合成生物疫苗載體研發(fā)工程師崗位招聘考試試卷及答案填空題（共10題，每題1分）1.常用重組病毒疫苗載體包括腺病毒、______、痘苗病毒等。2.合成生物學(xué)中，啟動子的核心功能是______基因轉(zhuǎn)錄起始。3.疫苗載體安全性需考慮低免疫原性、無致病性、無______風(fēng)險等。4.CRISPR-Cas系統(tǒng)常用于疫苗載體的______修飾（如基因敲除）。5.非病毒疫苗載體常見類型有脂質(zhì)體、______、聚合物納米粒等。6.疫苗載體靶向性設(shè)計可提高______，減少脫靶效應(yīng)。7.重組蛋白疫苗載體常用表達系統(tǒng)包括大腸桿菌、______、昆蟲細胞等。8.合成生物學(xué)中，RBS（核糖體結(jié)合位點）的作用是______核糖體與mRNA結(jié)合。9.疫苗載體穩(wěn)定性評估包括熱穩(wěn)定性、______穩(wěn)定性等。10.腺病毒載體常刪除______基因降低致病性。單項選擇題（共10題，每題2分）1.以下哪種病毒載體具有低整合風(fēng)險、長期表達特點？A.腺病毒B.AAVC.逆轉(zhuǎn)錄病毒D.痘苗病毒2.合成生物學(xué)中，不屬于基因表達調(diào)控“開關(guān)”的元件是？A.啟動子B.終止子C.增強子D.密碼子3.常用于mRNA疫苗遞送的非病毒載體是？A.脂質(zhì)納米粒（LNP）B.質(zhì)粒DNAC.樹突狀細胞D.腺病毒4.反向遺傳學(xué)技術(shù)主要用于？A.病毒載體構(gòu)建B.抗體篩選C.細胞培養(yǎng)D.蛋白純化5.最適合預(yù)防性疫苗快速研發(fā)的載體是？A.重組蛋白載體B.mRNA-LNP載體C.腺病毒載體D.痘苗病毒載體6.密碼子優(yōu)化的主要目的是？A.提高蛋白表達量B.降低載體大小C.增加靶向性D.提高穩(wěn)定性7.疫苗載體免疫原性過高會導(dǎo)致？A.免疫耐受B.過度炎癥反應(yīng)C.表達量降低D.整合風(fēng)險8.常用于疫苗載體體外驗證的細胞是？A.HEK293TB.大腸桿菌C.酵母D.植物細胞9.Cas9蛋白屬于？A.核酸內(nèi)切酶B.聚合酶C.連接酶D.激酶10.病毒載體“假型化”的主要作用是？A.改變宿主范圍B.提高表達量C.降低免疫原性D.增加穩(wěn)定性多項選擇題（共10題，每題2分）1.疫苗載體設(shè)計需考慮的關(guān)鍵因素包括（）A.免疫原性B.靶向性C.表達效率D.安全性2.合成生物學(xué)在疫苗載體研發(fā)中的應(yīng)用包括（）A.密碼子優(yōu)化B.載體元件組裝C.基因編輯修飾D.mRNA序列設(shè)計3.常用重組病毒疫苗載體有（）A.腺病毒B.AAVC.逆轉(zhuǎn)錄病毒D.流感病毒4.非病毒載體的優(yōu)點包括（）A.無致病性B.易大規(guī)模生產(chǎn)C.低免疫原性D.長期表達5.疫苗載體安全性評估指標(biāo)包括（）A.致病性B.整合風(fēng)險C.免疫毒性D.表達產(chǎn)物純度6.基因表達調(diào)控元件包括（）A.啟動子B.增強子C.終止子D.絕緣子7.mRNA-LNP載體的組成成分包括（）A.脂質(zhì)B.mRNAC.膽固醇D.PEG脂質(zhì)8.體外功能驗證實驗包括（）A.轉(zhuǎn)染效率檢測B.目的蛋白表達檢測C.免疫細胞激活實驗D.動物攻毒實驗9.合成生物學(xué)工具包括（）A.CRISPR-Cas9B.Gibson組裝C.GoldenGateD.PCR10.靶向性設(shè)計策略包括（）A.配體修飾B.抗體偶聯(lián)C.細胞特異性啟動子D.密碼子優(yōu)化判斷題（共10題，每題2分）1.腺病毒載體免疫原性比AAV載體高。（）2.啟動子越強，目的蛋白表達量一定越高。（）3.非病毒載體（如LNP）不會整合宿主基因組。（）4.反向遺傳學(xué)僅用于病毒載體構(gòu)建。（）5.密碼子優(yōu)化僅針對原核表達系統(tǒng)。（）6.mRNA-LNP穩(wěn)定性比DNA載體差。（）7.重組蛋白疫苗載體無需考慮靶向性。（）8.AAV具有天然致病性。（）9.RBS序列長度不影響翻譯效率。（）10.疫苗載體免疫原性越低越好。（）簡答題（共4題，每題5分）1.簡述合成生物學(xué)在疫苗載體研發(fā)中的核心應(yīng)用。2.比較病毒載體與非病毒載體的優(yōu)缺點。3.疫苗載體安全性評估的關(guān)鍵實驗內(nèi)容有哪些？4.簡述mRNA-LNP載體的設(shè)計要點。討論題（共2題，每題5分）1.如何解決腺病毒載體的預(yù)存免疫問題？2.合成生物學(xué)在通用/個性化疫苗研發(fā)中的潛力有哪些？---答案部分填空題答案1.腺相關(guān)病毒（AAV）2.調(diào)控3.整合4.定向5.樹突狀細胞載體（或納米乳）6.免疫效率7.CHO細胞8.介導(dǎo)9.血清（或儲存）10.E1（或E3）單項選擇題答案1.B2.D3.A4.A5.B6.A7.B8.A9.A10.A多項選擇題答案1.ABCD2.ABCD3.AB4.ABC5.ABCD6.ABCD7.ABCD8.ABC9.ABCD10.ABC判斷題答案1.√2.×3.√4.×5.×6.√7.×8.×9.×10.×簡答題答案1.合成生物學(xué)核心應(yīng)用：①元件設(shè)計：構(gòu)建模塊化啟動子/增強子，精準調(diào)控抗原表達；②基因編輯：用CRISPR敲除病毒載體致病基因（如腺病毒E1），降低風(fēng)險；③序列優(yōu)化：密碼子優(yōu)化提高蛋白表達效率，避免免疫識別；④快速組裝：用Gibson/GoldenGate拼接載體，縮短研發(fā)周期；⑤靶向設(shè)計：偶聯(lián)配體或插入特異性啟動子，提高免疫細胞靶向性。2.病毒載體vs非病毒載體：病毒載體優(yōu)點：轉(zhuǎn)染效率高、免疫原性強；缺點：有致病風(fēng)險（需改造）、可能整合基因組、預(yù)存免疫。非病毒載體優(yōu)點：無致病性、無整合風(fēng)險、易量產(chǎn)；缺點：轉(zhuǎn)染效率低、免疫原性弱、表達時間短?；パa性：病毒載體適合強免疫，非病毒適合快速研發(fā)（如mRNA疫苗）。3.安全性評估關(guān)鍵：①致病性：體外檢測是否感染非靶細胞，體內(nèi)觀察動物癥狀；②整合風(fēng)險：PCR/測序檢測載體是否整合基因組；③免疫毒性：檢測炎癥因子（TNF-α、IL-6）水平；④脫靶效應(yīng)：驗證CRISPR編輯是否精準；⑤長期安全性：動物長期實驗觀察腫瘤/器官損傷；⑥生物分布：檢測載體在體內(nèi)組織的分布（避免敏感器官積累）。4.mRNA-LNP設(shè)計要點：①成分：陽離子脂質(zhì)（結(jié)合mRNA）、中性脂質(zhì)（膜結(jié)構(gòu)）、膽固醇（穩(wěn)定性）、PEG脂質(zhì)（延長循環(huán)）；②粒徑：100-200nm（避免巨噬細胞清除）；③靶向：偶聯(lián)DC細胞配體提高靶向性；④穩(wěn)定性：優(yōu)化PEG鏈長度，降低血清吸附；⑤佐劑：搭載TLR激動劑增強免疫激活。討論題答案1.解決腺病毒預(yù)存免疫：①用罕見血清型（如Ad26），減少預(yù)存抗體識別；②假型化：替換包膜蛋白改變識別表位；③嵌合載體：替換部分基因降低同源性；④佐劑聯(lián)用：添加CpG增強免疫反應(yīng)；⑤聯(lián)合非病毒載體：腺病毒+mRNA降低單一載體壓力。這些方法可減少抗體中和，提高疫苗效果。2.合成生物學(xué)在通用/個性化疫苗的潛力：①通用疫苗：設(shè)計保守抗原表位（如流感