階段27動物細(xì)胞工程和胚胎工程【滾動判斷】1.合成固醇類激素的分泌細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)一般不發(fā)達(dá)。(×)2.無氧條件下酵母菌能存活但不能大量繁殖。(√)3.基因編碼序列缺失一個堿基對，可能出現(xiàn)翻譯提前終止或從缺失部位以后翻譯的氨基酸序列發(fā)生變化的情況。(√)4.基因治療需要對機(jī)體所有細(xì)胞進(jìn)行基因修復(fù)。(×)5.興奮除了在反射弧中傳導(dǎo)，還會在腦和脊髓等中樞神經(jīng)系統(tǒng)中傳導(dǎo)。(√)6.接種破傷風(fēng)疫苗比注射抗破傷風(fēng)血清可獲得更長時間的免疫力。(√)7.若利用柞蠶糞作魚飼料進(jìn)行漁業(yè)發(fā)展，可以提高能量傳遞效率。(×)【解析】柞蠶糞作魚飼料進(jìn)行漁業(yè)發(fā)展，實(shí)現(xiàn)了能量的多級利用，從而大大提高能量的利用率，而不是提高能量的傳遞效率。8.泡菜壇水槽加水并扣上壇蓋，既可隔絕空氣，又可防止雜菌入侵。(√)9.篩選尿素降解菌時，需要在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中添加尿素。(×)10.統(tǒng)計菌落數(shù)目時為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)目最多的平板進(jìn)行計數(shù)。(×)11.植物細(xì)胞培養(yǎng)是通過提高單個細(xì)胞次級代謝產(chǎn)物的量來實(shí)現(xiàn)細(xì)胞產(chǎn)物工廠化生產(chǎn)的。(×)12.煉苗后的植株應(yīng)移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質(zhì)上。(×)13.植物體細(xì)胞雜交獲得的白菜—甘藍(lán)含有2個染色體組。(×)14.利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量生產(chǎn)人參皂苷利用了植物細(xì)胞的全能性。(×)15.作物脫毒一般取材自含病毒很少的幼嫩根尖或莖尖，有助于提高農(nóng)產(chǎn)品的品質(zhì)和產(chǎn)量。(√)16.植物組織培養(yǎng)過程中，生長素/細(xì)胞分裂素比例較高有利于芽的分化。(×)17.蘭科珍稀植物難以獲得成熟種子，為盡快推廣種植可通過花藥離體培養(yǎng)來實(shí)現(xiàn)。(×)【基礎(chǔ)填空】1.動物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，將分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)；區(qū)分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的關(guān)鍵是是否分瓶培養(yǎng)。動物細(xì)胞需要傳代培養(yǎng)的原因是營養(yǎng)物質(zhì)缺乏、有害代謝產(chǎn)物的積累等導(dǎo)致細(xì)胞分裂受阻；大多數(shù)動物細(xì)胞貼壁生長相互接觸時，細(xì)胞分裂也會停止。2.動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件(1)無菌、無毒的環(huán)境：對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理以及在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作，培養(yǎng)液還需要定期更換以清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害。(2)營養(yǎng)：在動物細(xì)胞培養(yǎng)所用的合成培養(yǎng)基中，通常需加入血清等一些天然成分(含有動物細(xì)胞培養(yǎng)所必需的營養(yǎng)成分)。(3)適宜的溫度、pH和滲透壓：溫度為36.5±0.5℃(哺乳動物)，pH為7.2～7.4，滲透壓(4)氣體環(huán)境：在動物細(xì)胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，并將它們置于含95%空氣和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，O2的作用是細(xì)胞代謝所必需的。CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH。3.培養(yǎng)動物細(xì)胞時選胚胎或幼齡動物的組織和器官的原因是其分化程度低，增殖能力強(qiáng)。4.動物細(xì)胞培養(yǎng)中兩次使用胰蛋白酶的作用不同：第一次是處理剪碎的組織，使其分散成單個細(xì)胞；第二次是使貼壁生長的細(xì)胞從瓶壁上脫落下來。5.胚胎干細(xì)胞(簡稱ES細(xì)胞)存在于早期胚胎中，具有分化為成年個體任一類型的細(xì)胞甚至個體的潛能。成體干細(xì)胞是成體組織或器官內(nèi)的干細(xì)胞。一般認(rèn)為它只能分化成特定的細(xì)胞或組織。誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)，且不會引起倫理道德問題。6.動物細(xì)胞融合的主要原理是細(xì)胞膜的流動性。融合方法有聚乙二醇(PEG)融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法。7.動物體細(xì)胞核移植技術(shù)的原理是動物體細(xì)胞核具有全能性，從而得到克隆動物。8.動物細(xì)胞核移植的過程中，對受體卵母細(xì)胞去核的原因是使核移植的動物的遺傳物質(zhì)全部來自供體的體細(xì)胞。選擇去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞的原因是：①營養(yǎng)豐富；②體積大，易操作；③含有激發(fā)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。9.體細(xì)胞核移植技術(shù)難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，原因是體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性較難。10.雌、雄原核的形成：精子入卵后，尾部脫離，經(jīng)過一些變化形成一個比原來精子的核還大的核，叫作雄原核。精子入卵后，被激活的卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核。11.體外受精技術(shù)主要包括卵母細(xì)胞的采集、精子的獲取和受精等步驟。對得到的卵母細(xì)胞和精子要分別進(jìn)行成熟培養(yǎng)(培養(yǎng)到MⅡ期)和獲能處理，然后置于適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液中共同培養(yǎng)一段時間，來促使它們完成受精。12.早期胚胎包括受精卵→桑葚胚→囊胚幾個階段。早期胚胎發(fā)育的場所是輸卵管。囊胚由滋養(yǎng)層和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)組成，滋養(yǎng)層細(xì)胞發(fā)育成胎膜和胎盤，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)發(fā)育成胎兒的各種組織。囊胚孵化后發(fā)育成原腸胚。13.胚胎移植的實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移，優(yōu)勢是充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力。14.胚胎移植用到兩種激素：①同期發(fā)情注射相關(guān)激素(使胚胎在移植前后所處的生理環(huán)境保持一致，使供體的胚胎移入受體后有相同或相似的生存條件，這是胚胎移植成功與否的關(guān)鍵)；②超數(shù)排卵注射促性腺激素。15.胚胎分割(1)材料：發(fā)育良好，形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚。(2)實(shí)質(zhì)：胚胎分割可增加動物后代，其實(shí)質(zhì)是動物的無性生殖，即克隆。(3)分割要求：對囊胚分割時，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生同卵多胚是有限的，分割次數(shù)越多，分割后胚胎成活概率越低。目前仍以二分胚胎的分割和移植效率最高。(4)對DNA分析和性別鑒定可取滋養(yǎng)層細(xì)胞?！厩榫程羁铡?.克隆動物的性狀與供體不完全相同的原因是：①克隆動物細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)來自提供卵母細(xì)胞的個體；②生物體的性狀還受到環(huán)境的影響；等等。2.動物細(xì)胞培養(yǎng)時需要在培養(yǎng)液中加入動物血清。為了研究不同“層次”血清對細(xì)胞增殖的影響，科研人員做了以下實(shí)驗：將分離出的牛血清裝入專用血清瓶后放入冰箱中直立靜置一段時間。取三根刻度吸管，將血清從上到下輕輕吸成均等的三份，分別裝入消毒后的瓶中，標(biāo)記為上、中、下，再分別從三個瓶中吸取等量的血清置于一小瓶中，混合均勻備用。分別取等量的不同“層次”的血清和混合血清加入新配制的動物細(xì)胞培養(yǎng)液中，再接種小鼠上皮細(xì)胞(接種細(xì)胞密度為5×104個·mL－1)，在適宜條件下培養(yǎng)72h后，進(jìn)行計數(shù)。結(jié)果如下表。組別上中下混72h細(xì)胞數(shù)/(個·mL－1)9.75×1041.04×1037.5×1041.85×105(1)吸取血清過程中，要嚴(yán)格禁止振動和搖晃，目的是防止不同層次血清混合。(2)細(xì)胞培養(yǎng)過程中，須每天更換培養(yǎng)基，目的