第一章 緒論 一 名詞解釋1免疫學(xué)：是研究機(jī)體防御 機(jī)體如何識(shí)別異物并與之發(fā)生反應(yīng)的一門學(xué)科2 免疫：機(jī)體對(duì)自己或非己的識(shí)別，并排除非己以保護(hù)機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的一種生理反應(yīng)3免疫防御：是機(jī)體排除外來(lái)病原體及其他異物的一種免疫保護(hù)功能，異常情況下，反應(yīng)過(guò)高會(huì)引發(fā)超敏反應(yīng)，反應(yīng)過(guò)低可發(fā)生免疫缺陷4免疫自穩(wěn)：是識(shí)別和清除自身衰老殘損細(xì)胞，該功能失調(diào)時(shí)，可以發(fā)生生理性功能紊亂和自身免疫缺陷病5免疫監(jiān)視：是機(jī)體識(shí)別和清除體內(nèi)突變的細(xì)胞，該功能失調(diào)可導(dǎo)致腫瘤發(fā)生6免疫學(xué)檢驗(yàn)：是用實(shí)驗(yàn)的手段獲取機(jī)體免疫系統(tǒng)的信息，對(duì)機(jī)體的免疫系統(tǒng)的功能作出恰當(dāng)?shù)脑u(píng)估四 問(wèn)答題1 免疫: 機(jī)體對(duì)自己或非己的識(shí)別，并排除非己以保護(hù)機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的一種生理反應(yīng)免疫功能的雙刃劍：人體免疫系統(tǒng)由免疫器官（如胸腺、脾臟、骨髓、淋巴結(jié)等），免疫細(xì)胞（淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞等）及免疫因子（干擾素、白細(xì)胞介素、腫瘤壞死因子等）組成。免疫細(xì)胞、免疫因子分布全身，周流不息，形成一個(gè)相互制約的網(wǎng)絡(luò)，主宰人體的免疫功能抵抗細(xì)菌、病毒入侵，清除體內(nèi)損傷變性及衰老的細(xì)胞，清除體內(nèi)代謝廢物，維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，一旦發(fā)現(xiàn)癌變細(xì)胞就調(diào)動(dòng)免疫機(jī)制加以清除然而，免疫系統(tǒng)也像人體其他系統(tǒng)一樣，有時(shí)也會(huì)出現(xiàn)這樣那樣的毛病。也就是說(shuō)，免疫反應(yīng)是一把雙刃劍：一方面，正常的免疫對(duì)人體有利，是人體抵御百病的防御機(jī)制；另一方面，由于先天或后天因素，造成機(jī)體免疫反應(yīng)失常（免疫功能低下或缺陷，免疫反應(yīng)過(guò)強(qiáng)或異常），就會(huì)引起免疫性疾病的發(fā)生。2 免疫防御：是機(jī)體排斥外來(lái)抗原性異物的一種免疫保護(hù)功能。該功能正常時(shí)，機(jī)體可抵御病原微生物及其病毒產(chǎn)物的感染和損害，即抗感染過(guò)程，異常情況下，反應(yīng)過(guò)高會(huì)引發(fā)超敏反應(yīng)，反應(yīng)過(guò)低可發(fā)生免疫缺陷 免疫自穩(wěn)：是機(jī)體免疫系統(tǒng)維持內(nèi)環(huán)境相對(duì)穩(wěn)定的一種生理功能，該功能正常時(shí)，機(jī)體可及時(shí)清除體內(nèi)損傷、衰老、變性的細(xì)胞和免疫復(fù)合物等異物，而對(duì)自身成分則保持免疫耐受，該功能失調(diào)時(shí)，可以發(fā)生生理性功能紊亂和自身免疫缺陷病 免疫監(jiān)視：是機(jī)體免疫系統(tǒng)及時(shí)識(shí)別清除體內(nèi)突變、畸變細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞的一種生理功能。若該功能失調(diào)，有可能導(dǎo)致腫瘤發(fā)生，或因病毒不能清除而出現(xiàn)病毒持續(xù)感染狀態(tài) 第二章 抗原一 名詞解釋1抗原：是指能啟動(dòng)機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答，并能與相應(yīng)的免疫應(yīng)答產(chǎn)物（抗體或效應(yīng)靶細(xì)胞）在體內(nèi)或體外產(chǎn)生特異性結(jié)合反應(yīng)的物質(zhì)2 免疫原性：是指抗原能刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答，誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗體或效應(yīng)淋巴細(xì)胞的能力3抗原性：是指抗原與其所誘生的抗體或效應(yīng)淋巴細(xì)胞在體內(nèi)或體外發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的能力4半抗原：僅具備抗原性而無(wú)免疫原性的物質(zhì)5 表位：是指抗原分子中決定抗原特異性的特殊化學(xué)基團(tuán)6胸腺依賴性抗原：含有T細(xì)胞決定簇，需要T細(xì)胞的輔助才能激活B細(xì)胞產(chǎn)生抗體7胸腺非依賴性抗原：只含有B細(xì)胞決定簇，不需要T細(xì)胞輔助，可直接刺激B細(xì)胞產(chǎn)生抗體9線性決定簇：是由一段序列上相連續(xù)的氨基酸殘基片段組成，10 構(gòu)象決定簇：由空間上鄰近，但序列上不相連的氨基酸或多糖構(gòu)成，一般位于抗原分子表面，是B細(xì)胞或者抗體識(shí)別的抗原決多位于抗原分子的內(nèi)部，主要是T細(xì)胞識(shí)別的抗原決定簇定簇11功能性決定簇：位于抗原分子表面的決定簇易被BCR或抗體所識(shí)別可直接啟動(dòng)免疫應(yīng)答12隱蔽性決定簇：位于抗原分子內(nèi)部的決定簇不能引起免疫應(yīng)答，稱為13共同抗原:兩種不同的抗原具有相同或相似的抗原決定簇，互稱為共同抗原14交叉反應(yīng)：抗體對(duì)具有相同或相似抗原決定簇的不同抗原反應(yīng)稱為15異種抗原：指來(lái)自于另一物種的抗原性物質(zhì)，包括各種病原微生物及其代謝產(chǎn)物、植物蛋白、異種動(dòng)物血清、異種器官一只物以及吸入和食入的異種蛋白等16同種異型抗原：指同一種屬不同個(gè)體之間存在的抗原性物質(zhì)17自身抗原：在正常情況下，機(jī)體對(duì)自身組織細(xì)胞不會(huì)產(chǎn)生免疫應(yīng)答，即免疫耐受。但在外傷、感染、電離輻射或藥物等影響下，自身組織結(jié)構(gòu)發(fā)生改變或隱蔽的自身抗原釋放，或者免疫系統(tǒng)本身發(fā)生異常，免疫系統(tǒng)將自身物質(zhì)當(dāng)做抗原性異物來(lái)識(shí)別，誘發(fā)免疫應(yīng)答，引起自身免疫病18異嗜性抗原：是一類與種屬特異性無(wú)關(guān)，存在于人、動(dòng)植物和微生物之間的共同抗原19動(dòng)物免疫血清：是臨床上用于治療的動(dòng)物免疫血清，如馬血清抗毒素，既作為特異性抗體中和病人體內(nèi)相應(yīng)的外毒素來(lái)治療疾病，又是異種蛋白，具有免疫原性，能刺激人體產(chǎn)生抗馬血清抗體20超抗原：某些抗原物質(zhì)，只需要極低濃度（110ng/ml）即可直接非特異性激活大量的T細(xì)胞克隆，并產(chǎn)生極強(qiáng)的免疫應(yīng)答，稱為四問(wèn)答題1TD-Ag：為胸腺依賴性抗原,含有T細(xì)胞決定簇，需要T細(xì)胞的輔助才能激活B細(xì)胞產(chǎn)生抗體TI-Ag:為胸腺非依賴性抗原，只含有B細(xì)胞決定簇，不需要T細(xì)胞輔助，可直接刺激B細(xì)胞產(chǎn)生抗體區(qū)別如下表：TD-AgTI-Ag組成B細(xì)胞表位和T細(xì)胞表位重復(fù)B細(xì)胞表位T細(xì)胞輔助必需無(wú)需抗體類型多種，主要為IgGIgM免疫應(yīng)答體液免疫和細(xì)胞免疫體液免疫免疫記憶有無(wú)2 T細(xì)胞決定簇：在免疫應(yīng)答時(shí)，T細(xì)胞抗原識(shí)別受體所識(shí)別的抗原決定簇稱為T細(xì)胞決定簇，又稱為T細(xì)胞表位 B細(xì)胞決定簇：在免疫應(yīng)答時(shí)，B細(xì)胞抗原識(shí)別受體所識(shí)別的抗原決定簇稱為B細(xì)胞決定簇，又稱為B細(xì)胞表位3 a異種抗原 如 病原微生物、 細(xì)菌外毒素和類毒素、 動(dòng)物免疫血清b同種異型抗原 如血型抗原和主要組織相容性抗原c異嗜性抗原d自身抗原等等第三章 免疫器官一 名詞解釋1免疫系統(tǒng)：是指機(jī)體產(chǎn)生免疫功能的物質(zhì)基礎(chǔ)，是由具有免疫功能的器官、組織、細(xì)胞和分子組成的解剖和生理網(wǎng)絡(luò)2免疫器官：是指實(shí)現(xiàn)免疫功能的器官或組織?？煞譃橹袠忻庖咂鞴俸屯庵苊庖咂鞴賰刹糠?中樞免疫器官：是免疫活性細(xì)胞產(chǎn)生、增值和分化成熟的場(chǎng)所，對(duì)外周淋巴器官發(fā)育和全身免疫功能起調(diào)節(jié)作用4外周免疫器官：包括淋巴結(jié)、脾和粘膜相關(guān)淋巴組織等，是免疫細(xì)胞聚集和免疫應(yīng)答發(fā)生的場(chǎng)所5淋巴細(xì)胞再循環(huán)：指外周淋巴器官或淋巴組織中的淋巴細(xì)胞經(jīng)淋巴管進(jìn)入血液循環(huán)后，又通過(guò)外周淋巴器官或組織中的毛細(xì)血管后經(jīng)內(nèi)皮小靜脈返回掃淋巴器官或組織中的循環(huán)過(guò)程四 問(wèn)答題1 中樞免疫器官由骨髓和胸腺組成 功能：中樞免疫器官是免疫活性細(xì)胞產(chǎn)生、增值和分化成熟的場(chǎng)所 外周免疫器官由淋巴結(jié)、脾和粘膜相關(guān)淋巴組織等組成 功能：外周免疫器官是免疫細(xì)胞聚集和免疫應(yīng)答發(fā)生的場(chǎng)所。 其淋巴結(jié)有a、濾過(guò)和凈化作用 b、免疫應(yīng)答場(chǎng)所 c、淋巴細(xì)胞仔循環(huán)，脾是血細(xì)胞尤其是淋巴細(xì)胞再循環(huán)的最大儲(chǔ)庫(kù)和強(qiáng)有力的過(guò)濾器，還是免疫應(yīng)答的重要基地2淋巴細(xì)胞再循環(huán)：指外周淋巴器官或淋巴組織中的淋巴細(xì)胞經(jīng)淋巴管進(jìn)入血液循環(huán)后，又通過(guò)外周淋巴器官或組織中的毛細(xì)血管后經(jīng)內(nèi)皮小靜脈返回掃淋巴器官或組織中的循環(huán)過(guò)程生物學(xué)意義：a、細(xì)胞的再分部 b、有利于識(shí)別抗原和迅速傳遞信息，使分散各處的淋巴細(xì)胞成為一個(gè)相互關(guān)聯(lián)的有機(jī)整體，使功能相關(guān)的淋巴細(xì)胞共同進(jìn)行免疫應(yīng)答第四章 免疫細(xì)胞一名詞解釋 1.造血干細(xì)胞:2.免疫細(xì)胞：是指參與免疫應(yīng)答的各類細(xì)胞。3.T淋巴細(xì)胞：是在胸腺中訓(xùn)化成熟的細(xì)胞，故稱胸腺依賴性淋巴細(xì)胞，簡(jiǎn)稱T淋巴細(xì)胞或T細(xì)胞。4.B淋巴細(xì)胞:是指在鳥類法氏囊或其同功能器官(骨髓)內(nèi)發(fā)育成熟的細(xì)胞，因此稱為法氏囊或骨髓依賴的淋巴細(xì)胞，簡(jiǎn)稱B淋巴細(xì)胞或B細(xì)胞。5APC：可將蛋白質(zhì)抗原分子加工處理為8-12個(gè)氨基酸殘基的線性決定簇。6.CD分子：是白細(xì)胞（還包括血小板、血管內(nèi)皮細(xì)胞等）在正常分化成熟和激活過(guò)程中的不同階段出現(xiàn)或消失的細(xì)胞表面抗原標(biāo)志。7.ADCC：指表達(dá)FC受體的細(xì)胞（如NK細(xì)胞、單核吞噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞）通過(guò)識(shí)別抗體的FC段直接殺傷靶細(xì)胞（如病毒感染細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞）.8.TCR（T細(xì)胞抗原受體）：不能直接與天然的抗原結(jié)合，而需要將抗原處理后，嵌入MHC分子中的抗原才能被T細(xì)胞識(shí)別。9.BCR:是指B細(xì)胞表面的抗原受體。四問(wèn)答題1.正常情況下，只有少淋巴細(xì)胞在淋巴結(jié)內(nèi)分裂增殖，大部分則是再循環(huán)的淋巴細(xì)胞。血中的淋巴細(xì)胞通過(guò)毛細(xì)血管后靜脈進(jìn)入淋巴結(jié)副皮質(zhì)，然后再經(jīng)淋巴竇匯入輸出淋巴管。眾多的淋巴結(jié)是淋巴細(xì)胞再循環(huán)的重要補(bǔ)充來(lái)源。淋巴細(xì)胞從血循環(huán)進(jìn)入淋巴細(xì)胞具有高度的選擇性，這是因?yàn)榱馨图?xì)胞上具有特殊的受體分子，稱為歸巢受體，能識(shí)別淋巴結(jié)內(nèi)或黏膜表面的配體。再循環(huán)1周約需24-48小時(shí)。2.表面標(biāo)志：CD3、CD19，CD3是T細(xì)胞特有的分化抗原。3.四個(gè)功能亞群，即輔助功能、殺傷功能、調(diào)節(jié)功能、遲發(fā)性超敏反應(yīng)。但按T細(xì)胞表面標(biāo)志，可區(qū)分為2個(gè)亞群，即CD4和CD8亞群。兩者的大體關(guān)系為CD4包括輔助功能和遲發(fā)性超敏反應(yīng)，CD8包括殺傷功能。4.表面標(biāo)志：CD3、CD19、CD19是B細(xì)胞特有的標(biāo)志。功能：B細(xì)胞的功能比較單一，一般不進(jìn)行區(qū)分亞群，有時(shí)將B細(xì)胞分為非胸腺依賴型，即B1亞群，表面標(biāo)志為SigM;胸腺依賴型，即B2亞群，表面標(biāo)志為SigM+SigD.第五章 免疫球蛋白一名詞解釋1.抗體：是B細(xì)胞識(shí)別抗原后活化增殖分化為漿細(xì)胞所產(chǎn)生的一類能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合的球蛋白，是免疫應(yīng)答中的重要效應(yīng)分子。2免疫球蛋白：是指化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白。3.V區(qū)：分析Ig重鏈和輕鏈的氨基酸系列時(shí)是發(fā)現(xiàn)，靠近N鏈約1|4或1|5和L鏈約1|2的氨基酸的種類、排列順序及構(gòu)造變化很大，稱為可變區(qū)。4C區(qū)：Ig的多肽鏈羧基端(C端),H鏈的3|4或4|5 和L鏈1|2氨基酸種類、數(shù)量、排列順序、構(gòu)造及含糖量均較穩(wěn)定，稱為恒定區(qū)。5.CDR：H鏈和L鏈的V區(qū)分別稱為Vh和Vl，各有3個(gè)區(qū)域的氨基酸組成和排列順序高度可變，稱為超變區(qū)或互補(bǔ)決定區(qū)。6.多克隆抗體：7.單克隆抗體：是由單個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的僅針對(duì)一種抗原表位的高特異性抗體。四問(wèn)答題1.Ig的基本結(jié)構(gòu)由H鏈和L鏈組成的，某些類別Ig還含有連接鏈和分泌片等輔助成分。2將抗原的特異性分為同種型、同種異型、和獨(dú)特型。同種型的特異性因種而異，其抗原決定簇要主要存在Ig的C區(qū)。獨(dú)特型由Ig超變區(qū)特有的氨基酸序列和構(gòu)型所決定。3.IgG是血清中含量最高的，半衰期最長(zhǎng)的，是單體分子，有四個(gè)亞類，IgG作為唯一能通過(guò)胎盤的Ig，是新生兒抗感染免疫和發(fā)生新生兒溶血病的重要原因。Ig在免疫反應(yīng)中出現(xiàn)較晚，消失較慢。IgM是五聚體是分子量最大的Ig，是個(gè)體發(fā)育中合成與分泌最早的Ig，在胎盤發(fā)育晚期的胎兒就能產(chǎn)生。IgA是單體或雙體。IgD是單體，開始形成時(shí)間較晚。IgE是單體，開始形成時(shí)間較晚。；又有1.激活補(bǔ)亞類體2.結(jié)合Fc受體：調(diào)理作用、ADCC、介導(dǎo)I型超敏反映、結(jié)合細(xì)菌蛋白。C.穿過(guò)胎盤和黏膜。第六章 補(bǔ)體系統(tǒng)一、名詞解釋 1.補(bǔ)體 人和脊椎動(dòng)物新鮮血清和組織液中有一組不耐熱的、經(jīng)活化后具有酶樣活性的蛋白質(zhì)，并證明了該類蛋白質(zhì)對(duì)特異性抗體發(fā)揮溶菌作用有輔助和補(bǔ)充作用，故稱為補(bǔ)體2.C3轉(zhuǎn)化酶 大片段C4b和C2b結(jié)合在粘附有抗體的靶細(xì)胞膜上，形成C4b2b，即C3轉(zhuǎn)化酶3.C5轉(zhuǎn)化酶 C3a與C4b2b形成C4b2b3b復(fù)合物，即C5轉(zhuǎn)化酶4.補(bǔ)體活化的經(jīng)典途徑 經(jīng)典途徑是以抗原結(jié)合IgG或IgM類抗體后的免疫復(fù)合物為主要激活劑，使補(bǔ)體系統(tǒng)從C1C9連續(xù)發(fā)生激活反應(yīng)，最終產(chǎn)生溶細(xì)胞效應(yīng) 5.補(bǔ)體活化的旁路途徑 旁路激活途徑又稱替代途徑，與IC無(wú)關(guān)，為非特異性，是一條跨越C1、C2、C4直接活化C3的過(guò)程6.補(bǔ)體活化的MBL途徑 MBL激活途徑是急性期蛋白與細(xì)菌的甘露糖殘基結(jié)合后啟動(dòng)的激活過(guò)程7.膜攻復(fù)合體 當(dāng)1219分子的C9加入后，便形成C5b6789復(fù)合物，即一個(gè)貫穿靶細(xì)胞膜、內(nèi)徑約為11nm的膜攻擊復(fù)合體四、問(wèn)答題 1、溶解細(xì)胞作用，調(diào)理作用，清楚免疫復(fù)合物作用，炎癥介質(zhì)作用，免疫調(diào)節(jié)作用2、項(xiàng)目經(jīng)典途徑MBL途徑旁路途徑激活物質(zhì)ICMBL、C-反應(yīng)蛋白細(xì)菌脂多糖、肽聚糖或凝聚的IgA和IgG4起始分子C1qMASPC3參與的補(bǔ)體成分C1C9C2C9C3.C5C9、B因子、P因子、D因子所需離子Mg2+、Ca2+Mg2+、Ca2+Mg2+C3轉(zhuǎn)化酶C4b2bC4b2bC3bBb C3bBbPC5轉(zhuǎn)化酶C4b2b3bC4b2b3bC3bnBb C3bnBbP臨床意義參與特異性體液免疫參與非特異性免疫，感染早期即發(fā)揮作用參與非特異性免疫，感染早期即發(fā)揮作用第七章 MHC一、名詞解釋1、組織相容性 組織相容性是指器官或組織移植時(shí)供者與受者相互接受的程度2、組織相容性抗原 這種代表個(gè)體特異性的同種異體抗原稱為移植抗原或組織相容性抗原3、主要組織相容性抗原 能引起強(qiáng)烈而迅速排斥反應(yīng)的抗原稱為主要組織相容性抗原系統(tǒng)4、MHC 編碼基因是一組緊密連鎖的基因群，稱為主要組織相容性復(fù)合體（MHC）四、問(wèn)答題1、HLA I 類分子包括A、B、C三個(gè)亞區(qū)，編碼為HLA-A、B、C3種抗原HLA I 類分子廣泛分布于體內(nèi)各種有核細(xì)胞表面，包括血小板和網(wǎng)織紅細(xì)胞。HLA II 類分子由結(jié)構(gòu)復(fù)雜的DP、DQ、DR3個(gè)亞區(qū)組成HLA II 類分子主要表達(dá)在某些免疫細(xì)胞表面，如B細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、激活T細(xì)胞2、HLA與器官移植的關(guān)系HLA 與輸血反應(yīng)的關(guān)系HLA 異常表達(dá)與疾病的關(guān)系HLA與法醫(yī)學(xué)的關(guān)系第八章 細(xì)胞因子一、名詞解釋1、細(xì)胞因子： 機(jī)體的免疫細(xì)胞和非免疫細(xì)胞能合成和分泌小分子的多肽類因子，它們能調(diào)節(jié)多種細(xì)胞生理功能，這些因子統(tǒng)稱為細(xì)胞因子。2、白介素：將介導(dǎo)白細(xì)胞間相互作用的一些細(xì)胞因子。3、TNF:是一類直接造成腫瘤細(xì)胞死亡的細(xì)胞因子。4、IFN：是指一類由宿主細(xì)胞產(chǎn)生的，能干擾病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)增值的蛋白質(zhì)。5、CSF:一些細(xì)胞因子可刺激不同的造血肝細(xì)胞在半固體培養(yǎng)基中形成細(xì)胞集落，這類因子稱為集落刺激因子。四、問(wèn)答題1、（1）通過(guò)結(jié)合細(xì)胞表面高親和力受體發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)（2）高效性（3）多源性和多效性（4）自分泌、旁分泌或內(nèi)分泌形式發(fā)揮作用。2、（1）按功能分類：白細(xì)胞介素、干擾素、集落刺激因子、腫瘤壞死因子、趨化性細(xì)胞因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子等。按來(lái)源分為：淋巴因子和單核因子。（2）、生物活性：第九章 免疫應(yīng)答1、免疫應(yīng)答：是指機(jī)體受抗原刺激后，免疫活性細(xì)胞（T、B細(xì)胞）識(shí)別抗原、自身活化、增值、分化及產(chǎn)生特異性免疫效應(yīng)的過(guò)程。2.固有免疫應(yīng)答：3.適應(yīng)性免疫應(yīng)答：4.體液免疫：由于B細(xì)胞在抗原刺激下形成漿細(xì)胞，漿細(xì)胞合成并分泌抗體，抗體存在于血清等各體液中，故稱為體液免疫5.細(xì)胞免疫：T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答又稱特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答，簡(jiǎn)稱細(xì)胞免疫。6.正應(yīng)答：機(jī)體對(duì)非己抗原產(chǎn)生排異效應(yīng)7.負(fù)應(yīng)答：對(duì)自身物質(zhì)產(chǎn)生無(wú)應(yīng)答狀態(tài)。8.初次應(yīng)答：抗原第一次進(jìn)入機(jī)體引起的免疫應(yīng)答。9、再次應(yīng)答：相同抗原再次進(jìn)入機(jī)體引起的免疫應(yīng)答四、問(wèn)答題1、略（體液免疫應(yīng)答的機(jī)制）2、（1）初次應(yīng)答：潛伏期長(zhǎng)，一般為5-15天，接著到抗體成指數(shù)增長(zhǎng)的對(duì)數(shù)期，然后抗體濃度到達(dá)一個(gè)平臺(tái)期，持續(xù)幾天至幾周，下降期可持續(xù)幾天至幾周。主要產(chǎn)生IgM.（2）再次應(yīng)答：潛伏期短，3-5天，抗體很快到達(dá)平臺(tái)期，平臺(tái)期持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，下降期持久而緩慢，主要為IgG抗體。3、TC細(xì)胞通過(guò)TCR識(shí)別靶細(xì)胞表面抗原肽-MHC1類分子復(fù)合物中的抗原肽，CD8分子識(shí)別MHC1類分子，從而獲得CTL活化的第一信號(hào)，此信號(hào)經(jīng)CD3分子傳入細(xì)胞內(nèi)；CTL細(xì)胞表面的黏附分子與靶細(xì)胞表面的相應(yīng)配體分子結(jié)合形成CTL活化的第二信號(hào)。CLT在雙信號(hào)的刺激后活化，經(jīng)增值、活化成為效應(yīng)CTL。效應(yīng)CTL殺傷靶細(xì)胞主要通過(guò)分泌穿孔素和顆粒酶使靶細(xì)胞裂解或發(fā)生細(xì)胞凋亡。 第十章：抗原抗體反應(yīng)一名詞解釋1.抗原抗體反應(yīng)：是指抗原與相應(yīng)抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)。 2.親和性：是抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合部位與相應(yīng)的抗原決定簇之間的相適性而存在著的引力，是抗原與抗體之間的固有的結(jié)合力。3.親和力：是指一個(gè)抗體分子與整個(gè)抗原表位之間結(jié)合的強(qiáng)度。4.特異性：是指任何一種抗原分子通常只能與其刺激機(jī)體的抗體結(jié)合。5.等價(jià)帶：抗原與抗體分子比例合適的范圍，稱為抗原抗體反應(yīng)的等價(jià)帶。6.帶現(xiàn)象：在等價(jià)帶的兩側(cè)，由于抗體或抗原過(guò)量，形成的沉淀物少，上清液中可測(cè)到游離的抗原或抗體，稱帶現(xiàn)象。7.前帶：抗體過(guò)量時(shí)為前帶。8.后帶：抗原過(guò)量時(shí)為后帶。9.最適比：在等價(jià)帶范圍內(nèi)抗原抗體結(jié)合充分，沉淀物形成快而多，其中有一管沉淀物最多，抗原抗體幾乎全部結(jié)合成復(fù)合物，上清液中基本無(wú)游離的抗原或抗體，表明這是抗原與抗體濃度的最適比。10.可逆性：是指抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合成復(fù)合物，在一定條件下又可解離為游離抗原和抗體的特性。四問(wèn)答題 1 特異性 可逆性 比例性 反應(yīng)物自身因素（抗原.抗體） 環(huán)境條件（電解質(zhì).酸堿度.溫度.時(shí)間） 凝集反應(yīng) 沉淀反應(yīng) 補(bǔ)體參與的反應(yīng) 中和反應(yīng) 免疫標(biāo)記2凝集反應(yīng) 沉淀反應(yīng) 補(bǔ)體參與的反應(yīng) 中和反應(yīng) 免疫標(biāo)記 第十一章：特異性抗體的制備技術(shù)一名詞解釋1.免疫原：即抗原能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗體，又能與抗體在體內(nèi)外發(fā)生特異性反應(yīng)的物質(zhì)。2.佐劑：是先于抗原或與抗原一起注入機(jī)體，可增強(qiáng)機(jī)體對(duì)該抗原的特異性免疫應(yīng)答或改變免疫應(yīng)答類型的物質(zhì)。3.不完全弗氏佐劑：是由油劑（花生油或液狀石蠟）和乳化劑（羊毛脂或吐溫-80）制成。4.完全弗氏佐劑：在弗氏不完全佐劑中加入卡介苗即為。5.R型免疫血清：是用家兔及其他動(dòng)物免疫產(chǎn)生的抗體，抗原抗體反應(yīng)比例合適范圍較寬，適用于診斷試劑。6.H型免疫血清：是用馬等大型動(dòng)物免疫獲得的抗體，抗原抗體反應(yīng)比例合適范圍較窄，一般用作免疫治療。7.多克隆抗體：是利用抗原免疫動(dòng)物，從動(dòng)物血清中獲得能針對(duì)抗原多種表位的抗體。8.單克隆抗體：是通過(guò)雜交瘤技術(shù)制備的針對(duì)抗原分子中一種抗原表位的抗體。9.HAT培養(yǎng)基：雜交瘤細(xì)胞選擇培養(yǎng)基中有3種關(guān)鍵成分：次黃嘌呤（H）、甲氨蝶呤（A）與胸腺嘧啶核苷（T），取三者首字縮寫為。四問(wèn)答題制備原理：?jiǎn)慰寺】贵w（McAb）技術(shù)是應(yīng)用B細(xì)胞雜交瘤技術(shù)，將抗原免疫的小鼠脾細(xì)胞與具有體外長(zhǎng)期繁殖能力的小鼠骨髓瘤細(xì)胞通過(guò)融合劑融合，在HAT培養(yǎng)基的選擇作用下，只讓融合成功的雜交瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，經(jīng)反復(fù)的免疫學(xué)檢測(cè)、篩選和單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)（克隆化），最終獲得既能產(chǎn)生所需抗體，又能體外長(zhǎng)期增殖的雜交瘤細(xì)胞系，將這種雜交瘤細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)，接種于小鼠腹腔，從小鼠腹腔液中獲取高效價(jià)的單克隆抗體。利用B細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體應(yīng)用了融合兩種細(xì)胞后，雜交細(xì)胞同時(shí)保持雙方親代細(xì)胞主要生物學(xué)特征的基本原理，同時(shí)也根據(jù)淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的克隆選擇學(xué)說(shuō)（一種克隆產(chǎn)生一種抗體）和細(xì)胞代謝缺陷補(bǔ)救的機(jī)制，篩選出目的抗原表位特異性雜交瘤細(xì)胞并進(jìn)行克隆化，從而制備大量的單克隆抗體。技術(shù)要點(diǎn)：細(xì)胞的選擇與制備，細(xì)胞融合，雜交瘤細(xì)胞的篩選、克隆化與細(xì)胞凍存，單克隆抗體的大量制備、純化及鑒定。第十二章 凝集試驗(yàn)一、名詞解釋1、凝集反應(yīng)：是指細(xì)菌和紅細(xì)胞等顆粒性抗原，或表面覆蓋抗原的顆粒狀物質(zhì)（如紅細(xì)胞、聚苯乙烯膠乳顆粒等），與相應(yīng)抗體結(jié)合后，在適當(dāng)電解質(zhì)存在的條件下可出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象。2、直接凝集試驗(yàn)：在適當(dāng)電解質(zhì)參與下，細(xì)菌、螺旋體和紅細(xì)胞等顆?？乖苯优c相應(yīng)抗體反應(yīng)，當(dāng)兩者比例適當(dāng)時(shí)出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象。3、間接凝集試驗(yàn)：又稱被動(dòng)凝集試驗(yàn)，是將可溶性抗原（或抗體）吸附或偶聯(lián)在一種與免疫無(wú)關(guān)的顆粒上，使之成為致敏顆粒，與相應(yīng)抗體（或抗原）作用，在適宜電解質(zhì)存在的條件下，出現(xiàn)特異性凝集現(xiàn)象。4、正向間接凝集試驗(yàn)：是用抗原致敏載體檢測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)抗體的方法。5、反向間接凝集試驗(yàn):是用特異性抗體致敏載體檢測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)抗原的方法。6、間接凝集抑制試驗(yàn)：是以抗原致敏的載體及相應(yīng)抗體作為診斷試劑，用于檢測(cè)標(biāo)本中是否存在與致敏載體相同的抗原的試驗(yàn)。7、抗球蛋白試驗(yàn)：將抗球蛋白抗體加到抗原與不完全抗體的結(jié)合物中，就能出現(xiàn)可見(jiàn)的凝集反應(yīng)稱抗球蛋白試驗(yàn)。8、直接抗球蛋白試驗(yàn)：是將紅細(xì)胞和不完全抗體混合，然后加入球蛋白，若抗原相應(yīng)對(duì)應(yīng)即出現(xiàn)可見(jiàn)的紅細(xì)胞凝集。9、間接抗球蛋白試驗(yàn)：是直接把抗人球蛋白加入患者的紅細(xì)胞懸濁液中，若紅細(xì)胞已結(jié)合有“不完全抗體”便出現(xiàn)凝集。10、冷凝集試驗(yàn)：檢測(cè)冷凝集素的方法稱為冷凝集試驗(yàn)四、問(wèn)答題1、原理：抗體受某些抗原刺激后，可產(chǎn)生不完全抗體（多數(shù)為7S的IgG類抗體），這種抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后不出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，但能封閉抗原決定簇，使其不能再與完全抗體結(jié)合。2、原理：書P3738圖2-17、2-18技術(shù)類型：正向間接凝集試驗(yàn)、反向間接凝集試驗(yàn)、間接凝集抑制試驗(yàn)第十三章 沉淀反應(yīng)一、名詞解釋1、沉淀反應(yīng)：是可溶性抗原與相應(yīng)抗體發(fā)生特異性結(jié)合，在適當(dāng)條件下而出現(xiàn)的沉淀現(xiàn)象。2、液相內(nèi)沉淀試驗(yàn);以含鹽緩沖液為反應(yīng)介質(zhì)的抗原抗體特異性結(jié)合的沉淀試驗(yàn)。3、凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)：主要是指可溶性抗原、抗體在含有電解質(zhì)的凝膠內(nèi)自由擴(kuò)散形成濃度梯度，兩者在比例適合的位置形成肉眼可見(jiàn)的沉淀線或沉淀環(huán)。4、免疫電泳技術(shù)：是電泳分析與沉淀反應(yīng)的結(jié)合產(chǎn)物，即可溶性抗原和抗體在直流電場(chǎng)的作用下，在凝膠內(nèi)加速定向泳動(dòng)，彼此相遇而特異性結(jié)合，在比例合適處形成可見(jiàn)的沉淀物。四、問(wèn)答題1（1）吻合：即兩條沉淀線互相融合相連，說(shuō)明兩種抗原完全相同。（2）相切：即兩條沉淀線部分相連，說(shuō)明兩種抗原之間有部分相同。（3）相交：兩條沉淀線交叉而過(guò)，說(shuō)明兩種抗原完全不同。2、將定量抗體混勻在瓊脂凝膠中，繼而加待測(cè)的抗原溶液使其單獨(dú)在凝膠中擴(kuò)散，在抗原抗體相遇比例合適的部位，兩者結(jié)合形成沉淀環(huán)，沉淀環(huán)大小與抗原的濃度成正相關(guān)。3、原理：可溶性抗原與抗體，在一定緩沖液中形成的復(fù)合物，經(jīng)一定時(shí)間后聚合出現(xiàn)濁度，導(dǎo)致入射光在透過(guò)反應(yīng)液時(shí)，由于溶液內(nèi)復(fù)合物粒子對(duì)光線的反射和吸收，引起投射光減少，可用吸光度表示。其光量減少的程度與復(fù)合物的含量成正比，當(dāng)抗體量固定時(shí)，與待測(cè)抗原量成正比。影響因素：待測(cè)標(biāo)本的稀釋倍數(shù)可影響檢測(cè)結(jié)果，稀釋倍數(shù)太低時(shí)，抗原過(guò)?？寡辶坎蛔?，不能形成足夠的濁度，甚至復(fù)合物分解等導(dǎo)致假性結(jié)果。標(biāo)本應(yīng)清晰、避免混濁，脂蛋白的小顆?？墒箿y(cè)定值假性升高。4、技術(shù)類型：終點(diǎn)散射比濁法、速率散射比濁法終點(diǎn)散射比濁法原理：在抗原抗體反應(yīng)基礎(chǔ)上達(dá)到平衡時(shí)測(cè)定復(fù)合物的量。終點(diǎn)散射比濁法影響因素：散射光的強(qiáng)度不僅與顆粒（散射核心）的大小和數(shù)目有關(guān)，且與各種物理因素、反應(yīng)時(shí)間、光源強(qiáng)度、波長(zhǎng)以及測(cè)量角度均有關(guān)系。速率散射比濁法原理：是指抗原抗體反應(yīng)在每單位時(shí)間內(nèi)的速度，連續(xù)測(cè)定各單位時(shí)間的反應(yīng)動(dòng)態(tài)觀察。速率散射比濁法影響因素：峰值出現(xiàn)時(shí)間與抗體的濃度及其親和力直接相關(guān)，不同抗原含量其速率峰值不同。第十四章 酶標(biāo)記免疫技術(shù)一、名詞解釋1.酶免疫技術(shù)：是指利用酶的高效催化和放大作用與特異性免疫反應(yīng)結(jié)合而建立的一種標(biāo)記免疫技術(shù)。2.封閉：是指在抗原或抗體包被ELISA板后，用1%-5%牛血清白蛋白或5-20%小牛血清等再包被，以防止非特異性吸附。3.異相酶免疫測(cè)定：是指在酶免疫測(cè)定中，抗原抗體反應(yīng)后，需分離游離的和與抗原(或抗體)結(jié)合形成復(fù)合物的酶標(biāo)記物，然后對(duì)經(jīng)酶催化的底物顯色程度進(jìn)行測(cè)定，再推算出樣品中待測(cè)抗原(或抗體)的含量。4.包被：是指將抗原或抗體固相化的過(guò)程。5.均相酶免疫測(cè)定：是指抗原抗體反應(yīng)平衡后，無(wú)需分離F和B，直接根據(jù)反應(yīng)前后酶活性的改變進(jìn)行待檢物質(zhì)的測(cè)定。四、問(wèn)答題1、間接法檢測(cè)抗體、雙抗原夾心檢測(cè)抗體、競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)抗體、捕獲法檢測(cè)抗體 間接法測(cè)抗體雙抗原夾心檢測(cè)抗體2、雙抗體夾心法、雙位點(diǎn)一步法、競(jìng)爭(zhēng)法、競(jìng)爭(zhēng)法雙抗體夾心法雙位點(diǎn)一步法3、競(jìng)爭(zhēng)法工作原理 4、（1）酶免疫技術(shù)按實(shí)際用途，分為酶免疫組化和酶免疫測(cè)定兩大類。（2）按抗原抗體反應(yīng)后是否需將結(jié)合的和游離的酶標(biāo)記物分離，分為均相酶免疫測(cè)定和異相酶免疫測(cè)定，異相酶免疫測(cè)定又可分為固相酶免疫測(cè)定和液相酶免疫測(cè)定。5、辣根過(guò)氧化物酶 底物:四甲基聯(lián)苯胺、鄰苯二胺。 堿性磷酸酶；硝基苯磷酸脂6、加樣：在定量測(cè)定中加樣應(yīng)力求準(zhǔn)確。 溫育：在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加樣本后和加結(jié)合物后，此時(shí)反應(yīng)的溫度和時(shí)間應(yīng)安規(guī)定的要求，保溫容器最好是水浴箱或恒溫箱，可使溫度迅速平衡。洗滌：洗滌的目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。顯色：為保證催化反應(yīng)完全，顯色時(shí)間應(yīng)充分，根據(jù)試劑盒上的操作即可。比色：比色要注意波長(zhǎng)的選擇，目前以TMB為底物和以O(shè)PD為底物的試劑盒均有使用，而前者比色波長(zhǎng)為450nm，后者為492nm，濾光片需根據(jù)要求隨時(shí)更換。7、（1）酶活性高，能對(duì)低濃度底物產(chǎn)生較高的催化反應(yīng)率。（2）具有可與抗原、抗體共價(jià)結(jié)合的基團(tuán)，標(biāo)記后酶活性保持穩(wěn)定，而且不影響標(biāo)記抗原與抗體的免疫反應(yīng)性。（3）酶催化底物后產(chǎn)生的信號(hào)產(chǎn)物易于判定或測(cè)量，且方法簡(jiǎn)單、敏感和重復(fù)性好。（4）酶活性不受樣品中其他成分（內(nèi)源性酶、抑制物）的影響；用于均相酶免疫測(cè)定的酶還要求當(dāng)抗體與酶標(biāo)抗原結(jié)合后，酶活性可出現(xiàn)抑制或激活。（5）酶、輔助因子及其底物均對(duì)人體無(wú)危害，理化性質(zhì)穩(wěn)定，且價(jià)廉易得。8、免疫印跡方法亦稱Western blot，由SDS-PAGE、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印和酶免疫測(cè)定三項(xiàng)技術(shù)結(jié)合而成?？乖鹊鞍讟悠方?jīng)SDS處理后帶負(fù)電荷，SDS-PAGE時(shí)從陰極向陽(yáng)極泳動(dòng)，分子量小者，泳動(dòng)速度快；將凝膠中已經(jīng)分離的蛋白質(zhì)條帶在電場(chǎng)作用下轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上；將印有蛋白質(zhì)條帶的硝酸纖維素膜依次與特異性抗體和酶標(biāo)第二抗體作用，加入能形成不溶性顯色物的酶反應(yīng)底物，使區(qū)帶染色；根據(jù)電泳時(shí)加入的分子量標(biāo)準(zhǔn)，可確定各組份的分子量。 第十五章 熒光標(biāo)記免疫技術(shù) 一、名詞解釋 1.熒光免疫技術(shù)：是將抗原抗體反應(yīng)的特異性與熒光物質(zhì)檢測(cè)的敏感性和直觀性結(jié)合起來(lái)的一種免疫分析技術(shù) 2.熒光：某物質(zhì)能夠從外部接受能量而進(jìn)入激發(fā)態(tài)，當(dāng)其從激發(fā)態(tài)回復(fù)至基態(tài)時(shí)，過(guò)剩的能量以電磁波的形式發(fā)射稱為熒光。 3.Stokes位移 ：熒光物質(zhì)從激發(fā)態(tài)回到基態(tài)的過(guò)程中，部份能量丟失，發(fā)射光波長(zhǎng)比激發(fā)態(tài)波長(zhǎng)長(zhǎng)。兩者波長(zhǎng)之差稱為Stokes位移。 4.熒光淬滅：指熒光分子在某些理化因素作用下、熒光分子的輻射能力受到激發(fā)光較長(zhǎng)時(shí)間的照射后會(huì)減弱的現(xiàn)象 5.免疫芯片：是一種特殊的蛋白質(zhì)芯片，也稱抗體芯片，是將抗原抗體結(jié)合反應(yīng)的特異性與電子芯片高密度集成原理相結(jié)合的一種全新概念的生物芯片檢測(cè)技術(shù)。 四、問(wèn)答題1、具有特異性強(qiáng)，靈敏度高，標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍寬，分析速度快，標(biāo)記物制備較簡(jiǎn)便、有效使用期長(zhǎng)，無(wú)放射性污染等優(yōu)點(diǎn)。是很有發(fā)展前途的超微量物質(zhì)免疫分析技術(shù)。2熒光免疫顯微技術(shù)是以熒光顯微鏡為檢測(cè)工具，用熒光素標(biāo)記特異性抗體或抗抗體，檢測(cè)固定組織細(xì)胞上的抗原或血清中的抗體，常用于定性和定位檢查的一門技術(shù)。3臨床常應(yīng)用于：血清中自身抗體的檢測(cè); 各種微生物的快速檢查和鑒定; 寄生蟲感染的診斷; 白細(xì)胞分化抗原的檢測(cè)。4熒光偏振免疫測(cè)定基本原理：熒光偏振免疫測(cè)定是利用熒光素經(jīng)偏振光照射而躍入激發(fā)態(tài)，在回復(fù)至基態(tài)后可釋出光子，經(jīng)偏振儀形成偏振熒光，熒光偏振強(qiáng)度與熒光分子的大小成正比的關(guān)系而建立的免疫分析 第十六章 放射免疫技術(shù)一、名詞解釋1、放射性核素2、放射免疫分析：放射免疫分析是放射性核素標(biāo)記的抗原（A*）與反應(yīng)系統(tǒng)中為標(biāo)記抗原（A）競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合特異性抗體（Ab）來(lái)測(cè)定待檢樣品中抗原量的一種技術(shù)。3、免疫放射技術(shù)：1968年Miles和Hales應(yīng)用放射性核素標(biāo)記的抗胰島素檢測(cè)牛血清中胰島素獲得成功。為了區(qū)別經(jīng)典的放射免疫測(cè)定(RIA),他們將其命名為免疫放射測(cè)定或免疫放射量度分析。三問(wèn)答題1、 RIA和IRMA的基本原理及方法評(píng)價(jià)。RIA的原理：由于Ag*與Ag的免疫活性完全相同，對(duì)Ab具有同樣的親和力。當(dāng)Ag*和Ab為恒定量，Ab和Ag*的總量大于Ab上的有效結(jié)合點(diǎn)時(shí)，Ag*-Ab的形成是隨著Ag量的增加而減少，剩下來(lái)的未結(jié)合或游離的Ag*則隨著Ag量的增加而增加，競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合反應(yīng)。待測(cè)Ag量與Ag*-Ab(B)成反比關(guān)系，與游離的Ag*(F)成正比關(guān)系，因此測(cè)定Ag*-Ab或Ag*即可推出被測(cè)量的Ag量。用已知不同濃度的抗原標(biāo)準(zhǔn)品得到相應(yīng)B和F值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。待測(cè)標(biāo)準(zhǔn)同時(shí)操作，可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得待檢標(biāo)準(zhǔn)中的抗原量。IRMA的基本原理：免疫放射分析的基本原理是非競(jìng)爭(zhēng)性免疫結(jié)合反應(yīng)。反射性核素標(biāo)記于抗體上，用過(guò)量的標(biāo)記抗體Ab*與待測(cè)抗原Ag反應(yīng)，待反應(yīng)完成后，去除剩余的游離標(biāo)記抗體，則Ag-Ab*復(fù)合物的反射性強(qiáng)度與待測(cè)抗原帶的量成正比關(guān)系，通過(guò)檢測(cè)免疫免疫復(fù)合物的放射性，從而得到待測(cè)樣本的濃度。方法評(píng)價(jià)：RIA具有以下優(yōu)點(diǎn)：敏感度高，能檢測(cè)到ugL，甚至檢測(cè)到ngL或pg水平；特異性強(qiáng)，與結(jié)構(gòu)類似物質(zhì)間的交叉反應(yīng)少；準(zhǔn)確性好，重復(fù)性好，批間批內(nèi)誤差低；用血量少。RIA的缺點(diǎn)：有放射性核素對(duì)環(huán)境和實(shí)驗(yàn)室污染；放射性核素易衰變以及放射性標(biāo)記物不穩(wěn)定，導(dǎo)致試劑有效期短。IRMA具有以下幾種優(yōu)點(diǎn)：1、敏感性高（1）抗原分子含酪氨酸多，可結(jié)合多個(gè)放射性碘原子；（2）在過(guò)量抗體存在情況下，一個(gè)抗原分子可以結(jié)合多個(gè)抗體分子，提高了敏感性2、 特異性高：雙位點(diǎn)IRMA法要求待測(cè)物必須同時(shí)具備兩個(gè)表位，才能最后形成有效雙抗體夾心復(fù)合物，故IRMA法不易產(chǎn)生嚴(yán)重的價(jià)差反應(yīng)，具有較高的檢測(cè)特異性。3、 標(biāo)記物穩(wěn)定，標(biāo)記容易。4、 結(jié)果穩(wěn)定：IRMA法測(cè)定結(jié)果的穩(wěn)定性較好，因標(biāo)記抗體和固相抗體均屬過(guò)量，不易受外界環(huán)境的影響；也不一手試驗(yàn)操作的影響，因抗體過(guò)量，加樣誤差影響不大。缺點(diǎn)：IRMA抗體用量偏多，而且抗體的特異性純化較難，如用單克隆抗體可克服這些缺點(diǎn)。 第十七章 金標(biāo)記免疫技術(shù)一、名詞解釋1、 免疫膠體金技術(shù)：免疫膠體金技術(shù)是以膠體金作為示蹤標(biāo)記物應(yīng)用于抗原抗體的一種新型的免疫標(biāo)記技術(shù)。2、 膠體金：膠體金是由氯金酸（HAuCl4）在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，聚合成為特定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，稱為膠體金。四、問(wèn)答題3、 1、金免疫測(cè)定技術(shù)：免疫膠體金技術(shù)是以膠體金作為示蹤標(biāo)記物應(yīng)用于抗原抗體的一種新型的免疫標(biāo)記技術(shù)。技術(shù)類型及原理：斑點(diǎn)金免疫滲濾試驗(yàn)：斑點(diǎn)金免疫滲濾是將抗原或抗體點(diǎn)加在固相載體纖維素薄膜上，制成抗原或抗體包被的微孔濾膜于吸水材料上，依次滴加在膜上的標(biāo)本、免疫金及洗滌液等液體很快滲入吸水材料中，最后陽(yáng)性反應(yīng)在膜上呈紅色斑點(diǎn)。液體通過(guò)微孔濾膜時(shí)，滲濾中的抗原或抗體與膜上的抗體或抗原相接觸，起到親和層析的濃縮，達(dá)到快速檢測(cè)的目的，同時(shí)洗滌液的滲入在短時(shí)間內(nèi)即可達(dá)到測(cè)底洗滌的目的。斑點(diǎn)金免疫層析試驗(yàn)：斑點(diǎn)金免疫層析試驗(yàn)是膠體金標(biāo)技術(shù)和蛋白質(zhì)層析技術(shù)相結(jié)合的以微孔濾膜為載體的快速 ：固相膜免疫分析技術(shù)。與膠體金免疫滲濾試驗(yàn)的不同，DICA中滴加在膜一端的標(biāo)本溶液受載體膜的毛細(xì)管作用向另一端移動(dòng)，猶如層析一般，在移動(dòng)過(guò)程中被分析物與固定于載體膜上某一區(qū)域的抗體（抗原）結(jié)合而被固相化，無(wú)關(guān)物則越過(guò)區(qū)域而被分離，然后通過(guò)膠體金的呈色條帶來(lái)判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果。2、略 第十八章 化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)一名詞解釋 1.光致發(fā)光：是指發(fā)光劑（熒光素）經(jīng)較短波長(zhǎng)入射光照射后進(jìn)入激發(fā)態(tài),當(dāng)回復(fù)至基態(tài)時(shí)發(fā)出較長(zhǎng)波長(zhǎng)的光。 2.生物發(fā)光：通常是酶-產(chǎn)物類型的反應(yīng)，涉及多種酶和產(chǎn)物。 3.化學(xué)發(fā)光：是指在常溫下伴隨化學(xué)反應(yīng)過(guò)程所產(chǎn)生的發(fā)射現(xiàn)象。 4.化學(xué)發(fā)光劑：在化學(xué)發(fā)光反應(yīng)中參與能量轉(zhuǎn)移并最終以發(fā)射光子的形式釋放能量的化合物 5.酶促反應(yīng)發(fā)光劑：是利用標(biāo)記酶的催化作用,使發(fā)光劑（底物）發(fā)光。這一類需酶催化后發(fā)光的發(fā)光劑稱為酶促反應(yīng)發(fā)光劑 四問(wèn)答題 1. 簡(jiǎn)述化學(xué)發(fā)光免疫分析的原理。 答：化學(xué)發(fā)光免疫分析是用化學(xué)發(fā)光劑直接標(biāo)記的抗原或抗體與待測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原、磁顆粒性的抗原或抗體反應(yīng)，通過(guò)磁場(chǎng)把結(jié)合狀態(tài)部分中加入發(fā)光促進(jìn)劑進(jìn)行發(fā)光反應(yīng)，通過(guò)對(duì)結(jié)合狀態(tài)發(fā)光強(qiáng)度的檢測(cè)進(jìn)行定量或定性檢測(cè)。2.簡(jiǎn)述電化學(xué)發(fā)光免疫分析的原理。 答：電化學(xué)發(fā)光免疫分析是電化學(xué)發(fā)光和免疫檢測(cè)相結(jié)合的技術(shù)，是一種在電極表面由電化學(xué)引發(fā)的特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，實(shí)際上包括了電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光兩個(gè)過(guò)程。ECL是你電啟動(dòng)發(fā)光反應(yīng)?；瘜W(xué)發(fā)光劑三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記抗體，通過(guò)抗原抗體反應(yīng)和磁顆粒分離技術(shù)，根據(jù)三聯(lián)吡啶釕在電極上發(fā)出的光強(qiáng)度的大小對(duì)待測(cè)的抗原或抗體進(jìn)行定量或定性檢測(cè)。 第十九章 免疫細(xì)胞的分離及功能測(cè)定一名詞解釋1.吞噬細(xì)胞：略2.PBMC:外周血單個(gè)核細(xì)胞主要指淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞，是免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中最常用的細(xì)胞群，也是進(jìn)行T細(xì)胞和B細(xì)胞分離純化的重要環(huán)節(jié)。3.Ficoll分離法：是利用聚蔗糖-泛影葡胺分層液進(jìn)行單個(gè)核細(xì)胞分離的一種單次密度梯度離心分離法。4淋巴母細(xì)胞轉(zhuǎn)化：發(fā)生增殖的細(xì)胞在代謝和形態(tài)上會(huì)發(fā)生一系列變化，主要表現(xiàn)為細(xì)胞內(nèi)酶活化，蛋白質(zhì)和核酸合成，細(xì)胞變大、細(xì)胞質(zhì)擴(kuò)大、核仁明顯、染色質(zhì)疏松等，這樣的細(xì)胞為淋巴母細(xì)胞。因此，這種淋巴細(xì)胞增值試驗(yàn)又稱淋巴母細(xì)胞轉(zhuǎn)化。四問(wèn)答題1.簡(jiǎn)述T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的試驗(yàn)原理和鏡下淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化形態(tài)學(xué)特征。答：T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)原理：T淋巴細(xì)胞在受到非特異性有絲分裂原或特異性抗原刺激后能發(fā)生增殖反應(yīng)，細(xì)胞代謝旺盛，蛋白質(zhì)和核酸和合成增加；以此同時(shí)細(xì)胞體積增大，分裂成母細(xì)胞樣此為淋巴母細(xì)胞轉(zhuǎn)化現(xiàn)象。因此可借助形態(tài)學(xué)方法觀測(cè)淋巴細(xì)胞變化情況，3H-胸腺嘧啶核苷摻入法測(cè)定DNA情況，或MTT比色法測(cè)定線粒體代謝活性即可判定淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化程度。鏡下淋巴細(xì)胞形態(tài)可以見(jiàn)到以下幾種類型：1淋巴母細(xì)胞 胞體比未轉(zhuǎn)化淋巴細(xì)胞大34倍，呈圓形或橢圓形，包漿染色淡藍(lán)，可有偽足、空泡，細(xì)胞核增大，核質(zhì)疏松，呈網(wǎng)狀，可見(jiàn)分裂現(xiàn)象。2.過(guò)渡型淋巴細(xì)胞 形態(tài)介于淋巴母細(xì)胞和正常淋巴細(xì)胞之間，體積稍大，多為1215微米，胞漿稍多，淡藍(lán)色，核稍大，和質(zhì)疏松。注意與大淋巴細(xì)胞區(qū)別，后者雖然體積較大，但核質(zhì)致密胞漿較少嗜堿性強(qiáng)。3.正常淋巴細(xì)胞 與未經(jīng)刺激的淋巴細(xì)胞一樣，體積小，核質(zhì)致密，胞漿少嗜堿性強(qiáng)。2.簡(jiǎn)述Ficoll-hypaque分離液分離PBMS的原理、步驟和注意事項(xiàng)。答：原理;血液?jiǎn)蝹€(gè)核細(xì)胞包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。人外周血單個(gè)核細(xì)胞的密度為1.0501.070，而粒細(xì)胞和紅細(xì)胞的密度在1.070+-0.001的Ficoll-hypaque分層液，將待測(cè)分離的細(xì)胞懸液小心鋪于其上，經(jīng)離心后單個(gè)核細(xì)胞懸浮于分層液上層界面，而紅細(xì)胞與粒細(xì)胞沉于管底，據(jù)此可將血液中的單個(gè)核細(xì)胞與其他細(xì)胞分開。步驟 略注意事項(xiàng)：1.將血液適當(dāng)稀釋，減低血液凝稠度有利于提高單個(gè)核細(xì)胞的收獲率。2.分層液應(yīng)直接加入管底，防止浸沾四周管壁。3.將細(xì)胞懸液疊加于分層液上時(shí)務(wù)必小心，不要擾亂界面以影響分離效果。4.溫度變化可直接影響分層液的密度，即影響細(xì)胞的收獲率和純度。故應(yīng)在室溫下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，分層液使用前應(yīng)預(yù)溫致室溫。3.敘述T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒素試驗(yàn)的原理、意義和方法分類。答：略4.測(cè)定吞噬細(xì)胞功能有哪些常用方法。答：吞噬細(xì)胞功能測(cè)定從趨化、吞噬和殺菌三個(gè)方面進(jìn)行檢測(cè)。常用的方法：趨化功能測(cè)定的有濾膜滲透法、瓊脂平板法，吞噬功能測(cè)定的有吞噬試驗(yàn)，殺菌功能測(cè)定的有NBT還原試驗(yàn)、殺菌功能試驗(yàn)、化學(xué)發(fā)光試驗(yàn)等方法。第二十章 流式細(xì)胞術(shù)一名詞解釋1流式細(xì)胞術(shù)：是以流式細(xì)胞儀作為檢測(cè)工具，結(jié)合激光光學(xué)、計(jì)算機(jī)、電子物理學(xué)、流體力學(xué)、細(xì)胞化學(xué)和免疫學(xué)等學(xué)科的理論與技術(shù)，對(duì)于處在快速直線流動(dòng)狀態(tài)中的細(xì)胞或生物顆粒同時(shí)進(jìn)行多參數(shù)、快速定量分析和分選的高新技術(shù)。2熒光信號(hào):當(dāng)熒光抗體或其他染料染色的顆粒通過(guò)激光束時(shí)，染料吸收光子躍遷到激發(fā)態(tài)，返回基態(tài)時(shí)，染料釋放出能量，大部分以光形式釋放。這種發(fā)射出的光稱為熒光。3細(xì)胞凋亡:是有核細(xì)胞在一定條件下通過(guò)啟動(dòng)自身內(nèi)部機(jī)制，主要是通過(guò)內(nèi)源性DNA內(nèi)切酶的激活而發(fā)生的細(xì)胞死亡過(guò)程。四問(wèn)答題1、簡(jiǎn)述流式細(xì)胞儀的工作原理？答： 流式細(xì)胞儀主要由四部分組成：流動(dòng)室和液流系統(tǒng)，激光源和光學(xué)系統(tǒng)，光電管和檢測(cè)系統(tǒng)，計(jì)算機(jī)和分析系統(tǒng)。四大系統(tǒng)共同完成信號(hào)的產(chǎn)生、轉(zhuǎn)換和傳輸任務(wù)。檢測(cè)時(shí)將待測(cè)細(xì)胞或微粒制成細(xì)胞懸液，進(jìn)行熒光染色后加入樣品管中。以一定壓力將待測(cè)樣品壓人流動(dòng)室，在高壓下磷酸緩沖液(鞘液)從鞘液管噴出，鞘液管人口方向與待測(cè)樣品流成一定角度，這樣，鞘液就能夠包繞著樣品高速流動(dòng)，組成一個(gè)圓形流束(鞘流)，待測(cè)細(xì)胞在鞘液包繞下單行排列，依次通過(guò)檢測(cè)區(qū)。流式細(xì)胞儀通常以激光作為發(fā)光源。經(jīng)過(guò)聚焦后的光束，垂直照射在樣品流上，當(dāng)細(xì)胞攜帶熒光素標(biāo)記物通過(guò)激光照射區(qū)時(shí)，產(chǎn)生代表細(xì)胞內(nèi)部不同物質(zhì)、不同波長(zhǎng)的熒光信號(hào)，這些信號(hào)以細(xì)胞為中心向空間360o立體角發(fā)射，產(chǎn)生散射光和熒光信號(hào)。散射光包括前向角散射和側(cè)向角散射。前向角散射與被測(cè)細(xì)胞直徑的平方密切相關(guān)，反映細(xì)胞體積的大小。側(cè)向角散射光對(duì)細(xì)胞膜、胞質(zhì)及核膜的折射率更為敏感，可提供有關(guān)細(xì)胞內(nèi)精細(xì)結(jié)構(gòu)和顆粒性質(zhì)的信息。經(jīng)熒光染色的細(xì)胞受到適合的光波激發(fā)后產(chǎn)生的熒光通過(guò)光電轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)變成電信號(hào)。最常用的光電轉(zhuǎn)換器是光電倍增管。從光電倍增管輸出的電信號(hào)需要經(jīng)過(guò)放大后才能被傳送到計(jì)算機(jī)，經(jīng)模數(shù)轉(zhuǎn)換器傳輸?shù)轿C(jī)處理器形成數(shù)據(jù)文件，保存在計(jì)算機(jī)上。保存在計(jì)算機(jī)上的數(shù)據(jù)可在脫機(jī)后再進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析。 細(xì)胞的分選是通過(guò)分離含有單細(xì)胞的液滴而實(shí)現(xiàn)的。在流動(dòng)室的噴口上配有一個(gè)超高頻電晶體，充電后振動(dòng)，使噴出的液流斷裂為均勻的液滴，待測(cè)細(xì)胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正負(fù)不同的電荷，當(dāng)液滴流經(jīng)帶有幾千伏特的正負(fù)電荷偏轉(zhuǎn)板時(shí)，在高壓電場(chǎng)的作用下偏轉(zhuǎn)，落人各自的收集容器中，不予充電的液滴落人中間的廢液容器，從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分離。2、論述流式細(xì)胞術(shù)在免疫學(xué)中應(yīng)用？答：(1)淋巴細(xì)胞亞群分析：T淋巴細(xì)胞亞群分析、B淋巴細(xì)胞亞群分析、NK細(xì)胞分析(2)白血病免疫表型分析：FCM在白血病診斷、治療和預(yù)后判斷方面，具有非常重要的價(jià)值(3)細(xì)胞凋亡分析：半胱氨酸蛋白酶3檢測(cè)法、Annexin V-FITC/PI法、線粒體功能的檢測(cè)、DNA末端標(biāo)記法、凋亡相關(guān)蛋白檢測(cè)(4)FCM廣泛用于腫瘤研究領(lǐng)域，通過(guò)進(jìn)行DNA含量分析判斷細(xì)胞的倍體狀態(tài)，DNA非整倍體出現(xiàn)率增高是癌變的一個(gè)重要標(biāo)志3、流式細(xì)胞術(shù)定量分析的注意事項(xiàng)？答：(1)環(huán)境要求:一般要求環(huán)境溫度在2025攝氏度之間，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)盡量減少灰塵和煙塵，室內(nèi)光源和儀器光源都要有良好的屏蔽作用(2)儀器的校正:每天上機(jī)前須用質(zhì)控品校正儀器，確保儀器的良好狀態(tài)，才能進(jìn)行實(shí)驗(yàn)(3)樣本要求:制備單細(xì)胞懸液是流式細(xì)胞術(shù)的基礎(chǔ)，制備出合格的單細(xì)胞懸液是保證分析成功的關(guān)鍵(4)設(shè)置對(duì)照:在進(jìn)行樣本測(cè)定時(shí)，也應(yīng)該進(jìn)行質(zhì)量控制，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性，其中最重要的是設(shè)置同型對(duì)照和全程質(zhì)控(5)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的獲取和分析:呼氣實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)前，應(yīng)先調(diào)節(jié)儀器的光路補(bǔ)償，校正不同熒光探針之間的光譜重疊；分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)時(shí)，要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康膩?lái)決定分析模型，圈定細(xì)胞群，進(jìn)行分析(6)確保標(biāo)本上機(jī)檢測(cè)前的細(xì)胞濃度滿足儀器檢測(cè)要求，一般分析濃度為1*106/ml，細(xì)胞濃度過(guò)低直接影響檢測(cè)結(jié)果(7)熒光抗體染色后需充分洗滌，注意混勻，低速離心，減少重疊細(xì)胞和細(xì)胞碎片(8)判定結(jié)果是，應(yīng)注意減去本底熒光，為使免疫熒光的定量分析更精確，應(yīng)用計(jì)算機(jī)程序軟件4、流式細(xì)胞術(shù)的特點(diǎn)？答：(1)速度快 (2)靈敏度高 (3)多參數(shù)分析 (4)高精度 (5)高純度 (6)在適宜的條件下，能保持細(xì)胞及細(xì)胞器或微粒結(jié)構(gòu)及功能不被破壞，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行無(wú)害性定性或定量分析和分選 第二十一章 免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量控制一名詞解釋1精確度：待測(cè)物的測(cè)定值與其真值的一致性程度2精密度：在一定條件下進(jìn)行多次測(cè)定，所得結(jié)果之間的符合程度3誤差：待測(cè)物的測(cè)定值與客觀存在的真值之間的差異4偏差：待測(cè)物的測(cè)定值與多次測(cè)量平均值之間的差異5重復(fù)性條件：在同一實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，由相同的操作者使用同一儀器設(shè)備，在短的間隔時(shí)間內(nèi)對(duì)相同的測(cè)試項(xiàng)目使用同一方法相互獨(dú)立進(jìn)行測(cè)試的條件6批：在相同條件下所獲得的一組測(cè)定7標(biāo)準(zhǔn)差：用于表示一組測(cè)定數(shù)據(jù)的分布情況，它是反映一組數(shù)據(jù)的精密度和離散程度的最主要指標(biāo)8變異系數(shù)：將標(biāo)準(zhǔn)差與平均值之比用百分?jǐn)?shù)表示9正態(tài)分布：當(dāng)一質(zhì)控物用同一方法在不同的時(shí)間重復(fù)多次測(cè)定，當(dāng)測(cè)定數(shù)據(jù)足夠多時(shí)，如以橫軸表示測(cè)定值，縱軸表示在大量測(cè)定中相應(yīng)測(cè)定值的個(gè)數(shù)，則可得到一個(gè)兩頭低，中間高，中為所有測(cè)定值的均值，左右對(duì)稱的鐘形曲線，即正態(tài)分布10質(zhì)量保證：致力于某一產(chǎn)品或服務(wù)滿足特定的質(zhì)量要求，提供充分信任性所要求的而采取一系列有效的措施11室內(nèi)質(zhì)量控制：由實(shí)驗(yàn)室工作人員采取一定的方法和步驟，連續(xù)評(píng)價(jià)本實(shí)驗(yàn)室從收取樣本至獲得測(cè)定結(jié)果，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析的整個(gè)測(cè)定過(guò)程可靠性程度的措施12室間質(zhì)量控制：采取一定的方式、方法，連續(xù)、客觀地評(píng)價(jià)某實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果與靶值的差異，發(fā)現(xiàn)誤差并校正結(jié)果，使各實(shí)驗(yàn)室之間的結(jié)果具有可比性13質(zhì)控品：是專門用于質(zhì)量控制目的的特性明確的物質(zhì)，其