醫(yī)院腫瘤體細(xì)胞免疫治療1、 背景：據(jù)世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究中心報告，由于人口老齡化、地球環(huán)境惡化、吸煙等不良因素影響，導(dǎo)致全球癌癥人數(shù)猛增。目前，每年新增癌癥患者約1000萬人，其中530萬為男性，470萬為女性。與1990年相比，全球癌癥患者的發(fā)病率增長了19，死亡率增長了18。我國居民醫(yī)生罹患癌癥概率22%，因癌癥死亡率13%。每年新發(fā)腫瘤病例312萬例，死亡病例達(dá)到270萬例。每分鐘有6人被診斷為惡性腫瘤，每7人中會有1人因癌癥死亡?？箰盒阅[瘤的傳統(tǒng)治療手段包括：手術(shù)、化療及放療，但療效仍不盡人意。主要表現(xiàn)為治療的有效率低，毒副作用明顯。因而，十分有必要尋找更加安全有效的癌癥治療方法。隨著腫瘤生物學(xué)、分子生物學(xué)和免疫學(xué)的發(fā)展，免疫治療是目前最有希望取得突破的治療手段，并已成為繼傳統(tǒng)腫瘤治療方法（手術(shù)、化療、放療）后的第4種腫瘤治療模式。特別是抗腫瘤的樹突狀細(xì)胞（Dendritic cells, DC）治療，尤其是2010年4月29日美國FDA正式批準(zhǔn)第一個細(xì)胞治療藥物Provenge上市銷售，該產(chǎn)品使用腫瘤患者自體DC細(xì)胞，使用抗原蛋白刺激DC的方法制造主動性細(xì)胞免疫治療產(chǎn)品，用于抗前列腺癌的DC 治療，標(biāo)志著DC細(xì)胞自體治療開始進(jìn)入了腫瘤治療的主流，是細(xì)胞治療技術(shù)及產(chǎn)品發(fā)展的一個重要的里程碑。由于體細(xì)胞治療的先進(jìn)性，該技術(shù)已經(jīng)被國家衛(wèi)生部列為第三類醫(yī)療技術(shù)。國內(nèi)正在開展此類技術(shù)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)超過800家。腫瘤的細(xì)胞免疫治療已經(jīng)成為未來發(fā)展的重點(diǎn)方向之一。由于醫(yī)療改革的變化，醫(yī)院對于藥品比例的要求越來越嚴(yán)格，提升診療費(fèi)用可以降低藥品占醫(yī)院收入的比例，可以讓醫(yī)院更加靈活的選擇藥品進(jìn)行治療。2、 市場潛力全國每年300萬新增腫瘤患者，每年腫瘤患者保有量450萬以上。幾乎所有患者都會就診。每年全國死亡患者超過170萬，而新發(fā)患者經(jīng)過治療也存在復(fù)發(fā)風(fēng)險。目前的放化療方式可以輔助手術(shù)治療解決一部分腫瘤治療問題，但是仍然存在復(fù)發(fā)情況。多種腫瘤治療方法聯(lián)合治療將給腫瘤患者帶來福音。廣東中山腫瘤醫(yī)院每個月的細(xì)胞免疫患者數(shù)量達(dá)到800人，每個月為醫(yī)院創(chuàng)造收益達(dá)到數(shù)千萬。潛力巨大。3、 國內(nèi)腫瘤細(xì)胞免疫診療現(xiàn)狀自從20世紀(jì)90年代LAK細(xì)胞治療開始，腫瘤細(xì)胞免疫治療經(jīng)歷了一個長時間的技術(shù)演化期。最初的LAK細(xì)胞由于其理念的先進(jìn)性受到了國內(nèi)大量醫(yī)療機(jī)構(gòu)和醫(yī)學(xué)專家的追捧，但經(jīng)過一段時間的應(yīng)用證實(shí)，LAK細(xì)胞治療并不能比單純IL-2治療擁有更好的有效性。細(xì)胞免疫就此降溫，而起療效不理想的印象卻被大量醫(yī)生所了解。隨著科學(xué)發(fā)展，NK、CIK等非特異性、非靶向腫瘤細(xì)胞免疫治療技術(shù)在國內(nèi)外興起。但其非特異性的性質(zhì)造成療效仍然不理想和免疫反應(yīng)等副作用。但由于其商業(yè)利益的存在和對患者生活質(zhì)量的改善等優(yōu)勢，至今，仍有很多醫(yī)院仍然應(yīng)用。全國和國家發(fā)改委現(xiàn)行最普遍的價格標(biāo)準(zhǔn)就是按照CIK治療進(jìn)行設(shè)定的。多靶點(diǎn)細(xì)胞免疫治療技術(shù)正在逐漸獲得行業(yè)認(rèn)可。目前臨床使用最多的是重組腺相關(guān)病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的抗原致敏樹突狀細(xì)胞激活細(xì)胞毒性細(xì)胞的多靶點(diǎn)T細(xì)胞治療技術(shù)（ACTLTM）。該技術(shù)已經(jīng)在中山腫瘤醫(yī)院、天津腫瘤醫(yī)院、南方醫(yī)科大學(xué)附屬南方醫(yī)院等大型醫(yī)院進(jìn)行過臨床應(yīng)用和臨床試驗，初步驗證了其有效性和安全性。國際腫瘤細(xì)胞免疫治療發(fā)展目前國際上對于細(xì)胞免疫治療腫瘤的臨床操作方法各異。在美國是以藥品形式進(jìn)行申報。目前已經(jīng)批準(zhǔn)的是Provenge公司的DC產(chǎn)品。日本主要以企業(yè)和醫(yī)院合作的模式進(jìn)行腫瘤細(xì)胞免疫治療。ACTL技術(shù)曾經(jīng)成功應(yīng)用于斯坦曼教授的胰腺癌治療并取得了良好的成果。很多臨床研究正在進(jìn)行中，主要集中在腫瘤多抗原刺激T細(xì)胞產(chǎn)生的靶向殺傷作用、通過基因技術(shù)改善T細(xì)胞受體（TCR）等方面。腫瘤特異性細(xì)胞免疫治療技術(shù)主要有以下四種，主要也是圍繞著腫瘤的核心殺傷細(xì)胞，T細(xì)胞展開的。4、 醫(yī)院發(fā)展腫瘤細(xì)胞免疫治療的必要性從社會效益上講，選擇開展細(xì)胞免疫腫瘤治療可以給醫(yī)院提供更多的治療手段，使患者得到更好治療，同時進(jìn)一步提升醫(yī)院的學(xué)術(shù)地位和影響力。從經(jīng)濟(jì)利益上講，開展細(xì)胞免疫腫瘤治療可以吸引更多患者，可以獲得更多的治療收益。將來可以利用生物實(shí)驗室進(jìn)行腫瘤篩查等服務(wù)，為醫(yī)院創(chuàng)造更多收入。在細(xì)胞免疫治療的開展同時，醫(yī)院也可以獲得細(xì)胞免疫治療的一部分收入。從學(xué)術(shù)利益上講，細(xì)胞免疫治療腫瘤還屬于前沿科學(xué)。作為轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)，可以為醫(yī)院在前沿學(xué)科帶來更多學(xué)術(shù)課題。依托醫(yī)院的規(guī)?；?yīng)，通過大量患者的診治，可以在海外學(xué)術(shù)?？l(fā)表文章，帶來更多學(xué)術(shù)成果，提升醫(yī)院學(xué)術(shù)地位。5、 公司產(chǎn)品NK、CIK、LAK細(xì)胞屬于非靶向治療技術(shù)，效應(yīng)細(xì)胞數(shù)量不易評估，目前療效評價不理想，技術(shù)落后。自DC發(fā)現(xiàn)后，產(chǎn)生大量DC細(xì)胞治療產(chǎn)品?？乖D(zhuǎn)導(dǎo)方式包括：DC細(xì)胞直接增殖、腫瘤裂解液刺激、短肽轉(zhuǎn)導(dǎo)、腺病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)、逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)、重組腺相關(guān)病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)（rAAV）、長肽轉(zhuǎn)導(dǎo)等。由于抗原遞呈受抗原大小、抗原的抗原性、單核細(xì)胞吞噬和外排情況、抗原負(fù)載產(chǎn)品的安全特性等的影響，選擇高效抗原轉(zhuǎn)導(dǎo)能力的rAAV因其凸顯的抗原轉(zhuǎn)導(dǎo)能力強(qiáng)、安全、靶向性強(qiáng)等優(yōu)勢逐漸被行業(yè)認(rèn)可。1. ACTLTM技術(shù)由rAAV轉(zhuǎn)導(dǎo)的抗原致敏樹突狀細(xì)胞激活的T淋巴細(xì)胞治療技術(shù)已經(jīng)治療了大量的腫瘤患者?；颊吣褪芰己谩⒛[瘤轉(zhuǎn)移灶和腫瘤負(fù)載均明顯下降。目前已經(jīng)在廣東和湖北獲得了醫(yī)保報銷，使更多患者得到了有效治療。ACTLTM技術(shù)原理如下圖：（通過負(fù)載了腫瘤特異抗原的重組腺相關(guān)病毒感染分離的人體單個核細(xì)胞，體外培養(yǎng)產(chǎn)生樹突狀細(xì)胞；樹突狀細(xì)胞通過抗原遞呈過程形成具有腫瘤抗原表達(dá)的活化的細(xì)胞毒性T細(xì)胞從而溶解腫瘤細(xì)胞）。ACTLTM制備流程圖如下：rAAV可規(guī)?；?fù)載的腫瘤抗原如下：a) 腺癌：ACTLCEA； ACTLHer-2/neu(c-erb b2)b) 鱗癌：ACTLCYFRA21-1: K19 或 CK19c) 乳腺癌：ACTLBA46; ACTL-Bcg1d) 肝癌：ACTLAFPe) 宮頸癌：ACTLE6-E7：HPV-16；-18f) 鼻咽癌：ACTLLMP-1g) 前列腺腺癌：ACTLPSA； ACTLPSMA； ACTLPAP；h) 多發(fā)性骨髓瘤：ACTLHM1.24i) 乳腺癌腫瘤-睪丸抗原(CT)SPANX: ACTL-SPANX: 黑色素瘤、肝癌、腸癌以及神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤等。j) 精子蛋白17(SP17)：ACTL-SP17; 骨髓瘤以及卵巢癌、宮頸癌和子宮內(nèi)膜癌等生殖系統(tǒng)腫瘤等。6、 公司的技術(shù)優(yōu)勢現(xiàn)有市場上有近500家醫(yī)院開展了相關(guān)細(xì)胞免疫治療技術(shù)。由于技術(shù)落后，很多醫(yī)療機(jī)構(gòu)的治療技術(shù)并不能達(dá)到最佳效果。我公司結(jié)合了傳統(tǒng)技術(shù)和國際領(lǐng)先的細(xì)胞治療技術(shù)，結(jié)合GMP規(guī)范化的細(xì)胞制備技術(shù)，提供高質(zhì)量的體細(xì)胞制備產(chǎn)品。公司相關(guān)技術(shù)優(yōu)勢如下：1. 強(qiáng)大的國際化研發(fā)團(tuán)隊：公司擁有強(qiáng)大的研發(fā)團(tuán)隊，主要科學(xué)家均具有非常豐富的海外研究背景。同時擁有國外專家顧問團(tuán)隊。2. 優(yōu)秀的細(xì)胞負(fù)載技術(shù)：由于多數(shù)腫瘤患者在接受細(xì)胞治療時均進(jìn)行了多項治療，因此，直接通過手術(shù)獲得患者腫瘤抗原比較困難。公司擁有多種腫瘤特異抗原，采取現(xiàn)金的rAAV負(fù)載和長肽負(fù)載多腫瘤抗原進(jìn)行腫瘤免疫治療，腫瘤治療針對性強(qiáng)。DC細(xì)胞的抗原表達(dá)率高于國內(nèi)應(yīng)用的一般技術(shù)。在全國甚至國際上具有領(lǐng)先優(yōu)勢。ACTL技術(shù)還獲得了多項中國和美國專利，中國專利其中6項已授權(quán)，另有2項近期也即將授權(quán)。專利號專利名稱授權(quán)國家US 6,153,436 AMETHOD OF GENE DELIVERY USING WILD TYPE ADENO-ASSOCIATED VIRAL (AAV) VECTORS WITH INSERTIONS美國US 6,495,361 B1METHOD OF PRODUCING INFECTIOUS PAPILLOMAVIRUS IN PLACENTAL CELLS美國US 6,506,600 B2SECRETING PRODUCTS FROM SKIN BY ADENO-ASSOCIATED VIRUS (AAV) GENE TRANSFER美國US 6,884,605 B2COMPOSITIONS, METHODS AND PRODUCTS COMPRISING HUMAN PAPILLOMAVIRUS FOR DETECTING ANDTREATING A CANCER美國EP1206563B1GENETICALLY ALTERED DENDRITIC CELLS TRANSDUCED WITH ADENO-ASSOCIATED VIRUS(AAV),METHODS OF PRODUCING SAID CELLS AND USES THEREOF歐洲200880012949.6一種重組腺相關(guān)病毒載體及其構(gòu)建方法與應(yīng)用中國201110125660.9一種Her-2/neu重組腺相關(guān)病毒載體及其構(gòu)建方法與應(yīng)用中國201110125697.1一種BA46重組腺相關(guān)病毒載體及其構(gòu)建方法與應(yīng)用中國201110125665.1一種LMP-1重組腺相關(guān)病毒載體及其構(gòu)建方法與應(yīng)用中國201110125683.X一種AFP重組腺相關(guān)病毒載體及其構(gòu)建方法與應(yīng)用中國201110125603.0一種PSA重組腺相關(guān)病毒載體及其構(gòu)建方法與應(yīng)用中國201110125643.5一種CEA重組腺相關(guān)病毒載體及其構(gòu)建方法與應(yīng)用中國201110125632.7一種PSMA重組腺相關(guān)病毒載體及其構(gòu)建方法與應(yīng)用中國3. 先進(jìn)的GMP管理規(guī)范：公司十分關(guān)注產(chǎn)品質(zhì)量，按照國家體細(xì)胞治療規(guī)范，嚴(yán)格遵照GMP要求進(jìn)行質(zhì)量管理。制定了大量標(biāo)準(zhǔn)管理流程。舉例如下：4. ACTL技術(shù)臨床安全性研究：重組腺相關(guān)病毒（rAAV）感染樹突狀細(xì)胞（DC）激活的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)對中國癌癥患者的臨床安全性研究Lijun Di Yulin Zhu Jun Jia Jing Yu Gonghong Song Jie Zhang Li Che Huabing Yang Yan Han Bo Ma Chunrong Zhang Yanhua Yuan Miaoning You Fengling Wan Xiaoli Wang Xinna Zhou Jun RenReceived: 14 October 2011 / Accepted: 6 December 2011 / Published online: 19 July 2012Federacion de Sociedades Espanolas de Oncologa (FESEO) 2012摘要目的 本研究的目的在于探索使用攜帶癌胚抗原（CEA）cDNA的重組腺相關(guān)病毒（rAAV）感染樹突狀細(xì)胞（DC）從而激活的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL）用于治療惡性腫瘤患者的安全性。結(jié)論 這些初步的數(shù)據(jù)顯示rAAV-DC免疫治療是耐受的，對于癌癥患者沒有嚴(yán)重不良反應(yīng)。5. 豐富的臨床應(yīng)用經(jīng)驗：rAAV轉(zhuǎn)導(dǎo)的ACTL技術(shù)已經(jīng)在全國多家知名醫(yī)院進(jìn)行了臨床應(yīng)用，擁有豐富的臨床經(jīng)驗。ACTL技術(shù)已經(jīng)獲得了廣東省的物價批準(zhǔn)并獲得了廣東和湖北省的醫(yī)保報銷。為了追求更多詢證醫(yī)學(xué)證據(jù)，公司還聯(lián)合廣東中山腫瘤醫(yī)院、天津腫瘤醫(yī)院等多家細(xì)胞免疫治療權(quán)威醫(yī)院進(jìn)行多項大規(guī)模臨床研究，正在申報國家科研立項。以下是臨床腫瘤治療結(jié)果介紹：1572例惡性腫瘤患者接受ACTL治療結(jié)果腫瘤類型總計有反應(yīng)治療無反應(yīng)死亡乳腺癌1801552524宮頸癌5641