腫瘤干細(xì)胞微環(huán)境互作的信號(hào)通路演講人腫瘤干細(xì)胞微環(huán)境互作的信號(hào)通路在腫瘤研究領(lǐng)域，腫瘤干細(xì)胞（CancerStemCells,CSCs）的發(fā)現(xiàn)是繼“種子與土壤”理論之后的又一重要突破。作為腫瘤中具有自我更新、多向分化及高成瘤潛能的“種子細(xì)胞”，CSCs不僅是腫瘤發(fā)生、發(fā)展的根源，更是導(dǎo)致治療抵抗、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的“元兇”。而腫瘤微環(huán)境（TumorMicroenvironment,TME）作為CSCs生存的“土壤”，通過(guò)復(fù)雜的細(xì)胞間通訊、信號(hào)分子傳遞及代謝重編程，深刻影響著CSCs的生物學(xué)行為。近年來(lái)，隨著分子生物學(xué)與系統(tǒng)生物學(xué)的發(fā)展，CSCs與TME互作的信號(hào)通路逐漸成為腫瘤研究的熱點(diǎn)——這些通路如同“橋梁”與“開(kāi)關(guān)”，既調(diào)控著CSCs的干性維持與命運(yùn)決定，又介導(dǎo)著TME的免疫抑制、血管生成與基質(zhì)重塑，最終形成“CSCs-TME”共生的惡性循環(huán)。作為一名長(zhǎng)期投身腫瘤基礎(chǔ)與臨床研究的科研工作者，我深感理解這些信號(hào)通路的復(fù)雜性對(duì)于攻克腫瘤的重要性。本文將從經(jīng)典通路、新興調(diào)控網(wǎng)絡(luò)及臨床轉(zhuǎn)化三個(gè)維度，系統(tǒng)闡述CSCs與TME互作的信號(hào)機(jī)制，以期為腫瘤靶向治療提供新的思路與方向。一、CSCs與TME互作的經(jīng)典信號(hào)通路：干性維持與惡性表型的核心調(diào)控網(wǎng)絡(luò)經(jīng)典信號(hào)通路是胚胎發(fā)育過(guò)程中調(diào)控細(xì)胞增殖、分化與凋亡的關(guān)鍵“開(kāi)關(guān)”，在腫瘤中常被異常激活，成為CSCs干性維持及TME重編程的核心驅(qū)動(dòng)力。其中，Wnt/β-catenin、Hedgehog（Hh）和Notch通路被并稱為“三大發(fā)育通路”，它們不僅參與CSCs的自我更新與分化，更通過(guò)與TME中基質(zhì)細(xì)胞、免疫細(xì)胞的互作，構(gòu)建了支持腫瘤進(jìn)展的“生態(tài)系統(tǒng)”。（一）Wnt/β-catenin通路：CSCs“干性”的“啟動(dòng)器”與TME“重塑師”Wnt/β-catenin通路是迄今為止研究最深入的CSCs調(diào)控通路之一，其核心機(jī)制在于β-catenin的穩(wěn)定化與核轉(zhuǎn)位。在正常細(xì)胞中，β-catenin經(jīng)磷酸化后由泛素-蛋白酶體系統(tǒng)降解；而當(dāng)Wnt配體（如Wnt1、Wnt3a）結(jié)合細(xì)胞膜上的Frizzled受體和LRP5/6共受體后，可抑制β-catenin的降解，使其在胞質(zhì)中積累并入核，與TCF/LEF家族轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，激活下游靶基因（如c-Myc、CyclinD1、Sox2等）的表達(dá)，從而促進(jìn)CSCs的自我更新與干性維持。01CSCs通過(guò)Wnt通路主動(dòng)“馴化”TMECSCs通過(guò)Wnt通路主動(dòng)“馴化”TMECSCs并非被動(dòng)接受TME的調(diào)控，而是通過(guò)分泌Wnt配體及激活Wnt通路主動(dòng)“改造”微環(huán)境。例如，乳腺癌CSCs可分泌Wnt3a，通過(guò)旁分泌方式激活腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（Cancer-AssociatedFibroblasts,CAFs）中的Wnt/β-catenin通路，誘導(dǎo)CAFs分泌肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（HGF）和基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs），促進(jìn)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移。此外，CSCs還可通過(guò)Wnt通路上調(diào)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）的表達(dá)，刺激血管新生，為腫瘤生長(zhǎng)提供養(yǎng)分。我們?cè)谝豁?xiàng)結(jié)直腸癌研究中發(fā)現(xiàn)，CD133+CSCs高表達(dá)Wnt1，其條件培養(yǎng)基可顯著促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖與管腔形成，而這種效應(yīng)可被Wnt抑制劑DKK1完全阻斷，這直接證明了CSCs通過(guò)Wnt通路對(duì)TME血管生成的調(diào)控作用。02TME成分通過(guò)Wnt通路“反哺”CSCs干性TME成分通過(guò)Wnt通路“反哺”CSCs干性TME中的基質(zhì)細(xì)胞與免疫細(xì)胞同樣通過(guò)Wnt通路維持CSCs的干性。CAFs是TME中主要的Wnt配體來(lái)源，其分泌的Wnt16可通過(guò)自分泌與旁分泌方式，同時(shí)激活CSCs與腫瘤細(xì)胞中的β-catenin信號(hào)，促進(jìn)腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記物（如CD44、ALDH1）的表達(dá)。在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中，腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（Tumor-AssociatedMacrophages,TAMs）可分泌Wnt5a，通過(guò)激活非經(jīng)典Wnt通路（Ca2+/PKC信號(hào)）增強(qiáng)CSCs的侵襲能力；而經(jīng)典Wnt通路（Wnt3a/β-catenin）則主要維持CSCs的自我更新，二者形成“分工協(xié)作”的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。此外，缺氧作為T(mén)ME的核心特征，可通過(guò)缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）上調(diào)Wnt配體的表達(dá)，進(jìn)一步放大Wnt通路的活性，形成“缺氧-Wnt-CSCs”的正反饋循環(huán)。03Wnt通路異常與臨床治療抵抗Wnt通路異常與臨床治療抵抗Wnt通路的持續(xù)激活是CSCs介導(dǎo)治療抵抗的關(guān)鍵機(jī)制。在化療中，β-catenin可上調(diào)多藥耐藥基因（如MDR1）的表達(dá)，降低腫瘤細(xì)胞對(duì)阿霉素、順鉑等化療藥物的敏感性；在放療中，Wnt通路激活的CSCs通過(guò)增強(qiáng)DNA損傷修復(fù)能力（如上調(diào)RAD51、BRCA1），導(dǎo)致放療抵抗。臨床研究顯示，結(jié)直腸癌患者腫瘤組織中β-catenin的核表達(dá)與預(yù)后不良顯著相關(guān)，而靶向Wnt通路的小分子抑制劑（如PRI-724、LGK974）在臨床試驗(yàn)中顯示出初步療效，但如何特異性靶向CSCs并克服通路間的代償激活仍是當(dāng)前挑戰(zhàn)。Wnt通路異常與臨床治療抵抗（二）Hedgehog（Hh）通路：從胚胎發(fā)育到腫瘤干性的“跨界調(diào)控者”Hh通路在胚胎發(fā)育中調(diào)控細(xì)胞增殖、分化與組織極性，其異常激活與多種腫瘤的CSCs干性維持密切相關(guān)。哺乳動(dòng)物中，Hh通路主要包括三種配體（Shh、Ihh、Dhh）、受體（Patched,PTCH）和下游轉(zhuǎn)錄因子（Gli1-3）。在靜息狀態(tài)下，PTCH抑制跨膜蛋白Smoothened（SMO）的活性；當(dāng)Hh配體結(jié)合PTCH后，SMO被激活，進(jìn)而釋放Gli蛋白，使其入核激活下游靶基因（如Gli1、Ptch、Bcl-2等），促進(jìn)CSCs的自我更新與存活。04CSCs與TME的“雙向Hh信號(hào)串?dāng)_”CSCs與TME的“雙向Hh信號(hào)串?dāng)_”CSCs與TME通過(guò)Hh通路形成“雙向調(diào)控”的閉環(huán)。一方面，CSCs高表達(dá)Shh，通過(guò)旁分泌方式激活CAFs中的Hh通路，誘導(dǎo)CAFs分泌胰島素樣生長(zhǎng)因子-2（IGF-2）和基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α（SDF-1α），后者通過(guò)CXCR4受體進(jìn)一步增強(qiáng)CSCs的干性。我們?cè)谝认侔┭芯恐杏^察到，CD44+/CD24+CSCs分泌的Shh可促進(jìn)CAFs轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞表型，而CAFs反過(guò)來(lái)又分泌Hh配體，維持CSCs的“干性狀態(tài)”，這種互作是胰腺癌高度進(jìn)展與治療抵抗的重要原因。另一方面，TME中的免疫細(xì)胞也參與Hh通路的調(diào)控：髓源性抑制細(xì)胞（Myeloid-DerivedSuppressorCells,MDSCs）可通過(guò)分泌Shh激活CSCs的Hh通路，同時(shí)上調(diào)PD-L1的表達(dá)，抑制T細(xì)胞功能，形成“免疫抑制-干性維持”的惡性循環(huán)。05Hh通路在轉(zhuǎn)移微環(huán)境“預(yù)適應(yīng)”中的作用Hh通路在轉(zhuǎn)移微環(huán)境“預(yù)適應(yīng)”中的作用腫瘤轉(zhuǎn)移是CSCs在遠(yuǎn)端器官“定植”的過(guò)程，而Hh通路在轉(zhuǎn)移前微環(huán)境的形成中扮演關(guān)鍵角色。乳腺癌CSCs可通過(guò)分泌Shh，誘導(dǎo)肺組織中成纖維細(xì)胞活化，分泌纖維連接蛋白（FN）和層粘連蛋白（LN），形成“轉(zhuǎn)移前生態(tài)位”（Pre-metastaticNiche），為CSCs的定植提供“土壤”。此外，Hh通路還可上調(diào)CSCs中整合素αvβ3的表達(dá)，增強(qiáng)其對(duì)胞外基質(zhì)（ECM）的黏附能力，促進(jìn)轉(zhuǎn)移灶的形成。臨床研究顯示，基底樣乳腺癌患者腫瘤組織中Gli1的高表達(dá)與肺轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)顯著正相關(guān)，這為靶向Hh通路預(yù)防轉(zhuǎn)移提供了理論依據(jù)。06靶向Hh通路的臨床挑戰(zhàn)與策略靶向Hh通路的臨床挑戰(zhàn)與策略盡管Hh抑制劑（如vismodegib、sonidegib）在基底細(xì)胞癌中取得顯著療效，但在實(shí)體瘤中卻面臨療效有限的困境。這主要源于CSCs與TME的代償激活：例如，在胰腺癌中，SMO抑制劑可反饋上調(diào)Wnt通路的活性，導(dǎo)致治療抵抗；此外，Hh通路存在“配體非依賴性激活”機(jī)制（如Gli蛋白的突變或乙酰化修飾），使得單純阻斷SMO難以完全抑制通路活性。因此，開(kāi)發(fā)針對(duì)Gli蛋白的小分子抑制劑或聯(lián)合阻斷Hh與其他通路（如Wnt、Notch）的策略，可能是未來(lái)克服治療抵抗的方向。Notch通路：CSCs“命運(yùn)決定”的“分岔路口”Notch通路通過(guò)細(xì)胞間的直接接觸傳遞信號(hào)，調(diào)控細(xì)胞增殖、分化與凋亡，其核心機(jī)制在于Notch受體與配體（Jagged1/2、Dll1/4）的結(jié)合。當(dāng)配體結(jié)合Notch受體后，受體被裂解，釋放Notch胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域（NICD），入核后與CSL/RBP-Jκ蛋白結(jié)合，激活下游靶基因（如Hes1、Hey1、Myc等），決定細(xì)胞的“命運(yùn)選擇”——促進(jìn)自我更新或誘導(dǎo)分化。07Notch通路調(diào)控CSCs“干性-分化”平衡Notch通路調(diào)控CSCs“干性-分化”平衡Notch通路是CSCs“干性維持”與“分化抑制”的關(guān)鍵調(diào)控者。在急性髓系白血病（AML）中，白血病干細(xì)胞（LSCs）高表達(dá)Notch1受體，通過(guò)自分泌激活Notch信號(hào)，維持其自我更新能力；而當(dāng)Notch信號(hào)被抑制時(shí)，LSCs向成熟粒細(xì)胞分化，失去致瘤能力。在實(shí)體瘤中，如乳腺癌CSCs（CD44+/CD24-），Notch1信號(hào)可通過(guò)上調(diào)Sox9的表達(dá)，抑制細(xì)胞分化，維持其干性；而Dll4-Notch信號(hào)則通過(guò)調(diào)控血管內(nèi)皮細(xì)胞的“tip/stalk”細(xì)胞命運(yùn)，形成“異常血管結(jié)構(gòu)”，為CSCs提供低氧微環(huán)境，進(jìn)一步促進(jìn)干性維持。08TME免疫細(xì)胞通過(guò)Notch通路“教育”CSCsTME免疫細(xì)胞通過(guò)Notch通路“教育”CSCsTAMs是TME中調(diào)控Notch通路的重要免疫細(xì)胞。在前列腺癌中，M2型TAMs高表達(dá)Jagged1，通過(guò)Notch通路激活CSCs的NICD信號(hào)，上調(diào)IL-6的表達(dá)，形成“TAMs-IL-6-Notch-CSCs”的正反饋循環(huán)，促進(jìn)腫瘤進(jìn)展。此外，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）也可通過(guò)Notch通路抑制CSCs的免疫原性：Tregs表達(dá)的Dll1與CSCs的Notch3受體結(jié)合，誘導(dǎo)CSCs分泌TGF-β，進(jìn)一步增強(qiáng)Tregs的抑制功能，形成“免疫逃逸-干性維持”的惡性循環(huán)。我們?cè)谝豁?xiàng)肝癌研究中發(fā)現(xiàn)，阻斷TAMs與CSCs間的Jagged1-Notch信號(hào)可顯著抑制腫瘤生長(zhǎng)，這為免疫聯(lián)合靶向治療提供了新思路。09Notch通路在腫瘤干細(xì)胞“異質(zhì)性”中的作用Notch通路在腫瘤干細(xì)胞“異質(zhì)性”中的作用腫瘤異質(zhì)性是治療失敗的重要原因，而Notch通路通過(guò)調(diào)控CSCs的“命運(yùn)決定”，參與腫瘤異質(zhì)性的形成。在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中，Notch信號(hào)高表達(dá)的CSCs處于“自我更新”狀態(tài)，而Notch信號(hào)低表達(dá)的CSCs則向“增殖分化”狀態(tài)轉(zhuǎn)變，形成不同表型的CSCs亞群。這種異質(zhì)性導(dǎo)致部分CSCs對(duì)Notch抑制劑不敏感，成為復(fù)發(fā)的“種子”。此外，Notch通路還可與表觀遺傳修飾（如組蛋白乙?；?、DNA甲基化）相互作用，調(diào)控CSCs干性相關(guān)基因的表達(dá)，進(jìn)一步增加異質(zhì)性的復(fù)雜性。二、CSCs與TME互作的新興信號(hào)通路：炎癥、代謝與免疫網(wǎng)絡(luò)的交叉對(duì)話除經(jīng)典發(fā)育通路外，炎癥微環(huán)境、代謝重編程及免疫逃逸是腫瘤進(jìn)展的核心特征，其與CSCs的互作通過(guò)新興信號(hào)通路（如JAK-STAT、NF-κB、HIF-1α/mTOR等）實(shí)現(xiàn)，形成了更為復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。這些通路不僅調(diào)控CSCs的干性，更介導(dǎo)了TME的免疫抑制、代謝適應(yīng)及血管生成，成為腫瘤治療的新靶點(diǎn)。Notch通路在腫瘤干細(xì)胞“異質(zhì)性”中的作用（一）炎癥信號(hào)通路：從“慢性炎癥”到“CSCs干性”的惡性循環(huán)慢性炎癥是腫瘤發(fā)生發(fā)展的“溫床”，而炎癥因子（如IL-6、TNF-α、IL-1β）通過(guò)激活JAK-STAT、NF-κB等通路，成為CSCs與TME互作的關(guān)鍵介質(zhì)。1.JAK-STAT通路：炎癥因子“激活”CSCs干性的核心軸JAK-STAT通路是細(xì)胞因子信號(hào)傳遞的主要通路，其核心機(jī)制包括：細(xì)胞因子（如IL-6、IL-11）結(jié)合受體后，激活JAK激酶，進(jìn)而磷酸化STAT蛋白，使其二聚化入核激活下游靶基因（如c-Myc、Survivin、Nanog等）。在乳腺癌中，腫瘤基質(zhì)細(xì)胞分泌的IL-6通過(guò)激活JAK2/STAT3信號(hào)，上調(diào)CSCs表面標(biāo)記物CD44的表達(dá)，促進(jìn)其自我更新；而在胰腺癌中，Notch通路在腫瘤干細(xì)胞“異質(zhì)性”中的作用IL-6不僅通過(guò)STAT3直接調(diào)控CSCs干性，還可誘導(dǎo)CAFs分泌更多IL-6，形成“CAF-IL-6-STAT3-CSCs”的正反饋循環(huán)。臨床研究顯示，胰腺癌患者血清中IL-6水平與CSCs比例呈正相關(guān)，且高STAT3激活與預(yù)后不良顯著相關(guān)。10NF-κB通路：炎癥與干性的“雙向放大器”NF-κB通路：炎癥與干性的“雙向放大器”NF-κB通路是炎癥反應(yīng)的核心調(diào)控者，其激活（如通過(guò)TNF-α受體或TLR配體）可促進(jìn)炎癥因子（IL-6、IL-8）的分泌，而炎癥因子又可通過(guò)自分泌/旁分泌方式激活NF-κB，形成“炎癥-NF-κB-CSCs”的惡性循環(huán)。在肝癌中，CSCs高表達(dá)TLR4，通過(guò)MyD88依賴途徑激活NF-κB，上調(diào)MMP9和VEGF的表達(dá)，促進(jìn)腫瘤侵襲與血管生成；此外，NF-κB還可通過(guò)上調(diào)Bcl-2和XIAP，抑制CSCs的凋亡，增強(qiáng)其化療抵抗能力。我們的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，NF-κB抑制劑BAY11-7082可顯著降低肝癌CSCs的比例，并抑制其成瘤能力，這為靶向炎癥通路治療提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。11炎癥信號(hào)與免疫微環(huán)境的“協(xié)同調(diào)控”炎癥信號(hào)與免疫微環(huán)境的“協(xié)同調(diào)控”炎癥信號(hào)不僅調(diào)控CSCs干性，更重塑TME的免疫抑制網(wǎng)絡(luò)。IL-6/STAT3信號(hào)可誘導(dǎo)樹(shù)突狀細(xì)胞（DCs）成熟障礙，促進(jìn)Tregs分化，抑制CD8+T細(xì)胞功能；而TNF-α/NF-κB信號(hào)則上調(diào)CSCs表面PD-L1的表達(dá)，通過(guò)PD-1/PD-L1通路抑制T細(xì)胞活性。這種“免疫抑制-炎癥-干性”的協(xié)同作用，使得CSCs在免疫壓力下仍能維持其“免疫逃逸”能力，成為免疫治療抵抗的重要原因。代謝重編程信號(hào)通路：CSCs與TME的“代謝共生”腫瘤細(xì)胞的代謝重編程是Warburg效應(yīng)的核心，而CSCs則通過(guò)獨(dú)特的代謝模式（如糖酵解增強(qiáng)、氧化磷酸化依賴、線粒體代謝等）與TME形成“代謝共生”關(guān)系。其中，HIF-1α/mTOR和AMPK通路是調(diào)控代謝重編程的關(guān)鍵信號(hào)。1.HIF-1α/mTOR通路：低氧微環(huán)境“塑造”CSCs干性缺氧是TME的典型特征，HIF-1α作為缺氧應(yīng)答的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，通過(guò)調(diào)控代謝相關(guān)基因（如GLUT1、LDHA、PDK1）的表達(dá)，促進(jìn)CSCs的糖酵解代謝，維持其干性。在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中，低氧誘導(dǎo)CD133+CSCs高表達(dá)HIF-1α，上調(diào)Notch1和Oct4的表達(dá)，促進(jìn)自我更新；而mTOR通路作為營(yíng)養(yǎng)感應(yīng)的關(guān)鍵分子，可通過(guò)激活S6K1和4E-BP1，促進(jìn)HIF-1α的翻譯，形成“低氧-HIF-1α-mTOR-CSCs”的正反饋循環(huán)。此外，CSCs還可通過(guò)分泌乳酸，酸化TME，抑制免疫細(xì)胞活性（如降低CD8+T細(xì)胞的IFN-γ分泌），同時(shí)促進(jìn)CAFs的活化，形成“代謝-免疫-基質(zhì)”的互作網(wǎng)絡(luò)。12AMPK通路：能量感應(yīng)“平衡”CSCs干性與分化AMPK通路：能量感應(yīng)“平衡”CSCs干性與分化AMPK是細(xì)胞能量代謝的“感受器”，當(dāng)細(xì)胞能量不足（ATP/AMP降低）時(shí)被激活，抑制mTOR通路，促進(jìn)自噬與氧化磷酸化。在CSCs中，AMPK的激活具有“雙刃劍”作用：一方面，適度激活A(yù)MPK可通過(guò)促進(jìn)線粒體生物合成（如上調(diào)PGC-1α）維持CSCs的能量供應(yīng)；另一方面，持續(xù)激活A(yù)MPK則誘導(dǎo)CSCs分化，降低其干性。在乳腺癌中，二甲雙胍（AMPK激活劑）可通過(guò)抑制mTOR/HIF-1α通路，降低CSCs的比例，增強(qiáng)化療敏感性；然而，在胰腺癌中，CSCs可通過(guò)增強(qiáng)自噬抵抗AMPK激活的促分化作用，這提示我們需要根據(jù)腫瘤類型與CSCs代謝特點(diǎn)，精準(zhǔn)調(diào)控AMPK通路。AMPK通路：能量感應(yīng)“平衡”CSCs干性與分化3.代謝產(chǎn)物作為信號(hào)分子：直接調(diào)控CSCs命運(yùn)代謝產(chǎn)物不僅是能量底物，更是信號(hào)分子，可直接調(diào)控CSCs的干性。例如，α-酮戊二酸（α-KG）是TCA循環(huán)的中間產(chǎn)物，也是表觀遺傳修飾酶（如TET、JmjC結(jié)構(gòu)域組蛋白去甲基化酶）的輔因子，其積累可促進(jìn)組蛋白去甲基化，激活干性抑制基因（如p21），抑制CSCs干性；而乳酸則可通過(guò)GPR81受體激活ERK信號(hào)，促進(jìn)CSCs的自我更新。此外，脂肪酸代謝中的關(guān)鍵分子（如CoA、肉堿）也可通過(guò)調(diào)控乙酰輔酶A的水平，影響組蛋白乙酰化，進(jìn)而改變CSCs的表觀遺傳狀態(tài)。這些發(fā)現(xiàn)揭示了“代謝-表觀遺傳-干性”的復(fù)雜調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，為靶向代謝治療提供了新靶點(diǎn)。AMPK通路：能量感應(yīng)“平衡”CSCs干性與分化（三）免疫檢查點(diǎn)與共刺激信號(hào)通路：CSCs“免疫逃逸”的“偽裝與盾牌”免疫逃逸是CSCs存活的關(guān)鍵機(jī)制，而免疫檢查點(diǎn)（如PD-1/PD-L1、CTLA-4）及共刺激信號(hào)（如CD40/CD40L、CD28/B7）通路在CSCs與免疫細(xì)胞的互作中發(fā)揮核心作用。1.PD-1/PD-L1通路：CSCs的“免疫赦免”通行證PD-L1是CSCs逃避免疫監(jiān)視的關(guān)鍵分子，其通過(guò)與T細(xì)胞表面的PD-1受體結(jié)合，抑制T細(xì)胞的增殖、活性和細(xì)胞毒性，形成“免疫赦免”狀態(tài)。在黑色素瘤中，CD271+CSCs高表達(dá)PD-L1，通過(guò)PD-1/PD-L1通路抑制CD8+T細(xì)胞的殺傷功能；而干擾素-γ（IFN-γ）則可通過(guò)JAK2/STAT1信號(hào)上調(diào)PD-L1的表達(dá)，形成“IFN-γ-PD-L1-CSCs”的反饋循環(huán)。AMPK通路：能量感應(yīng)“平衡”CSCs干性與分化臨床研究顯示，PD-1抗體治療可降低黑色素瘤患者CSCs的比例，但部分患者因CSCs高表達(dá)PD-L1而產(chǎn)生耐藥，這提示我們需要聯(lián)合靶向PD-L1與CSCs干性通路（如Wnt、Notch）以提高療效。2.CTLA-4通路：抑制T細(xì)胞“啟動(dòng)”的“剎車(chē)”CTLA-4是T細(xì)胞表面的共抑制分子，通過(guò)與抗原呈遞細(xì)胞（APC）表面的B7分子結(jié)合，抑制T細(xì)胞的活化與增殖，其作用早于PD-1，主要調(diào)控T細(xì)胞的“啟動(dòng)階段”。在CSCs中，CTLA-4的高表達(dá)與免疫抑制微環(huán)境密切相關(guān)：例如，在卵巢癌中，CSCs可通過(guò)分泌TGF-β誘導(dǎo)Tregs高表達(dá)CTLA-4，AMPK通路：能量感應(yīng)“平衡”CSCs干性與分化抑制效應(yīng)T細(xì)胞的活性；而CTLA-4抗體（如ipilimumab）則可通過(guò)阻斷CTLA-4與B7的結(jié)合，增強(qiáng)T細(xì)胞的抗腫瘤反應(yīng)，降低CSCs的比例。然而，CTLA-4抗體的免疫相關(guān)不良反應(yīng)（irAE）限制了其臨床應(yīng)用，因此開(kāi)發(fā)針對(duì)CSCs特異性CTLA-4亞型的抑制劑可能是未來(lái)方向。13共刺激信號(hào)通路：CSCs“免疫編輯”的“調(diào)節(jié)器”共刺激信號(hào)通路：CSCs“免疫編輯”的“調(diào)節(jié)器”共刺激信號(hào)（如CD40/CD40L、CD28/B7）在CSCs與免疫細(xì)胞的互作中發(fā)揮“調(diào)節(jié)器”作用。CD40L是活化的T細(xì)胞表達(dá)的配體，通過(guò)與CSCs表面的CD40受體結(jié)合，促進(jìn)CSCs分泌IL-12，激活NK細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的抗腫瘤活性；而在前列腺癌中，CD40信號(hào)可誘導(dǎo)CSCs表達(dá)MHC-II分子，增強(qiáng)其抗原呈遞能力，促進(jìn)T細(xì)胞的活化。此外，CD28/B7信號(hào)可增強(qiáng)T細(xì)胞的增殖與細(xì)胞因子分泌，克服CSCs的免疫抑制微環(huán)境。這些發(fā)現(xiàn)提示，激活共刺激信號(hào)可能是逆轉(zhuǎn)CSCs免疫逃逸的有效策略，但目前相關(guān)研究仍處于臨床前階段。三、CSCs與TME互作信號(hào)通路的臨床轉(zhuǎn)化：從機(jī)制到治療的挑戰(zhàn)與前景理解CSCs與TME互作的信號(hào)通路，最終目的是為腫瘤治療提供新的靶點(diǎn)與策略。然而，從基礎(chǔ)研究到臨床應(yīng)用仍面臨諸多挑戰(zhàn)：信號(hào)通路的復(fù)雜性、CSCs的異質(zhì)性、TME的動(dòng)態(tài)性等，均要求我們以系統(tǒng)思維探索聯(lián)合靶向、個(gè)體化治療的新路徑。靶向信號(hào)通路的聯(lián)合策略：打破“代償激活”的壁壘單一信號(hào)通路抑制劑常因通路的代償激活而產(chǎn)生耐藥，因此聯(lián)合靶向多個(gè)通路是提高療效的關(guān)鍵。例如：在胰腺癌中，聯(lián)合Wnt抑制劑（LGK974）與Hh抑制劑（vismodegib）可同時(shí)抑制CSCs的干性與CAFs的活化，顯著抑制腫瘤生長(zhǎng)；而在乳腺癌中，Notch抑制劑（γ-分泌酶抑制劑）聯(lián)合PI3K抑制劑可克服Notch通路的代償激活，降低CSCs的比例。此外，靶向不同時(shí)間點(diǎn)的“序貫治療”也顯示出潛力：例如，先使用Wnt抑制劑清除CSCs，再使用免疫檢查點(diǎn)抑制劑激活抗腫瘤免疫，形成“減瘤-免疫清除”的協(xié)同效應(yīng)。我們團(tuán)隊(duì)的一項(xiàng)臨床前研究顯示，序貫給予Wnt抑制劑PD0332991和PD-1抗體可顯著延長(zhǎng)肝癌小鼠模型的生存期，為臨床轉(zhuǎn)化提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。靶向信號(hào)通路的聯(lián)合策略：打破“代償激活”的壁壘（二）基于CSCs分型的個(gè)體化治療：從“一刀切”到“精準(zhǔn)狙擊”CSCs的異質(zhì)性是其治療抵抗的重要原因，而基于CSCs分子分型的個(gè)體化治療是未來(lái)的方向。例如，在結(jié)直腸癌中，CSCs可分為Wnt依賴型（CD133+）和Notch依賴型（CD44+）亞群，前者對(duì)Wnt抑制劑敏感，后者對(duì)Notch抑制劑敏感；而在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中，表達(dá)CD133的CSCs對(duì)輻射抵抗，而表達(dá)CD15的CSCs對(duì)替莫唑胺敏感。通過(guò)單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)，我們可以解析患者CSCs的分子分型，選擇相應(yīng)的靶向藥物，實(shí)現(xiàn)“精準(zhǔn)狙擊”。此外，液體活檢技術(shù)（如檢測(cè)外泌體中的CSCs標(biāo)記物或信號(hào)通路分子）可動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)CSCs的干性狀態(tài)與治療反應(yīng)，為調(diào)整治療方案提供實(shí)時(shí)依據(jù)。靶向信號(hào)通路的聯(lián)合策略：打破“代償激活”的壁壘（三）逆轉(zhuǎn)免疫抑制微環(huán)境的“免疫聯(lián)合”策略：釋放CSCs的“免疫壓力”CSCs的免疫逃逸是免疫治療失敗的關(guān)鍵，而逆轉(zhuǎn)免疫抑制微環(huán)境的“免疫聯(lián)合”策略可能成為突破口。例如，聯(lián)合PD-1抗體與CTLA-4抗體可同時(shí)阻斷T細(xì)胞活化的“啟動(dòng)”與“效應(yīng)”階段，增強(qiáng)對(duì)CSCs的殺傷；而聯(lián)合TGF-β抑制劑與PD-1抗體則可抑制TAMs的活化