銀杏葉凍干粉可行性報告一、項目提出的背景、投資的必要性及意義山東仁和制藥有限公司是于2001年5月在成功收購原郯城華銀制藥廠的基礎(chǔ)上組建而成的綜合性制藥企業(yè)。前身為山東郯城華銀制藥廠，始建于1995年，生產(chǎn)的劑型為中成藥片劑和中藥提取物。2002年4月又成功收購了破產(chǎn)企業(yè)煙臺康泰制藥有限公司，增加了15個化學(xué)藥品的片劑。目前公司已形成了包括中藥、西藥、抗生素、中藥提取物、保健食品口服液、生化藥、食品七大系列共計40多個品種的綜合性制藥企業(yè)，同時正在研發(fā)的18個新藥和保健食品正在國家局的審批中。年實現(xiàn)工業(yè)總產(chǎn)值10500萬元，銷售收入8500多萬元，利稅1600多萬元。山東仁和制藥有限公司位于中國銀杏之鄉(xiāng)山東省郯城縣境內(nèi)，西鄰205國道和京滬高速，交通便利。郯城銀杏資源占整個中國銀杏資源的三分之一以上，公司具有巨大的資源優(yōu)勢。公司注冊資本3832.44萬元，總資產(chǎn)8000多萬元。公司全廠職工322人。其中在職職工273人，從事生產(chǎn)人員208人，管理技術(shù)人員92人。技術(shù)人員占職工總數(shù)的32%，其中高級職稱6人，中級職稱26人，初級職稱44人。為適應(yīng)企業(yè)發(fā)展需要，2003年1月開始投資3000多萬元，對公司進(jìn)行了全面的GMP改造,包括新建了1600平米的包括片劑、膠囊劑、顆粒劑的新建固體制劑車間，嚴(yán)格按照GMP要求對辦公區(qū)、綜合倉庫、質(zhì)檢樓、前處理車間及提取車間精干包的改造、中藥材庫、凈藥材庫、空調(diào)主控室、配電室組成、鍋爐及廠區(qū)地面進(jìn)行了硬化等改造工作。形成年產(chǎn)片劑20億片，膠囊劑1億粒，顆粒劑1000萬袋，中藥提取物100噸，中藥飲片500噸的生產(chǎn)能力。同時嚴(yán)格按保健食品GMP和藥品GMP正在改建的能生產(chǎn)10ml口服液3600萬支和100ml口服液300萬瓶的口服液生產(chǎn)車間正在建設(shè)。目前，本公司形成了能夠生產(chǎn)包括中藥、西藥、抗生素、保健食品口服液、食品、中藥提取物等的綜合性制藥企業(yè)。公司占地面積50980m2，其中預(yù)留面積為8020m2，綠化面積為9670m2，約占總面積31.2%，建筑面積為24000m2。其中質(zhì)量保證部為510m2，生產(chǎn)車間總計6200m2，倉庫面積為2000m2。2001至2003年連續(xù)被評為臨沂市醫(yī)藥系統(tǒng)先進(jìn)單位，2004年5月一次性通過了國家局的GMP認(rèn)證，2004年年底被認(rèn)定為高新技術(shù)企業(yè)，2005年被評為臨沂市農(nóng)業(yè)重點龍頭企業(yè)。公司堅持以市場為中心，以新產(chǎn)品研發(fā)為突破口，堅持四個創(chuàng)新和科學(xué)發(fā)展觀，積極創(chuàng)建先進(jìn)的企業(yè)文化，打造優(yōu)秀的公司品牌和良好的企業(yè)形象，為建成現(xiàn)代化的企業(yè)管理制度并力爭在5年內(nèi)把公司建成魯南地區(qū)產(chǎn)值、利稅、效益、知名度高第二位的大型企業(yè)集團(tuán)制藥企業(yè)。把公司建成一個集“產(chǎn)、學(xué)、研、銷”于一體的“科、工、貿(mào)”聯(lián)合體，形成年產(chǎn)值10億元，利稅過億元的規(guī)模，使之成為全市醫(yī)藥行業(yè)的第二大知名品牌。1銀杏葉功效成分簡述銀杏葉具有豐富的活性成分和巨大的藥用功效：概括的說：銀杏樹是目前發(fā)現(xiàn)的當(dāng)今世界上最奇特、對人類貢獻(xiàn)最大的植物，特別是銀杏葉具有五大成分五大功效，銀杏葉將是世界上最有發(fā)展前景的中藥材，能夠治療世界上很多的疑難雜癥：（1）.黃酮苷類：對心腦血管疾病，高血脂，高血壓，清除氧自由基具有顯著的療效，是目前世界上治療該類疾病最顯著的藥物。（2）.銀杏內(nèi)酯A、B、C、M類：是血小板活化因子（PAF）拮抗劑，是銀杏葉中最重要的活性成分，是治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的特效藥物。（3）.白果內(nèi)酯類：白果內(nèi)酯有很強(qiáng)的生物活性，為神經(jīng)精神病藥物，對因年老的呆傻癥有奇異的療效，它能抗神經(jīng)末梢的衰老，被譽為真正抗衰老化學(xué)物質(zhì)。（4）.銀杏酚酸類：可促進(jìn)胃液和膽汗的分泌；具有抗細(xì)菌和消炎的作用；制成無殘留農(nóng)藥；含有抗真菌物質(zhì)，能夠真正刺激神經(jīng)中樞系統(tǒng)的作用。（5）.聚異戊烯醇類：促進(jìn)造血功能，改善肝臟機(jī)能，對再生障礙性貧血（白血?。?，對各種肝病、糖尿病具有最顯著的療效，是治療這類疾病最具有開發(fā)前景的藥物。1.1銀杏葉主要成分研究情況：自20世紀(jì)60年代開始，許多國家采用現(xiàn)代分離技術(shù)對銀杏葉的化學(xué)成分進(jìn)行研究，經(jīng)藥理實驗和臨床驗證，發(fā)現(xiàn)銀杏葉的多方面生物活性與其所含特定化學(xué)成分有關(guān)。德國WillamarSchwabe首次注冊了銀杏葉的一種簡單提取物，并于1972年申請了專利（WSchwabeDE176708和DE2117429），定名為EGb761，將其用于治療心腦血管疾病和神經(jīng)系統(tǒng)疾病，具有顯著療效，且無毒副作用；銀杏內(nèi)酯類化合物（ginkgolides）具有顯著療效，且無毒副作用；銀杏內(nèi)酯類化合物具有增強(qiáng)血小板活化因子（PAF）拮抗的作用。將銀杏制劑列為治療藥物的國家有德國、法國和中國，其他國家均只將其用為保健食品或非處方用藥。美國開發(fā)出的銀杏保健食品已經(jīng)獲得FDA的批準(zhǔn)，使人們對銀杏葉的保健藥用價值更加重視，對銀杏葉化學(xué)成分研究也越來越深入。最近不斷從銀杏葉中發(fā)現(xiàn)一些新的生物活性成分。迄今為止，從銀杏葉中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了100多種化學(xué)成分。這些化學(xué)成分主要有黃酮苷類（flavonoidglycosides）、萜內(nèi)酯類(terpenoids)、聚異戊烯醇類(polyprenols)、6-羥基犬尿喹啉酸(6-hydroxykynurenicacid,6HKA)、有機(jī)酸、銀杏酚酸類(phenolicacids)及烷基酚、烷基酚酸（又稱銀杏酸，ginkgolicacids）、4-甲氧基吡哆醇(4-O-methypyridoxine)等。黃酮類化合物：（1）組成及結(jié)構(gòu)銀杏葉中黃酮類化合物(flavonoids)可分為黃酮、又黃酮和兒茶素等三類化合物，共有36種，主要以苷的形式存在，是銀杏葉的主要藥理成分之一，含量較高，在銀杏葉中含量變化較大。據(jù)作者對貴州等地330份樣品及銀杏葉生產(chǎn)發(fā)育期間黃酮苷含量的檢測分析表明：不同地區(qū)、各單株之間變化幅度在0.2%2.74%；葉中黃酮苷含量0.8%者占測定數(shù)的48.0%；不同生育期間葉中黃酮苷含量相差2倍左右，4月份含量最高，46月份呈下降趨勢，6至10月含量變化不明顯。（2）銀杏黃酮：銀杏黃酮的苷元有7種，即槲皮素（quercetin）、山奈素（kaempferol）、異鼠李素（isorhamnetin）、楊梅素（myricetin）、芹菜素（apigenin）、木犀草素（luteolin）、三粒小麥黃酮（tricetin）等，前三種是其主要成分。銀杏葉及其提取物（GBE）的質(zhì)量控制中主要檢測這三種黃酮苷元的含量。銀杏黃酮又稱單黃酮，銀杏葉中3種主要單黃酮類的結(jié)構(gòu)銀杏黃酮中，槲皮素類的化合物有9個，其糖基主要是葡萄糖和鼠李糖基，有些糖基上還連接有肉桂?；?。山奈素比槲皮素在3位少一個酚羥基，極性較小，銀杏葉中山奈素類化合物有8個。異鼠李素是槲皮素的3上羥基被甲基化的衍生物，銀杏葉中異鼠李素化合物有4個。（3）雙黃酮：銀杏葉中的雙黃酮是由兩分子黃酮母核通過CC鍵聚合而成的一類化合物，一共有6種，即銀杏素（ginkgetin），異銀杏素（isogenkgetin）、穗花杉雙黃酮（amentoflavone）、金錢松雙黃酮（sciadoputydin）、去甲銀杏雙黃酮（bilobetin）、5-甲氧基去甲銀杏雙黃酮（5-methoxybilo-betin）等。（4）兒茶素類：兒茶素類化合物具有治療肝中毒的作用和抗腫瘤活性。銀杏葉中的兒茶素類化合物有6種，即兒茶素（catechin）、表兒茶素（epicatechin）、沒食子酸兒茶素（gallocat-echin）、表沒食子兒茶素（epigallocatechin）、4，8-兒茶素沒食子兒茶素（4，8-catechingallocatechin）和4，8-沒食子兒茶素沒食子兒茶素（4，8-gallocatechingallocatechin）。（5）銀杏黃酮類化合物的理化性質(zhì)黃酮類為酚性成分，屬多環(huán)多元酚類，由于含有苯并-吡酮而形成-烯醇酮（-enolone）結(jié)構(gòu)，這種烯醇酮結(jié)構(gòu)所表現(xiàn)的特性是黃酮分子中的酚羥基的弱酸性與鐵鹽的顯色反應(yīng)；還能與鋁形成配合物，使光吸收長移，顯較深的顏色，可用于鑒定黃酮類化合物（即鋁鹽比色法）；同時酚羥基具有還原性，表現(xiàn)在提取加工過程中的氧化變色，在撮份離時可加入還原劑進(jìn)行保護(hù)。銀杏黃酮類化合物的苷元多為結(jié)晶體、苷多為無定性粉末。黃酮苷類由于在結(jié)構(gòu)中引入糖基，故均有旋光性，且多為左旋。銀杏黃酮、黃酮醇及其苷類子含有7，4-位助色團(tuán)，顏色為深黃色；在紫外光下產(chǎn)生熒光，可用于銀杏黃酮類化合物的定性檢驗。銀杏黃酮類化合物的苷元一般難溶于或不溶于水，可溶于甲醇、乙醇、丙酮、醋酸乙酯、氯仿、乙醚等有機(jī)溶劑及稀堿溶液中。銀杏黃酮苷與糖結(jié)合成苷后，水溶性相應(yīng)增大，一般可溶于熱水、甲醇、乙醇、丙酮、醋酸乙酯中，難溶于乙醚、石油醚、苯、氯仿等有機(jī)溶劑。銀杏黃酮類化合物因分子中具有酚羥基而顯弱酸性，可溶于堿性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺等。銀杏萜內(nèi)酯：（1）組成和結(jié)構(gòu)銀杏內(nèi)酯化合物屬于萜類化合物，又稱為銀杏萜內(nèi)酯，由倍半萜內(nèi)酯和二萜內(nèi)酯組成，是銀杏葉中一類重要的活性成分。白果內(nèi)酯（bilobalide）屬倍半萜內(nèi)酯，是R.T.Major于1967年和K.Weinges1969年分離得到的，是目前從銀杏葉中發(fā)現(xiàn)的唯一的一個倍半萜內(nèi)酯化合物。銀杏內(nèi)酯A（GA）、銀杏內(nèi)酯B（GB）、銀杏內(nèi)酯C（GC）、銀杏內(nèi)酯M（GM）、銀杏內(nèi)酯J（GJ）（ginkgolideA、ginkgolideB、ginkgolideC、ginkgolideM、ginkgolideJ）為二萜內(nèi)酯化合物，于1932年由S.Furukawa首次從銀杏葉中分離出來，1967年才由K.Nakanish、M.Maruyama和K.Okabe等人進(jìn)一步分離和確定其化學(xué)結(jié)構(gòu)。白果內(nèi)酯類分子骨架由15個碳原子組成，具有互相稠合在一起的4個五元環(huán)，其中有1個五元碳環(huán)，3個五元內(nèi)酯碳環(huán)，五元環(huán)上連有1個天然產(chǎn)物中罕見的叔丁基。白果內(nèi)酯有很強(qiáng)的生物活性，為神經(jīng)精神病藥物，對因年老的呆傻癥有奇異的療效，它能抗神經(jīng)末梢的衰老，被譽為真正抗衰老化學(xué)物質(zhì)。而銀杏內(nèi)酯類化合物的分子骨架由20個碳原子組成，具有6個五元環(huán)，其中有2個五元碳環(huán)，3個五元內(nèi)酯環(huán)，1個四氫呋喃環(huán)，2個五元碳環(huán)以螺環(huán)的形式連接在一起，其余的環(huán)以稠合的方式連接，形成一個剛性籠狀的特殊立體化學(xué)結(jié)構(gòu)。銀杏內(nèi)酯分子中均具有天然產(chǎn)物中罕見的叔丁基。銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C、銀杏內(nèi)酯M、銀杏內(nèi)酯J結(jié)構(gòu)差別在于含有羥基數(shù)目和羥基連接的位置不同。銀杏內(nèi)酯均為強(qiáng)血小板活化因子拮抗劑，是銀杏葉中特殊生理活性的關(guān)鍵成分。國內(nèi)外對這類成分做了大量化學(xué)、藥理和臨床研究。作者1989年以來對貴州等地及不同生育期生長的銀杏葉進(jìn)行了分析測定，在327多份樣品檢測結(jié)果中發(fā)現(xiàn)銀杏葉中萜內(nèi)酯含量差異很大，變幅為0.04%1.17%。0.3%以上者占樣本數(shù)的35.2%；萜內(nèi)酯組分中銀杏內(nèi)酯（GA+GB+GC）含量大于白果內(nèi)酯（BB）含量。不同生育期間葉中萜內(nèi)酯含量相差510倍，秋季（910月）含量最高。（2）銀杏內(nèi)酯類化合物的理化性質(zhì)銀杏內(nèi)酯類化合物為白色結(jié)晶，味苦，熔點為300左右。其中銀杏內(nèi)酯M加熱至280分解，無明顯熔點。因分子中含有羥基和多個含氧酯基，比一般的倍半萜和二萜類化合物的極性大，易溶于乙醇、丙酮、丁酮、乙酸乙酯、二甲基亞砜等有機(jī)溶劑中。銀杏內(nèi)酯類化合物對濃酸和強(qiáng)氧化劑很穩(wěn)定，用濃硝酸溶解銀杏內(nèi)酯類化合物后蒸發(fā)至干，其內(nèi)酯仍不破壞。銀杏內(nèi)酯類化合物分子中含有多個內(nèi)酯結(jié)構(gòu)。與堿作用生成鹽，可溶于水。將生成的鹽用酸酸化，則生成原來的內(nèi)酯而不溶于水，卻溶解于有機(jī)溶劑，這一特性可用于銀杏內(nèi)酯的提取分離。銀杏內(nèi)酯類化合物分子中有C1、C2、C3、C7、C8、C10、和C14等7個手性碳原子，這些手性碳原子的構(gòu)型決定了銀杏內(nèi)酯類化合物的剛性籠狀構(gòu)型及其特殊的生物活性。聚異戊烯醇：聚異戊烯醇屬于多烯醇類（或多萜醇類），是銀杏葉中存在的一種類酯化合物。由一系列異戊烯基單元首尾相連構(gòu)成的長鏈化合物，有順式和反式兩種。1982年日本田中康之等從銀杏葉中分離出聚異戊烯醇類化合物，其分子中異戊烯基單元數(shù)為1422。王成章（1992）等證明我國銀杏葉也含有樺木聚異戊烯醇型聚異戊烯醇，其分子中異戊烯基單元數(shù)為1521。這類化合物廣泛存在于哺乳動物的肝臟、胰臟和腎臟等器官中，對維持肝功能，促進(jìn)造血功能能起到重要作用，是一類值得引起重視的，具有廣闊開發(fā)前景的生物活性成分。近年來對銀杏葉中聚異戊烯醇類化合物進(jìn)行了系統(tǒng)分離、純化及組分鑒定，采用石油醚浸提、硅膠柱吸附、以石油醚-氯仿乙酸乙酯梯度洗脫，獲得聚異戊烯醇產(chǎn)物純度為79.0%，得率為0.4%0.49%。聚異戊烯醇類化合物的異戊烯基結(jié)構(gòu)單元數(shù)為1522。研究結(jié)果表明，銀杏葉中聚異戊烯醇類化合物含量隨產(chǎn)地和樹齡不同相差甚大，其中以貴州省正安縣銀杏基地樹葉（25年生）中含量最高（12.1mg/g），是貴州省務(wù)川縣老樹葉（15年以上）的8倍左右。有機(jī)酸類銀杏葉中含有脂肪酸、羥基酸、莽草酸、氨基酸及6-羥基犬尿喹啉酸（6-HKA）等。6-HKA是廣譜中樞神經(jīng)氨基酸拮抗劑，它作用于N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA），能降低腦缺氧，是銀杏葉提取物中一種重要的生物活性成分，近年來已引起了國內(nèi)外學(xué)者的重視，其全面的藥理作用有待進(jìn)一步研究。氨基酸也是銀杏葉中重要的有機(jī)酸。對銀杏葉中氨基酸測試結(jié)果表明：銀杏葉中氨基酸含量極其豐富，總氨基酸量為10.7%15.4%（干基計），均含有9種必需氨基酸，氨基酸組成合理，必須氨基酸含量占總氨基酸的比值達(dá)39.1%41.5%，必需氨基酸占非必需氨基酸比值為66.5%70.9%。酚酸、烷基酚及烷基酚酸類銀杏葉中酚酸類（phenolicacids）據(jù)波蘭MariaEllnain-Woj-taszek（1997）報道主要有7種，即原兒茶酸（protocatechuicacid）、p-羥基苯酸（p-hydroxybenzoicacid）、香草酸（vanillicacid），咖啡酸（caffeicacid）、p-香豆酸（p-coumaricacid）、隊員魏酸（ferulicacid）、綠原酸（chlorogenicacid）。近年來，酚酸及其酯的生物活性引起了廣泛的關(guān)注。其中阿魏酸、香豆酸、咖啡酸及綠原酸可促進(jìn)胃液和膽汗的分泌。香豆酸、香草酸和咖啡酸有抗細(xì)菌和消炎的作用，原兒茶酸是一種抗真菌物質(zhì)，綠原酸還有刺激神經(jīng)中樞系統(tǒng)的作用。經(jīng)HPLC法分析了銀杏葉，根和種皮中的7種游離酚酸，其含量分別為19.9g/g鮮葉；345g/g根和2.71g/g種皮中。經(jīng)水解后，原兒茶酸是主要組分，含量最高達(dá)272g/g（鮮），主要存在于葉和根中。烷基酚及烷基酚酸屬于長鏈苯酚類化合物，目前所說的銀杏酸主要指這類化合物，其中有白果酸（ginkgolicacid）、氫化白果酸（hydroginkgolicacid）、銀杏酚（bilobol）、白果酚（ginkgol），這些成分可能與致過敏、致突變有關(guān)，是銀杏葉提取物中毒副作用成分，銀杏葉提取物（GBE）中要控制其含量在5g/g以下。據(jù)作者研究，我國銀杏葉銀杏酸含量為5002000g/g，并采用現(xiàn)代分離手段，控制GBE產(chǎn)品銀杏酸含量在23g/g。另外，4-甲氧基吡哆醇（4-O-methmylpyridoxine，MPN）是白果的主要毒性成分（毒害神經(jīng)），也存在于銀杏葉中，據(jù)德國波恩大學(xué)AnsgarArenz等（1996）報道，在銀杏葉中4-甲氧基吡哆醇含量24mg/kg。這種毒素不僅為維生素B6的拮抗劑，并能在大腦中抑制谷氨酸轉(zhuǎn)化為4-氨基丁酸（GABA），其毒性反應(yīng)主要引起陣發(fā)性痙攣、神經(jīng)麻痹等。一般營養(yǎng)成分銀杏葉中含有多種營養(yǎng)成分，據(jù)作者對貴州不同地區(qū)銀杏葉測定結(jié)果表明：其蛋白質(zhì)、糖、維生素C、胡蘿卜素、維生素E及礦質(zhì)元素鈣、磷、鐵、氟、銅、錳、鋅、鉻、鈷、硼、硒等含量極豐富，是食品資源的重要原料。1.2.國外對銀杏葉開發(fā)研究情況在距今1.7億年前的中生代，銀杏類植物遍布全世界，成為地球上分布最廣泛地植物群落。直到目前，除了南極洲和赤道兩側(cè)外，在地球上中生代沉積的巖石中，均已發(fā)現(xiàn)了葉形和脈序與現(xiàn)代銀杏非常相似的銀杏類植物葉化石。大約到了距今一百萬年前的第三紀(jì)末和第四紀(jì)初，整個地球氣候變冷，北半球發(fā)生了強(qiáng)大的冰川運動，隨之植物群落也發(fā)生了根本性的變化。銀杏類植物抗不住這一嚴(yán)寒的侵襲，大部分地區(qū)的銀杏類植物全部滅絕，在亞洲大陸也頻于絕種。只在東亞中國、朝鮮、韓國和日本的局部地區(qū)被保留下來，成為當(dāng)今具有重大科學(xué)價值的“活化石”。隨著人類社會的不斷向前發(fā)展，這一孑遺植物又在世界各地繁衍起來。銀杏在日本分布于北到本州青森縣，南達(dá)九州鹿兒島的廣大地區(qū)。在日本：研制出了十余種銀杏系列化妝品投放國內(nèi)外市場，開辟了銀杏加工利用增值的新途徑。銀杏列為中藥，最早見于十四世紀(jì)吳瑞的日用本草、李時珍的本草綱目。日本學(xué)者山下太藏、左藤文比生（1930）和中尺浩（1941）分析出銀杏葉片中含有黃酮。70年代初，我國北京制藥廠及日本藥物學(xué)家分別用銀杏葉提取物黃酮甙類，制造出用于治療心血管和腦血管疾病的片劑、針劑。法國學(xué)者從銀杏葉片中分離出銀杏精B，它可抑制血小板活化因子的活性，同時還可防止過敏反應(yīng)。銀杏外種皮的腐蝕作用，多年來已引起銀杏產(chǎn)區(qū)人們的關(guān)注。葉秀蓮等（1987）從銀杏外種皮中提取出銀杏酸和銀杏酚，成為治療小兒腦膜炎藥物的主要原料。盡管如此，銀杏種仁中卻含有有毒物質(zhì)，食用過量會引起中毒。本世紀(jì)40年代，在波蘭的拉卡夫，專門建立了銀杏種植園。