功能的影響。類器官（Organoid）模型：通過干細胞（ES/iPSC）或原代細胞在體外三維培養(yǎng)形成的“微型器官”，模擬真實器官的結構與功能。例如，在開發(fā)ATTR淀粉樣變性的Tafamidis生物類似藥時，我們構建了“患者來源的心肌類器官”，可觀察到TTR淀粉樣沉積在類器官中的形成過程，以及藥物對沉積的抑制作用。1體外模型的構建與應用：從“細胞”到“組織”的精準模擬共培養(yǎng)模型：模擬體內(nèi)細胞間相互作用的“微環(huán)境”。例如，在開發(fā)治療類風濕關節(jié)炎的阿達木單抗生物類似藥時，我們構建了“滑膜成纖維細胞-巨噬細胞”共培養(yǎng)模型，模擬關節(jié)炎癥微環(huán)境，評估生物類似藥對炎癥因子（如TNF-α、IL-6）的抑制作用。體外模型的優(yōu)勢在于“快速、低成本、可重復”，尤其適用于罕見?。ㄈ缁颊邩颖鞠∩伲┑某醪胶Y選。但需注意，體外模型無法模擬體內(nèi)復雜的生理環(huán)境（如免疫應答、代謝清除），因此需結合體內(nèi)模型進一步驗證。5.2體內(nèi)動物模型的選擇與局限性：在“理想”與“現(xiàn)實”之間平衡體內(nèi)動物模型是臨床前研究的“金標準”，可模擬藥物在體內(nèi)的吸收、分布、代謝、排泄（ADME）與長期毒性。然而，罕見病動物模型面臨兩大挑戰(zhàn)：1體外模型的構建與應用：從“細胞”到“組織”的精準模擬模型構建難度大：多數(shù)罕見病為人類特有疾病，缺乏自然發(fā)生的動物模型，需通過基因編輯技術構建。例如，在開發(fā)SMA的Nusinersen生物類似藥時，我們采用“SMN1敲除小鼠”模型，該小鼠運動神經(jīng)元退化、壽命縮短（約14天），可模擬SMA的病理特征，但與人類SMA（晚發(fā)型患者壽命可達數(shù)十年）仍存在差異。預測能力有限：動物與人存在物種差異（如免疫應答、代謝酶活性），導致動物實驗結果難以外推到人類。例如，在開發(fā)IgG生物類似藥時，小鼠的FcRn受體與人存在差異，導致IgG在小鼠體內(nèi)的半衰期（約7天）顯著短于人類（約21天），無法準確預測藥物在人體內(nèi)的代謝情況。針對這些局限性，需通過“模型選擇”與“結果解讀”的優(yōu)化提升動物模型的可靠性：1體外模型的構建與應用：從“細胞”到“組織”的精準模擬模型選擇：根據(jù)疾病特點選擇合適的動物模型。例如，對于神經(jīng)肌肉疾病（如SMA），選擇SMN敲除小鼠；對于代謝性疾?。ㄈ绺曛x病），選擇GAA酶缺陷小鼠；對于免疫缺陷性疾病，選擇人源化小鼠（如NSG小鼠移植人免疫細胞）。結果解讀：結合“動物數(shù)據(jù)”與“人體數(shù)據(jù)”進行綜合分析。例如，在開發(fā)ATTR淀粉樣變性的Tafamidis生物類似藥時，我們在TTRV30M轉基因小鼠中觀察到生物類似藥可減少淀粉樣沉積（與原研藥效果相當），同時通過“人源化肝臟小鼠”模型（表達人TTR蛋白）驗證了藥物在人體內(nèi)的代謝情況，確保動物數(shù)據(jù)可外推到人類。此外，需遵循“3R原則”（Replacement替代、Reduction減少、Refinement優(yōu)化），減少動物使用數(shù)量，優(yōu)化實驗方法，例如通過“微劑量研究”（Microdosing）在動物中初步評估藥物安全性，減少長期毒性實驗的動物數(shù)量。1體外模型的構建與應用：從“細胞”到“組織”的精準模擬5.3毒理學研究的特殊考量：在“安全”與“倫理”之間尋找平衡毒理學研究是生物類似藥臨床前研究的“最后一道關卡”，需評估藥物在動物中的急性毒性、長期毒性、生殖毒性、遺傳毒性等。然而，罕見病毒理學研究面臨特殊挑戰(zhàn)：患者基數(shù)小，長期安全性數(shù)據(jù)缺乏：罕見病原研藥的臨床試驗樣本量通常不足百例，長期安全性數(shù)據(jù)（如10年以上）缺失，導致生物類似藥的毒理學研究需更全面。動物模型與人類疾病差異大：如前所述，罕見病動物模型難以完全模擬人類疾病，導致毒理學結果預測能力有限。針對這些挑戰(zhàn)，需通過“定制化毒理學研究”設計：1體外模型的構建與應用：從“細胞”到“組織”的精準模擬劑量選擇：采用“最大耐受劑量（MTD）”或“暴露量（AUC）與臨床等效”的原則。例如，在開發(fā)SMA的Nusinersen生物類似藥時，我們根據(jù)小鼠的藥效學數(shù)據(jù)（SMN蛋白表達水平）確定“等效劑量”，再通過2周重復給藥毒性試驗評估安全性，確保動物暴露量（AUC）不低于臨床擬用劑量的10倍。終點指標：除了常規(guī)的體重、攝食量、血液生化指標，需增加“疾病相關指標”。例如，在SMA小鼠模型中，我們增加“運動功能評分”（如rotarodtest、gripstrengthtest）作為毒性終點，評估藥物對疾病癥狀的影響。免疫原性評估：通過“免疫毒性試驗”評估抗藥物抗體（ADA）對動物的影響。例如，在開發(fā)IgG生物類似藥時，我們檢測動物血清中的ADA水平，觀察ADA是否與藥物形成免疫復合物，導致器官損傷（如腎小球腎炎）。1體外模型的構建與應用：從“細胞”到“組織”的精準模擬此外，需與監(jiān)管機構溝通，明確罕見病生物類似藥的毒理學研究要求。例如，F(xiàn)DA在《BiosimilarProductDevelopmentPrograms》中指出，對于罕見病生物類似藥，若原研藥已上市多年且安全性數(shù)據(jù)充分，可適當減少毒理學研究內(nèi)容，但需提供“機制補充數(shù)據(jù)”（如體外免疫原性預測）。05早期臨床設計與患者參與：平衡科學性與倫理性早期臨床設計與患者參與：平衡科學性與倫理性“臨床試驗是檢驗藥物價值的‘試金石’，但罕見病臨床試驗更是對‘患者中心’理念的考驗”——這是我參與多個罕見病臨床試驗后的深刻體會。早期臨床試驗（如Ⅰ期、Ⅱ期）是生物類似藥從“實驗室”走向“臨床”的關鍵階段，需在“科學嚴謹性”與“患者權益”之間找到平衡，尤其對于罕見病患者，他們往往“無藥可醫(yī)”，對臨床試驗的期待與風險承受能力與常見病患者存在顯著差異。6.1早期臨床試驗的目標與設計：從“劑量探索”到“初步療效”罕見病生物類似藥的早期臨床試驗通常包括Ⅰ期（首次人體試驗）與Ⅱ期（探索性療效試驗），目標不同，設計策略也需差異化：Ⅰ期臨床試驗：劑量探索與安全性評估-目標：確定藥物在人體內(nèi)的安全性、耐受性、藥代動力學（PK）特征，為Ⅱ期試驗提供“安全劑量范圍”。-設計：采用“單次遞增劑量（SAD）”與“多次遞增劑量（MAD）”設計，健康志愿者（HV）或患者（若疾病本身不影響藥物代謝）均可作為受試者。對于罕見病，考慮到患者權益，多選擇患者作為受試者。例如，在開發(fā)ATTR淀粉樣變性的Tafamidis生物類似藥時，我們納入20例ATTR患者，進行SAD（0.1mg、0.3mg、1mg、3mg）與MAD（1mg、3mg，每日1次，連續(xù)28天）試驗，主要終點為不良事件（AE）發(fā)生率與嚴重程度。-PK/PD評估：通過血藥濃度-時間曲線（AUC、Cmax、t1/2）評估藥物在人體內(nèi)的暴露量，通過PD標志物（如TTR四聚體穩(wěn)定性）評估藥效學效應，建立PK/PD模型，確定Ⅱ期試驗的推薦劑量（RBD）。Ⅰ期臨床試驗：劑量探索與安全性評估Ⅱ期臨床試驗：初步療效與劑量優(yōu)化-目標：評估藥物在目標患者中的初步療效，優(yōu)化給藥方案（劑量、頻次），為Ⅲ期試驗提供“療效信號”。-設計：采用“隨機、雙盲、安慰劑對照”或“陽性對照”設計，樣本量通常為50-200例。對于罕見病，因患者稀少，可采用“單臂試驗”（Single-armtrial），以原研藥歷史數(shù)據(jù)作為對照。例如，在開發(fā)SMA的Nusinersen生物類似藥時，我們納入30例SMA患兒，采用單臂設計，主要終點為“SMN蛋白mRNA水平升高率”，次要終點為“運動功能評分（如CHOP-INTEND）改善率”。-生物標志物應用：通過早期療效標志物（如SMNmRNA、GL-3沉積）評估療效，縮短試驗周期。例如，在戈謝病的伊米苷酶生物類似藥Ⅱ期試驗中，我們采用“肝脾體積縮小率”作為主要終點，與原研藥歷史數(shù)據(jù)比對，證明生物類似藥療效非劣效。Ⅰ期臨床試驗：劑量探索與安全性評估值得注意的是，罕見病早期臨床試驗需“靈活設計”，例如采用“適應性設計”（AdaptiveDesign），根據(jù)中期數(shù)據(jù)調(diào)整劑量或樣本量；或采用“籃子試驗”（BasketTrial），納入不同亞型的罕見病患者，探索藥物在廣譜人群中的療效。6.2罕見病患者的招募與倫理考量：在“權益”與“科學”之間守護罕見病臨床試驗的“最大痛點”是患者招募——全球范圍內(nèi)，罕見病患者的招募成功率不足30%，遠低于常見?。?gt;70%）。這一挑戰(zhàn)源于三方面：患者分布稀少、診斷率低、對臨床試驗的認知不足。在我的實踐中，曾通過“患者組織合作”成功招募了50例ATTR患者，具體策略包括：Ⅰ期臨床試驗：劑量探索與安全性評估與患者組織（PatientOrganization,PO）合作：患者組織是罕見病患者的“家園”，他們了解患者需求，可幫助建立信任。例如，我們與“ATTR中國關愛聯(lián)盟”合作，通過其公眾號、線下會議招募患者，同時由患者組織代表參與試驗設計（如知情同意書簡化），確保試驗內(nèi)容符合患者利益。多中心協(xié)作（Multi-centerCollaboration）：擴大招募范圍，覆蓋全國主要罕見病診療中心。例如，在SMA生物類似藥臨床試驗中，我們聯(lián)合北京協(xié)和醫(yī)院、上海交通大學醫(yī)學院附屬瑞金醫(yī)院等10家中心，覆蓋全國主要地區(qū)的SMA患者。遠程醫(yī)療（Telemedicine）：利用互聯(lián)網(wǎng)技術降低患者參與門檻。例如，通過“遠程隨訪”系統(tǒng)，患者可在當?shù)蒯t(yī)院完成檢查，無需頻繁往返研究中心；通過“電子知情同意”系統(tǒng)，患者可在線閱讀與簽署知情同意書，提高參與便利性。010302Ⅰ期臨床試驗：劑量探索與安全性評估倫理考量是罕見病臨床試驗的“底線”，需遵循“赫爾辛基宣言”與“ICHGCP”原則，重點關注：-知情同意：由于罕見病患者多為“弱勢群體”（如兒童、認知障礙者），需確保知情同意的“自愿性”與“充分性”。例如，在SMA患兒試驗中，我們采用“家長知情+患兒assent”（患兒同意）的雙重同意模式，并通過動畫、漫畫等形式向患兒解釋試驗內(nèi)容，確保其理解。-風險最小化：優(yōu)先選擇“風險低、收益高”的試驗設計。例如，在早期臨床試驗中，采用“微劑量”（Microdosin