1、激光共聚焦顯微鏡FV1000 -光譜掃描型-（倒置顯微鏡1X81簡易使用說明書1內(nèi)容啟動系統(tǒng)顯微鏡鏡下觀察微分干涉差觀察熒光觀察取圖的操作界面如 何取圖XY平面單標XY平面雙標同步掃描方式 序列掃描方式XY平面單標+微 分干涉差XYZ掃描雙標XYL光譜掃描2D操作界面圖像分析打開文件3D圖像的 疊加比例尺的使用3D圖像的重建3D圖像的旋轉(zhuǎn)Unmixing保存圖像保存到CD-R 關(guān)閉系統(tǒng) 附錄 3 4 5 6 7 10 13 16 19 21 24 24 25 26 27 29 31 35 36 37 38 2 2開啟系統(tǒng)1 1.2.打開計算機.打開激光器.（打開鑰匙開關(guān).2-1.多線氬離子（4

2、58 nm, 488 nm, 514 nm ON打開電源開關(guān)后，打開鑰匙開關(guān).2-2.氦氖綠（543 nm ON 2-3.氦氖紅（633 nm ON 3. 4.打開汞燈電源開關(guān).登陸Win dows XP系統(tǒng).User ID: Admi nistrator Password: fluoview 5.雙擊快捷方式： 打開 FV10-ASW 應(yīng)用軟件.User ID: Admi ni strator Password: Admi nistrator * 系統(tǒng)軟件的啟動需要等待一定時間.3 2 5 3 3顯微鏡鏡下觀察微分干涉差觀察1手控面板*DIC元件1.使用手控面板選擇 物鏡.（參照Memo .

3、 2 3 2.插入起偏鏡.3.插入微分干涉滑塊.4.點擊FV10-ASW軟 件中的圖標.Note 1.使用TD滑塊控制鹵素燈的光強.Note 2.檢查濾色片轉(zhuǎn)盤的位 置是否為“6.DICT”如果不是，用手柄按下DICT圖標.用此旋鈕進行微分干 涉法對 比度的調(diào)節(jié).5.標本聚焦.4 Memo按照7-1的操作轉(zhuǎn)換物鏡的倍率之后，對：物鏡各物鏡對應(yīng)的DIC元件*進行操作.4 Note 1 4顯微鏡鏡下觀察 熒光觀察1 Hand switch 1.使用手控面板選擇物鏡.2 2.點擊 FV10-ASW軟件中的圖標.Note 1.選擇第3步后，顯微鏡進入熒光觀察狀態(tài).注意此 時汞燈的機械快門要打開.（建議

4、通常機械快門要放在關(guān)閉的位置（.Note 2.檢查 DIC滑塊是否拉出.Note 2 Notes 1 & 3 3.使用手控面板選擇熒光濾色片.（參照 Memo . Note 3.觀察之前，檢查汞燈的機械快門要放在開啟的位置（.3 4.標本聚焦.Memo關(guān)于熒光濾色片NIBA :藍色激發(fā)/綠色熒光（例：FITC、EGFP等）WIG :綠色激發(fā)/紅色熒光（例：Rhodamine DsRed等）5 52貝 Hy3H-*r Br-FWOASWU: 1123家£M!ssa 二 Es&li-?s士 ss§p fis -龍esWHeM 佟季 J»MJt<:

5、z e 事 SIHJAe r >匚托 3H2Q2 Q*esw >亍 AWHy?£亠 X3冷二 m fkaaJLOOM 建SJw««好力43ZB37Sac%匸sxz>I£03 FXYW 匡PWXYZ.XYTAXYIHfrwlRA:亠.f3K< 養(yǎng)2 詫 N«(XY-tt二忿疋sa)sK£!JUMi(»(FITG)7&tfAU_OH<二二左匡崗= 一心>4M 工 aANsjhx y *«>> 9slt Fkxrff三 IQiman9 A J Sen 02003左s

6、 *2D <?Uve*nu8x百事»=«ONFMASB,Msatt 工審二K、7.32ttNrIf&w AX«J冷？pASMm va予2a9興 jf ;3KE3Y5 丘 HgtuHTC-辛a stlyffT 心 W3S.WS* -6:>_ssop 定29-二玄sss用！-E二2l3x«nr5CMV-4 二n-3n>- 一>:nA- s A&3FFMr->rM FUH 546SB &!|*»0丁 金？93和-6 . h£op_*三己;aaMemoJ網(wǎng)¥Em£* 運

7、= -«»一 BS1M 33幾 3!.、：* 誘CE A<二一氏ra#BeBBr?37(XY-tt»二卅F33IEsA*r.sK*.w5->- FV-PASW 餐 rwsKsMlS55Z -M A.-drilHffH AGRxr Asi«3sz*KBrrB«nn 幷3SJtJ9 2p .c-r-APPBSLpJXYRepe22cB A1I1XYKIHC1M Mmff如何収圖（XY平面収標）7- llffAutoHV.人 tff 11M1afrman L It ««mw9 A Ji SewxDonefi i|. *

8、20 Vcw grrrngbNmm細 I；服10 (¥“M»4怕為4&減斟像皿林 V V址 FV1(XASW1tn sun13/.<13/.<10fv-asw t%/.<»e« W)rrtl<- twr« tf比8e"UF. VW4MB44<IKE 曲”13/.<13/.<i t«d.caftx«»i 21.< a.Applyffiffl./2如何収圖（XY甲面収標）d取"滋帕像（XY平面）（餐無悄代：例 * 二丈口486 ） *九 1L&

9、#163; 忙:從也 546 ）二 «色序列；U& （這屮介總址庠列,1樹t .6.1 FVIO-ASWUtt'PttHHI tj x.M*<r<Mn KWatrttn 13/.<13/.<13/.<如何収圖（XY甲面収小15!$15!$5 y.nXYFpeMIIHtfrflW.如何収圖（XY平血収小MTl<n PW.ZhF4tW UAJCffttMIMHKnith6 U| fc(Aacia Auort fc(Alexa FUof 54® 圧* «Z 4tti£ttF |1| nriRb仞火SA

10、1;mivmH ms icai SmKFilk|15!$15!$9MmB. AtfAutoHV. UXUffllVitlg.(業(yè)時 煌 'tUman am w4g)Qn i 人 t «wmw10 A.t.ScwsOoneH , *20 Vcw Uve*naQo(xr 20 IVrtlA<llAi11朋*血擊HiettH診爾的圖It憎冷.皿林 * y rvii fvkxaswro vmn15!$15!$11，F(xiàn)V-ASW*："KE 曲”15!$如何取圖（XY平面-單標+微分干涉差獲取單張圖像（XY平面）（熒光圖像 +微分干涉）例：綠色熒光（FITC） +DIC圖

11、像1 1點擊FV10-ASW軟件中的按 鈕關(guān)閉汞燈快門同時，點擊按鈕 關(guān)閉鹵素燈快門.2. 2 3點擊染料選擇按鈕.在染 料列表中，雙擊用于觀察的熒光染料.*取消當前熒光染料，選擇另外熒光染 料，要 雙擊已指定的熒光染料，并重復(fù)步 驟2.點擊Apply按鈕.（關(guān)閉染料選擇面板可以 用Close按鈕.3 4.選擇TD1.4染料選擇后的顯示界面16 16如何取圖（XY平面-單標+微分干涉差5 6 5點擊XY Repeat按鈕開始掃描.6. 調(diào)節(jié)綠色（FITC圖像和微分干涉差的 圖像.（圖像調(diào)節(jié)的略述如下更多的信息，參照 附錄1. 7點擊Stop按鈕停止掃描.（參照Memo . 7 Memo掃描控制

12、面板：連續(xù)掃描： 停止掃描：快速掃描（隔行掃描圖像調(diào)節(jié)略述1 2 1探測器的靈敏度調(diào)節(jié)（HV 2 共聚焦的孔徑大小調(diào)節(jié)（C.A. 3激光輸出的調(diào)節(jié)（Laser調(diào)節(jié)方法（例：HV調(diào)節(jié)：點 擊滑塊,HV直接提高（或降低到指定的位置.點擊此按鈕 或者使用鼠標轉(zhuǎn)輪進行 微調(diào).3 17 17如何取圖（XY平面-單標+微分干涉差8 9 8.選擇AutoHV,并選擇掃描速度.* 隨著掃描速度變慢，在保持同等亮度的前提 下，背景噪音就會消除.（也可以使用 Kalman accumulation方式.更多的信息，參照附錄2. 9.點擊XY按鈕取得一幅圖像. 10.點擊 SeriesDone按鈕,“2D View

13、Livelmage（x ”界面就出現(xiàn).10 11 11.保存該幅 圖像：右擊圖像管理器中顯示的圖像圖標，選擇另存為保存該幅圖像.（保存為“xml類型是FV10-ASW軟件專用的 圖像格式.Memo FV10-ASW專用的圖形格式OIF格式：創(chuàng)建一個含（16-bit TIFF的圖像”和一個附屬 文件,不能單獨分割.OIB 格式:創(chuàng)建單個的OIF格式的文件，方便進行移動和進 行其它的操作.18 18如何取圖（XYZ掃描-雙標獲取3D圖像（XYZ （熒光圖像 例：綠色熒光（FITC和 紅色熒光（Rhodamine雙標 這里介紹線序列掃描取圖的過程.1 4 5 6 7 1.采用13和 14頁步驟1到7

14、.確定Z軸的上限和下限如下.2.輸入StepSize大小（點擊OP按鈕可 以使用推薦的值,并選擇.3.點擊XY Repeat按鈕開始掃描.4.點擊和按鈕上移焦 點位置.（參照Memo . 5.當圖像顯示到達上限時，點擊Set按鈕確定.6.點擊和按鈕 下移焦點位置.（參照Memo . 2 8 Memo和按鈕：點擊移動1.0 m.:點擊移動0.1 m.7.當圖像顯示到達下限時，點擊Set按鈕確定.8.點擊Stop按鈕停止掃描.19 19如何取圖（XYZ掃描-雙標9 10 9.選擇AutoHV,并選擇掃描速度.*隨著掃描速 度變慢,在保持同等亮度的前提 下，背景噪音就會消除.（也可以使用Kalman

15、 accumulation方式.更多的信息，參照附錄 2. 10.選擇Depth按鈕.11.點擊XYZ按 鈕取得圖像.12.點擊SeriesDone按鈕,“2D ViewLivelmage（x ”界面就出現(xiàn).11 13. 保存該幅圖像：右擊圖像管理器中顯示的圖像圖標，選擇另存為保存該幅圖像.（保存為“xml類型是FV10-ASW軟件專用的 圖像格式.12 13 Memo FV10-ASW專用的 圖形格式OIF格式：創(chuàng)建一個含（16-bit TIFF的圖像”和 一個附屬 文件,類不能單獨 分割.OIB格式:創(chuàng)建單個的OIF格式的文件，方便進行移動和進 行其它的操作.2020如何収圖（XYL光診&

16、#163;1撞）- -XYL 1. A.t.FVIO ASWrtflfJftM! i K«*<rftn.MW.jftrfittW 4快仃.2 ZnhlfcwW Wft t*X tt<u b«W.如何収圖（XYL光諭£1雄）44.出理工謂說WMil.7.m川忖 “QAdflESMIWmstnpirtt.it： KAlX«»RW»Wn»t« VtXjlOnmi 念.一910-AtfAutoHV. HXinfEt»eiwrt«fc>n<.（辿材匕悴川 3mn EEAaian h

17、兒 農(nóng)事枷£團川«2）11. di «lMr>ttt£.fiHl.W»M.Stan - 2"Rescludon 尤牝 SgSt"-"14 * JfScn«OorefttI.-20V«w Sanwkb 20界由氏出錄is6J/M»n>IS中¥仆的圖僮圖悴 itff、； “為"“謖酬型.廣art!乍.FWASWttr2J2D曲挫作界面圖3分析（打開文件）聞儻甘trie 口田扯藝畳也1 z 噸m衣鋌愎#韭嗟嗽f .LrttlHA. 11卵5抽圖像分析（比例尺的

18、使用12 1.點擊按鈕.2.點擊圖像的同時，拖放此比例尺到 一個特定的位置 3點擊手柄的左端或右端，移動鼠標.改變比例尺的大小3 4.選擇 比例尺并右擊選擇屬性的設(shè)置 4 5.設(shè)置具體的比例尺屬性.改變文本，顏色，字體等.5 26 26圖像分析（3D圖像的重建 以一定的角度觀察3D圖像1 3 1點擊按鈕2.創(chuàng)建 3D圖像.3.拖動鼠標以一定的角度觀察圖像.-要保存此圖像,進行下一頁第6步 的操作.觀察3D圖像的某個橫截面4 5 4點擊按鈕 并選定.5.拖動鼠標觀察某個 垂直橫斷面.-要保存此圖像,進行下一頁第6步的操作.27 27圖像分析（3D圖像的重建 保存上一頁中第3、5選項的圖像6 6點

19、擊按鈕.7. 會創(chuàng)建一個2D圖像（帶文件名.8 8保存該幅圖像：右擊圖像管理器中顯示的圖像 圖標，選擇另存為保存該幅圖像.（保存為“xml類型是FV10-ASW軟件專用的 圖 像格式.Memo FV10-ASW專用的圖形格式OIF格式：創(chuàng)建 一個含（16-bit TIFF的圖 像”和一個附屬 文件,”不能單獨分割.OIB格式：創(chuàng)建單個的OIF格式的文件,方便 進行移動和進行其它的操作.28 28圖像分析（3D圖像的旋轉(zhuǎn)1點擊按鈕.1 3 2.創(chuàng)建3D圖像.3.拖動鼠標以一定 的角度觀察圖像.動畫的播放4 4.點擊并控制按鈕 著X-軸旋轉(zhuǎn).再次點擊停止旋轉(zhuǎn). 實現(xiàn)圖像圍繞 點擊并控制按鈕 著丫-

20、軸旋轉(zhuǎn).再次點擊停止旋轉(zhuǎn).實現(xiàn)圖像圍繞 點 擊并控制按鈕 著Z-軸旋轉(zhuǎn).再次點擊停止旋轉(zhuǎn).實現(xiàn)圖像圍繞29 29圖像分析（3D圖像的旋轉(zhuǎn)要保存動態(tài)旋轉(zhuǎn)的圖像，請參照如下的方法創(chuàng)建3D 圖像.例,試圖旋轉(zhuǎn)圖像180度.5 6 5.點擊按鈕.6.點擊Angle rotation菜單.7 8 9 1030 7.選擇旋轉(zhuǎn)軸.8.輸入旋轉(zhuǎn)的角度.Start = End = Frame/s = Interval =開始角度 結(jié) 束角度旋轉(zhuǎn)速度單次旋轉(zhuǎn)的角度9.選擇AVI類型并點擊Create按鈕.10.輸入一 個文件名并點擊Save按鈕.30圖像分析(Urunhdnq)L邙®滅光蠱料的定位郁ft

21、t朝顯的血軼 1TTJMI*3?tUttJUlKl410»«. 4ddfcmfuHit*n(fi5£(tf5h 尤 iim«imtt圖像分析（Urunbdnq）1 U *1 W. Alexa Flmx 488W YOYO12 好刊力 Nou Fluor 488，YOYOU<3 從ProccsfingbKJ *«paH Spectral DoccmoSon懺每.5為 gmer"H喬hUHcniw鼻麗個燙it尤窘什刃期.isi7&的分丹麗t IAJexAFM0f4e9jf(lM 色 MteQWMl&b1 H JI W

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25、X-：i':MUM X 的 i B 麗 bmp r .<WJtftI. FhLE輯愷呻一W<f ；SW¥(T1. fi.Lctmw.3 出即抽*4«吐劃咐汀4 *.ff.it a win.保存到CD-R 1.插入一張CD-R光盤.2 2.點擊OK. 3 4 3.選擇文件并拖放到 CD-R 的窗口 . 4.點擊"Write these files to CD." 5.點擊 Next. 5 6 7 36 6.開始刻錄.7. 點擊Finish按鈕結(jié)束.36關(guān)閉系統(tǒng)1.選擇File/Exit,退出FV10-ASW 軟件.1 2 2.退出 Windows XP. （1選 擇 Start/Shut Down. （2 在 Shut Down 窗口中，選擇 Shut Down 并點擊 OK 按鈕.3.關(guān) 閉激光器.（關(guān)閉鑰匙開關(guān).3-1.多線氬離子（458 nm, 488 nm, 514 nm OFF等待風(fēng)扇 停止,關(guān)閉電源開關(guān).3-2.氦氖綠（543 nm OFF 3-3.氦氖紅（633 nm OFF 4.關(guān)閉汞燈 電源.4 37