乳與乳制品檢驗(yàn)方法匯編（第三版）匯編：蔣懿超220 / 221前 言 本匯編內(nèi)的原奶及奶粉摻假檢驗(yàn)方法等同采用伊利集團(tuán)內(nèi)部檢驗(yàn)方法，理化檢驗(yàn)方法等效采用IDF相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)、GB/T5413-1997，GB/T5009-2003，個(gè)別地方根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體情況做了適當(dāng)修改；微生物檢驗(yàn)方法等同采用GB/T4789-2003，部分檢驗(yàn)項(xiàng)目等效采用IDF標(biāo)準(zhǔn)。 目 錄前言-1目錄-2第一部分 原料奶新鮮度和摻雜異物的檢驗(yàn)方法YLNB 1.1 酒精實(shí)驗(yàn)-5YLNB 1.2 美蘭實(shí)驗(yàn)-6YLNB 1.3 堿性物質(zhì)的檢出-8YLNB 1.4 食鹽的檢出-10YLNB 1.5 硝酸鹽，亞硝酸鹽的檢出-12YLNB1.6 糊精的檢出-14YLNB 1.7 淀粉的檢出-15YLNB 1.8 硫酸鹽的檢出-16YLNB 1.9 蔗糖的檢出-17YLNB 1.10 尿素的檢出-18YLNB 1.11 飴糖（糖?。┘捌咸烟堑臋z出-19YLNB 1.12 甲醛的檢出-20YLNB1.13 硫代硫酸鈉、焦亞硫酸鈉的檢出-21YLNB1.14 過(guò)氧化氫的檢出 -23YLNB1.15 乳中摻入水解蛋白的檢測(cè)出25 YLNB 1.16 乳中不溶性物質(zhì)的檢出27 第二部分 乳與乳制品常規(guī)理化指標(biāo)檢驗(yàn)方法YLNB 2. 滴定酸度的檢測(cè)28YLNB 2.2 灰分的檢測(cè)-34YLNB 2.3 全脂乳固體的檢測(cè)-36YLNB 2.4 總固形物的檢測(cè)-38YLNB 2.5 水分的檢測(cè)-42YLNB 2.6 脂肪的檢測(cè)-44YLNB 2.7 乳糖和蔗糖的檢測(cè)-53YLNB 2.8 蛋白質(zhì)的檢測(cè)62YLNB 2.9 不溶度指數(shù)的檢測(cè)-68YLNB 2.10 乳與乳粉中雜質(zhì)度的檢測(cè)73YLNB 2.11 硝酸鹽，亞硝酸鹽的檢測(cè)74YLNB 2.12 乳鐵蛋白飽和度的檢測(cè)82第三部分 乳與乳制品微生物檢驗(yàn)方法YLNB 3.1 菌落總數(shù)檢測(cè)-84YLNB 3.2 大腸菌群檢測(cè)-90YLNB 3.3 嗜冷菌檢測(cè)-96YLNB 3.4 霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)- 100YLNB 3.5 鮮乳中抗生素殘留檢測(cè)103YLNB 3.6 芽孢和耐熱芽孢檢測(cè)-106YLNB 3.7 雙歧桿菌檢測(cè)109YLNB 3.8 染色技術(shù)-112YLNB 3.9 顯微技術(shù)116第四部分 乳與乳制品病原微生物檢驗(yàn)方法YLNB4.1 金黃色葡萄球菌的檢測(cè)119YLNB4.2 金黃色葡萄球菌腸毒素的檢測(cè)-123YLNB4.3 沙門氏菌的檢測(cè)126YLNB4.4 志賀氏菌的檢測(cè)132YLNB4.5 溶血性鏈球菌的檢測(cè)136 YLNB4.6 單增李斯特菌的檢測(cè)-139YLNB4.7 阪崎腸桿菌的檢測(cè)-146YLNB4.8 糞鏈球菌群的檢測(cè)-152附圖1 金黃色葡萄球菌革蘭氏染色顯微照片附圖2 金黃色葡萄球菌的平板菌落照片附圖3 金黃色葡萄球菌在BP平板上的菌落形態(tài)附圖4 志賀氏菌落在SS平板上的照片附圖5 大腸桿菌革蘭氏染色照片第五部分 乳與乳制品非常規(guī)指標(biāo)分析方法YLNB 5.1 乳與乳制品中黃曲霉毒素M1的檢測(cè)163YLNB 5.2 食品及飼料中黃曲霉毒素B1的檢測(cè)165YLNB 5.3 預(yù)混料中維生素C的含量的檢測(cè)（常規(guī)法）167YLNB 5.4 維生素C的檢測(cè)-169YLNB 5.5 奶酪中脂肪含量以及食鹽含量的檢測(cè)172YLNB 5.6 磷的檢測(cè) -177YLNB 5.7 DHA、AA的檢測(cè)-180YLNB 5.8 維生素B1的檢測(cè)-184YLNB 5.9 碘的檢測(cè)-187YLNB 5.10 維生素A、E的檢測(cè)-191YLNB 5.11 山梨酸、苯甲酸、糖精鈉的檢測(cè)-195YLNB 5.12 維生素B6的檢測(cè)-198YLNB 5.13 煙酸和煙酸銨的檢測(cè)-201YLNB 5.14 乳制品中鉀、鈉、鈣、鎂、鐵、鋅、銅和錳的檢測(cè)-204YLNB 5.15 乳制品中鉛的檢測(cè)-209YLNB 5.16 乳制品中總砷的檢測(cè)-212YLNB 5.17 乳制品中硒的檢測(cè)-215原料奶新鮮度和摻雜異物檢驗(yàn)方法 酒精實(shí)驗(yàn) YLNB 1.11. 原理 生鮮牛乳在酸度升高后，與等體積中性酒精混合后會(huì)出現(xiàn)絮片, 通過(guò)絮片的產(chǎn)生情況判定是否可通過(guò)該濃度的酒精。2. 試劑所有試劑均應(yīng)為分析純；實(shí)驗(yàn)用水至少應(yīng)是蒸餾水。 酒精：根據(jù)需要用分析純中性乙醇配制72%（v/v）, 75%（v/v），78%（v/v）的酒精（必要時(shí)配制74%（v/v）的酒精）。注：如酒精呈酸性，使用前可用0.1mol/l或1 mol/l NaOH進(jìn)行中和，中和時(shí)推薦使用5g/l酚酞指示劑。3. 器材3.1 平皿：直徑80-90 mm3.2 溫度計(jì)：檢定合格的玻璃溫度計(jì)或探測(cè)式溫度計(jì)3.3 酒精計(jì)：檢定合格的酒精計(jì)3.4 量筒：25 ml 3.5 吸管：2 ml。4. 方法4.1 準(zhǔn)確吸取2 ml牛奶于平皿中。注：a.該步驟開始后，應(yīng)將試驗(yàn)連續(xù)進(jìn)行下去直至完成，中間不得間斷； b.酒精加入混合均勻后，應(yīng)在30秒內(nèi)觀察結(jié)果。4.2 根據(jù)需要在加有奶樣的平皿中加入2 ml酒精，要邊加邊搖，使酒精與牛奶均勻混合，觀察是否有絮片生成（絮片無(wú)論大?。?。注：試驗(yàn)應(yīng)在20C的溫度下進(jìn)行，必要時(shí)擴(kuò)大取樣量和檢樣量。5. 結(jié)果判定出現(xiàn)絮片的牛乳為該濃度下的酒精試驗(yàn)陽(yáng)性乳?；厥醉?yè)原料奶新鮮度和摻雜異物檢驗(yàn)方法 美蘭實(shí)驗(yàn) YLNB 1.21.原理美蘭還原試驗(yàn)是用來(lái)判斷原料乳新鮮程度的一種色素還原試驗(yàn)。新鮮乳加入亞甲基蘭后染為藍(lán)色。如污染大量微生物產(chǎn)生還原酶使顏色逐漸變淺，直至無(wú)色，通過(guò)測(cè)定顏色變化時(shí)間，間接推斷出鮮奶的衛(wèi)生質(zhì)量。2.試劑亞甲藍(lán)水溶液：0.01g/300ml3.器材3.1 試管，20mm200mm3.2 水浴鍋：可恒溫到384.方法4.1 吸取10ml牛奶于滅菌試管中，在水浴中加熱到38，再加入亞甲基蘭溶液1ml，混勻。4.2 將試管放入水浴中，每30min觀察一次褪色情況，并記錄每個(gè)樣品褪色時(shí)間。5.結(jié)果判定通常，通過(guò)溶液的褪色時(shí)間可以估算出牛奶中細(xì)菌總數(shù)。（應(yīng)為開始退色的時(shí)間計(jì)）。6.影響因素6.1細(xì)菌的活性：由于原奶在實(shí)驗(yàn)前冷藏時(shí)間的延長(zhǎng)，傳統(tǒng)的適溫菌型（產(chǎn)酸菌的牛奶菌絲），逐漸轉(zhuǎn)換為嗜冷菌型（分解蛋白質(zhì)和脂肪的菌絲），脫色時(shí)間和細(xì)菌總數(shù)之間的相關(guān)性變?nèi)酢?.2溶液的退色時(shí)間與染色液的濃度有關(guān)。6.3此方法對(duì)體細(xì)胞（白細(xì)胞）及其他細(xì)胞的還原作用也敏感，因此還可檢驗(yàn)異常乳（乳房炎及初乳或末乳）。裉色時(shí)間相當(dāng)每ml牛乳中的細(xì)菌總數(shù)20min 2107 20-40min 1.0107-2.010740min-1小時(shí) 5.0106-1.01071小時(shí)-2小時(shí) 4.0106-5.01062小時(shí)-3小時(shí) 3.0106-4.01063小時(shí)-4小時(shí) 2.0106-3.01064小時(shí)-5小時(shí) 1.0106-2.01065小時(shí)-5.5小時(shí) 5.0105-1.01065.5小時(shí)-6.5小時(shí) 3.0105-5.01056.5小時(shí)-7.5小時(shí) 1.0105-3.0105 7.5小時(shí) 1.0105 注：此方法較適用于原料奶的驗(yàn)收檢驗(yàn)，所以一般時(shí)間控制在40分鐘之內(nèi)觀察為宜。 回首頁(yè)原料奶新鮮度和摻雜異物檢驗(yàn)方法 堿性物質(zhì)的檢出 YLNB 1.3方法一：玫瑰紅酸法（仲裁法）1.原理鮮奶中如摻堿，可使指示劑變色，根據(jù)顏色的不同，粗略判斷加堿量的多少。2.試劑玫瑰紅酸（0.05%乙醇溶液）：稱取0.05g玫瑰紅酸溶于100ml 95%的乙醇中。3.方法于盛有2ml牛乳的試管中加入2ml玫瑰紅酸溶液，搖勻，觀察顏色變化。4.結(jié)果判定正常色：如圖（1）（2）（3）（4）； （1） （2） （3） （4） 異常色：如下圖 （a量） （b量） （c量） 注明：（1）牛奶酸度及新鮮度影響最終顏色的判定，酸度越高、新鮮度越差最終顏色越黃 。 （2）最低檢測(cè)限：弱堿為0.02%強(qiáng)堿為0.006% 方法二：溴麝香草酚蘭法1.1原理鮮乳中如摻堿物質(zhì)，可使指示劑變色，由顏色的不同，大略判斷加堿量的多少。1.2器材試管：F 18180mm試管架吸管：2ml1.3試劑取0.04克溴百里香草酚蘭（溴麝香草酚蘭）溶于100ml95%分析純乙醇中。1.4方法取乳樣約2ml于小試管中，沿管壁慢慢加入指示劑約0.5ml，將試管輕輕斜轉(zhuǎn)2-3圈，然后垂直放置2分鐘后，觀察指示劑與樣品接觸面顏色特征以判定檢驗(yàn)結(jié)果。同時(shí)用不含堿的正常生鮮牛乳作空白對(duì)照。1.5結(jié)果判定正常奶：黃色摻堿奶：0.03%黃綠色 0.05%淡綠色 0.1%綠色 0.3%深綠色 0.5%青綠色 0.7%淡青色 1.0%青色 1.5%深青色1.6注意事項(xiàng)摻水乳（因水的PH大都在79之間）、摻洗衣粉乳（因洗衣粉中加有碳酸鈉）、乳房炎乳（因?yàn)榧?xì)菌分解乳酪蛋白產(chǎn)生氨及乳房代謝功能的改變而造成PH值升高）與摻堿指示劑的接觸面均可呈黃綠至淡綠色?；厥醉?yè)原料奶新鮮度和摻雜異物檢驗(yàn)方法 食鹽的檢出 YLNB 1.41. 原理鮮奶中氯化物與硝酸銀反應(yīng)，生成氯化銀沉淀，用鉻酸鉀指示劑，當(dāng)牛奶中的氯化物與硝酸銀作用后，過(guò)量的硝酸銀與鉻酸鉀生成磚紅色的Ag2CrO4 沉淀。2. 試劑2.1 9.6g/L硝酸銀溶液：取分析純硝酸銀置于105烘箱內(nèi)烘30min，取出放在干燥器內(nèi)冷卻后，稱取9.6g溶于1000ml蒸餾水中。2.2 100g/l鉻酸鉀溶液：稱取分析純鉻酸鉀10g溶于100ml蒸餾水中。注：硝酸銀溶液應(yīng)儲(chǔ)存于棕色試劑瓶備用。 3. 器材3.1 吸管：2 ml 3.2 試管：F 18 180 mm4. 方法取2ml牛乳于試管中，加入100g/l鉻酸鉀溶液5滴，搖勻，再加入9.6g/L硝酸銀溶液1.5ml，搖勻后，立即觀察結(jié)果。注：在加入硝酸銀后，應(yīng)立即觀察顏色，做出判定；否則，判定結(jié)果會(huì)偏高。5. 結(jié)果判定正常色： 摻鹽乳：呈黃色，且隨著摻入量的增多，顏色由土黃色向鮮黃色變化 （ (a量鹽） (b量鹽) (c量鹽)最低檢測(cè)限為0.05%6. 注意事項(xiàng)6.1試劑加入順序不同影響測(cè)定結(jié)果，先加入硝酸銀其結(jié)果偏高1020%，因此應(yīng)按“牛奶+指示劑+硝酸銀”或“指示劑+牛奶+硝酸銀”的順序進(jìn)行。6.2 日常試驗(yàn)應(yīng)盡量在20C左右的室溫下進(jìn)行，仲裁試驗(yàn)必須在20C條件下進(jìn)行。 回首頁(yè)原料奶新鮮度和摻雜異物檢驗(yàn)方法 亞硝酸鹽和硝酸鹽檢出 YLNB 1.5方法一：固體試劑法1. 原理鮮奶中的亞硝酸鹽與顯色試劑作用，形成紅色的化合物；鮮奶中的硝酸鹽被還原成亞硝酸鹽后，再與顯色試劑形成紅色化合物。2. 試劑哈爾濱龍澤科技有限公司的鮮奶亞硝酸鹽和硝酸鹽試劑。（使用之前要對(duì)該試劑驗(yàn)證，確保藥品的有效性）3. 方法取鮮奶亞硝酸鹽或硝酸鹽試劑（按試劑說(shuō)明添加）到試管中，加入被檢奶樣，振蕩混合均勻，必要時(shí)加熱溶解，5-10分鐘內(nèi)觀察結(jié)果。4. 結(jié)果判定：正常乳：呈無(wú)色摻亞硝酸鹽或硝酸鹽乳：呈粉紅色，且由摻入量的增加，顏色逐漸加深。（a量）（b量） 最低檢測(cè)限：硝酸鹽為2*10-6亞硝酸鹽為：10-85. 注意事項(xiàng)5.1.1 藥品瓶必須用顏色較深的紙包好避光保存。5.1.2 藥品置于干燥的環(huán)境中保存，最好放在干燥器中。5.1.3 已打開包裝的藥品要密封好后于干燥器中避光保存，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)塊現(xiàn)象應(yīng)立即停止使用。5.1.4 硝酸鹽檢測(cè)時(shí)，所加硝鹽試劑要足量（約0.3克），要使試劑和樣品充分混勻后，應(yīng)在5分鐘內(nèi)觀察結(jié)果。方法二：液體試劑法（仲裁法）1.試劑1.1顯色劑：稱取對(duì)氨基苯磺酸0.6g,甲萘胺0.2g，甲萘酚0.1g,溶于400ml 50%的醋酸溶液中，置棕色試劑瓶中保存。1.2還原劑：硫酸鋇44.0g, 硫酸錳5.0g, 鋅粉1.0g, 混合在一起，干燥研磨成細(xì)粉末，密閉保存。2.方法：吸取2.0ml牛乳于試管中，加入還原劑約0.1g混勻（亞硝酸鹽檢測(cè)不加還原劑），加顯色劑0.51.0 (ml)搖勻， 5-10分鐘內(nèi)觀察結(jié)果。3. 結(jié)果判定：摻假乳：微粉水粉粉紅紅色（根據(jù)顏色的深淺判斷硝酸鹽和亞硝酸鹽含量的大小）正常乳：無(wú)色4. 注意事項(xiàng)：還原劑配制時(shí)，一定要研磨均勻，否則會(huì)嚴(yán)重影響硝酸鹽檢測(cè)?；厥醉?yè)原料奶新鮮度和摻雜異物檢驗(yàn)方法糊精類物質(zhì)的檢出 YLNB 1.6 1.試劑： B試劑，C試劑（由內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)提供）2.方法2.1取一定體積的被檢奶樣置于高速的離心機(jī)上離心（轉(zhuǎn)速為4000r/min）20分鐘，去除浮在上面的脂肪；2.2在剩余的乳樣中加入冰醋酸（每50ml加2.3-2.5ml）搖勻，再次離心（同上），棄去沉淀，收集乳清；2.3在收集的乳清中加入B試劑（每5ml乳清加0.6mlB試劑），繼續(xù)離心，棄去沉淀，收集上清液，將其作為待測(cè)檢樣；2.4取1ml乳清于小試管中加C試劑3ml，搖勻。3.結(jié)果判定正常乳：沒(méi)有沉淀產(chǎn)生或搖勻后為澄清透明的液體。摻糊精乳：混濁的液體。最低檢出限為0.05% 。4注意事項(xiàng)1、脂肪必須去除干凈，特別是油滴層。2、吸取上清液時(shí)不要觸及底部的沉淀物。3、得到乳清液必須澄清，否則需要相應(yīng)增加B試劑的使用量，至達(dá)到澄清為止。4、加入C試劑混合均勻后2分鐘內(nèi)?；厥醉?yè)原料奶新鮮度和摻雜異物檢驗(yàn)方法 淀粉的檢出 YLNB 1.71. 原理：淀粉遇碘呈蘭色反應(yīng)。2. 試劑KII試劑：碘化鉀20g加碘5g先用大約20ml的蒸餾水溶解，然后定容至250ml。3. 方法取乳2ml，加熱煮沸，觀察乳液是否有沉積現(xiàn)象，冷卻后加入3-5滴KII試劑。4. 判定結(jié)果正常奶：呈黃色；摻淀粉奶：呈藍(lán)色或青藍(lán)色沉淀物出現(xiàn)。正常色： 摻淀粉奶：呈蘭色，且顏色深淺與摻入量成正比。a量： b量： c量： 回首頁(yè)原料奶新鮮度和摻雜異物檢驗(yàn)方法 硫酸鹽的檢出 YLNB 1.81. 原理鮮奶中的硫酸鹽與氯化鋇形成硫酸鋇沉淀，過(guò)量的鋇離子與玫紅酸鈉反應(yīng)生成玫紅酸鋇呈玫瑰紅色。若鮮奶中摻入硫酸鹽后，因氯化鋇被硫酸鹽全部沉淀，無(wú)游離的鋇離子，因而不能與玫紅酸反應(yīng)，故呈黃色。2. 試劑2.1 稱取氯化鋇3克，加蒸餾水少許溶解后，加濃鹽酸20ml，加蒸餾水至250ml。2.2 玫紅酸鈉1克，氯化鈉49克，干燥研磨至粉末狀，密閉保存。3. 方法取乳2ml于小試管中，加入玫紅酸鈉指示劑約0.3克混勻，加氯化鋇溶液45滴混勻，放置35分鐘后觀察結(jié)果。4結(jié)果判定正常乳：呈玫瑰紅色；摻入硫酸鹽乳呈黃色或土黃色。最低檢出量：0.1%。5注意事項(xiàng)5.1 嚴(yán)格控制酸度，酸度過(guò)大易褪色，酸度不足不顯色。5.2 對(duì)不能判定奶樣可取奶10ml，加10%氯化鋇溶液0.51ml離心沉淀，正常鮮奶沉淀物很少，摻硫酸鹽奶有較多量硫酸鋇沉淀。5.3玫紅酸鈉與氯化鈉混合后，研磨至粉末狀，防止吸潮?；厥醉?yè)原料奶新鮮度和摻雜異物檢驗(yàn)方法 蔗糖的檢出 YLNB 1.91. 原理蔗糖在酸性溶液中水解產(chǎn)生的果糖與溶于強(qiáng)酸內(nèi)的間苯二酚溶液加熱后顯紅色沉淀反應(yīng)。2. 試劑稱取間苯二酚0.4克用少量蒸餾水溶解，加濃鹽酸200ml，再加蒸餾水稀釋至600ml置棕色瓶，現(xiàn)用現(xiàn)配。 3. 方法取間苯二酚鹽酸溶液1.5ml于小試管中，加鮮乳5滴，水浴加熱煮沸2.5分鐘，觀察結(jié)果。4. 結(jié)果判定 正常色：如圖A 圖A摻蔗糖乳： a量：如圖B 圖B b量：如圖C 圖Cc量：如圖D 圖D5.注意事項(xiàng)5.1 鹽酸濃度不能高也不能低否則影響顯色反應(yīng)。5.2 試劑須置棕色瓶中，配制及貯存過(guò)程中被有機(jī)物污染，顏色變黃或變紅則不能使用。5.3 加熱時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，其它醛類糖也能產(chǎn)生淺紅色的反應(yīng)。回首頁(yè)原料奶新鮮度和摻雜異物檢驗(yàn)方法 尿素的檢出 YLNB 1.101.原理尿素與二乙酰肟在酸性條件下，經(jīng)鎘離子（或三價(jià)鐵離子）的催化產(chǎn)生縮合，并在氨基硫脲存在下，生成3，5，6三甲基1，2，4三胺的紅色復(fù)合物。2.試劑2.1 酸性試劑：在1升容量瓶中加入蒸餾水約100ml，然后加入濃硫酸44ml及85%磷酸66ml，冷卻至室溫后，加入硫氨脲30mg，硫酸鎘2克溶解后用蒸餾水稀釋至1000ml。貯棕色瓶中冰箱內(nèi)保存半年不變。2.2 2%二乙酰肟試劑：稱取二乙酰一一肟2克，溶于100ml蒸餾水中。貯棕色瓶中放置冰箱內(nèi)，可保存半年不變。2.3 應(yīng)用液：取酸性試劑90ml加2%二乙酰一一肟10ml混合均勻，即可使用。3. 方法取應(yīng)用液1ml于試管中，加鮮奶一滴加熱煮沸約1分鐘后觀察結(jié)果。4結(jié)果判定正常：無(wú)色或微紅色；摻入尿素或尿的奶立即呈深紅色。摻入量越大，顯色越快，紅色越深；最低檢出限為0. 03 % 。注：正常奶煮沸時(shí)間超過(guò)2分鐘，也可出現(xiàn)淡紅色?；厥醉?yè)原料奶新鮮度和摻雜異物檢驗(yàn)方法 飴糖（糖稀）及葡萄糖的檢出 YLNB 1.111. 原理飴糖中的葡萄糖被葡萄糖氧化酶氧化生成葡萄糖酸及過(guò)氧化氫；后者在過(guò)氧化物酶的作用下，使還原性氧受體鄰聯(lián)甲苯銨氧化成蘭色化合物。2.方法用醫(yī)院用來(lái)檢驗(yàn)?zāi)蛱怯玫哪蛱窃嚰垳y(cè)試。3.結(jié)果判定按照尿糖試紙上的要求進(jìn)行判定。大于0含量即判定為陽(yáng)性。最低檢測(cè)限為0.05% ?；厥醉?yè)原料奶新鮮度和摻雜異物檢驗(yàn)方法 甲醛的檢出 YLNB 1.121. 原理 甲醛常被作為防腐劑而摻入牛乳中，鮮奶中的甲醛在酸性溶液中與三氯化鐵產(chǎn)生紫色反應(yīng)。 2. 試劑稱取0.2g三氯化鐵溶于100ml濃鹽酸中。3. 器材3.1 吸管：2ml，0.5 ml 3.2 試管：F 18 180 mm3.3 試管架3.4可調(diào)式電爐4. 方法取乳樣2ml于小試管中，加入三氯化鐵鹽酸溶液0.5ml，混勻于沸水中水浴1分鐘，觀察顏色。5. 結(jié)果判定正常：呈黃色或淡黃褐色。 摻甲醛乳：呈紫色。最低檢出量1/4000。有些涂料中含有甲醛或甲醛的衍生物，亦可檢出?；厥醉?yè)原料奶新鮮度和摻雜異物檢驗(yàn)方法硫代硫酸鈉、焦亞硫酸鈉的檢出 YLNB 1.131.原理硫代硫酸鈉（Na2S2O3）、焦亞硫酸鈉（Na2S2O5）都具有強(qiáng)烈的還原性和漂白作用，它們能把碘（I2）還原成碘離子（I），從而使碘失去了遇淀粉變藍(lán)的能力。2.試劑1）碘-碘化鉀溶液：7g碘與18g碘化鉀溶于100ml水中，稀釋至1000ml。貯存于棕色試劑瓶中，避光保存。2) 10g/L淀粉指示劑，現(xiàn)用現(xiàn)配。3.方法 取2ml牛奶，加入2滴淀粉指示劑，搖勻后，加入0.05ml碘一碘化鉀溶液，立即搖勻后觀察顏色。4. 結(jié)果判定正常乳：藍(lán)色（下圖的顏色均為正常色）摻假乳：乳白色或灰白色（如下圖）最低檢測(cè)限：硫代硫酸鈉為0.02 %。 焦代硫酸鈉為0.01 %。附加說(shuō)明正常色（藍(lán)色）不可能把所有的藍(lán)顏色都逐一的列出來(lái)，只要是藍(lán)色系列均為正常色。注意事項(xiàng)1、樣品和試劑的加入量要求準(zhǔn)確加入，并且在加入碘-碘化鉀溶液時(shí)必須讓溶液完全與樣品混合，不能掛在管壁上。2、淀粉指示劑必須澄清、有效。3、搖勻后立即觀察?；厥醉?yè) 原料奶新鮮度和摻雜異物檢驗(yàn)方法 過(guò)氧化氫的檢出 YLNB 1.14 方法一：半定量試紙條法： 1. 原理過(guò)氧化氫酶將過(guò)氧化氫的氧轉(zhuǎn)移至有機(jī)的氧化還原指示劑，形成一種藍(lán)色的氧化產(chǎn)物。2. 器材半定量試紙條3. 方法3.1取下一試紙條后，立即密封保存管。3.2將試紙條浸入待測(cè)溶液一秒種，將反應(yīng)區(qū)充分浸潤(rùn)。3.3輕輕移開試紙條，抖落過(guò)量的水分，15秒后將反應(yīng)區(qū)的顏色與標(biāo)準(zhǔn)比色條對(duì)比。4. 結(jié)果判定 通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)色對(duì)比，確定牛乳中的過(guò)氧化氫含量，如發(fā)現(xiàn)檢測(cè)中的試紙的藍(lán)色過(guò)深，是由于過(guò)氧化氫的含量過(guò)高而導(dǎo)致。5. 注意事項(xiàng) 未開啟包裝的試紙條應(yīng)在冰箱中保存，開封后應(yīng)盡可能干燥低溫保存。盡量保存在1025下。方法二：碘化鉀淀粉方法1.原理過(guò)氧化氫在酸性條件下，能使碘化物氧化析出碘，KII與淀粉反應(yīng)呈藍(lán)色。2.試劑a.淀粉溶液：溶解3g可溶性淀粉于10ml水中，然后將其慢慢倒入100ml沸水中，邊加邊攪拌，溶解完全后，使溶液冷卻?，F(xiàn)用現(xiàn)配。b.碘化鉀淀粉溶液：將3g碘化鉀溶解于5ml水中，將其倒入淀粉溶液中，攪拌均勻?，F(xiàn)用現(xiàn)配。c硫酸溶液， 濃硫酸:水=1:1 3. 方法吸取1ml鮮奶于試管中，加入0.2ml碘化鉀淀粉溶液，混勻。加入硫酸溶液1滴，搖勻，1分鐘內(nèi)觀察顏色變化。4. 結(jié)果判定正常乳：呈乳白色，參考下圖摻防腐劑乳：呈藍(lán)色，且隨著摻入量的增加顏色逐漸加深。參考下圖H2O2含量色卡編號(hào)H2O2含量色卡編號(hào)1.0350U0.092758U0.9349U0.08259U0.8357U 0.072685U0.7341U 0.06289U 0.63288U0.05272U0.53302U 0.04271U0.43035U 0.03263U0.3303U 0.02無(wú)0.2282U 0.01無(wú)0.12768U0.00無(wú)回首頁(yè)原料奶新鮮度和摻雜異物檢驗(yàn)方法 水解蛋白的檢出 YLNB 1.151. 器材1.1 量筒10 mL、100 mL、250 mL1.2 具塞刻度比色管10 mL1.3 小燒杯50 mL1.4 移液管1 mL、5 mL1.5 濾紙11 cm1.6 比色管架1.7 容量瓶（棕色）250 mL、100 mL1.8 玻璃棒1.9 小牛角勺1.10 吸水紙2. 試劑2.1 打底標(biāo)樣（簡(jiǎn)稱“底標(biāo)”）配制：含3 水解蛋白粉奶樣配制方法，用精密天平（萬(wàn)分之一感量），用50 mL潔凈干燥小燒杯稱取水解蛋白粉0.750 g，然后用自產(chǎn)新鮮未摻假牛奶少量多次（每次30-40 mL鮮奶）溶解，并無(wú)損轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，最后用同種鮮奶定容至250 mL刻度，蓋上瓶塞，反復(fù)顛倒振搖50次以上，以保證充分溶解并混勻。2.2 5%汞（）鹽溶液：用潔凈小燒杯在天平上稱取硝酸汞（AR級(jí)）試劑12.5 g，小心地用10 mL量筒量取4 mL濃硝酸倒入小燒杯中，進(jìn)而加蒸餾水溶解并無(wú)損轉(zhuǎn)移至250 mL棕色容量瓶中（用少許蒸餾水沖洗小燒杯3-4次均轉(zhuǎn)移至容量瓶中），最后用蒸餾水定容至250 mL，搖勻。2.3 飽和苦味酸溶液：用小牛角勺取苦味酸兩小勺，小心地置入100 mL棕色容量瓶中，用洗瓶沖洗試劑至瓶下部，再加入蒸餾水至刻度，反復(fù)振搖50次，并放置過(guò)夜使之達(dá)到溶解平衡即為飽和溶液（注意觀察容量瓶底部始終應(yīng)有固體試劑殘留才為飽和狀態(tài)）。3.方法取10 mL具塞比色管若干支，編號(hào)后置于比色管架上，用1 mL移液管吸取1.00 mL“底標(biāo)”奶液注入每支比色管中，再用5ml移液管吸取待測(cè)奶樣4.00 mL注入加標(biāo)比色管中，注意記錄樣號(hào)與管號(hào)對(duì)應(yīng)關(guān)系，然后蓋塞充分振蕩混勻樣品。用另一支5 mL移液管吸取5 %硝酸汞溶液5.00 mL依次加入各樣品管中，蓋塞搖勻，等待5分鐘（在此期間，準(zhǔn)備好與比色管相同個(gè)數(shù)的50 mL潔凈小燒杯，折好濾紙置各燒杯上）后，將各比色管中奶樣倒入濾紙中進(jìn)行無(wú)漏斗過(guò)濾操作，約2分鐘后，各燒杯中濾液即達(dá)5 mL以上，此時(shí)棄去濾紙及其內(nèi)容物，用另一5 mL移液管分別移取濾液各2.00 mL分別注入另一組（即比色管架上已備好的另一排10mL比色管）中，再用一支5 mL移液管吸取2.00 mL飽和苦味酸溶液分別加入各個(gè)盛濾液比色管中，蓋塞搖勻，然后在白色或黑白相間或透明空間背景下觀察混濁情況，若有淡黃色渾濁出現(xiàn)即為陽(yáng)性。操作時(shí)以未摻假鮮奶做對(duì)照，即移取該奶樣4.00 mL注入編為“0”號(hào)的比色管中，加入5 mL汞鹽試液，以下操作同于樣品檢測(cè)。4. 檢測(cè)原理及有關(guān)說(shuō)明4.1 加入汞鹽即可使乳中蛋白質(zhì)變性凝聚，通過(guò)過(guò)濾操作即可除去，但水解蛋白與汞鹽不發(fā)生沉淀反應(yīng)，通過(guò)該步驟即可實(shí)現(xiàn)乳中固有蛋白與人為加入的蛋白質(zhì)成分分離。4.2 因苦味酸具有比汞鹽更強(qiáng)的沉淀作用，其與水解蛋白中的堿性基團(tuán)（氨基）作用即可形成難溶的有機(jī)鹽類沉淀，故使體系出現(xiàn)渾濁，當(dāng)水解蛋白粉在奶樣中含量高于1 %時(shí)，此操作步驟則會(huì)較快出現(xiàn)淺黃色沉淀析出的現(xiàn)象。4.3 任何難溶物均具有與溫度密切相關(guān)的溶度積常數(shù)，水解蛋白粉與苦味酸的作用也不例外，操作中給待檢樣中加入“底標(biāo)奶樣”是為了提高檢測(cè)方法的靈敏度，即通過(guò)該措施可以達(dá)到含量萬(wàn)分之五水解蛋白粉的奶樣穩(wěn)定檢出陽(yáng)性結(jié)果的目的。4.4苦味酸性狀：苦味酸化學(xué)名稱為2，4，6-三硝基苯酚，為黃色晶體或粉末，苦味有毒，密度1.763，熔點(diǎn)122，不易吸濕，難溶于冷水，較易溶于熱水、乙醇、氯仿、苯和乙醚。具有強(qiáng)烈爆炸性，是軍事上最早使用的一種烈性炸藥。易與多種金屬作用生成更易爆炸且危險(xiǎn)的苦味酸鹽，能與有機(jī)堿生成難溶晶體鹽類。本身是一種酸性染料，在工業(yè)上也用于制造其它染料和照像藥品，在醫(yī)療上則做為外科收斂劑?；厥醉?yè)原料奶新鮮度和摻雜異物檢驗(yàn)方法 乳中不溶性物質(zhì)的檢出 YLNB 1.161. 原理 牛乳中如果摻雜了石膏，滑石粉等不溶于牛乳的物質(zhì)，在一定速度和時(shí)間內(nèi)用離心機(jī)進(jìn)行離心后，由于其比重較大，會(huì)沉淀于離心管的底部，通過(guò)觀察沉淀的多少，來(lái)判斷是否為正常牛乳。2. 儀器及器材2.1 離心機(jī)：有速度顯示器，有適合于離心管（3.2）并可向外轉(zhuǎn)動(dòng)的套管，轉(zhuǎn)速可達(dá)到1000r/min 2.2 離心管：錐形，標(biāo)有刻度，最大容量50 ml ，最小刻度0.1ml3. 方法3.1 將采好的牛乳樣品攪拌均勻，并將溫度調(diào)為20，將牛乳倒入離心管至30ml刻度處。3.2 將離心管放入離心機(jī)中（要對(duì)稱放置），使離心管迅速旋轉(zhuǎn)，以1000r/min的轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)5min。3.3 取出離心管，倒出上清液，加15ml 20蒸餾水，用攪拌棒充分?jǐn)嚢韬?，倒入蒸餾水至30ml刻度處。3.4 將離心管放入離心機(jī)中，以1000r/min的轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)3min。注：將離心管放入離心機(jī)中，使離心管的刻度線在離心機(jī)旋轉(zhuǎn)時(shí)既不朝上也不朝下，而是處于中間位置。這樣即使沉淀物頂部?jī)A斜，沉淀物也很容易估算。3.5 取出離心管，豎直握住離心管，以適當(dāng)背景為對(duì)照，使眼睛與沉淀物頂部平齊，讀取沉淀物體積數(shù)。如果沉淀物頂部?jī)A斜，則估算其體積數(shù)（可以讀取傾斜面的1/2處刻度）。4. 結(jié)果判定正常乳：沉淀物體積0.1ml摻雜乳：沉淀物體積0.1ml 回首頁(yè)乳與乳制品常規(guī)理化指標(biāo)檢驗(yàn) 滴定酸度的檢測(cè) YLNB 2.1一、基準(zhǔn)法（仲裁法）1. 原理 將一定量的乳粉溶于水中，制成復(fù)原乳，或者吸取一定量的牛乳，用0.1mol/L氫氧化鈉滴定至pH為8.30，由此消耗的0.1mol/l氫氧化鈉溶液的毫升數(shù)可計(jì)算出滴定100ml牛乳或干物質(zhì)為12的復(fù)原乳所需的氫氧化鈉量。所需氫氧化鈉溶液的量隨產(chǎn)品中的自然緩沖物質(zhì)變酸或添加酸性或堿性物質(zhì)的量而變化。2. 試劑 所有試劑，如未注明規(guī)格，均指分析純；所有實(shí)驗(yàn)用水，如未注明其他要求，均指三級(jí)水。2.1 氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液：c(OH-)為0.1mol/l。保護(hù)此溶液，防止二氧化碳滲透。2.1.1 氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 將100g氫氧化鈉固體溶解到100ml無(wú)二氧化碳水中，制成飽和溶液，靜置，吸取上清液5.4ml于1000ml容量瓶中，用無(wú)二氧化碳水定容。2.1.2 氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)定執(zhí)行GB/T601-2002中的方法或下面的方法 稱取約0.18g于105110烘至恒重的鄰苯二甲酸氫鉀，準(zhǔn)確至0.1mg，用50ml無(wú)二氧化碳水溶于250ml三角瓶中，加兩滴5g/l的酚酞指示劑，用配好的氫氧化鈉溶液地滴定至粉紅色，同時(shí)做空白實(shí)驗(yàn)。氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為： m c(NaOH)= (V-V0)*0.2042式中：c(NaOH)氫氧化鈉的濃度，mol/lm 稱取的鄰苯二甲酸氫鉀的質(zhì)量，gV 氫氧化鈉的用量，mlV0 空白實(shí)驗(yàn)氫氧化鈉溶液的用量，ml2.2 酚酞溶液：取0.5g酚酞溶于75ml體積分?jǐn)?shù)為95的乙醇中，并加入20ml水，然后再加入氫氧化鈉溶液（2.1），直至加入一滴立即變成粉紅色，再加入水定容至100ml。2.3 氮?dú)?. 儀器及器材3.1 天平：靈敏度為0.01g或更高。3.2 電位滴定儀或pH計(jì)：帶電極，（使用之前需進(jìn)行校正）3.3 量筒：100ml3.4 三角瓶：250ml，帶磨口和玻璃塞，頸部可容納電極，一個(gè)滴定管頭和一根氮?dú)夤堋?. 方法4.1樣品處理4.1.1 原料奶和液態(tài)奶樣品：吸取10ml原料奶或液態(tài)奶樣品于三角瓶中，加入20ml無(wú)二氧化碳蒸餾水，同時(shí)做空白。4.1.2 酸奶類樣品：準(zhǔn)確稱取5g左右樣品于三角瓶中，加入40ml40無(wú)二氧化碳蒸餾水，溶解，同時(shí)做空白4.1.3 奶粉：稱取4g樣品于三角瓶中，準(zhǔn)確至10mg。用量筒量取96ml 20的無(wú)二氧化碳水，使樣品復(fù)原，劇烈攪拌，然后靜置20min，同時(shí)做空白。4.2 用pH7和pH9的緩沖溶液校準(zhǔn)電位滴定儀，將滴定終點(diǎn)設(shè)定為8.30。4.3 將盛有樣品溶液的三角瓶放于電位滴定儀的攪拌器上，打開攪拌器，然后用氫氧化鈉進(jìn)行滴定，當(dāng)?shù)竭_(dá)終點(diǎn)時(shí)，將自動(dòng)停止滴定。4.4 滴定的同時(shí)向三角瓶中吹氮?dú)?，防止溶液吸收空氣中的二氧化碳。整個(gè)滴定過(guò)程應(yīng)在1min內(nèi)完成。4.5 記錄消耗氫氧化鈉的毫升數(shù)。注：如沒(méi)有電位滴定儀，可用pH計(jì)代替。步驟：首先校準(zhǔn)pH計(jì)，然后將樣品溶液放于磁力攪拌器上，用滴定管向三角瓶中滴加氫氧化鈉溶液，直到pH值達(dá)到8.30，以下步驟同4.4和4.5。5. 結(jié)果計(jì)算5.1 原料奶或液態(tài)奶： 樣品的滴定酸度（0T）= 其中：C氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/LV1滴定時(shí)消耗的氫氧化鈉的體積，mlV0-空白實(shí)驗(yàn)時(shí)消耗的氫氧化鈉的體積，mlV-吸取樣品的體積，ml5.2 酸奶類樣品的滴定酸度（0T）=C氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/LV1滴定時(shí)消耗的氫氧化鈉的體積，mlV0-空白實(shí)驗(yàn)時(shí)消耗的氫氧化鈉的體積，mlm-稱取樣品的質(zhì)量，g5.3 奶粉： 樣品的滴定酸度（0T）式中：c 氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/LV 滴定時(shí)消耗的氫氧化鈉的體積，mlm 稱取樣品的質(zhì)量，gw 樣品中水分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，12 12g乳粉相當(dāng)100ml復(fù)原乳（脫脂乳粉應(yīng)為9，脫脂乳清粉為7）以上滴定酸度結(jié)果保留至小數(shù)點(diǎn)后一位。注：若以乳酸含量表示樣品的酸度，則樣品乳酸含量（g/100g）T0.009。T為樣品的滴定酸度；0.009為乳酸的換算系數(shù)。6. 允許差 本方法的重復(fù)性為由同一分析人員，同時(shí)或在短時(shí)間間隔內(nèi)，對(duì)同一樣品所做的兩次單獨(dú)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果之差不得超過(guò)1.0 0T。二、常規(guī)法1. 原理 將一定量的乳或奶粉復(fù)原乳，以酚酞作指示劑，堿性品紅或硫酸鈷作參比顏色，用0.1mol/L的氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至粉紅色，根據(jù)所消耗的毫升數(shù)可計(jì)算出滴定100ml乳或干物質(zhì)為12%的復(fù)原乳，所需的氫氧化鈉量。所需氫氧化鈉溶液的量隨產(chǎn)品中的自然緩沖物質(zhì)變酸或添加酸性或堿性物質(zhì)的量而變化。2. 試劑 所有試劑，如未注明規(guī)格，均指分析純；所有實(shí)驗(yàn)用水，如未注明其他要求，均指三級(jí)水。2.1 氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液：c（NaOH）為0.1mol/l。配制和標(biāo)定同基準(zhǔn)法2.1。2.2 參比溶液2.2.1 堿性品紅溶液：將0.005g堿性品紅溶于水中，并定容至100ml。2.2.2 硫酸鈷溶液：將3g七水硫酸鈷溶于水中，并定容至100ml。2.3 酚酞溶液：同基準(zhǔn)法2.2。3. 儀器及器材3.1 分析天平3.2 半微量滴定管：10ml，分刻度為0.05ml3.3 吸管：0.5ml，2ml，10ml3.4 量筒：20ml，100ml3.5 三角瓶：150ml，250ml4. 操作步驟4.1樣品處理4.1.1 原料奶和液態(tài)奶樣品：吸取10ml原料奶或液態(tài)奶樣品于三角瓶中，加入20ml無(wú)二氧化碳蒸餾水，同時(shí)做空白。4.1.2 酸奶類樣品：準(zhǔn)確稱取5g左右樣品于三角瓶中，加入40ml40無(wú)二氧化碳蒸餾水，溶解，同時(shí)做空白。4.1.3 奶粉：稱取4g樣品于三角瓶中，準(zhǔn)確至10mg。用量筒量取96ml 20的無(wú)二氧化碳水，使樣品復(fù)原，劇烈攪拌，然后靜置20min后，同時(shí)做空白。4.2 標(biāo)準(zhǔn)顏色制備4.2.1 液態(tài)奶樣品：吸取10ml樣品于150ml三角瓶中，加入20ml無(wú)二氧化碳水，加入3滴堿性品紅溶液，搖勻。4.2.2 酸奶類樣品: 稱取5g左右樣品于150ml三角瓶中，加入40ml40無(wú)二氧化碳水，溶解冷卻后加入3滴堿性品紅溶液，搖勻。4.2.3乳粉：將乳粉按照4.1.3復(fù)原后，在溶液中加入2ml硫酸鈷溶液，搖勻。如果要測(cè)定一系列相似的產(chǎn)品，則以上兩種標(biāo)準(zhǔn)色溶液可用于整個(gè)測(cè)定過(guò)程，但不得超過(guò)2h.4.3 樣品滴定4.3.1原料奶和液態(tài)奶樣品：將樣品按照4.1.1處理后，加入0.