1、第二章 白細胞檢驗,本章目錄,第一節(jié) 白細胞生理概要 第二節(jié) 白細胞計數(shù) 第三節(jié) 白細胞分類計數(shù) 第四節(jié) 中性粒細胞常見的形態(tài)變化 第五節(jié) 白細胞計數(shù)和白細胞分類計數(shù)的臨床意義 第六節(jié) 嗜酸性粒細胞計數(shù) 第七節(jié) 紅斑狼瘡細胞檢驗,返回,下一頁,第一節(jié) 白細胞生理概要,外周血常見白細胞的種類與功能 白細胞的壽命和歸宿,返回,上一頁,下一頁,學習目標,1.敘述白細胞顯微鏡計數(shù)法的原理、試劑組成、注意事項 2.學會白細胞顯微鏡計數(shù)法的操作方法 3.準確識別外周血常見正常和異常白細胞形態(tài) 4.學會白細胞分類計數(shù)方法,返回,上一頁,下一頁,外周血常見白細胞的種類與功能,(一)外周血常見白細胞的種類 1.

2、白細胞的形態(tài)： 無色有核，球形，直徑7m25m。 2.白細胞的種類（形態(tài)分類）： 三類五種-,返回,上一頁,下一頁,中性粒細胞（N） 粒細胞 嗜酸粒細胞（E） 嗜堿粒細胞（B） 白細胞 淋巴細胞 （L） 單核細胞 （M）,返回,上一頁,下一頁,白細胞的發(fā)育,起源于骨髓多能造血干細胞。,返回,上一頁,下一頁,白細胞的功能,中性粒細胞：具有較強的運動能力和吞噬活性。胞內酶有復雜的殺菌系統(tǒng)。 嗜酸粒細胞：可作變形運動，吞噬抗原抗體復合物，滅活組織胺減輕過敏反應。 嗜堿粒細胞：與IgE具有較強的結合力，脫粒釋放組胺導致速發(fā)性變態(tài)反應。 淋巴細胞：參與體液免疫和細胞免疫。 單核細胞：有強大的吞噬功能，傳

3、遞抗原信息。,返回,上一頁,下一頁,白細胞的壽命,粒細胞： 1015天 淋巴細胞：數(shù)天20余年 單核細胞：數(shù)月,返回,上一頁,下一頁,白細胞的歸宿,衰老的粒細胞被單核-吞噬細胞系統(tǒng)清除，也有一部分從口腔、氣管、消化道和泌尿生殖道排出。 B淋巴細胞經(jīng)抗原刺激后分化為漿細胞，產(chǎn)生特異性抗體，參與體液免疫。T淋巴細胞經(jīng)抗原致敏后，可產(chǎn)生多種免疫活性物質，參與細胞免疫。 粒-單核系祖細胞在骨髓經(jīng)分化成原始單核細胞后發(fā)育為成熟單核細胞，釋放入血液。,返回,上一頁,下一頁,返回,上一頁,下一頁,學習目標,1.敘述白細胞顯微鏡計數(shù)法的原理、試劑組成、注意事項。 2.學會白細胞顯微鏡計數(shù)法的操作方法 3.準確

4、識別外周血常見正常和異常白細胞形態(tài)。 4.學會白細胞分類計數(shù)方法。,返回,上一頁,下一頁,顯微鏡計數(shù)法,【原理】 用白細胞計數(shù)稀釋液，將血液稀釋一定倍數(shù)并破壞紅細胞后，混勻充入計數(shù)池中，在顯微鏡下計數(shù)一定容積內的白細胞數(shù)，經(jīng)換算即可求得每升血液中白細胞的總數(shù)。,返回,上一頁,下一頁,顯微鏡計數(shù)法,【器材】 1.顯微鏡（目鏡10；物鏡10） 2.微量吸管（Hb吸管） 傳統(tǒng)的Hb吸管玻璃上有10l和20l（誤差1%）兩個刻度。使用前應經(jīng)嚴格校正。橡膠乳頭提供負壓,返回,上一頁,下一頁,Hb吸管的消毒清洗,每次使用后，應經(jīng)2/過氧乙酸浸泡2消毒。然后依次用蒸餾水沖洗，0.95/乙醇除脂脫水，乙醚干燥

5、后，才能再次使用。注意清洗的順序不可顛倒。,返回,上一頁,下一頁,顯微鏡計數(shù)法,3.計數(shù)池,返回,上一頁,下一頁,顯微鏡計數(shù)法,3.計數(shù)池 各池刻劃有92面積的刻度，分為 9個大方格，每格長、寬各1，面積12，體積為 0.1，容量 0.1l。,返回,上一頁,下一頁,計數(shù)白細胞的四個大方格,四個角的大方格都用單線劃分為16個中方格，為計數(shù)密度小的（白）細胞用。 容量： 0.1l/大方格,返回,上一頁,下一頁,計數(shù)紅細胞的五個中方格,中央的一個大方格，用雙線劃分為25個中方格，每個中方格又被單線劃分為16個小方格，共有400個小方格，供計數(shù)密度大的（紅）細胞用。 容量： 0.1l/大方格 0.00

6、4l/中方格,返回,上一頁,下一頁,.蓋玻片,特制的計數(shù)池專用蓋片，要求玻璃表面平整光滑，有一定重量，不被細胞懸液所抬浮，厚度應為0.40.7。蓋玻片兩面的平整度是：0.002以內， 大小: 24mm20mm0.6mm。,返回,上一頁,下一頁,顯微鏡計數(shù)法,【試劑】 白細胞稀釋液 冰乙酸 2.0 10g亞甲藍（或結晶紫）數(shù)滴 蒸餾水加至100,返回,上一頁,下一頁,稀釋液中各組分的作用,蒸餾水 低滲溶解紅細胞， 乙 酸 可加速紅細胞溶解，同時乙酸能固定核蛋白，使白細胞核顯現(xiàn)，便于辨認。 染 料 使核略著色，且易與紅細胞稀釋液 區(qū)別。,返回,上一頁,下一頁,顯微鏡計數(shù)法,【操作】 取小試管支，加

7、入白細胞稀釋液0.38。 用微量吸管準確吸取外周血20ul。 擦去管尖外部余血，立即將吸管插入盛有稀釋液的試管底部，輕輕將血放出，并吸取上清液漱洗吸管次次，注意每次不能沖渾稀釋液，最后用手振搖試管混勻。,返回,上一頁,下一頁,操作,.充液 將計數(shù)板和蓋玻片擦凈，蓋片蓋在計數(shù)池上，用毛細滴管或玻璃棒取已混勻的細胞懸液1滴，充入計數(shù)池與蓋玻片間的縫隙中，靜置2min3min，待白細胞下沉。,返回,上一頁,下一頁,鏡下白細胞形態(tài),似成熟蠶卵，中央核深染，胞質色淡。,返回,上一頁,下一頁,顯微鏡計數(shù)法,5.計數(shù)方法 用低倍鏡依次計數(shù)四角的四個大格內的白細胞數(shù)。對于壓線的白細胞，應采取數(shù)上不數(shù)下；數(shù)左不

8、數(shù)右（左、上計入，右、下棄去）的原則，保證計數(shù)域的一致性，使計數(shù)準確。,返回,上一頁,下一頁,讓我們共同計數(shù)下列大格的細胞,返回,上一頁,下一頁,讓我們再試一次：,返回,上一頁,下一頁,顯微鏡計數(shù)法,【計算 】 四個大格白細胞數(shù)白細胞數(shù) 10 20 106 4 式中： 得每個大格（即 0.1l）內白細胞平均數(shù) 10 因一大格容積為0.1l，換算為1l 20 血液稀釋倍數(shù)。 106 將1l換算為 1。,返回,上一頁,下一頁,稀釋倍數(shù)的確認,稀釋倍數(shù)（溶質溶劑）/溶質 注意：體積單位需一致后方能運算。,返回,上一頁,下一頁,請您練習,求以下操作的稀釋倍數(shù)： 稀釋液（ml）血液（l）稀釋倍數(shù) 0.3

9、8 20 0.48 20 0.39 10 2.00 10,20,25,40,201,返回,上一頁,下一頁,請您練習,按常規(guī)取血稀釋后數(shù)得4個大格共有白細胞280個，求白細胞計數(shù)結果？,解：WBC280/41020106,14109/L,返回,上一頁,下一頁,請您練習,取血40ul加入稀釋液0.36ml，鏡下計數(shù)了8個大格共有白細胞320個，求其白細胞計數(shù)結果？,答案：稀釋倍數(shù)（36040）40,WBC 32081010106,10, 4109/L,返回,上一頁,下一頁,白細胞計數(shù)計數(shù)誤差,1.技術誤差: 由于操作不正確和儀器不精確造成的誤差。 2.固有誤差: 因每次白細胞分布不可能完全相同所造

10、成的偏差屬固有誤差，也稱計數(shù)域誤差。,返回,上一頁,下一頁,常見技術誤差：,血液凝固 稀釋倍數(shù)不準 充液不當 識別錯誤 器材不符合要求,返回,上一頁,下一頁,固有誤差(計數(shù)域誤差),根據(jù)統(tǒng)計學研究，白細胞在計數(shù)池內的隨機分布符合泊森分布。 從計算公式中可以看出計數(shù)范圍越大，計數(shù)的細胞越多，計數(shù)域誤差越小。,返回,上一頁,下一頁,注意事項,1、稀釋液要過濾使用，試管、計數(shù)板等均須清潔。 2、計數(shù)池內細胞分布要均勻。 總數(shù)在參考范圍內，每個大方格間白細胞數(shù)不得相差8個以上，兩次重復計數(shù)誤差不得超過10%，否則要重新充液計數(shù)。 3、遇白細胞數(shù)太低者、白細胞數(shù)太高者稀釋倍數(shù)應靈活掌握。 4、當外周血出

11、現(xiàn)大量有核紅細胞時應予以校正除去。,返回,上一頁,下一頁,總 結,1.白細胞的種類按形態(tài)分類包括： 三類五種2.顯微鏡法計數(shù)原理： 用稀乙酸溶液將血液稀釋并破壞紅細胞后，混勻充入計數(shù)池中，在鏡下計數(shù)一定容積中的白細胞數(shù)，經(jīng)換算求得每升血液中的白細胞總數(shù)。,返回,上一頁,下一頁,總 結,3. 計數(shù)池的結構：分為 9個大方格，每個大方格長、寬各1，面積 2，體積為 0.1，容量 0.1l。 4. 稀釋液中各組分的作用為：蒸餾水低滲溶解紅細胞；乙酸加速紅細胞溶解同時固定核蛋白，使白細胞核顯現(xiàn)，便于辨認；染料使核略著色，且易與紅細胞稀釋液區(qū)別。,返回,上一頁,下一頁,總 結,5. Hb吸管的清洗順序是

12、：蒸餾水沖洗95%乙醇脫水除脂 乙醚干燥 6.鏡下計數(shù)時要遵循一定順序，對于壓線的白細胞，應采取:數(shù)上不數(shù)下；數(shù)左不數(shù)右（左、上計入，右、下棄去）的原則計數(shù)。,返回,上一頁,下一頁,總 結,計算公式 四個大格白細胞數(shù)白細胞數(shù)1020106,4,返回,上一頁,下一頁,第三節(jié) 白細胞分類計數(shù),一、外周血常見白細胞的形態(tài) 二、白細胞分類計數(shù),返回,上一頁,下一頁,學習目標,1. 敘述外周血常見白細胞的形態(tài) .分析白細胞在血涂片上的分布，正確選擇分類計數(shù)區(qū)域 .述說顯微鏡白細胞分類計數(shù)法,返回,上一頁,下一頁,一、外周血常見白細胞的形態(tài),經(jīng)瑞特染色后外周血中常見各種成熟白細胞形態(tài)如下：,返回,上一頁,

13、下一頁,（一）中性粒細胞,返回,上一頁,下一頁,胞體呈圓形，直徑1015，約為紅細胞的倍。胞質量豐富染粉紅色，含大量細小均勻的紫紅色中性顆粒。細胞核染色質粗糙不勻，排列緊密成小塊狀染深紫紅色。根據(jù)核的形狀分為中性桿狀（帶狀）核粒細胞和中性分葉核（多節(jié)核）粒細胞兩種。,（一）中性粒細胞,中性分葉核粒細胞的核分葉葉或更多葉，以葉葉為常見葉間以核絲或核橋相連。分葉的大小、形狀和排列各不相同。,返回,上一頁,下一頁,中性分葉核粒細胞的核,返回,上一頁,下一頁,桿狀核和分葉核的劃分標準,胞核完全分離或核間以絲狀相連，或核葉重疊，使核的輪廓看不清，劃分為分葉核粒細胞。胞核細長多樣，彎曲盤繞，可呈C型、S型

14、、V型或不規(guī)則型，劃分為桿狀核粒細胞。為不完全成熟細胞。,返回,上一頁,下一頁,桿狀核粒細胞的核形,返回,上一頁,下一頁,（二）嗜酸粒細胞,圓形，直徑13m15m，略大于中性粒細胞。胞核常分兩葉，似眼鏡形。也可見葉葉者。核染色質粗。染紫紅色。胞質中充滿粗大、均勻、整齊、緊密排列的橘紅色嗜酸性顆粒。偶見少許淡藍或無色胞質。嗜酸粒細胞較易碎，破碎后顆粒多散在胞核附近。,返回,上一頁,下一頁,（三）嗜堿粒細胞,圓形，直徑10m1m ，較其他粒細胞小。胞核常被顆粒遮蓋，核染色質粗著色較淺，分葉常不明顯形態(tài)不規(guī)則，清楚時可見葉葉。胞質量較少，常呈淡紅或淡紫紅色，含少量粗大，但大小不均、排列不規(guī)則的紫黑色

15、嗜堿性顆粒，常蓋于核上。嗜堿性顆粒易溶于水，故染色時易被溶解消失，而呈淡紅色空穴狀。,返回,上一頁,下一頁,（四）單核細胞,呈不規(guī)則的圓或橢 圓形，為外周血中最大 的細胞直徑15m 25m 。細胞核大呈不 規(guī)則圓形、腎形、馬蹄形， 或不規(guī)則分葉有時折疊卷曲。染色質細致疏松如網(wǎng)狀，染淡紫紅色。胞質量豐富染淡藍、灰藍色不等，常呈毛玻璃樣半透明。胞質內含有大量細小灰塵樣紫紅色嗜天青顆粒。核凹陷處胞質染色較淡偶見無顆粒胞質是偽足樣伸出。,返回,上一頁,下一頁,（五）淋巴細胞,按其個體可有大小之分。 小淋巴細胞：呈圓形，直徑6m 10m 。胞核圓形。偶見 凹陷，染色質粗糙緊密，排列 均勻，無空隙。常有隱

16、約成塊現(xiàn)象，核周常有染色質濃集，核膜明顯，有時可見潛在核仁。 胞質量極少，僅在核的一側出現(xiàn)一線天藍或深 藍色，有的甚至完全不見。胞質中一般無顆粒 存在，偶見幾顆大小不等的紫紅色嗜天青顆粒。,返回,上一頁,下一頁,大淋巴細胞：,體積較大直徑10m 15m ，胞核染色質比小淋巴細胞疏松，胞質量豐富，呈透明的淡藍色，常有少量大小不等的嗜天青顆粒。,返回,上一頁,下一頁,五種白細胞鑒別要點,返回,上一頁,下一頁,點評,三種粒細胞主要依據(jù)胞質中顆粒形態(tài)和染色性質去相互鑒別； 淋巴細胞與單核細胞則重點根據(jù)細胞核的特征去區(qū)別。,返回,上一頁,下一頁,嗜中性粒細胞,嗜酸性粒細胞,嗜堿性粒細胞,淋巴細胞,單核細

17、胞,返回,上一頁,下一頁,二、白細胞分類計數(shù),步驟 1制備血涂片 2血涂片染色 3白細胞分類 4計算百分率,返回,上一頁,下一頁,白細胞總數(shù)與分類白細胞數(shù)的關系,返回,上一頁,下一頁,二、白細胞分類計數(shù)法,由于各種白細胞大小不同在血片中分布不很均勻。一般體積較小的淋巴細胞在頭、體部較多而尾部和兩側以中性粒細胞和單核細胞較多特別是異常大的細胞常常在片尾末端出現(xiàn)。,返回,上一頁,下一頁,二、白細胞分類計數(shù),分類最好是在血膜體尾交界處由血膜邊緣向中央依次上下呈曲線向血膜中間移動，計數(shù)不同區(qū)域的白細胞，以免重復計數(shù)縮小因細胞分布不勻的誤差。,返回,上一頁,下一頁,二、白細胞分類計數(shù),3.白細胞分類記錄

18、方法 （1）分類計數(shù)器法 （2）完全記錄法,返回,上一頁,下一頁,二、白細胞分類計數(shù),4 .各類細胞所占百分率乘以白細胞總數(shù)/即得每升血液中各類白細胞的濃度數(shù)（習慣稱絕對值）。 某種白細胞數(shù)某種白細胞白細總數(shù),返回,上一頁,下一頁,二、白細胞分類計數(shù),5 .血片中如有幼紅細胞也應逐個計數(shù)，不列入白細胞總數(shù)，而是報告分類計數(shù)100個白細胞的過程中見到的幼紅細胞數(shù)，并應注明其所屬階段。,返回,上一頁,下一頁,二、白細胞分類計數(shù),6 .如發(fā)現(xiàn)幼稚或異常白細胞應分類鑒定，包括在白細胞分類百分率中。此外還應注意血涂片中有無異常紅、白細胞及血小板的大體數(shù)量分布情況及寄生蟲等。,返回,上一頁,下一頁,二、白

19、細胞分類計數(shù),注意事項 1. 在血涂片選擇適宜的分類部位進行細胞分類。 2.移動血涂片的順序一定要有規(guī)律。 3.分類時不能人為地拋棄個別細胞，不能確認者應單獨記錄比例并用文字描述其形態(tài)特征。,返回,上一頁,下一頁,二、白細胞分類計數(shù),注意事項 4.法線幼稚白細胞應包括在%內，若細胞形態(tài)異常也應加以說明。 5.發(fā)現(xiàn)有核紅細胞（幼紅細胞）不計入白細胞%內，而報告“計數(shù)個白細胞時發(fā)現(xiàn)幼紅細胞個，同時要對白細胞計數(shù)結果進行校正。,返回,上一頁,下一頁,二、白細胞分類計數(shù),注意事項 6.如患者WBC少，一張血涂片上分類計數(shù)不足100個細胞時可在兩張涂片上連續(xù)完成。實在有困難時可按“/50個白細胞”報告（

20、但本法誤差大）。,返回,上一頁,下一頁,二、白細胞分類計數(shù),鏡檢中，對細胞形態(tài)力求掌握最根本點，如核形、核染質結構、胞質色澤、顆粒等反復對比。由于染色條件不可能使每一張涂片完全一致，因此細胞大小，染色深淺，色調等變化不是絕對不變的，要學會“具體問題，具體分析”，抓主要矛盾。 在注意細胞比例關系變化的同時，更要注意細胞形態(tài)有無異常改變。發(fā)現(xiàn)特殊變化要及時報告。,返回,上一頁,下一頁,作業(yè),1.瑞特染色白細胞核不著色或僅呈極淺藍色是何原因？怎樣校正？ 2.下列細胞組應重點從哪方面區(qū)分： （1）中性粒細胞-嗜酸粒細胞 （2）中性粒細胞-單核細胞 （3）單核細胞-大淋巴細胞,返回,上一頁,下一頁,返回

21、,上一頁,下一頁,學習目標,1.白細胞總數(shù)和各類白細胞分數(shù)的參考區(qū)間 2.白細胞總數(shù)和各類白細胞分數(shù)的生理變化和病理變化 3.中性粒細胞核象變化的意義 4.白細胞變化與疾病預后的關系,返回,上一頁,下一頁,第四節(jié) 中性粒細胞常見的形態(tài)變化,一、核象變化 二、毒性變化 三、退行性變化,返回,上一頁,下一頁,一、中性粒細胞核象變化,外周血中中性粒細胞核象-指粒細胞的成熟程度， 核象變化反映疾病的病情發(fā)展和預后。 中性粒細胞的核象變化分為核象左移與核象右移兩種。左、右移的區(qū)分線在桿狀與分葉核之間。,返回,上一頁,下一頁,一、中性粒細胞核象變化,返回,上一頁,下一頁,一、中性粒細胞核象變化,.中性粒細

22、胞核象左移 外周血中桿狀核粒細胞增多和桿狀核階段以前的幼稚細胞出現(xiàn)稱為核象左移。,返回,上一頁,下一頁,一、中性粒細胞核象變化,(1) 再生性左移-核象左移伴有白細胞總數(shù)增多者。表示機體迫切需要骨髓能釋放大量粒細胞至外周血。常見于急性化膿性感染、急性中毒、急性大出血等。,返回,上一頁,下一頁,一、核象變化,(2) 退行性左移或變質性左移-核象左移，但白細胞總數(shù)不增加或降低者。表示骨髓釋放功能受抑制。常見于嚴重感染，機體抵抗力低下時，加傷寒、敗血癥等。,返回,上一頁,下一頁,一、核象變化,核象左移根據(jù)其程度可分為： （1）輕度核象左移：僅見于桿狀核粒細胞 增多，6 ()中度核象左移：桿狀核粒細胞

23、 10，伴少數(shù)晚幼粒、中幼粒細胞。 ()重度核象左移（類白血病反應）：桿狀核粒細胞25，出現(xiàn)更幼稚的粒細胞并常伴有明顯的中毒顆粒、空泡變性、核變性等質的改變。,返回,上一頁,下一頁,一、核象變化,中性粒細胞核象右移 核右移-外周血中中性分葉核粒細胞增多，同時分5葉核以上的細胞3時（正常時多為3葉核）。 這是造血功能衰退或造血物質缺乏的表現(xiàn)，核象右移常伴白細胞總數(shù)的減少。主要見于營養(yǎng)性巨幼細胞性貧血，惡性貧血和用抗代謝藥物，炎癥恢復期可出現(xiàn)一過性右移。在疾病進行期，突然出現(xiàn)右移，提示預后不良。,返回,上一頁,下一頁,二、毒性變化,在重癥傳染病、各種化膿性感染、惡性腫瘤、中毒、大面積燒傷、放射性治

24、療等病理情況下，中性粒細胞可發(fā)生毒性變化。具體表現(xiàn)為中毒顆粒、細胞大小不均、空泡、杜氏小體、核棘突 。,返回,上一頁,下一頁,二、毒性變化,1. 細胞大小不等： 指中性粒細胞體積大小懸殊的情況而言。常見于炎癥。其發(fā)生機理可能是在內毒素的作用下，骨髓內幼稚中性粒細胞發(fā)生不規(guī)則的分裂增殖所致。,返回,上一頁,下一頁,二、毒性變化,.中毒顆粒 瑞特染色后，中性粒細胞胞質內出現(xiàn)深紫藍色或紫黑色的粗大而分布不均勻的顆粒有時也較小或稀疏散在于中性顆粒中。常見于嚴重的化膿性感染及大面積燒傷等。,返回,上一頁,下一頁,二、毒性變化,3.空泡 細胞受損后胞質發(fā)生脂肪變性，染色后脂質溶解后的結果。可出現(xiàn)在核上或胞

25、質中。,返回,上一頁,下一頁,二、毒性變化,4.杜氏小體 細胞嚴重毒性變時胞質中保留的局部嗜堿性區(qū)域。,返回,上一頁,下一頁,二、毒性變化,5.核變性 包括核固縮、核溶解、核破碎等。 核固縮指細胞核固縮為均勻而深紫色的塊狀；核溶解則可見細胞核膨脹，著色淺淡，伴核破碎的則核的輪廓不清。臨床意義同空泡變性等。,返回,上一頁,下一頁,二、中性粒細胞毒性變化,6.核棘突 中性粒細胞核有各種形態(tài)的芽狀突起，稱為核棘突。正常人白細胞如大量出現(xiàn)此種現(xiàn)象，則預示有嚴重中毒或感染存在，如轉移癌、晚期結核病、嚴重放射線損傷等。,返回,上一頁,下一頁,與代表性染色體的核鼓錘狀突出物區(qū)別。,鼓錘狀突出物為一直徑約1.

26、5m的圓形物突出，并有細絲與核相連接，形同鼓錘。,返回,上一頁,下一頁,三、退行性變化,表現(xiàn)為胞體腫大、結構模糊、邊緣不清晰；核固縮、核腫脹和核溶解、染色質模糊、疏松。如胞質破裂后消失，只剩失去結構的腫脹的胞核，則成裸核或藍狀細胞。,返回,上一頁,下一頁,一、參考區(qū)間 二、生理變化 三、病理變化 四、白細胞變化和疾病預后的關系,返回,上一頁,下一頁,課前復習,1.作白細胞分類計數(shù)應注意哪些問題？,答案： 1.選擇好分類的部位 2.移動血涂片的順序一定要有規(guī)律， 3.分類時不能人為地拋棄個別細胞， 4.發(fā)現(xiàn)幼稚白細胞應包括在%內， 5.細胞形態(tài)異常也應加以說明。 6.發(fā)現(xiàn)有核紅細胞（幼紅細胞）不

27、計入白細胞%內，同時要對白細胞計數(shù)結果進行校正。,返回,上一頁,下一頁,課前復習,2.瑞特染色后見部分分葉核粒細胞胞質中顆粒呈紫黑色，問此類細胞有可能是哪幾種細胞！,答案： （1）嗜堿粒細胞 （2）中性粒細胞染色偏堿 （3）嗜酸粒細胞顆粒染色偏堿,返回,上一頁,下一頁,一、參考值（參考區(qū)間）,白細胞計數(shù)： 成 人： 4109/L10109/L； 兒 童： 5109/L12109/L 初生兒：15109/L20109/L。,返回,上一頁,下一頁,白細胞分類計數(shù)的參考值,百分率（%） 濃度數(shù)（109/L） 中性桿狀核粒細胞 15 0.040.5 中性分葉核粒細胞 5070 27 嗜酸性粒細胞 0.

28、55 0.050.5 嗜堿性粒細胞 01 00.1 淋巴細胞 2040 0.84 單核細胞 38 0.120.8,返回,上一頁,下一頁,絕對值的計算方法,某種細胞絕對值白細胞總數(shù)該種細胞% 例：某患者WBC為4109/L；D.C中Nc為60%，求該患者中性粒細胞濃度數(shù)（絕對值）？ 解： 絕對值410960% 2.4109/L,返回,上一頁,下一頁,二、生理變化,年齡 日間變化 運動、疼痛和情緒影響 妊娠與分娩,返回,上一頁,下一頁,二、生理變化,年齡因素 形成中性粒細胞和淋巴細胞變化曲線的二次交叉。,返回,上一頁,下一頁,二、生理變化,日間變化 活動進食后較高 下午高于上午,運動、疼痛和情緒影

29、響 當劇烈運動、劇痛和情緒激動時，可引起白細胞顯著增加。,妊娠與分娩 妊娠期白細胞常輕度增加。產(chǎn)后2周左右恢復正常、此后如再次升高，就有產(chǎn)后感染的可能。,返回,上一頁,下一頁,三、病理性變化,（一）中性粒細胞與白細胞總數(shù)的增多與減少 1中性粒細胞增多 2中性粒細胞減少 （二）嗜酸性粒細胞增多與減少 （三）嗜堿性粒細胞增多 （四）淋巴細胞增多與減少 （五）單核細胞增多,返回,上一頁,下一頁,三、病理性變化,中性粒細胞病理增多 急性感染 急性中毒 急性大出血 嚴重的組織損傷 白血病及惡性腫瘤,返回,上一頁,下一頁,三、病理性變化,中性粒細胞增多的病理變化 急性細菌性感染和化膿性炎癥 金黃色葡萄球菌

30、、肺炎鏈球菌感染等、其白細胞總數(shù)的增高視感染范圍，嚴重程度及機體反應性如何而有所不同。 常見疾病有肺炎、丹毒、猩紅熱、敗血癥、白喉、蘭尾炎等。,返回,上一頁,下一頁,三、病理性變化,中性粒細胞增多的病理變化 急性中毒 急性藥物及農(nóng)藥中毒如安眠藥、有機磷等中毒；代謝性中毒如糖尿病酮癥酸中毒、尿毒癥及汞、鉛中毒等。,返回,上一頁,下一頁,三、病理性變化,中性粒細胞增多的病理變化 急性大出血 內臟（肝、脾等）破裂或宮外孕破裂所致大出血、大量血細胞破壞、此時白細胞可迅速增高，達20109，且出現(xiàn)于血紅蛋白降低之前。,返回,上一頁,下一頁,三、病理性變化,中性粒細胞增多的病理變化 嚴重的組織損傷 如嚴重

31、燒傷、較大手術后、心肌梗死等均可見白細胞增多，并可借此來區(qū)別心肌梗死與心絞痛。,返回,上一頁,下一頁,三、病理性變化,中性粒細胞增多的病理變化 白血病及惡性腫瘤 常見于急性、慢性粒細胞性白血病。,返回,上一頁,下一頁,中性粒細胞減少的病理變化,傳染病 理化損傷 血液病 脾功能亢進 自身免疫性疾病,返回,上一頁,下一頁,中性粒細胞減少的病理變化,傳染病 某些革蘭陰性桿菌如傷寒、副傷寒感染和某些病毒感染如流感。乙肝、麻疹等，無并發(fā)癥時均可見白細胞減少。,返回,上一頁,下一頁,中性粒細胞減少的病理變化,某些理化損傷 長期接觸電離輻射如線、鐳照射等；或應用、接觸某些化學藥物、抗癌藥物、有毒物質，如晚期

32、或嚴重的苯、鉛、砷、汞等中毒。,返回,上一頁,下一頁,中性粒細胞減少的病理變化,某些血液病 如再生障礙性貧血、非白血性白血病、粒細胞缺乏癥，白細胞可110。 分類時呈淋巴細胞相對增多。,返回,上一頁,下一頁,中性粒細胞減少的病理變化,脾功能亢進 腫大的脾臟中單核巨噬細胞系統(tǒng)吞噬破壞過多的白細胞及分泌過多的脾素滅活了促進粒細胞生成的某些因子。,返回,上一頁,下一頁,中性粒細胞減少的病理變化,自身免疫性疾?。?如系統(tǒng)性紅斑狼瘡等因自身免疫性抗核抗體導致粒細胞破壞增多。,返回,上一頁,下一頁,嗜酸粒細胞增多與減少,1 .嗜酸性粒細胞增多 2 .嗜酸性粒細胞減少,返回,上一頁,下一頁,嗜酸粒細胞增多與

33、減少,.嗜酸粒細胞增多 過敏性疾病 寄生蟲病 皮膚病 傳染病 腫 瘤 血液病,返回,上一頁,下一頁,嗜酸粒細胞增多與減少,. 嗜酸粒細胞減少 由于嗜酸粒細胞在白細胞中所占百分率較低，故其減少意義不大，在長期應用腎上腺皮質激素時由于它抑制組胺合成可間接導致嗜酸粒細胞減少。急性傳染病的早期亦常見減少。,返回,上一頁,下一頁,嗜堿粒細胞增多,.慢性粒細胞性白血?。菏葔A粒細胞增多可達10以上。 .嗜堿粒細胞性白血?。捍瞬『币娛葔A粒細胞增多,多為稚型 .其他：如淋巴網(wǎng)細胞瘤，脾切除術后和某些轉移癌等可見嗜堿粒細胞增多。,返回,上一頁,下一頁,淋巴細胞增多與減少,.淋巴細胞增多 .淋巴細胞減少,返回,上一

34、頁,下一頁,淋巴細胞增多與減少,.淋巴細胞增多（40） （1）相對增多：即每升血液中淋巴細胞濃度數(shù)不增加，因中性粒細胞顯著減少使淋巴細胞分類計數(shù)百分率相對增高。如再生障礙性貧血、粒細胞缺乏癥等,返回,上一頁,下一頁,淋巴細胞增多與減少,.淋巴細胞增多（40） （）絕對增多 是指淋巴細胞濃度數(shù)和分數(shù)數(shù)都增多，可見于： 某些傳染病 某些傳染病的恢復期和腎移植術后發(fā)生排異反應時。 急、慢性淋巴細胞性白血病、白血病性淋巴肉瘤時淋巴細胞均增高。,返回,上一頁,下一頁,淋巴細胞增多與減少,.淋巴細胞減少（20） 多見于傳染病的急性期、長期接觸放射線、細胞免疫缺陷病等。此外，各種引起中性粒細胞增多的原因均可

35、導致淋巴細胞相對減少。,返回,上一頁,下一頁,單核細胞增多,.某些感染 如結核、傷寒、亞急性感染性心內膜炎及某些急性感染的恢復期。 .某些寄生蟲病 如瘧疾、黑熱病等。 .某些血液病 單核細胞性白血病、惡性組織細胞病及骨髓增生異常綜合征（）等單核細胞均可增高。,返回,上一頁,下一頁,四、白細胞變化和疾病預后的關系,預后良好征兆 病情較重征兆 病情險惡的征兆 感染已被清除征兆,返回,上一頁,下一頁,預后良好征兆,白細胞總數(shù)正?；蛏愿?中性粒細胞略有增高 核象輕度左移表示感染程度較輕，機體抵抗力強，預后良好。,返回,上一頁,下一頁,病情較重征兆,中性粒細胞10109/L 核象出現(xiàn)中度左移及毒性變化

36、嗜酸性粒細胞消失表示病情較重,返回,上一頁,下一頁,病情險惡的征兆,白細胞總數(shù)與中性粒細胞比值明顯增高分別20109/L及80%； 感染嚴重時白細胞不增高反而降低； 中性粒細胞有嚴重核象左移； 嗜酸性粒細胞消失表示病情險惡的征兆。,返回,上一頁,下一頁,感染已被清除征兆,單核細胞逐漸增多； 嗜酸性粒細胞重新出現(xiàn)或上升； 中性粒細胞核象左移減輕； 中性粒細胞毒性變化消失表示感染已被清除 。,返回,上一頁,下一頁,總結,返回,上一頁,下一頁,目標形成檢測,返回,上一頁,下一頁,請您練習,某患者WBC為8109/L；DC中 Nc為80%，Lc 為10%。求中性粒細胞和淋巴細胞濃度數(shù)？ 答案：,Nc6

37、.4109/L Lc0.8109/L,返回,上一頁,下一頁,病例討論,患者、男、45歲、全身酸痛乏力咳嗽二天、體溫37.8。 血常規(guī)檢驗：白細胞12109 /L、中性粒細胞80%、中性粒細胞桿狀核15%、嗜酸粒細胞0%、見中毒顆粒、其它未見異常 問：有患上呼吸道感染的可能，病情是初期？病情比較嚴重？為什么？,返回,上一頁,下一頁,請您練習,某患者WBC為6109/L， D.C Nc 90%問該患者中性粒細胞是否正常？,解：Nc6109/L90% 5.4109/L 答：檢查結果正常,返回,上一頁,下一頁,請您練習,出生后Nc和Lc變化曲線的兩次交叉發(fā)生在什么時候？,答案： 笫一次交叉：出生后的第

38、69日； 第二次交叉：4歲5歲。,返回,上一頁,下一頁,請您練習,中性粒細胞有哪些病理變化？,返回,上一頁,下一頁,答案： （1）數(shù)量增加和減少 （2）核象左移和右移 （3）形態(tài)毒性變和退行性變,重慶藥劑學校臨床檢驗教研室須建 制作 多媒體教學中心張曉輝,返回,上一頁,下一頁,學習目標,1. 解釋嗜酸粒細胞直接計數(shù)的原理 2. 分析稀釋液成分與計數(shù)結果的關系 3. 闡述嗜酸粒細胞直接計數(shù)的臨床意義 4. 進行嗜酸粒細胞直接計數(shù),返回,上一頁,下一頁,復習前課,嗜酸粒細胞的參考值是多少？哪些情況會升高？,返回,上一頁,下一頁,答案： 參考值：0.5 % 5%；（0.05 0.5） 109/L 增

39、多：（1）過敏性疾病（2）寄生蟲病 （3）某些皮膚?。ㄈ鐫裾睿?）某些傳染病及傳染病恢復期（5）某些惡性腫瘤和血液?。ㄈ鏓c白血?。?嗜酸粒細胞直接計數(shù),為什么要直接計數(shù)（目的意義）?,返回,上一頁,下一頁,測定每升血液中嗜酸粒細胞濃度數(shù)，雖然可從白細胞濃度數(shù)和嗜酸粒細胞%的乘積得知，但由于嗜酸粒細胞所占百分率低，加之在血片上細胞分布不十分均勻誤差很大，所以，在臨床上需要準確了解嗜酸粒細胞的變化時，多采用直接計數(shù)法。,嗜酸粒細胞直接計數(shù),【原理】 用嗜酸粒細胞稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)破壞其紅細胞和部分其他白細胞，將嗜酸粒細胞顆粒染色，充入計數(shù)池內，計數(shù)一定體積內嗜酸粒細胞，經(jīng)換算得出每升血液

40、中嗜酸粒細胞數(shù)。,返回,上一頁,下一頁,嗜酸粒細胞直接計數(shù),【稀釋液】 .乙醇-伊紅稀釋液 0.95乙醇 30.0l 甘油 10.0l 碳酸鉀 1.0 檸檬酸鈉 0.5 20g/伊紅 10.0ml 蒸餾水加至 100.0l,返回,上一頁,下一頁,嗜酸粒細胞直接計數(shù),試劑成分的作用 1.乙醇為嗜酸粒細胞保護劑其濃度以3035較為合適。 2.甘油可防止乙醇揮發(fā)。 3.碳酸鉀可促進紅細胞和中性粒細胞等溶解并增加嗜酸粒細胞對染料的著色力。 4.枸椽酸三鈉可防止血液凝固。 5.伊紅可使嗜酸性顆粒染橘紅色。,返回,上一頁,下一頁,嗜酸粒細胞直接計數(shù),乙醇-伊紅稀釋液的特點 優(yōu)點：試劑穩(wěn)定，視野清晰、無沉渣

41、。在室溫下可保持個月。 缺點：稀釋液內含甘油，比較粘稠，細胞不易搖勻和下沉。,返回,上一頁,下一頁,嗜酸粒細胞直接計數(shù),2.Hinkelman氏液 伊紅 0.2g 95苯酚 0.5ml 40甲醛 0.5ml 蒸餾水加至 100ml,返回,上一頁,下一頁,嗜酸粒細胞直接計數(shù),【操作】 . 取稀釋液0.38ml于小試管內，吸血20l，立即輕輕混合均勻待紅細胞溶解。 充分混勻充入雙側計數(shù)池內。靜置2min5min。 低倍鏡下計數(shù)10個大方格（兩側計數(shù)池的中央和四角的大方格）內嗜酸粒細胞數(shù)。,返回,上一頁,下一頁,嗜酸粒細胞直接計數(shù),.計算 嗜酸粒細胞數(shù)10個大方格內嗜酸粒細胞數(shù)20106 注意：稀釋

42、倍數(shù)與計數(shù)域發(fā)生改變后應按實際操作換算成每升血液中的細胞數(shù)。,返回,上一頁,下一頁,嗜酸粒細胞直接計數(shù),【注意事項】 .本試驗應在30min內計數(shù)完畢。否則嗜酸粒細胞逐漸破壞，使結果偏低。 血液加入稀釋液中，要及時混勻，以免細胞聚集，但又不宜過分振搖,以免嗜酸粒細胞破碎。,返回,上一頁,下一頁,嗜酸粒細胞直接計數(shù),【注意事項】 .住院患者作用酸粒細胞直接計數(shù)應固定時間，以免受日間生理變化的影響。 .注意與未破壞的中性粒細胞區(qū)別，中性粒細胞顆粒一般不受色或受色極淺，且其顆粒較小。 若出現(xiàn)嗜酸粒細胞被破壞，可適當增加乙醇的劑量。,返回,上一頁,下一頁,嗜酸粒細胞直接計數(shù),臨床意義 1.參考區(qū)間 ：

43、 0.051090.5109 （50l500l）。,返回,上一頁,下一頁,嗜酸粒細胞直接計數(shù),臨床應用 （）觀察急性傳染病的預后。 （ 2）觀察大手術和燒傷病人的預后。 （）腎上腺皮質功能和腦垂體前葉功能測定(減數(shù)試驗)。,返回,上一頁,下一頁,減數(shù)試驗原理,注射腎上腺素 （間接刺激）,垂體前葉,釋放促腎上腺皮質激素 （ACTH）,腎上腺皮質,嗜酸粒細胞減少,注射ACTH （直接刺激）,返回,上一頁,下一頁,減數(shù)試驗結果判斷,在正常情況下，注射ACTH （促腎上腺皮質激素）或腎上腺素后，嗜酸粒細胞比注射前應減少50以上。 腎上腺皮質功能正常，但垂體前葉功能不良時，注射ACTH直接刺激后，嗜酸粒

44、細胞下降50以上，而注射腎上腺素，間接刺激后則不下降。 垂體功能亢進時，注射ACTH和腎上腺素，都可使嗜酸粒細胞降低 80 100。 垂體前葉功能正常，腎上腺皮質功能不良時，則注射ACTH和腎上腺素后，嗜酸粒細胞下降均不到50。,返回,上一頁,下一頁,減數(shù)試驗結果判斷, 注射促腎上腺皮質激素ACTH 注射腎上腺素（Adrendin） （直接刺激） （間接刺激） 1.正常 下降50% 下降50% 2.垂體功能亢進 下降80%100% 下降80%100% 3.垂體功能正常 下降50% 下降50% 腎上腺皮質功能不良 4.垂體功能不良 下降50% 不下降 腎上腺皮質功能正常,返回,上一頁,下一頁,減數(shù)試驗原理示意圖,返回,上一頁,下一頁,總結,嗜酸粒細胞直接計數(shù)的目的是準確了解嗜酸粒細胞的變化，以觀察急性傳染病、燒傷和手術的預后，特別是了解腎上腺皮質功能和腦垂體前葉功能。,返回,上一頁,下一頁,嗜酸粒細胞直接計數(shù),嗜酸粒細胞直接計數(shù)需要專用稀釋液破壞紅細胞和其他白細胞。 鏡下嗜酸粒細胞顆粒染橘紅色，有立體感，殘存的中性粒細胞顆粒不受色。 計數(shù)遵