016 前 言本標(biāo)準(zhǔn)代替003醬油衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法B/003醬衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法B/999黃豆醬檢驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)與003相比,主要變化如下:標(biāo)準(zhǔn)名稱修改為“食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中氨基酸態(tài)氮的測(cè)定”;擴(kuò)充了第一法的適用范圍;修改了原標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)。0161 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中氨基酸態(tài)氮的測(cè)定1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了醬油、醬、黃豆醬中氨基酸態(tài)氮的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)第一法適用于以糧食和其副產(chǎn)品豆餅、麩皮等為原料釀造或配制的醬油,以糧食為原料釀造的醬類,以黃豆、小麥粉為原料釀造的豆醬類食品中氨基酸態(tài)氮的測(cè)定;第二法適用于以糧食和其副產(chǎn)品豆餅、麩皮等為原料釀造或配制的醬油中氨基酸態(tài)氮的測(cè)定。第一法 酸度計(jì)法2 原理利用氨基酸的兩性作用,加入甲醛以固定氨基的堿性,使羧基顯示出酸性,用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定后定量,以酸度計(jì)測(cè)定終點(diǎn)。3 試劑和材料除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為6682規(guī)定的三級(jí)水。醛(36%38%):應(yīng)不含有聚合物(沒有沉淀且溶液不分層)。氧化鈉(酞(醇(苯二甲酸氫鉀(基準(zhǔn)物質(zhì)。劑配制氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液c(:經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液或配制方法如下:a) 酚酞指示液:稱取酚酞1g,溶于95%的乙醇中,用95%乙醇稀釋至100mL。b) 氫氧化鈉溶液氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液c(:稱取110100搖使之溶解成飽和溶液,冷卻后置于聚乙烯的塑料瓶中,密塞,放置數(shù)日,澄清后備用。適量新煮沸過的冷蒸餾水至1000勻。c) 氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的標(biāo)定:110干燥至恒重的基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀,加80之盡量溶解,加2滴酚酞指示液(10g/L),用氫氧化鈉溶液滴定至溶液呈微紅色,30下耗用氫氧化鈉溶液毫升數(shù)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。0162 d) 計(jì)算:氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度按式(1)計(jì)算:c=m(1)式中:c 氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的實(shí)際濃度,單位為摩爾每升();m基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀的質(zhì)量,單位為克(g);氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量體積,單位為毫升(空白實(shí)驗(yàn)中氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量體積,單位為毫升(c(相當(dāng)?shù)幕鶞?zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀的質(zhì)量,單位為克(g)。4 度計(jì)(附磁力攪拌器)。0析天平: 水分?jǐn)?shù)次洗入100水至刻度,60動(dòng)磁力攪拌器,用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液c(下消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的毫升數(shù),可計(jì)算總酸含量。勻。下消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的毫升數(shù)。同時(shí)取80用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液c(試劑空白試驗(yàn)。及黃豆醬樣品將醬或黃豆醬樣品攪拌均勻后,放入研缽中,在10入磨口瓶中備用。50右的蒸餾水分?jǐn)?shù)次洗入100卻后,轉(zhuǎn)入100少量水分次洗滌燒杯,洗液并入容量瓶中,并加水至刻度,混勻后過濾。于20060動(dòng)磁力攪拌器,用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液c(下消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的毫升數(shù),可計(jì)算總酸含量。勻。下消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的毫升數(shù)。同時(shí)取80用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液c(試劑空白試驗(yàn)。6 分析結(jié)果的表述試樣中氨基酸態(tài)氮的含量按式(2)進(jìn)行計(jì)算:X=(c3/00(2)0163 式中:X 試樣中氨基酸態(tài)氮的含量,單位為克每百克(g/100g);測(cè)定用試樣稀釋液加入甲醛后消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積,單位為毫升(試劑空白實(shí)驗(yàn)加入甲醛后消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積,單位為毫升(c氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度,單位為摩爾每升();c(相當(dāng)?shù)牡馁|(zhì)量,單位為克(g);m稱取試樣的質(zhì)量,單位為克(g);試樣稀釋液的取用量,單位為毫升(試樣稀釋液的定容體積,單位為毫升(100單位換算系數(shù)。計(jì)算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。7 精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過算術(shù)平均值的10%。第二法 比色法8 基酸態(tài)氮與乙酰丙酮和甲醛反應(yīng)生成黃色的3,5二氫化吡啶氨基酸衍生物。在波長400標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。9 試劑和材料除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為6682規(guī)定的二級(jí)水。酸(水乙酸鈉(乙酸鈉(醇(酰丙酮(酸溶液(1):水稀釋至100 乙酸鈉溶液(1):稱取41加水溶解后并稀釋至500 乙酸鈉取60)與40)混合, 顯色劑:15水稀釋至100烈振搖混勻(室溫下放置穩(wěn)定3d)。0164 氮標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(精密稱取105水溶解后移至100稀釋至刻度,混勻,0下冰箱內(nèi)貯存穩(wěn)定1年以上)。氮標(biāo)準(zhǔn)使用溶液():用移液管精確量取10100水稀釋至刻度,混勻,此溶液每毫升相當(dāng)于1000下冰箱內(nèi)貯存穩(wěn)定1個(gè)月)。10 光光度計(jì)。熱恒溫水浴鍋(100。01 水稀釋至刻度,混勻。準(zhǔn)曲線的制作精密吸取氨氮標(biāo)準(zhǔn)使用溶液0當(dāng)于別于10各比色管分別加入44水稀釋至刻度,混勻。置于100水浴中加熱15出,水浴冷卻至室溫后,移入1零管為參比,于波長400制標(biāo)準(zhǔn)曲線或計(jì)算直線回歸方程。樣的測(cè)定精密吸取2入44水稀釋至刻度,混勻。置于100水浴中加熱15出,水浴冷卻至室溫后,移入1零管為參比,于波長400樣吸光度與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較定量或代入標(biāo)準(zhǔn)回歸方程,計(jì)算試樣含量。12 分析結(jié)果的表述試樣中氨基酸態(tài)氮的含量按式(3)進(jìn)行計(jì)算:X=00010002100(3)式中:X 試樣中氨基酸態(tài)氮的含量,單位為克每百克(g/100g);m試樣測(cè)定液中氮的質(zhì)量,單位為微克(g);稱取試樣的質(zhì)量,單位為克