1、第八章 糖酵解,重點(diǎn)： 糖酵解的反應(yīng)途徑 糖酵解過程中的 糖酵解的調(diào)節(jié),糖的分解代謝 生物體中提供能量的主要物質(zhì)是atp，而atp 的形成主要有糖的分解代謝產(chǎn)生,一、糖酵解（glycolysis)概念 也稱emp（embdenmeyerhof途徑），指葡萄糖在無氧條件下分解生成2分子丙酮酸并釋放出能量的過程。 總反應(yīng)式： glc+2pi+2adp+2nad+ 2丙酮酸2atp+2nadh+h+2h2o 它是氧化磷酸化和三羧酸循環(huán)的前奏。 是動(dòng)物、植物、微生物細(xì)胞中葡萄糖分解產(chǎn)生能量的共同代謝途徑。,二、糖酵解途徑的實(shí)驗(yàn)依據(jù) 酵母抽提液的發(fā)酵速度比完整酵母慢，且逐漸緩慢直至停頓 如果加入無機(jī)磷酸

2、鹽，可以恢復(fù)發(fā)酵速度，但不久又會(huì)再次緩慢，同時(shí)加入的磷酸鹽濃度逐漸下降。 上述現(xiàn)象說明在發(fā)酵過程中需要磷酸，可能磷酸與葡萄糖代謝中間產(chǎn)物生成了糖磷酸酯。完整細(xì)胞可通過atp水解提供磷酸。,將酵母液透析后就會(huì)失去發(fā)酵能力 將酵母液加熱到50也會(huì)失去發(fā)酵能力 將經(jīng)過透析失活的酵母液混合在一起后又恢復(fù)發(fā)酵能力 由此推斷發(fā)酵需要兩類物質(zhì)：一是熱不穩(wěn)定的，不可透析的組分即酶；二是熱穩(wěn)定的可透析的組分，如輔酶、atp、金屬離子等。,碘乙酸對酵母生長有抑制作用 將葡萄糖、酵母抽提液及碘乙酸一起保溫，可以分離出少量的磷酸丙糖（主要是3-磷酸甘油醛和磷酸二羥丙酮的平衡混合物） 因此推斷磷酸己糖可能裂解為兩分子三

3、碳糖，而碘乙酸對三碳糖進(jìn)一步分解的酶有抑制作用。,氟化鈉對酵母生長也有抑制作用 將1,6-二磷酸果糖或磷酸丙糖、酵母抽提液以及氟化鈉一起保溫有磷酸甘油酸積累（3-和2-磷酸甘油酸的平衡混合物） 由此推斷3-磷酸甘油酸是3-磷酸甘油醛的氧化產(chǎn)物，2-磷酸甘油酸又是前者變位后的產(chǎn)物，氟化鈉對2-磷酸甘油酸進(jìn)一步反應(yīng)的酶有抑制作用,三、糖酵解途徑 場所:細(xì)胞質(zhì)(胞液)中 氧氣:不需要,糖酵解過程,b,1,糖酵解可分為兩個(gè)階段： 1分子葡萄糖分解為2分子丙酮酸需經(jīng)10步反應(yīng)，前5步反應(yīng)為準(zhǔn)備階段，1glc轉(zhuǎn)變?yōu)?三碳物：磷酸二羥丙酮和3-磷酸甘油醛，消耗2atp。 第二階段是能量獲得階段（payoff

4、 phase)，3-磷酸甘油醛轉(zhuǎn)變?yōu)楸幔?atp和2nadh +h+。 葡萄糖的碳架分解產(chǎn)生丙酮酸、磷酸化adp產(chǎn)生atp、產(chǎn)生的氫轉(zhuǎn)變?yōu)閚adh。,（一）葡萄糖的磷酸化,第一階段的反應(yīng),催化這一反應(yīng)的酶有己糖激酶和葡萄糖激酶。己糖激酶專一性弱，km值小，存在所有的細(xì)胞內(nèi)；別構(gòu)調(diào)節(jié)酶,受adp和葡萄糖6-磷酸的變構(gòu)抑制。 葡萄糖激酶專一行強(qiáng)，km值高，在肝臟中，當(dāng)肝糖濃度較高時(shí)，催化葡萄糖6-磷酸的合成，維持血糖的穩(wěn)定.,糖酵解過程中的中間產(chǎn)物都帶有磷酸基團(tuán)，它們的意義在于： 1.磷酸化導(dǎo)致負(fù)離子，使分子產(chǎn)生極性，使產(chǎn)物不致流失到膜外； 2.磷酸基團(tuán)起一種信號作用，易于被酶識別； 3.

5、磷酸基團(tuán)最終形成atp，保存了能量。,該酶有絕對的底物專一性和立體專一性。 6pg,e4p和s7p等是該酶的競爭性抑制劑。,（三）果糖6-磷酸生成果糖1,6二磷酸,這是一個(gè)不可逆反應(yīng)。 催化該反應(yīng)的是一種變構(gòu)調(diào)節(jié)酶，也是酵解過程中最重要的限速酶。atp有抑制作用，amp可消除這種抑制作用。h+對該酶也有一種抑制作用，這可防止乳酸中毒。 該反應(yīng)對下一步的裂解做好了準(zhǔn)備。,（四）果糖-1,6-二磷酸轉(zhuǎn)變成 三碳化合物,該反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)自由能表明該反應(yīng)是趨向與縮合，但在細(xì)胞中由于底物濃度的驅(qū)動(dòng)，反應(yīng)趨向于裂解。 兩個(gè)三碳糖相同的原子序號其來源不同。,（五）二羥丙酮轉(zhuǎn)變成甘油醛3-磷酸,該反應(yīng)盡管平衡點(diǎn)處

6、二羥丙酮的濃度要高，但由于后續(xù)反應(yīng)對甘油醛的消耗，導(dǎo)致反應(yīng)趨向甘油醛方向。,丙糖磷酸異構(gòu)酶,第二階段的反應(yīng),該反應(yīng)中產(chǎn)生第一個(gè)還原型的輔酶i(nadhh+),同時(shí)吸收1分子無機(jī)磷酸。碘乙酸是一種不可逆抑制劑，它與-sh結(jié)合。砷酸使得其氧化作用與磷酸化作用解偶聯(lián)，即反應(yīng)仍進(jìn)行，但未形成高能磷酸鍵。,砷酸的結(jié)構(gòu)和磷酸類似，故是該酶的競爭性抑制劑。但產(chǎn)物為1砷酸，3 -磷酸甘油酸，后者易水解成3 -磷酸甘油酸。,高能鍵,(二）由1,3-二磷酸甘油酸生成3磷酸甘油酸,這是酵解過程第一個(gè)產(chǎn)生atp的部位。,（三）3-磷酸甘油酸轉(zhuǎn)變成2-磷酸甘油酸,該反應(yīng)通過一個(gè)中間產(chǎn)物:2,3-二磷酸甘油酸。當(dāng)3-磷酸

7、甘油酸與酶結(jié)合后，酶分子上的磷酸轉(zhuǎn)移到2位，生成 2,3-二磷酸甘油酸，使酶分子的活性部位再結(jié)合1分子的磷酸，同時(shí)產(chǎn)生游離的2-磷酸甘油酸。,（四）2-磷酸甘油酸脫水生成烯醇式丙酮酸,這一步反應(yīng)的作用是為下一步將其高能狀態(tài)轉(zhuǎn)變成atp作準(zhǔn)備。 氟化物是酶的強(qiáng)抑制劑。氟與鎂、磷酸形成復(fù)合物，取代酶分子上鎂的位置使酶失活。,mg2+,高能磷酸化合物,（五）磷酸烯醇式丙酮酸轉(zhuǎn)變成丙酮酸并產(chǎn)生atp,這是第二個(gè)產(chǎn)生atp的部位，生成的丙酮酸是共同途徑的終產(chǎn)物，無氧發(fā)酵和有氧呼吸在此之后開始分支。 丙酮酸激酶是一個(gè)變構(gòu)調(diào)節(jié)酶，atp、長鏈脂肪酸、乙酰coa、丙氨酸為負(fù)調(diào)節(jié)物；果糖-1，6-二磷酸和磷酸烯

8、醇式丙酮酸為正調(diào)節(jié)物。,mg2+,四、酵解過程中能量的產(chǎn)生,以葡萄糖為起點(diǎn),無氧情況下:,gg-6-p -1atp f-6-pf-1，6-dip -1atp 2 1,3-二磷酸甘油酸2甘油酸-3-磷酸 +2atp,2pep2py +2atp,除2分子atp外，還生成2分子nadh,葡萄糖2pi+2adp+2nad+ 2丙酮酸2atp+2nadh+2h+2h2o,五、丙酮酸的去路,丙酮酸,無氧或 相對缺氧,有氧：,酒精發(fā)酵,五、丙酮酸的去路,六、nadh+h+的命運(yùn) 無氧條件下: 通過乙醇發(fā)酵受氫，解決重氧化 通過乳酸發(fā)酵受氫，解決重氧化 有氧條件下: 通過呼吸鏈遞氫，最終生成h2o,并生成at

9、p,乳酸生成 (發(fā)酵) 動(dòng)物包括人在劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)或供氧不足時(shí)：,酒精發(fā)酵 酵母在無氧條件下，進(jìn)行乙醇發(fā)酵。,co2,nadh,nad,七、糖酵解作用的調(diào)節(jié) 糖酵解代謝途徑有三個(gè)關(guān)鍵酶： 己糖激酶 磷酸果糖激酶 丙酮酸激酶 三種酶催化的反應(yīng)均為不可逆的，因此，都具有調(diào)節(jié)糖酵解的作用。 其中，磷酸果糖激酶所催化的反應(yīng)是糖酵解的限速步驟。,1.磷酸果糖激酶（pfk）的調(diào)節(jié) atp：高濃度的atp使酶與底物f-6-p的親和力降 低，從而抑制該酶活性。 檸檬酸：通過加強(qiáng)atp的抑制效應(yīng)來抑制該酶的 活性。 h+抑制 果糖-2,6-二磷酸：是該酶的強(qiáng)激動(dòng)劑。能提高 果糖激酶與果糖6磷酸的親合力，并降 低atp的抑制效應(yīng)。別構(gòu)調(diào)控。 前饋刺激作用 f-6-p f-2,6-2p,2.己糖激酶的調(diào)節(jié) 該酶受其催化產(chǎn)物g-6-p的抑制。 3.丙酮酸激酶的調(diào)節(jié) 果糖-1,6-二磷酸對該酶有激活作用； atp是該酶的變構(gòu)抑制劑； 丙氨酸為該酶的變構(gòu)抑制劑； 共價(jià)修飾調(diào)節(jié)：該酶的去磷酸化形式為活性形 式；磷酸化形式為非活性形式。 高濃度葡萄糖促進(jìn)該酶的去磷酸化；,八、其它糖進(jìn)入糖酵解的途