腫瘤微環(huán)境重塑：CAR-T細胞增效策略演講人01腫瘤微環(huán)境的特征及其對CAR-T細胞的抑制機制02CAR-T細胞增效策略——基于腫瘤微環(huán)境重塑的多維度干預03挑戰(zhàn)與未來展望04總結(jié)目錄腫瘤微環(huán)境重塑：CAR-T細胞增效策略作為一名長期從事腫瘤免疫治療研究的臨床轉(zhuǎn)化科學家，我親身經(jīng)歷了CAR-T細胞療法從血液腫瘤到實體瘤的艱難跨越。盡管CD19CAR-T在B細胞白血病中取得了突破性療效，但實體瘤微環(huán)境的復雜抑制網(wǎng)絡(luò)，始終是限制其療效的“攔路虎”。腫瘤微環(huán)境（TumorMicroenvironment,TME）并非被動“舞臺”，而是主動參與腫瘤進展、免疫逃逸和治療抵抗的“動態(tài)生態(tài)系統(tǒng)”。如何通過重塑TME打破CAR-T細胞的“枷鎖”，成為當前免疫治療領(lǐng)域亟待解決的核心命題。本文將從TME的抑制特征出發(fā)，系統(tǒng)梳理基于TME重塑的CAR-T細胞增效策略，并探討其臨床轉(zhuǎn)化挑戰(zhàn)與未來方向。01腫瘤微環(huán)境的特征及其對CAR-T細胞的抑制機制腫瘤微環(huán)境的特征及其對CAR-T細胞的抑制機制腫瘤微環(huán)境是腫瘤細胞與免疫細胞、基質(zhì)細胞、細胞因子、代謝產(chǎn)物等相互作用形成的復雜網(wǎng)絡(luò)。其免疫抑制特征是導致CAR-T細胞功能耗竭、遷移受阻、殺傷能力下降的關(guān)鍵原因。深入解析TME的抑制性組分與機制，是設(shè)計增效策略的前提。免疫抑制性細胞群的“圍剿”TME中存在多種免疫抑制性細胞，它們通過直接接觸、分泌抑制性因子等方式，抑制CAR-T細胞的活化與功能。免疫抑制性細胞群的“圍剿”髓系來源抑制性細胞（MDSCs）MDSCs是TME中主要的免疫抑制細胞群，根據(jù)形態(tài)和分化階段分為單核型（M-MDSCs）和粒細胞型（G-MDSCs）。在腫瘤患者外周血和腫瘤組織中，MDSCs比例顯著升高，其通過以下機制抑制CAR-T細胞：-精氨酸酶1（ARG1）和誘導型一氧化氮合酶（iNOS）介導的代謝抑制：ARG1分解精氨酸，精氨酸是T細胞活化必需的氨基酸，缺乏精氨酸會導致T細胞受體（TCR）信號受阻、細胞周期停滯；iNOS催化L-精氨酸生成一氧化氮（NO），NO通過抑制線粒體呼吸鏈和DNA合成，誘導CAR-T細胞凋亡。-reactiveoxygenspecies（ROS）和過氧化亞硝酸鹽（ONOO?）的氧化損傷：MDSCs高表達NADPH氧化酶，產(chǎn)生大量ROS，導致CAR-T細胞內(nèi)關(guān)鍵信號分子（如ZAP70、PLCγ1）的巰基基團氧化失活，破壞T細胞活化信號通路；ONOO?則通過硝化酪氨酸殘基，抑制CAR-T細胞的細胞毒功能。免疫抑制性細胞群的“圍剿”髓系來源抑制性細胞（MDSCs）-免疫調(diào)節(jié)細胞因子的分泌：MDSCs分泌IL-10、TGF-β等抑制性細胞因子，抑制CAR-T細胞的IFN-γ分泌和增殖能力。免疫抑制性細胞群的“圍剿”腫瘤相關(guān)巨噬細胞（TAMs）TAMs是TME中豐度最高的免疫細胞之一，根據(jù)極化狀態(tài)分為M1型（抗腫瘤）和M2型（促腫瘤）。在TME中，巨噬細胞主要向M2型極化，通過以下機制抑制CAR-T細胞：-PD-L1/PD-1通路介導的耗竭：M2型TAMs高表達PD-L1，與CAR-T細胞表面的PD-1結(jié)合，傳遞抑制性信號，導致CAR-T細胞耗竭（表現(xiàn)為CD62L、CD27等記憶相關(guān)分子丟失，IFN-γ、TNF-α等細胞因子分泌減少）。-IL-10和TGF-β的免疫抑制：M2型TAMs分泌IL-10，抑制CAR-T細胞的IL-2受體表達和增殖；TGF-β則誘導CAR-T細胞分化為調(diào)節(jié)性T細胞（Tregs），進一步放大免疫抑制。-吞噬功能抑制：M2型TAMs通過表達“別吃我”信號分子（如CD47），結(jié)合CAR-T細胞表面的SIRPα，抑制其對腫瘤細胞的吞噬作用。免疫抑制性細胞群的“圍剿”調(diào)節(jié)性T細胞（Tregs）Tregs是CD4?CD25?FOXP3?T細胞亞群，通過以下機制維持TME的免疫抑制狀態(tài)：-細胞接觸依賴的抑制：Tregs通過細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)蛋白4（CTLA-4）與抗原提呈細胞（APCs）的B7分子結(jié)合，競爭性抑制CAR-T細胞的共刺激信號；同時，Tregs分泌顆粒酶和穿孔蛋白，直接殺傷CAR-T細胞。-抑制性細胞因子的分泌：Tregs高分泌TGF-β和IL-10，抑制CAR-T細胞的活化、增殖和細胞毒功能。-代謝競爭：Tregs高表達CD25（IL-2受體α鏈），高親和力結(jié)合IL-2，剝奪CAR-T細胞的IL-2供應(yīng)，導致其增殖受阻。免疫抑制性分子的“枷鎖”TME中存在多種可溶性免疫抑制分子，它們通過直接或間接作用，抑制CAR-T細胞的抗腫瘤活性。免疫抑制性分子的“枷鎖”轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）TGF-β是TME中最強效的免疫抑制因子之一，由腫瘤細胞、TAMs、CAFs等分泌，通過以下機制抑制CAR-T細胞：-抑制CAR-T細胞的增殖與活化：TGF-β通過Smad信號通路，下調(diào)CAR-T細胞中IL-2、IFN-γ等促炎細胞因子的表達，抑制細胞周期蛋白（如CyclinD2、CDK4）的表達，阻滯CAR-T細胞于G1期。-誘導CAR-T細胞耗竭與分化：TGF-β誘導CAR-T細胞表達PD-1、TIM-3、LAG-3等抑制性受體，促進其向耗竭狀態(tài)分化；同時，TGF-β抑制CAR-T細胞的干細胞記憶（Tscm）表型形成，影響其長期抗腫瘤能力。-促進上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）：TGF-β誘導腫瘤細胞發(fā)生EMT，上調(diào)間質(zhì)標志物（如Vimentin、N-cadherin），下調(diào)上皮標志物（如E-cadherin），增強腫瘤細胞的遷移和侵襲能力，同時增加腫瘤細胞對CAR-T細胞的抵抗。免疫抑制性分子的“枷鎖”前列腺素E2（PGE2）PGE2由腫瘤細胞、TAMs、CAFs等通過環(huán)氧合酶-2（COX-2）催化花生四烯酸生成，通過以下機制抑制CAR-T細胞：-抑制CAR-T細胞的細胞毒功能：PGE2通過EP2/EP4受體，激活腺苷酸環(huán)化酶（AC），增加細胞內(nèi)cAMP水平，抑制CAR-T細胞的顆粒酶B和穿孔素的表達，降低其對腫瘤細胞的殺傷能力。-促進MDSCs和Tregs的擴增：PGE2誘導骨髓前體細胞分化為MDSCs，促進Tregs的擴增和活化，進一步放大免疫抑制。123免疫抑制性分子的“枷鎖”腺苷（Adenosine）腺苷由TME中的CD39（外切酶，分解ATP為AMP）和CD73（5'-核苷酸酶，分解AMP為腺苷）催化生成，通過以下機制抑制CAR-T細胞：01-抑制CAR-T細胞的活化與增殖：腺苷通過A2A受體（A2AR）增加細胞內(nèi)cAMP水平，抑制PKA信號通路，降低CAR-T細胞的IL-2受體表達和增殖能力。02-誘導CAR-T細胞凋亡：腺苷通過A2AR激活caspase-3通路，誘導CAR-T細胞凋亡。03代謝紊亂的“饑餓戰(zhàn)”TME的代謝異常是導致CAR-T細胞功能衰竭的重要原因。腫瘤細胞的高代謝需求與免疫細胞對代謝底物的競爭，形成“代謝沙漠”，抑制CAR-T細胞的生存與功能。代謝紊亂的“饑餓戰(zhàn)”缺氧（Hypoxia）實體瘤血管結(jié)構(gòu)異常、功能紊亂，導致TME嚴重缺氧（氧分壓<1%）。缺氧通過以下機制抑制CAR-T細胞：-HIF-1α信號通路的激活：缺氧誘導因子-1α（HIF-1α）是缺氧反應(yīng)的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，其在CAR-T細胞中高表達時，通過下調(diào)糖酵解關(guān)鍵酶（如HK2、PKM2）的表達，抑制糖酵解過程，減少ATP生成；同時，HIF-1α誘導CAR-T細胞表達PD-L1、LAG-3等抑制性受體，促進其耗竭。-腫瘤細胞的代謝重編程：缺氧誘導腫瘤細胞通過Warburg效應(yīng)（有氧糖酵解）產(chǎn)生大量乳酸，乳酸通過MCT1轉(zhuǎn)運體進入CAR-T細胞，抑制組蛋白去乙?；福℉DAC）活性，導致組蛋白乙?；惓?，抑制CAR-T細胞的基因轉(zhuǎn)錄和功能。代謝紊亂的“饑餓戰(zhàn)”營養(yǎng)物質(zhì)耗竭-葡萄糖缺乏：腫瘤細胞高表達葡萄糖轉(zhuǎn)運體（GLUT1），競爭性攝取葡萄糖，導致TME中葡萄糖濃度顯著降低。葡萄糖是CAR-T細胞糖酵解和氧化磷酸化（OXPHOS）的主要底物，缺乏葡萄糖會導致CAR-T細胞ATP生成不足，增殖和殺傷能力下降。-必需氨基酸缺乏：腫瘤細胞和MDSCs高表達精氨酸酶1（ARG1），分解精氨酸；高表達吲哚胺2,3-雙加氧酶（IDO），分解色氨酸。精氨酸是T細胞活化必需的氨基酸，缺乏精氨酸會導致CAR-T細胞TCR信號受阻；色氨酸缺乏通過激活GCN2激酶，抑制CAR-T細胞的蛋白質(zhì)翻譯和增殖。-脂質(zhì)代謝紊亂：TME中高濃度的游離脂肪酸（FFAs）和膽固醇，通過激活PPARγ和LXR信號通路，誘導CAR-T細胞向脂質(zhì)儲存方向分化（形成脂滴積累的“脂質(zhì)誘導的耗竭”表型），抑制其氧化磷酸化和細胞毒功能。010302基質(zhì)屏障的“物理阻隔”腫瘤基質(zhì)細胞（如CAFs）和細胞外基質(zhì)（ECM）形成的物理屏障，阻礙CAR-T細胞向腫瘤核心區(qū)域的浸潤，是實體瘤CAR-T療效不佳的重要原因?；|(zhì)屏障的“物理阻隔”癌癥相關(guān)成纖維細胞（CAFs）CAFs是TME中最主要的基質(zhì)細胞，通過以下機制抑制CAR-T細胞：-分泌ECM蛋白：CAFs高表達α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA），分泌大量的I型膠原、III型膠原、纖維連接蛋白等ECM蛋白，形成致密的基質(zhì)網(wǎng)絡(luò)，物理阻隔CAR-T細胞與腫瘤細胞的接觸。-分泌生長因子和細胞因子：CAFs分泌肝細胞生長因子（HGF）、成纖維細胞生長因子（FGF）、TGF-β等，通過旁分泌信號抑制CAR-T細胞的浸潤和功能。例如，HGF結(jié)合CAR-T細胞表面的c-Met受體，抑制其遷移能力；TGF-β誘導CAR-T細胞表達Snail、Slug等轉(zhuǎn)錄因子，促進其向間質(zhì)表型分化（增強遷移能力但降低殺傷能力）?；|(zhì)屏障的“物理阻隔”細胞外基質(zhì)（ECM）的異常沉積ECM不僅形成物理屏障，還通過以下機制抑制CAR-T細胞：-整合素信號通路異常：CAR-T細胞通過表面整合素（如LFA-1、VLA-4）結(jié)合ECM中的配體（如ICAM-1、纖連蛋白），活化FAK/Src信號通路，促進其遷移和存活。然而，在TME中，異常沉積的ECM（如交聯(lián)的膠原蛋白）導致整合素信號失調(diào)，反而抑制CAR-T細胞的浸潤。-ECM降解酶的抑制：CAFs高表達金屬蛋白酶組織抑制劑（TIMPs），抑制基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）的活性。MMPs是降解ECM的關(guān)鍵酶，其活性降低導致ECM過度沉積，進一步阻礙CAR-T細胞的浸潤。02CAR-T細胞增效策略——基于腫瘤微環(huán)境重塑的多維度干預CAR-T細胞增效策略——基于腫瘤微環(huán)境重塑的多維度干預針對TME的抑制特征，我們需要從“清除抑制性細胞、阻斷抑制性信號、糾正代謝紊亂、破解基質(zhì)屏障”四個維度，設(shè)計多靶點、聯(lián)合的TME重塑策略，打破CAR-T細胞的“枷鎖”。免疫抑制性細胞群的清除與重編程清除TME中的免疫抑制性細胞，或?qū)⑵渲鼐幊虨榭贡硇?，是增強CAR-T細胞浸潤和功能的關(guān)鍵策略。免疫抑制性細胞群的清除與重編程MDSCs的靶向清除與抑制-CSF-1R抑制劑：集落刺激因子-1受體（CSF-1R）是MDSCs存活和擴增的關(guān)鍵信號分子。臨床前研究表明，CSF-1R抑制劑（如PLX3397、BLZ945）可顯著減少腫瘤組織中MDSCs的浸潤，恢復CAR-T細胞的增殖和殺傷功能。例如，在一項黑色素瘤小鼠模型中，聯(lián)合CSF-1R抑制劑和GD2CAR-T，可使腫瘤完全消退率從20%提高到80%。-CXCR2抑制劑：CXCR2是MDSCs向腫瘤組織遷移的關(guān)鍵趨化因子受體。CXCR2抑制劑（如SX-682）可阻斷MDSCs的招募，聯(lián)合CAR-T治療可顯著改善胰腺癌模型的生存期。-ARG1和iNOS抑制劑：針對MDSCs的代謝抑制機制，開發(fā)ARG1抑制劑（如CB-1158）和iNOS抑制劑（如1400W），可恢復精氨酸和NO的平衡，逆轉(zhuǎn)CAR-T細胞的抑制狀態(tài)。免疫抑制性細胞群的清除與重編程TAMs的極化重編程-CSF-1R抑制劑聯(lián)合CD47抗體：CSF-1R抑制劑可減少M2型TAMs的浸潤，CD47抗體（如Magrolimab）可阻斷“別吃我”信號，促進巨噬細胞對腫瘤細胞的吞噬。聯(lián)合CAR-T治療可增強巨噬細胞的抗原提呈功能，激活CAR-T細胞的記憶形成。-TLR激動劑：Toll樣受體（TLR）激動劑（如TLR4激動劑LPS、TLR9激動劑CpG）可誘導TAMs向M1型極化，增加IL-12、TNF-α等促炎細胞因子的分泌，增強CAR-T細胞的抗腫瘤活性。例如，TLR9激動劑與HER2CAR-T聯(lián)合治療，可顯著改善胃癌小鼠模型的生存期。-PI3Kγ抑制劑：磷脂酰肌醇3-激酶γ（PI3Kγ）是TAMs極化為M2型的關(guān)鍵信號分子。PI3Kγ抑制劑（如IPI-549）可抑制M2型TAMs的極化，聯(lián)合CAR-T治療可增加腫瘤組織中CD8?T細胞的浸潤。010302免疫抑制性細胞群的清除與重編程Tregs的depletion與功能抑制-CCR4抗體：CCR4是Tregs向腫瘤組織遷移的關(guān)鍵趨化因子受體。CCR4抗體（如Mogamulizumab）可選擇性清除Tregs，聯(lián)合CAR-T治療可顯著增強其抗腫瘤效果。在一項臨床試驗中，CCR4抗體聯(lián)合CD19CAR-T治療復發(fā)/難治性B細胞淋巴瘤，客觀緩解率（ORR）達到60%，顯著高于單藥CAR-T的30%。-CTLA-4抗體：CTLA-4是Tregs抑制T細胞活化的關(guān)鍵分子。CTLA-4抗體（如Ipilimumab）可阻斷CTLA-4與B7分子的結(jié)合，抑制Tregs的抑制功能，增強CAR-T細胞的增殖和殺傷能力。-GITR抗體：糖皮質(zhì)激素誘導的TNFR相關(guān)蛋白（GITR）是Tregs的激活受體。GITR抗體（如TRX518）可抑制Tregs的抑制功能，同時激活CD8?T細胞的抗腫瘤活性，聯(lián)合CAR-T治療可顯著改善實體瘤模型的生存期。免疫抑制性分子的阻斷與中和阻斷TME中的免疫抑制性分子，解除對CAR-T細胞的“枷鎖”，是增強其功能的重要手段。免疫抑制性分子的阻斷與中和TGF-β信號通路阻斷-TGF-β中和抗體：TGF-β中和抗體（如Fresolimumab）可結(jié)合TGF-β，阻斷其與受體的結(jié)合，恢復CAR-T細胞的增殖和殺傷功能。臨床前研究表明，TGF-β中和抗體聯(lián)合GPC3CAR-T治療肝癌，可顯著抑制腫瘤生長，延長生存期。-TGF-β受體I（TβRI）激酶抑制劑：TβRI激酶抑制劑（如Galunisertib）可阻斷TGF-β的下游信號通路，抑制CAR-T細胞的耗竭和EMT。在一項胰腺癌小鼠模型中，Galunisertib聯(lián)合CAR-T治療，可顯著增加腫瘤組織中CD8?T細胞的浸潤，抑制腫瘤進展。免疫抑制性分子的阻斷與中和TGF-β信號通路阻斷-CAR-T細胞改造：通過CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)，敲除CAR-T細胞中的TGF-β受體II（TβRII），使其對TGF-β不敏感。例如，敲除TβRII的間皮素（Mesothelin）CAR-T在胰腺癌模型中，顯示出更強的增殖和殺傷能力，腫瘤完全消退率達到70%，顯著高于野生型CAR-T的30%。免疫抑制性分子的阻斷與中和PD-1/PD-L1通路阻斷-CAR-T細胞共表達PD-1dominantnegative受體（PD-1DNR）：PD-1DNR是PD-1的突變體，可結(jié)合PD-L1但不傳遞抑制性信號，從而阻斷PD-1/PD-L1通路對CAR-T細胞的抑制。臨床前研究表明，PD-1DNRCAR-T在實體瘤模型中，顯示出更強的持久性和殺傷能力。-局部遞送可溶性PD-L1抗體：通過納米顆?；蚰[瘤局部注射，將可溶性PD-L1抗體遞送至TME，避免全身給藥的副作用。例如，負載抗PD-L1抗體的脂質(zhì)納米顆粒（LNPs）聯(lián)合CAR-T治療，可顯著提高腫瘤組織中抗體濃度，增強CAR-T細胞的抗腫瘤活性。免疫抑制性分子的阻斷與中和PD-1/PD-L1通路阻斷-CAR-T細胞高表達PD-L1抗體：通過基因工程改造，使CAR-T細胞高表達抗PD-L1單鏈抗體（scFv），在TME中局部中和PD-L1，避免全身免疫激活。例如，抗PD-L1scFv修飾的HER2CAR-T在胃癌模型中，顯示出更強的浸潤和殺傷能力，腫瘤完全消退率達到60%。免疫抑制性分子的阻斷與中和腺苷通路阻斷-CD39抑制劑：CD39是分解ATP為AMP的關(guān)鍵酶，抑制CD39可減少腺苷的生成。CD39抑制劑（如ABI-009）聯(lián)合CAR-T治療，可顯著改善黑色素瘤模型的生存期。01-CD73抑制劑：CD73是分解AMP為腺苷的關(guān)鍵酶，抑制CD73可減少腺苷的生成。CD73抑制劑（如Etrumadenant）聯(lián)合CAR-T治療，可顯著增強CAR-T細胞的增殖和殺傷功能。02-A2AR拮抗劑：A2AR是腺苷的受體，拮抗A2AR可阻斷腺苷的抑制作用。A2AR拮抗劑（如Caffeine、Stradomycin）聯(lián)合CAR-T治療，可顯著改善實體瘤模型的生存期。03代謝微環(huán)境的重編程糾正TME的代謝紊亂，為CAR-T細胞提供充足的能量底物，是增強其功能的關(guān)鍵策略。代謝微環(huán)境的重編程改善缺氧狀態(tài)-抗血管生成藥物：血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）是腫瘤血管生成的主要調(diào)控因子，抗VEGF藥物（如Bevacizumab）可normalize腫瘤血管結(jié)構(gòu)，改善TME的氧合狀態(tài)。臨床前研究表明，Bevacizumab聯(lián)合CAR-T治療，可顯著增加腫瘤組織中CAR-T細胞的浸潤，抑制腫瘤生長。-高壓氧治療（HBOT）：高壓氧可提高血液中的氧分壓，改善TME的缺氧狀態(tài)。臨床前研究表明，HBOT聯(lián)合CAR-T治療，可顯著增強CAR-T細胞的增殖和殺傷功能，延長實體瘤模型的生存期。-HIF-1α抑制劑：HIF-1α是缺氧反應(yīng)的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，抑制HIF-1α可逆轉(zhuǎn)缺氧對CAR-T細胞的抑制。HIF-1α抑制劑（如PX-478）聯(lián)合CAR-T治療，可顯著改善胰腺癌模型的生存期。代謝微環(huán)境的重編程補充代謝底物-精氨酸補充：針對精氨酸缺乏，通過局部注射或納米顆粒遞送L-精氨酸，可恢復CAR-T細胞的TCR信號和增殖能力。例如，精氨酸修飾的納米顆粒聯(lián)合CAR-T治療，可顯著提高腫瘤組織中精氨酸濃度，增強CAR-T細胞的殺傷功能。-色氨酸補充：針對色氨酸缺乏，通過局部注射L-色氨酸，可抑制GCN2激酶的激活，恢復CAR-T細胞的蛋白質(zhì)翻譯和增殖能力。-脂質(zhì)代謝重編程：通過基因工程改造，使CAR-T細胞高表達脂質(zhì)氧化關(guān)鍵酶（如CPT1a），增強其對脂質(zhì)的利用能力，提高在低營養(yǎng)環(huán)境中的生存能力。例如，CPT1a過表達的CAR-T在胰腺癌模型中，顯示出更強的增殖和殺傷能力，腫瘤完全消退率達到50%，顯著高于野生型CAR-T的20%。代謝微環(huán)境的重編程增強糖酵解能力-CAR-T細胞高表達糖酵解關(guān)鍵酶：通過基因工程改造，使CAR-T細胞高表達己糖激酶2（HK2）、磷酸果糖激酶1（PFK1）等糖酵解關(guān)鍵酶，增強其糖酵解能力，提高ATP生成效率。例如，HK2過表達的CAR-T在實體瘤模型中，顯示出更強的增殖和殺傷能力。-PI3K/Akt/mTOR通路激活：PI3K/Akt/mTOR通路是糖酵解的關(guān)鍵調(diào)控通路，通過CAR-T細胞高表達組成性激活的Akt（myr-Akt），可增強其糖酵解能力，提高在低葡萄糖環(huán)境中的生存能力。基質(zhì)屏障的破解與ECM降解破解TME的物理屏障，促進CAR-T細胞向腫瘤核心區(qū)域浸潤，是提高實體瘤CAR-T療效的關(guān)鍵策略?；|(zhì)屏障的破解與ECM降解CAFs的靶向抑制-TGF-β抑制劑：TGF-β是CAFs活化的關(guān)鍵因子，TGF-β抑制劑（如Galunisertib）可抑制CAFs的活化，減少ECM蛋白的分泌。臨床前研究表明，Galunisertib聯(lián)合CAR-T治療，可顯著減少胰腺癌中ECM的沉積，增加CAR-T細胞的浸潤。-FGFR抑制劑：成纖維細胞生長因子受體（FGFR）是CAFs存活的關(guān)鍵信號分子，F(xiàn)GFR抑制劑（如Erdafitinib）可抑制CAFs的活化，減少ECM蛋白的分泌。-α-SMA靶向CAR-T細胞：通過基因工程改造，使CAR-T細胞靶向CAFs的表面標志物（如α-SMA、FAP），可選擇性清除CAFs，減少ECM的沉積。例如，F(xiàn)APCAR-T聯(lián)合PD-1CAR-T治療，可顯著改善實體瘤模型的生存期?；|(zhì)屏障的破解與ECM降解ECM的降解與重塑-透明質(zhì)酸酶（Hyaluronidase）：透明質(zhì)酸是ECM的主要成分之一，透明質(zhì)酸酶（如PEGPH20）可降解透明質(zhì)酸，降低ECM的黏稠度，促進CAR-T細胞的浸潤。臨床前研究表明，PEGPH20聯(lián)合CAR-T治療，可顯著增加胰腺癌中CAR-T細胞的浸潤，抑制腫瘤生長。-基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）：MMPs是降解ECM的關(guān)鍵酶，通過CAR-T細胞高表達MMPs（如MMP2、MMP9），可促進ECM的降解，增強其浸潤能力。例如，MMP9過表達的CAR-T在膠質(zhì)母細胞瘤模型中，顯示出更強的浸潤和殺傷能力，腫瘤完全消退率達到40%，顯著高于野生型CAR-T的10%。基質(zhì)屏障的破解與ECM降解ECM的降解與重塑-膠原酶（Collagenase）：膠原是ECM的主要成分之一，膠原酶（如CollagenaseIV）可降解膠原，降低ECM的密度，促進CAR-T細胞的浸潤。例如，膠原酶修飾的納米顆粒聯(lián)合CAR-T治療，可顯著增加肝癌中CAR-T細胞的浸潤，抑制腫瘤生長。03挑戰(zhàn)與未來展望挑戰(zhàn)與未來展望盡管基于TME重塑的CAR-T細胞增效策略在臨床前研究中展現(xiàn)出巨大潛力，但將其轉(zhuǎn)化為臨床應(yīng)用仍面臨多重挑戰(zhàn)。TME的異質(zhì)性與動態(tài)性TME的異質(zhì)性和動態(tài)性是制約CAR-T療效的重要因素。不同腫瘤、不同患者甚至同一腫瘤的不同區(qū)域，TME的組分和功能特征均存在顯著差異。例如，胰腺癌的TME以致密的基質(zhì)屏障和免疫抑制性細胞浸潤為特征，而肝癌的TME則以缺氧和代謝紊亂為主。此外，腫瘤在治療過程中會動態(tài)調(diào)整TME，例如CAR-T細胞的浸潤可誘導腫瘤細胞分泌更多的免疫抑制性分子（如PD-L1、TGF-β），形成“治療抵抗”。因此，需要開發(fā)個體化的TME重塑策略，通過單細胞測序、空間轉(zhuǎn)錄組等技術(shù)，解析患者TME的特征，指導治療選擇。靶向治療的脫毒與安全性TME重塑策略的靶向性是提高療效、降低副作用的關(guān)鍵。例如，CAFs是TME的重要組成部分，但部分CAFs具有正常的生理功能（如組織修復），過度清除可能導致正常組織損傷。因此，需要開發(fā)腫瘤特異性靶點，如CAFs的腫瘤特異性標志物（如FAP、α-SMA的高表達亞群），避免脫毒效應(yīng)。此外，聯(lián)合治療的毒性管理也是重要挑戰(zhàn)，例如CSF-1R抑制劑聯(lián)合CAR-T治療可能導致巨噬細胞減少，增加感染風險，需要優(yōu)化劑量和給藥方案。遞送效率與局部濃度TME重塑藥物（如抑制劑、抗體）的遞送效率是影響療效的關(guān)鍵因素。全身給藥可導致藥物在血液中被快速清除，腫瘤局部濃度低，且易引起全身副作用。因此，需要開發(fā)局部遞送系統(tǒng)，如腫瘤內(nèi)注射、植入型緩釋裝置、納米顆粒等，提高藥物在TME中的局部濃度，減少全身暴露。例如，負載CSF-1R抑制劑的脂質(zhì)納米顆粒聯(lián)合CAR-T治療，可顯著提高腫瘤中抑制劑的濃度，增強療效，同時降低