2026年醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)員招聘生物樣本分析+儀器操作面試題一、單選題（共10題，每題2分，合計(jì)20分）注：請(qǐng)根據(jù)題目要求選擇最符合的答案。1.在處理生物樣本時(shí)，以下哪種方法最適合長(zhǎng)期儲(chǔ)存RNA樣本以避免降解？（）A.保存于-80℃凍存B.保存于4℃冰箱C.加入RNA酶抑制劑D.使用無(wú)RNA酶的離心管2.使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞時(shí)，若發(fā)現(xiàn)細(xì)胞熒光信號(hào)過(guò)強(qiáng)，可能的原因是？（）A.標(biāo)記抗體濃度過(guò)高B.細(xì)胞固定不充分C.儀器激光功率過(guò)低D.樣本稀釋比例不當(dāng)3.高效液相色譜（HPLC）分析中，若出現(xiàn)峰拖尾現(xiàn)象，可能的原因是？（）A.色譜柱老化B.流動(dòng)相pH值不合適C.進(jìn)樣量過(guò)大D.檢測(cè)器靈敏度過(guò)低4.以下哪種試劑常用于蛋白質(zhì)印跡（WesternBlot）實(shí)驗(yàn)中的封閉步驟？（）A.SDS緩沖液B.Tris-HCl緩沖液C.牛血清白蛋白（BSA）D.過(guò)硫酸銨5.電泳實(shí)驗(yàn)中，若凝膠出現(xiàn)氣泡，可能的原因是？（）A.電極連接錯(cuò)誤B.樣本緩沖液不均勻C.凝膠溫度過(guò)高D.染料濃度過(guò)低6.在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，若發(fā)現(xiàn)細(xì)胞大量脫落，可能的原因是？（）A.培養(yǎng)基pH值過(guò)低B.細(xì)胞密度過(guò)高C.培養(yǎng)皿表面不潔D.溫度控制不當(dāng)7.使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)時(shí)，若出現(xiàn)背景高的問(wèn)題，可能的原因是？（）A.樣本稀釋比例不當(dāng)B.孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)C.抗體濃度過(guò)高D.加樣過(guò)程污染8.質(zhì)譜儀在分析有機(jī)物時(shí)，若出現(xiàn)離子峰強(qiáng)度不均，可能的原因是？（）A.樣品前處理不充分B.質(zhì)譜儀離子源故障C.色譜柱選擇不當(dāng)D.數(shù)據(jù)采集時(shí)間過(guò)短9.在微生物培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，若平板出現(xiàn)衛(wèi)星現(xiàn)象，可能的原因是？（）A.培養(yǎng)基滅菌不徹底B.細(xì)菌交叉污染C.培養(yǎng)溫度過(guò)高D.培養(yǎng)皿材質(zhì)問(wèn)題10.使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）檢測(cè)時(shí)，若出現(xiàn)Ct值偏高的現(xiàn)象，可能的原因是？（）A.引物設(shè)計(jì)不合理B.樣本提取不徹底C.試劑保存不當(dāng)D.實(shí)驗(yàn)操作污染二、多選題（共5題，每題3分，合計(jì)15分）注：請(qǐng)根據(jù)題目要求選擇所有符合的答案。1.影響PCR擴(kuò)增效率的因素包括？（）A.引物二聚體形成B.DNA模板濃度C.dNTPs種類D.Taq酶活性E.反應(yīng)體系pH值2.在流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)中，常用的細(xì)胞表面標(biāo)記物包括？（）A.CD3（T細(xì)胞）B.CD19（B細(xì)胞）C.CD45（造血細(xì)胞）D.HLA-DR（活化標(biāo)記）E.CD4/CD8（T細(xì)胞亞群）3.高效液相色譜（HPLC）分析中，以下哪些操作有助于提高分離效果？（）A.優(yōu)化流動(dòng)相組成B.選擇合適的色譜柱C.調(diào)整檢測(cè)波長(zhǎng)D.增加進(jìn)樣量E.控制柱溫4.WesternBlot實(shí)驗(yàn)中，影響蛋白條帶亮度的因素包括？（）A.抗體濃度B.增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光（ECL）試劑C.染料種類D.電轉(zhuǎn)移條件E.蛋白質(zhì)樣品制備5.電鏡觀察細(xì)胞時(shí)，以下哪些操作有助于提高圖像質(zhì)量？（）A.樣品固定充分B.脫水過(guò)程緩慢C.負(fù)染技術(shù)使用不當(dāng)D.硅膠載網(wǎng)清潔E.冷凍電子顯微鏡（Cryo-EM）技術(shù)三、判斷題（共10題，每題1分，合計(jì)10分）注：請(qǐng)判斷下列說(shuō)法的正誤（正確填“√”，錯(cuò)誤填“×”）。1.RNA提取時(shí)，使用苯酚-氯仿法可以有效去除蛋白質(zhì)。（√）2.流式細(xì)胞儀的熒光通道數(shù)量越多，檢測(cè)精度越高。（√）3.HPLC分析中，梯度洗脫比等度洗脫分離效果更好。（√）4.WesternBlot實(shí)驗(yàn)中，一抗和二抗不能重復(fù)使用。（√）5.電泳實(shí)驗(yàn)中，電壓越高，電泳速度越快。（√）6.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，CO2濃度通?？刂圃?%。（√）7.ELISA實(shí)驗(yàn)中，酶標(biāo)板需要用封片液封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)。（√）8.質(zhì)譜儀的離子源溫度越高，分子離子峰強(qiáng)度越強(qiáng)。（×）9.微生物培養(yǎng)時(shí)，平板劃線法可以用于分離純化菌落。（√）10.qPCR實(shí)驗(yàn)中，無(wú)模板對(duì)照（NTC）的Ct值應(yīng)接近35。（×）四、簡(jiǎn)答題（共4題，每題5分，合計(jì)20分）注：請(qǐng)簡(jiǎn)要回答下列問(wèn)題。1.簡(jiǎn)述RNA提取的基本步驟及其關(guān)鍵注意事項(xiàng)。2.解釋流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡的原理及常用標(biāo)記物。3.比較HPLC和GC（氣相色譜）在樣品分析中的主要區(qū)別。4.描述WesternBlot實(shí)驗(yàn)中，一抗和二抗的作用及選擇原則。五、論述題（共2題，每題10分，合計(jì)20分）注：請(qǐng)結(jié)合實(shí)際工作場(chǎng)景，詳細(xì)闡述下列問(wèn)題。1.在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室中，如何確保生物樣本分析的準(zhǔn)確性和可靠性？請(qǐng)從樣本采集、保存、處理和檢測(cè)等環(huán)節(jié)進(jìn)行分析。2.闡述高效液相色譜（HPLC）在藥物代謝研究中的應(yīng)用，并說(shuō)明如何優(yōu)化HPLC條件以提高分析靈敏度。答案與解析一、單選題答案與解析1.A解析：RNA易被RNA酶降解，-80℃凍存可最大程度抑制酶活性，適合長(zhǎng)期儲(chǔ)存。2.A解析：標(biāo)記抗體濃度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致非特異性結(jié)合，使熒光信號(hào)過(guò)強(qiáng)。3.A解析：色譜柱老化會(huì)導(dǎo)致柱效下降，峰形拖尾。4.C解析：BSA可封閉膜表面非特異性位點(diǎn)，減少背景染色。5.B解析：樣本緩沖液不均勻可能導(dǎo)致凝膠氣泡形成。6.B解析：細(xì)胞密度過(guò)高會(huì)引發(fā)“接觸抑制”，導(dǎo)致細(xì)胞脫落。7.D解析：加樣過(guò)程污染（如抗體交叉污染）會(huì)導(dǎo)致背景高。8.B解析：離子源故障會(huì)影響離子化效率，導(dǎo)致峰強(qiáng)度不均。9.B解析：衛(wèi)星現(xiàn)象通常由耐藥菌株產(chǎn)生，提示交叉污染。10.A解析：引物設(shè)計(jì)不合理（如非特異性結(jié)合）會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增效率降低，Ct值偏高。二、多選題答案與解析1.A,B,C,D解析：引物二聚體、模板濃度、dNTPs和Taq酶活性均影響PCR效率。pH值影響較小。2.A,B,C,D,E解析：這些均為常用的細(xì)胞表面標(biāo)記物，用于區(qū)分不同細(xì)胞類型和亞群。3.A,B,E解析：流動(dòng)相優(yōu)化、色譜柱選擇和柱溫控制是提高分離效果的關(guān)鍵。進(jìn)樣量和檢測(cè)波長(zhǎng)影響較小。4.A,B,D,E解析：抗體濃度、ECL試劑、電轉(zhuǎn)移條件和樣品制備均影響蛋白條帶亮度。染料種類屬于染色步驟，影響較小。5.A,B,D,E解析：樣品固定、脫水過(guò)程、載網(wǎng)清潔和Cryo-EM技術(shù)均有助于提高電鏡圖像質(zhì)量。負(fù)染技術(shù)不當(dāng)會(huì)降低分辨率。三、判斷題答案與解析1.√解析：苯酚-氯仿法通過(guò)有機(jī)溶劑沉淀RNA，同時(shí)去除蛋白質(zhì)。2.√解析：更多熒光通道可檢測(cè)更多標(biāo)志物，提高檢測(cè)精度。3.√解析：梯度洗脫可通過(guò)改變流動(dòng)相組成實(shí)現(xiàn)更好分離。4.√解析：重復(fù)使用抗體會(huì)導(dǎo)致活性下降和交叉污染。5.√解析：電壓越高，電場(chǎng)力越強(qiáng)，電泳速度越快。6.√解析：CO2維持培養(yǎng)基pH穩(wěn)定，通?？刂圃?%。7.√解析：封片液封閉非特異性位點(diǎn)可降低假陽(yáng)性。8.×解析：過(guò)高溫度可能導(dǎo)致分子降解，峰強(qiáng)度反而降低。9.√解析：劃線法可分離單菌落。10.×解析：NTC的Ct值應(yīng)接近40，表示無(wú)模板擴(kuò)增。四、簡(jiǎn)答題答案與解析1.RNA提取步驟及注意事項(xiàng)步驟：（1）裂解細(xì)胞，使用TRIzol或酸性胍鹽裂解液。（2）加入氯仿或苯酚，分離RNA（水相）、蛋白質(zhì)（有機(jī)相）和DNA（有機(jī)相）。（3）用無(wú)RNA酶水洗滌RNA，干燥沉淀。（4）溶解RNA，加入RNA保存液。注意事項(xiàng)：-使用無(wú)RNA酶試劑和耗材。-避光操作，避免RNA降解。-樣本量需足夠，避免低濃度RNA影響結(jié)果。2.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡原理及標(biāo)記物原理：細(xì)胞凋亡時(shí)，膜磷脂不對(duì)稱性改變，導(dǎo)致磷脂酰絲氨酸外翻，可用AnnexinV-FITC標(biāo)記。同時(shí)，線粒體膜電位下降，可用JC-1染料檢測(cè)。標(biāo)記物：AnnexinV-FITC（外膜磷脂酰絲氨酸）、PI（核酸染料，區(qū)分死細(xì)胞）、CD95（凋亡受體）。3.HPLC與GC的主要區(qū)別-HPLC：適用于極性、熱不穩(wěn)定分子（如蛋白質(zhì)、糖類），使用液體流動(dòng)相。-GC：適用于非極性、熱穩(wěn)定分子（如小分子有機(jī)物），使用氣體流動(dòng)相。-分析時(shí)間：GC更快，HPLC較慢。-靈敏度：GC通常更高。4.WesternBlot抗體作用及選擇原則作用：-一抗：特異性識(shí)別目標(biāo)蛋白，需高親和力、低非特異性結(jié)合。-二抗：結(jié)合一抗，需標(biāo)記酶（如HRP）或熒光基團(tuán)。選擇原則：-抗體特異性（查文獻(xiàn)驗(yàn)證）；-交叉反應(yīng)性（避免與其他蛋白結(jié)合）；-親和力（WesternBlot優(yōu)先選擇高親和力抗體）。五、論述題答案與解析1.確保生物樣本分析準(zhǔn)確性和可靠性的措施-樣本采集：規(guī)范操作，避免污染（如使用無(wú)菌工具）；-保存：低溫（-80℃）或固定（如甲醛）；-處理：無(wú)RNA酶/蛋白酶環(huán)境