合成生物診斷試劑研發(fā)工程師崗位招聘考試試卷及答案合成生物診斷試劑研發(fā)工程師崗位招聘考試試卷及答案一、填空題（共10題，每題1分）1.核酸探針中，能與靶序列互補(bǔ)雜交的短單鏈核酸稱為______。2.CRISPR-Cas系統(tǒng)中，引導(dǎo)Cas酶識(shí)別靶序列的RNA稱為______。3.抗原抗體反應(yīng)中，常用的酶標(biāo)記物包括辣根過氧化物酶（HRP）和______。4.熒光定量PCR中，非特異性結(jié)合雙鏈DNA的熒光染料是______。5.核酸提取的常用磁珠法依賴于磁珠與核酸的______作用。6.生物素-親和素系統(tǒng)中，與生物素高親和力結(jié)合的蛋白是______。7.ELISA檢測(cè)抗體常用的方法是______法。8.重組蛋白原核表達(dá)最常用的宿主是______。9.膠體金試紙條的檢測(cè)膜是______（硝酸纖維素膜）。10.合成生物診斷試劑中，調(diào)控基因表達(dá)的核心元件是______。二、單項(xiàng)選擇題（共10題，每題2分）1.常用于核酸診斷的Cas酶是？A.Cas1B.Cas9C.Cas13D.Cas142.ELISA間接法的檢測(cè)對(duì)象是？A.抗原B.抗體C.半抗原D.核酸3.核酸探針特異性的關(guān)鍵是？A.長(zhǎng)度B.堿基組成C.靶序列互補(bǔ)性D.標(biāo)記物4.重組蛋白親和層析常用的配體是？A.Ni-NTAB.瓊脂糖C.纖維素D.硅膠5.膠體金試紙條檢測(cè)線（T線）包被的是？A.金標(biāo)抗體B.捕獲抗體C.質(zhì)控抗體D.抗原6.PCR退火溫度一般范圍是？A.55-65℃B.72℃C.94℃D.37℃7.抗原抗體結(jié)合不包括的作用力是？A.氫鍵B.疏水作用C.共價(jià)鍵D.范德華力8.合成生物診斷中用于信號(hào)放大的元件是？A.啟動(dòng)子B.終止子C.報(bào)告基因D.核糖體結(jié)合位點(diǎn)9.診斷試劑靈敏度指的是？A.檢測(cè)陽性樣本的能力B.檢測(cè)陰性樣本的能力C.特異性D.精密度10.核酸雜交最適溫度比Tm值低約？A.5-10℃B.15-20℃C.25-30℃D.35-40℃三、多項(xiàng)選擇題（共10題，每題2分，多選/少選不得分）1.合成生物診斷試劑關(guān)鍵技術(shù)包括？A.核酸探針設(shè)計(jì)B.CRISPR技術(shù)C.重組蛋白表達(dá)D.熒光標(biāo)記2.CRISPR診斷的優(yōu)勢(shì)有？A.高特異性B.高靈敏度C.無需PCRD.快速檢測(cè)3.ELISA常見類型包括？A.間接法B.雙抗體夾心法C.競(jìng)爭(zhēng)法D.捕獲法4.核酸提取方法有？A.酚氯仿抽提法B.磁珠法C.硅膠膜法D.乙醇沉淀法5.重組蛋白表達(dá)系統(tǒng)包括？A.大腸桿菌B.酵母C.昆蟲細(xì)胞D.哺乳動(dòng)物細(xì)胞6.熒光標(biāo)記物選擇依據(jù)是？A.熒光強(qiáng)度B.激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)C.穩(wěn)定性D.結(jié)合能力7.膠體金試紙條組成部分包括？A.樣品墊B.結(jié)合墊C.NC膜D.吸水墊8.診斷試劑質(zhì)控指標(biāo)包括？A.靈敏度B.特異性C.精密度D.穩(wěn)定性9.抗原抗體反應(yīng)影響因素包括？A.溫度B.pHC.離子強(qiáng)度D.反應(yīng)時(shí)間10.合成生物元件類型包括？A.啟動(dòng)子B.終止子C.核糖體結(jié)合位點(diǎn)D.報(bào)告基因四、判斷題（共10題，每題2分，√/×）1.CRISPR僅用于基因編輯，不能用于診斷。（）2.ELISA間接法可檢測(cè)樣本中的抗體。（）3.核酸探針越長(zhǎng)，特異性越高。（）4.生物素-親和素結(jié)合是可逆的。（）5.PCR延伸溫度均為72℃。（）6.重組蛋白表達(dá)后必須復(fù)性才有活性。（）7.膠體金試紙條只能定性檢測(cè)。（）8.診斷試劑特異性指檢測(cè)陰性樣本的能力。（）9.酚氯仿法可同時(shí)提取DNA和RNA。（）10.合成生物診斷試劑無需考慮生物安全。（）五、簡(jiǎn)答題（共4題，每題5分）1.簡(jiǎn)述核酸探針的設(shè)計(jì)原則。2.簡(jiǎn)述ELISA間接法的原理。3.簡(jiǎn)述重組蛋白在診斷試劑中的應(yīng)用。4.簡(jiǎn)述合成生物診斷試劑的質(zhì)量控制要點(diǎn)。六、討論題（共2題，每題5分）1.結(jié)合合成生物學(xué)技術(shù)，談?wù)勅绾翁岣咴\斷試劑的靈敏度。2.討論合成生物診斷試劑在POCT中的應(yīng)用前景及挑戰(zhàn)。---答案部分一、填空題答案1.探針2.sgRNA（單導(dǎo)向RNA）3.堿性磷酸酶（AP）4.SYBRGreenI5.吸附6.鏈霉親和素7.間接8.大腸桿菌（E.coli）9.NC膜10.啟動(dòng)子二、單項(xiàng)選擇題答案1.C2.B3.C4.A5.B6.A7.C8.C9.A10.A三、多項(xiàng)選擇題答案1.ABCD2.ABD3.ABCD4.ABC5.ABCD6.ABCD7.ABCD8.ABCD9.ABCD10.ABCD四、判斷題答案1.×2.√3.√4.×5.×6.×7.×8.×9.√10.×五、簡(jiǎn)答題答案1.核酸探針設(shè)計(jì)原則：①特異性：與靶序列高度互補(bǔ)，無交叉雜交；②長(zhǎng)度適宜（15-30nt）：過短特異性差，過長(zhǎng)雜交效率低；③GC含量（40%-60%）：避免發(fā)夾/二聚體；④標(biāo)記合理：不影響雜交活性；⑤保守性：針對(duì)靶序列保守區(qū)域，提高通用性。2.ELISA間接法原理：①包被：已知抗原固定于酶標(biāo)板；②孵育：待測(cè)樣本中抗體與包被抗原結(jié)合；③孵育：酶標(biāo)記二抗（抗待測(cè)抗體）與結(jié)合抗體結(jié)合；④顯色：酶催化底物顯色，吸光度與待測(cè)抗體含量正相關(guān)。3.重組蛋白的應(yīng)用：①抗原：作為ELISA/試紙條包被抗原（如乙肝重組抗原）；②抗體：重組單克隆抗體（如新冠抗體），提高特異性；③標(biāo)記物：重組酶（如重組HRP），穩(wěn)定性優(yōu)于天然酶；④對(duì)照：重組蛋白作為陽性對(duì)照，保證試劑可靠性。4.質(zhì)量控制要點(diǎn)：①原料質(zhì)控：重組蛋白/探針純度、酶活性；②性能質(zhì)控：靈敏度（最低檢測(cè)限）、特異性（交叉反應(yīng)）、精密度（CV≤10%）；③穩(wěn)定性：加速老化試驗(yàn)（37℃放置），驗(yàn)證有效期；④生物安全：重組元件無致病性；⑤批間一致性：不同批次性能差異符合標(biāo)準(zhǔn)。六、討論題答案1.提高靈敏度的合成生物學(xué)策略：①CRISPR信號(hào)放大：利用Cas13旁系切割活性，切割熒光淬滅探針釋放信號(hào)；②重組蛋白融合：將Luciferase與抗體融合，增強(qiáng)信號(hào)；③基因回路級(jí)聯(lián)：低濃度靶標(biāo)觸發(fā)級(jí)聯(lián)反應(yīng)，放大信號(hào)；④多標(biāo)記聯(lián)用：同時(shí)標(biāo)記多個(gè)靶標(biāo)區(qū)域，提高信號(hào)強(qiáng)度；⑤適配體優(yōu)化：SELEX篩選高親和力適配體，增強(qiáng)靶標(biāo)結(jié)合。2.POCT應(yīng)用