1、 2.2.1動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù) 第1課時【學(xué)習(xí)目標(biāo)】 1、簡述動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程、條件及應(yīng)用。 2、比較動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)區(qū)別?！緦W(xué)習(xí)重點】 1、動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程、條件。【自主學(xué)習(xí)】一、動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段1、動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有哪幾種？2、_是動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。二、動物細(xì)胞培養(yǎng)1、動物細(xì)胞培養(yǎng)的概念（1）動物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織，它分散成_，后放在_中，讓這些細(xì)胞_和_。（2）動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是：_。2、動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程（1）基本概念什么是細(xì)胞貼壁？什么是接觸抑制？什么是原代培養(yǎng)？什么是傳代培養(yǎng)？說明：分瓶之前，稱原代培養(yǎng)；出現(xiàn)接觸抑

2、制用胰蛋白酶處理，再分瓶培養(yǎng)為傳代培養(yǎng)。幼齡動物組織或胚胎單個細(xì)胞細(xì)胞懸液細(xì)胞貼壁生長細(xì)胞懸液細(xì)胞株或細(xì)胞系原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)剪碎胰蛋白酶胰蛋白酶（2）過程【思考探究】為什么選用幼齡的動物組織或胚胎？如何使組織分散為單個細(xì)胞？這說明細(xì)胞間的物質(zhì)是什么？能不能用胃蛋白酶？制成細(xì)胞懸液的主要目的是什么？培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿應(yīng)具備什么條件？貼滿瓶壁的細(xì)胞要如何處理才能繼續(xù)培養(yǎng)？目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10代以內(nèi)的，為什么？1050代，50代以后細(xì)胞有什么變化？【例1】下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述中正確的是 （ ）A、動物細(xì)胞培育的目的是獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白B、動物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶

3、使細(xì)胞分散C、細(xì)胞的癌變發(fā)生于原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過渡過程中D、培養(yǎng)至50代后的傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞株3、動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件無菌、無毒的環(huán)境 采取什么措施保證無菌、無毒的環(huán)境？營養(yǎng)什么是合成培養(yǎng)基？培養(yǎng)動物細(xì)胞時為什么要加入血清、血漿？溫度和PH適宜的溫度一般為_；適宜的PH一般為_。氣體環(huán)境細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要為O2和CO2，它們分別有什么作用？4、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用生產(chǎn)生物制品：疫苗、干擾素、單克隆抗體等；作為基因工程中的受體細(xì)胞；檢測有毒物質(zhì)及毒性；科研方面：篩選抗癌藥物、治療和預(yù)防疾病等。5、動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的區(qū)別植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)理論基礎(chǔ)(原理)細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培

4、養(yǎng)基的物理性質(zhì)固體液體（合成培養(yǎng)基）培養(yǎng)基的成分水、礦質(zhì)元素、蔗糖、氨基酸、瓊脂等葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清等過程結(jié)果新的植株或組織新的細(xì)胞株或細(xì)胞系用途 植株快速繁殖脫毒植株的培育 人工種子生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等轉(zhuǎn)基因植物的培育生產(chǎn)蛋白質(zhì)制品如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等；檢測有毒物質(zhì)；研究藥理病理；移植治療相同點都需人工條件下的無菌操作，需要適宜的溫度、PH、O2等特別注意以下幾點： 1.動物細(xì)胞培養(yǎng)基成分特有的動物血清含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等多種成分。 2.兩技術(shù)手段培養(yǎng)過程中都進行有絲分裂，都是無性繁殖，都可稱克隆，都不涉及減數(shù)分裂。3.植物組織培養(yǎng)最終產(chǎn)生新個體

5、，體現(xiàn)全能性；動物細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生大量細(xì)胞，不形成新個體，故不能體現(xiàn)全能性?！纠?】一般來說，動物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足以下條件（）無毒的環(huán)境無菌的環(huán)境合成培養(yǎng)基需加血漿溫度與動物體溫相近需要O2，不需要CO2CO2能調(diào)培養(yǎng)液pHA. B. C. D.【例3】動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物細(xì)胞培養(yǎng)的重要區(qū)別在于（ ） A.培養(yǎng)基不同； B.動物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進行； C.動物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細(xì)胞不能； D.動物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細(xì)胞只能培養(yǎng)成植株。【隨堂練習(xí)】1、在進行動物細(xì)胞培養(yǎng)時，通常選用的培養(yǎng)材料是（ ）A、衰老退化的動物組織細(xì)胞 B、成熟動物個體的體細(xì)胞C、動物的受精卵細(xì)胞 D、動物胚胎或幼齡動物個體的細(xì)胞2、下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述中，錯誤的是（ ）A、用于培養(yǎng)的細(xì)胞大多取自胚胎或幼齡動物的器官或組織B、將所取的組織先用胰蛋白酶等進行處理使其分散成單個細(xì)胞C、在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液D、動物細(xì)胞培養(yǎng)只能傳50代左右，所培養(yǎng)的細(xì)胞會衰老死亡3、在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，使用胰蛋白酶的目的是（）A、使動物組織分散為單個細(xì)胞進行培養(yǎng) B、去掉細(xì)胞壁成為原生質(zhì)體C、去掉細(xì)胞膜暴露出原生質(zhì)體便于細(xì)胞融合 D、促進蛋白質(zhì)水解為多肽4、離體的植物組織或細(xì)胞在適當(dāng)培養(yǎng)條件下發(fā)育成完整的植株，離體動物體細(xì)胞