1、一、一、 微生物微生物（一）特點(diǎn)（一）特點(diǎn)（二）類型（二）類型種類種類多；多；分布分布廣；易培養(yǎng)；廣；易培養(yǎng)；個(gè)體個(gè)體微??；微小； 結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單；簡(jiǎn)單；繁殖繁殖快；快；代謝代謝強(qiáng)；強(qiáng)；易易變異。變異。微微生生物物原核原核: :真核真核非細(xì)胞類：非細(xì)胞類：細(xì)菌、細(xì)菌、放線菌、放線菌、支原體、支原體、藍(lán)藻藍(lán)藻等等酵母菌、酵母菌、霉菌等霉菌等真菌：真菌：原生原生生物生物病毒、類病毒、朊病毒等病毒、類病毒、朊病毒等顯微顯微藻類：衣藻、小球藻等藻類：衣藻、小球藻等原生動(dòng)物原生動(dòng)物：草履蟲(chóng)、變形蟲(chóng)等：草履蟲(chóng)、變形蟲(chóng)等1. 1. 球菌球菌2. 2. 桿菌桿菌3. 3. 螺旋菌螺旋菌肺炎雙球菌肺炎雙球菌金黃色

2、葡萄球菌金黃色葡萄球菌乳酸鏈球菌乳酸鏈球菌大腸桿菌大腸桿菌蘇云金芽孢桿菌蘇云金芽孢桿菌枯草芽孢桿菌枯草芽孢桿菌霍亂弧菌霍亂弧菌幽門(mén)螺旋菌幽門(mén)螺旋菌齒垢密螺旋體齒垢密螺旋體（三）細(xì)菌的形態(tài)（三）細(xì)菌的形態(tài)細(xì)菌芽孢的結(jié)構(gòu)模式圖細(xì)菌芽孢的結(jié)構(gòu)模式圖 環(huán)境適宜時(shí)，環(huán)境適宜時(shí)，芽孢芽孢可以可以萌發(fā)萌發(fā)，形成一個(gè)，形成一個(gè)細(xì)菌細(xì)菌。（四）細(xì)菌的芽孢和孢子（四）細(xì)菌的芽孢和孢子芽孢：芽孢：有些有些細(xì)菌在一定的條件下，細(xì)胞里面形成一個(gè)細(xì)菌在一定的條件下，細(xì)胞里面形成一個(gè)橢圓橢圓形的形的休眠體（不是休眠體（不是生殖細(xì)胞生殖細(xì)胞）。）。孢子：孢子：細(xì)菌的細(xì)菌的生殖細(xì)胞生殖細(xì)胞芽孢芽孢的的壁很厚壁很厚，含水量極低含

3、水量極低，抗逆性極強(qiáng)抗逆性極強(qiáng)（對(duì)干旱、低（對(duì)干旱、低溫、高溫等溫、高溫等惡劣的環(huán)境惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力）。有很強(qiáng)的抵抗力）。 菌落具有菌落具有大小大小、形狀、光澤度、形狀、光澤度、顏色、顏色、透明度、透明度等基本特征。等基本特征。 菌落是菌落是鑒定鑒定菌種菌種的重要的重要依據(jù)。依據(jù)。（五）菌落（五）菌落菌落：菌落：由由單個(gè)細(xì)菌單個(gè)細(xì)菌（或其他微生物）（或其他微生物）細(xì)胞細(xì)胞或少數(shù)同種或少數(shù)同種細(xì)細(xì)胞胞在適宜固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長(zhǎng)繁殖到一定程度，形在適宜固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長(zhǎng)繁殖到一定程度，形成肉眼可見(jiàn)的成肉眼可見(jiàn)的子子細(xì)胞細(xì)胞群體群體。 噬噬菌斑菌斑即噬菌體侵染細(xì)菌細(xì)胞，導(dǎo)即噬菌體侵

4、染細(xì)菌細(xì)胞，導(dǎo)致寄主細(xì)胞溶解致寄主細(xì)胞溶解死亡，因而死亡，因而在瓊脂培養(yǎng)在瓊脂培養(yǎng)基表面形成的肉眼可見(jiàn)的透明小圓斑基表面形成的肉眼可見(jiàn)的透明小圓斑（“負(fù)菌落負(fù)菌落”）。 在在適當(dāng)條件下，一個(gè)噬菌體形成一適當(dāng)條件下，一個(gè)噬菌體形成一個(gè)噬菌斑個(gè)噬菌斑。 （六六）病毒的繁殖）病毒的繁殖二二、 無(wú)菌技術(shù)無(wú)菌技術(shù)（一）定義（一）定義在培養(yǎng)微生物的操作中，所有在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染防止雜菌污染的方法。的方法。（二）措施（二）措施1. 對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間空間、操作者的、操作者的衣著和手衣著和手，進(jìn)行，進(jìn)行清潔和消毒清潔和消毒。2. 將用于微生物培養(yǎng)的將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具

5、和培養(yǎng)基器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行等進(jìn)行滅菌滅菌。3. 為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火酒精燈火焰附近焰附近進(jìn)行。進(jìn)行。4. 實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。相接觸?？諝庵杏写罅康奈⑸铮諝庵杏写罅康奈⑸?，而酒精燈的火焰旁能形成而酒精燈的火焰旁能形成一個(gè)無(wú)菌區(qū)域。一個(gè)無(wú)菌區(qū)域。二二、 無(wú)菌技術(shù)無(wú)菌技術(shù)（三）消毒（三）消毒1.1.定義定義指使指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死僅殺死物體表面或內(nèi)部物體表面或內(nèi)部一部一部分分對(duì)人體有

6、害的微生物對(duì)人體有害的微生物。（不包括芽孢和孢子）不包括芽孢和孢子）2 2. .方法方法1 1）煮沸）煮沸消毒法消毒法:100:100煮沸煮沸5-6min5-6min2 2）巴氏消毒法）巴氏消毒法：70-7570-75下煮下煮30min 30min 或或 8080下下煮煮15min15min3 3）化學(xué)）化學(xué)藥劑消毒法藥劑消毒法: :用酒精用酒精進(jìn)行皮膚消毒進(jìn)行皮膚消毒; ; 氯氣氯氣消毒水源消毒水源4 4）紫外線消毒）紫外線消毒：只適用于表面滅菌和空氣：只適用于表面滅菌和空氣滅菌滅菌5 5）化學(xué)藥物消毒）化學(xué)藥物消毒: :照射前噴灑式碳酸或煤酚皂溶液等消毒液，以增強(qiáng)消毒效果照射前噴灑式碳酸或

7、煤酚皂溶液等消毒液，以增強(qiáng)消毒效果二二、 無(wú)菌技術(shù)無(wú)菌技術(shù)（四）滅菌（四）滅菌1.1.定義定義使用使用強(qiáng)烈的強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外理化因素殺死物體內(nèi)外所有的所有的微生物，微生物，包括芽孢包括芽孢和和孢子。孢子。2 2. .方法方法在酒精燈火焰上灼燒。適用于在酒精燈火焰上灼燒。適用于接種環(huán)接種環(huán)、接種接種針、接種鉤等金屬用具以及試管口、三角瓶針、接種鉤等金屬用具以及試管口、三角瓶口口滅菌滅菌1)1)灼燒灼燒滅菌滅菌接種針、鉤、環(huán)接種針、鉤、環(huán)二二、 無(wú)菌技術(shù)無(wú)菌技術(shù)2)2)干熱干熱滅菌滅菌干熱滅菌箱內(nèi)干熱滅菌箱內(nèi)160160170 1170 12 2小時(shí)小時(shí)，適，適用于用于耐高溫、需保持干燥

8、的物品（吸管、耐高溫、需保持干燥的物品（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等培養(yǎng)皿）和金屬用具等。3 3) )高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)100KPa100KPa、121121、151530min30min；適用于；適用于培養(yǎng)基培養(yǎng)基、水、水的的滅菌。滅菌。高壓蒸汽滅菌前，為什么要將滅菌鍋內(nèi)的高壓蒸汽滅菌前，為什么要將滅菌鍋內(nèi)的冷空氣排盡？冷空氣排盡？利于溫度升高。若冷空氣未排盡，當(dāng)壓力升利于溫度升高。若冷空氣未排盡，當(dāng)壓力升到到100kpa100kpa時(shí)，鍋內(nèi)溫度不會(huì)上升到應(yīng)有高度，時(shí)，鍋內(nèi)溫度不會(huì)上升到應(yīng)有高度，導(dǎo)致滅菌不徹底導(dǎo)致滅菌不徹底滅菌完畢后，若壓力未降到零就打開(kāi)

9、氣閥，滅菌完畢后，若壓力未降到零就打開(kāi)氣閥，會(huì)出現(xiàn)什么現(xiàn)象？為什么？會(huì)出現(xiàn)什么現(xiàn)象？為什么？滅菌容器內(nèi)的液體沖出容器。因?yàn)闇缇亙?nèi)滅菌容器內(nèi)的液體沖出容器。因?yàn)闇缇亙?nèi)外壓力不平衡的緣故外壓力不平衡的緣故利用干熱滅菌箱和高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時(shí)，利用干熱滅菌箱和高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時(shí)，物品不能擺的太擠，為什么？物品不能擺的太擠，為什么？以免妨礙熱空氣或蒸汽的流通以免妨礙熱空氣或蒸汽的流通超超凈凈工工作作臺(tái)臺(tái)三三、 培養(yǎng)基培養(yǎng)基（一）（一）定義定義 人們?nèi)藗儼凑瘴⑸飳?duì)按照微生物對(duì)_的不同需求，配制出供的不同需求，配制出供其其 的的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)叫培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)叫培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)生長(zhǎng)繁殖生長(zhǎng)繁殖種類種

10、類是否含是否含凝固劑凝固劑用途用途固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基1.5%-2.5%分離、計(jì)數(shù)、鑒定分離、計(jì)數(shù)、鑒定半固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基0.2%-0.7%觀察運(yùn)動(dòng)、鑒定菌種觀察運(yùn)動(dòng)、鑒定菌種液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基否否工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn)（二）類型（二）類型（按物理性質(zhì)劃分）（按物理性質(zhì)劃分）固體培養(yǎng)基：菌落固體培養(yǎng)基：菌落固體斜面培養(yǎng)基固體斜面培養(yǎng)基固體平板培養(yǎng)基固體平板培養(yǎng)基瓊脂瓊脂液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基三三、 培養(yǎng)基培養(yǎng)基（三）基本成分（三）基本成分成分成分舉例舉例作用或特點(diǎn)作用或特點(diǎn)碳碳源源無(wú)機(jī)物無(wú)機(jī)物有機(jī)物有機(jī)物氮氮源源無(wú)機(jī)物無(wú)機(jī)物有機(jī)物有機(jī)物無(wú)機(jī)鹽無(wú)機(jī)鹽水水COCO2 2、HCOHCO3 3- -等

11、等適于適于自養(yǎng)自養(yǎng)生物，生物，不不提供能量提供能量葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等等適于適于異養(yǎng)異養(yǎng)生物，生物，可可提供能量提供能量N N2 2、NHNH4 4、NHNH3 3、NONO3 3- -等等牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等KHKH2 2POPO4 4、K K2 2HPOHPO4 4、（、（NHNH4 4）2 2SOSO4 4、MgSOMgSO4 4、CaClCaCl2 2、Ca(NOCa(NO3 3) )2 2、NaClNaCl、FeSOFeSO4 4等。等。參與酶的組成參與酶的組成；調(diào)節(jié)并；調(diào)節(jié)并維持細(xì)胞的滲透壓維持細(xì)胞的滲透壓；調(diào)調(diào)節(jié)節(jié)

12、PHPH的平衡的平衡。良好溶劑，參與物質(zhì)運(yùn)輸良好溶劑，參與物質(zhì)運(yùn)輸；參與細(xì)胞內(nèi)一系列；參與細(xì)胞內(nèi)一系列化學(xué)反應(yīng)化學(xué)反應(yīng)；酶催化的酶催化的介質(zhì)介質(zhì)生長(zhǎng)因子生長(zhǎng)因子微生物生長(zhǎng)所微生物生長(zhǎng)所必需必需的、的、微量微量的、自身的、自身不能合成或合成很不能合成或合成很少少的有機(jī)物的有機(jī)物。包括。包括維生素、某些氨基酸、堿基維生素、某些氨基酸、堿基三類物質(zhì)三類物質(zhì) 牛肉膏牛肉膏、稱量紙、稱量紙 、少量、少量水加入燒杯水加入燒杯加熱溶解加熱溶解取取紙紙蛋白胨、蛋白胨、NaClNaCl攪拌溶解攪拌溶解冷卻調(diào)冷卻調(diào)pHpH瓊脂瓊脂 攪拌熔化攪拌熔化補(bǔ)補(bǔ)水至水至100mL100mL（四）制備（四）制備（牛肉膏蛋白胨

13、固體培養(yǎng)基）（牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基）1.1.計(jì)算計(jì)算：依配方依配方計(jì)算計(jì)算100mL100mL培養(yǎng)基所需各培養(yǎng)基所需各成分的用量成分的用量。2.2.稱量稱量：玻璃棒挑取牛肉膏于稱量紙上稱取玻璃棒挑取牛肉膏于稱量紙上稱取。牛肉膏和蛋白胨易吸潮，稱取時(shí)動(dòng)作要迅速。牛肉膏和蛋白胨易吸潮，稱取時(shí)動(dòng)作要迅速。3.3.溶化：溶化：牛肉膏牛肉膏黏稠黏稠，保證粘附在稱量紙上，保證粘附在稱量紙上的牛肉膏也溶于水中，減少誤差的牛肉膏也溶于水中，減少誤差作為凝固劑作為凝固劑防止瓊脂糊底而防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂導(dǎo)致燒杯破裂4 4. .滅菌：滅菌：培養(yǎng)基培養(yǎng)基裝入錐形瓶，加棉塞，包牛皮紙?jiān)o，裝入錐形瓶，加棉塞，

14、包牛皮紙?jiān)o，高壓高壓蒸汽滅菌蒸汽滅菌；培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿5 58 8套作一包，放于套作一包，放于干熱滅菌箱干熱滅菌箱內(nèi)滅菌。內(nèi)滅菌。三三、 培養(yǎng)基培養(yǎng)基防止污染和揮發(fā)防止污染和揮發(fā)滅菌滅菌時(shí)避免水蒸氣浸濕棉時(shí)避免水蒸氣浸濕棉塞，取出培養(yǎng)基時(shí)，也起塞，取出培養(yǎng)基時(shí)，也起到隔絕空氣中雜菌的作用到隔絕空氣中雜菌的作用三三、 培養(yǎng)基培養(yǎng)基5.5.倒平板倒平板 培養(yǎng)基冷卻至約培養(yǎng)基冷卻至約5050左右時(shí)左右時(shí)灼燒灼燒滅菌滅菌左手拔左手拔出棉塞出棉塞通過(guò)縫隙通過(guò)縫隙倒入培養(yǎng)基，倒入培養(yǎng)基，蓋蓋蓋蓋冷卻倒置冷卻倒置答答：用：用手手觸摸錐形瓶觸摸錐形瓶，感覺(jué)剛剛感覺(jué)剛剛不燙手不燙手時(shí)。時(shí)。2.2.為什么需要使錐形

15、瓶的瓶口通過(guò)火焰？為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？答答：灼燒：灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。問(wèn)題討論問(wèn)題討論1.1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50 50 左右時(shí)，才能用左右時(shí)，才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？3.3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？平板冷凝后，為什么要將平板倒置？答答：既可以防止培養(yǎng)基：既可以防止培養(yǎng)基表面的表面的水分過(guò)快揮發(fā)水分過(guò)快揮發(fā)，又可以，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，影響微生物生長(zhǎng)影響微生物生長(zhǎng)。4.4.在倒平板的過(guò)

16、程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎？與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎？為什么？為什么？答：最好不要答：最好不要用。因?yàn)榭諝庥?。因?yàn)榭諝庵械奈⑸锟赡苤械奈⑸锟赡茉诖俗躺Ｔ诖俗躺?。三三?培養(yǎng)基培養(yǎng)基5.5.倒平板倒平板 培養(yǎng)基冷卻至約培養(yǎng)基冷卻至約5050左右時(shí)左右時(shí)灼燒灼燒滅菌滅菌左手拔左手拔出棉塞出棉塞通過(guò)縫隙通過(guò)縫隙倒入培養(yǎng)基，倒入培養(yǎng)基，蓋蓋蓋蓋冷卻倒置冷卻倒置6.6.無(wú)菌檢查：無(wú)菌檢查： 3737倒置培養(yǎng)倒置培養(yǎng)242448h48h，觀察是否有微生物生長(zhǎng)，觀察是否有微生物生長(zhǎng)。四

17、四、 純化純化大腸桿菌大腸桿菌（微生物的接種）（微生物的接種）（一）平板劃線法（一）平板劃線法接種環(huán)接種環(huán)灼燒滅菌灼燒滅菌冷卻冷卻接種環(huán)，接種環(huán)，打開(kāi)菌種的棉塞打開(kāi)菌種的棉塞試管口試管口滅菌滅菌沾取菌種沾取菌種試管口試管口滅菌滅菌，塞棉塞塞棉塞通過(guò)通過(guò)縫隙縫隙，劃劃3-53-5平行線平行線，蓋蓋，蓋蓋，不要?jiǎng)澆灰獎(jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基破培養(yǎng)基12345灼燒灼燒接種環(huán)，接種環(huán)，冷卻后，從冷卻后，從1 1區(qū)區(qū)末端末端往往2 2區(qū)劃線，區(qū)劃線，重復(fù)重復(fù)操作操作倒置倒置培養(yǎng)培養(yǎng)1 1. .操作：操作：四四、 純化純化大腸桿菌大腸桿菌（微生物的接種）（微生物的接種）（一）平板劃線法（一）平板劃線法0 02.2.培養(yǎng)

18、培養(yǎng)方法方法：3.3.其他劃線方法：其他劃線方法：3 3. .培養(yǎng)結(jié)果：培養(yǎng)結(jié)果：1 12 23 3劃線組：分離到由一個(gè)細(xì)胞繁劃線組：分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的菌落殖而來(lái)的菌落對(duì)照組對(duì)照組：無(wú)無(wú)微生物生長(zhǎng)微生物生長(zhǎng)三個(gè)重復(fù)平板三個(gè)重復(fù)平板1 1 倒置培養(yǎng)倒置培養(yǎng)2 2 倒置培養(yǎng)倒置培養(yǎng)3 3 倒置培養(yǎng)倒置培養(yǎng)空白對(duì)照空白對(duì)照0 0 倒置培養(yǎng)倒置培養(yǎng)四四、 純化純化大腸桿菌大腸桿菌（微生物的接種）（微生物的接種）（一）平板劃線法（一）平板劃線法問(wèn)題討論問(wèn)題討論1. 1. 為什么為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要

19、灼燒接種環(huán)嗎？為什么？環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？ 防止污染：防止污染：操作操作的的第一步灼燒第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)是為了避免接接種環(huán)上種環(huán)上 可能可能存在的微生物污染存在的微生物污染培養(yǎng)物；培養(yǎng)物； 劃線劃線結(jié)束結(jié)束時(shí)灼燒時(shí)灼燒接種環(huán)，接種環(huán)，及時(shí)殺死接種環(huán)上及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留殘留 的的菌種，菌種，避免細(xì)菌避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者污染環(huán)境和感染操作者。 純化微生物：純化微生物：每次劃線前的每次劃線前的灼燒灼燒，為殺死，為殺死上次殘留的菌種上次殘留的菌種， 保證保證使下一次劃線時(shí)，菌種直接來(lái)源于上次使下一次劃線時(shí)，菌種直接來(lái)源于上次劃劃 線的末端線的末端

20、，從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使，從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使每次每次 劃線時(shí)菌種劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便的數(shù)目逐漸減少，以便得到得到單個(gè)單個(gè)菌落菌落。四四、 純化純化大腸桿菌大腸桿菌（微生物的接種）（微生物的接種）（一）平板劃線法（一）平板劃線法問(wèn)題討論問(wèn)題討論2. 2. 在在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？以免以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3 3. . 在在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線次劃線的末端開(kāi)始劃線？劃線后，線條末端

21、細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開(kāi)始，能使細(xì)菌的數(shù)目每次從上一次劃線的末端開(kāi)始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。四四、 純化純化大腸桿菌大腸桿菌（微生物的接種）（微生物的接種）（二二）稀釋涂布平板法）稀釋涂布平板法四四、 純化純化大腸桿菌大腸桿菌（微生物的接種）（微生物的接種）（二二）稀釋涂布平板法）稀釋涂布平板法1 1. .操作操作 將將菌菌液進(jìn)行一系列液進(jìn)行一系列的的梯度稀釋梯度稀釋移液管、試管移液管、試管及水等要及

22、水等要滅菌滅菌；菌液與水要菌液與水要混混勻勻；移液管、試管口移液管、試管口要離火焰要離火焰12cm處。處。 涂布平板涂布平板（接種）（接種）四四、 純化純化大腸桿菌大腸桿菌（微生物的接種）（微生物的接種）（二二）稀釋涂布平板法）稀釋涂布平板法2.2.培養(yǎng)培養(yǎng)方法方法：3 3. .培養(yǎng)結(jié)果：培養(yǎng)結(jié)果：各各梯度分別涂布梯度分別涂布3 3個(gè)個(gè)平板，平板，1 1個(gè)不涂布作空白個(gè)不涂布作空白對(duì)照。對(duì)照。稀釋度足夠稀釋度足夠的菌液在培養(yǎng)基表面形成的菌液在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落單個(gè)菌落四四、 純化純化大腸桿菌大腸桿菌（微生物的接種）（微生物的接種）問(wèn)題討論問(wèn)題討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無(wú)菌操作要求，想一想，第列稀釋的無(wú)菌操作要求，想一想