1、-精品 word 文檔值得下載值得擁有 -乳制品質(zhì)量安全監(jiān)督抽查檢驗細則時間： 2007-08-31前言為保障人民群眾身體健康，全面推進 “無公害農(nóng)產(chǎn)品行動計劃 ”，保證乳制品質(zhì)量安全， 指導有關(guān)檢驗機構(gòu)進行乳制品質(zhì)量安全監(jiān)督抽查檢驗工作，特制定本檢驗細則，作為組織監(jiān)督抽查的依據(jù)。本標準所列的檢驗項目與法律、法規(guī)、規(guī)章有不一致時，應(yīng)以法律、法規(guī)、規(guī)章的規(guī)定為準。本標準的附錄A 為規(guī)范性附錄。本標準由浙江省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢測協(xié)調(diào)會議辦公室提出。本標準起草單為：浙江方圓食品與農(nóng)副產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測中心。本標準主要起草人：何喬桑陳自力趙淑娟陳小珍盛華棟乳制品質(zhì)量安全監(jiān)督抽查檢驗細則1 范圍本標準規(guī)

2、定了乳制品的分類、檢驗項目、檢驗方法、抽樣方法及判定原則。本標準適用于浙江省境內(nèi)生產(chǎn)或銷售的乳制品的質(zhì)量監(jiān)督抽查。2 規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。GB 4789.2食品衛(wèi)生微生物學檢驗菌落總數(shù)測定GB 4789.3食品衛(wèi)生微生物學檢驗大腸菌群測定GB 4789.4食品衛(wèi)生微生物學檢驗沙門氏菌檢驗GB 4789.5食品衛(wèi)生微生物學檢驗志賀氏菌檢驗GB 4789

3、.10食品衛(wèi)生微生物學檢驗金黃色葡萄球菌檢驗GB 4789.11食品衛(wèi)生微生物學檢驗溶血性鏈球菌檢驗GB 4789.18食品衛(wèi)生微生物學檢驗乳與乳制品檢驗GB/T 5009.11食品中總砷的測定方法GB/T 5009.12食品中鉛的測定方法GB/T 5009.17食品中總汞的測定方法GB/T 5009.24食品中黃曲霉素 M 1 和 B 1 的測定方法GB/T 5009.29食品中山梨酸、苯甲酸的測定方法GB/T 5409牛乳檢驗方法GB/T 5413.32乳粉硝酸鹽、亞硝酸鹽的測定3 產(chǎn)品分類乳制品分以下三類：巴氏殺菌乳、滅菌乳、酸牛奶。4 檢驗項目檢驗項目見表 1、表 2、表 3。表 1

4、巴氏殺菌乳檢測項目序號檢驗項目要求-精品 word 文檔值得下載值得擁有 -1鉛（以 Pb 計）， mg/kg0.052砷（以 As 計）， mg/kg0.23汞（以 Hg 計）， mg/kg0.01表 1(續(xù))4硝酸鹽（以 NaNO 3 計）， mg/kg8.05亞硝酸鹽以 NaNO 2 計， mg/kg0.26黃曲霉毒素 M1 ，g/kg0.27菌落總數(shù)， cfu/mL300008大腸菌群， MPN/100mL909青霉素不得檢出10鏈霉素不得檢出12致病菌（指腸道致病菌和致病性球菌）不得檢出表 2 滅菌乳檢測項目序號檢驗項目要求1鉛（以 Pb 計）， mg/kg0.052砷（以 As 計

5、）， mg/kg0.23汞（以 Hg 計）， mg/kg0.014硝酸鹽（以 NaNO3 計）， mg/kg8.05亞硝酸鹽（以 NaNO2 計）， mg/kg0.26黃曲霉毒素 M 1， g/kg0.27青霉素不得檢出8鏈霉素不得檢出9商業(yè)無菌商業(yè)無菌表 3酸牛乳檢測項目序號檢驗項目要求鉛（以 Pb 計）， mg/kg0.052砷（以 As 計）， mg/kg0.23汞（以 Hg 計）， mg/kg0.014硝酸鹽（以 NaNO3 計）， mg/kg8.05亞硝酸鹽（以 NaNO2 計）， mg/kg0.26黃曲霉毒素 M 1， g/kg0.5純酸牛乳、調(diào)味酸牛乳70.03苯甲酸， g/kg

6、果味酸牛乳 0.238純酸牛乳、調(diào)味酸牛乳山梨酸， g/kg0.001果味酸牛乳 0.239大腸菌群， MPN/100mL90-精品 word 文檔值得下載值得擁有 -10致病菌（指腸道致病菌和致病性球菌）不得檢出5 檢驗方法5.1 砷的測定按 GB/T 5009.11 執(zhí)行。5.2 鉛的測定按 GB/T 5009.12 執(zhí)行。5.3 汞的測定按 GB/T 5009.17 執(zhí)行。5.4 硝酸鹽及亞硝酸鹽的測定按 GB/T 5413.32 執(zhí)行。5.5 山梨酸、苯甲酸的測定按 GB/T 5009.29 執(zhí)行。5.6 黃曲霉素 M1 的測定按 GB/T 5009.24 執(zhí)行。5.7 青霉素的測定按

7、 GB/T 5409 執(zhí)行。5.8 鏈霉素的測定按附錄 A 執(zhí)行5.9 菌落總數(shù)的測定按 GB 4789.2 和 GB 4789.18 執(zhí)行。5.10 大腸菌群的測定按 GB 4789.3 和 GB 4789.18 執(zhí)行。5.11 致病菌的測定按 GB 4789.4、GB 4789.5、 GB 4789.10、 GB 4789.11 和 GB 4789.18 執(zhí)行。6 抽樣方法6.1 抽樣方法采取隨機抽樣的方法進行抽樣。6.2 樣品數(shù)量規(guī)格 250mL的樣品，抽取樣品數(shù)量為5 瓶（盒），其中3 瓶（盒）用作檢驗， 2 瓶（盒）作為備樣封存留企業(yè)，規(guī)格250mL的樣品，抽取樣品數(shù)量加倍。6.3

8、注意事項抽樣人員抽樣時應(yīng)填寫好浙江省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢查抽樣單，樣品用塑料袋包裝，貼好樣品標志，并經(jīng)受檢單位或個人對其有效性進行確認。樣品標志的格式統(tǒng)一，包括以下內(nèi)容：產(chǎn)品名稱、種類、抽樣地點、抽樣時間、抽樣人姓名及簽字、見證人姓名及簽字。抽樣后應(yīng)盡快將樣品送至檢驗機構(gòu)進行檢驗。抽樣單位或人員應(yīng)采取必要的措施，保證送檢樣品滿足檢驗需要。7 判定原則抽檢全部項目符合標準要求，判定該批產(chǎn)品為合格；有一項或一項以上項目不符合標準要求時，判定該批產(chǎn)品為不合格。8 復檢受檢方對檢驗結(jié)果異議時，可申請復檢。復檢指對備樣進行檢驗。復檢申請向原檢驗機構(gòu)提出，原檢驗機構(gòu)應(yīng)在3 個工作日內(nèi)作出受理或不受理決-精品

9、word 文檔值得下載值得擁有 -定。若受檢方對不受理決定仍有異議，可向浙江省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢測協(xié)調(diào)會議辦公室提出。不合格結(jié)果以檢驗結(jié)果通知書的形式送達受檢方，受檢方應(yīng)在收到不合格通知書之日起3 日內(nèi)提出復檢申請，逾期不予受理。附錄 A（規(guī)范性附錄）乳制品中鏈霉素殘留的測定-精品 word 文檔值得下載值得擁有 -A.1 測定原理測定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)。微孔板包被有結(jié)合到蛋白上的鏈霉素（固相），鏈霉素抗體、鏈霉素酶標記物、標準或樣品溶液或樣本加入后，游離鏈霉素與鏈霉素酶標記物競爭鏈霉素抗體。沒有被結(jié)合的酶標記物在洗滌時被除去，將酶基質(zhì)（過氧化尿素）和發(fā)色劑（四甲基聯(lián)苯胺）加入到微孔中并孵

10、育。結(jié)合的酶標記物將無色的發(fā)色劑轉(zhuǎn)化為藍色的物質(zhì)，加入反應(yīng)停止液后，使微孔中的顏色由藍轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。在450nm 處進行吸光度測量，吸收度與樣品中的鏈霉素濃度成反比，通過計算比例可以獲得樣本中鏈霉素的濃度值。A.2 試劑和材料酶標免疫分析定量測定鏈霉素殘留試劑盒。德國 R-Biopharm 公司制造。正己烷。Carrez I： 0.36mol/L 鐵氰化鉀（ II ） ?3 H 2O 。CarrezII： 1.04 mol/L 硫酸鋅 ?7 H2 O。PBS 緩沖液： (0.55g NaH2PO4?H2O;2.85g Na2HPO4 ?2H2O+9gNaCl + 0.1%吐溫 20, 加入蒸餾水

11、至1000mL)。A.3儀器和設(shè)備微孔板酶標儀 (450nm)。離心機。振蕩器?；旌掀?。磁攪拌器。25L， 50L, 100 L, 1000 L微量加樣器。A.4 樣品處理脫脂牛奶用 PBS-Tween 緩沖液以 1:40(25 L牛奶 +975L緩沖液 ) 稀釋，取 50L進行測定。脂肪牛奶150C 離心 10 分鐘 （ 3000 轉(zhuǎn) /分鐘）， 去除脂肪 ( 如無冷凍離心機請予冷卻樣品)。去除上層脂肪 , 用 PBS-Tween緩沖液以 1:40 稀釋脫脂牛奶，取 50L進行測定。A.5 工作液的準備制備標準應(yīng)用液： 50uLL標準濃縮液用450L緩沖液稀釋并混合均勻，不要用塑料瓶而用玻璃

12、瓶。標準液 1： 50L標準濃縮液 1 用 450L緩沖液稀釋0g/kg。標準液 2： 50L標準濃縮液 2 用 450L緩沖液稀釋0.5 g/kg。標準液 3： 50L標準濃縮液 3 用 450L緩沖液稀釋2g/kg。標準液 4： 50L標準濃縮液 4 用 450L緩沖液稀釋8g/kg。標準液 5： 50L標準濃縮液 5 用 450L緩沖液稀釋32g/kg。標準液 6： 50L標準濃縮液 6 用 450L緩沖液稀釋128g/kg。每一批實驗所用的標準液應(yīng)當按上述要求重新制備。A.6 實驗步驟使用之前將所有的試劑回升至室溫20 -24。將足夠標準和樣品所用數(shù)量的孔條插入微孔架,標準和樣品做兩個

13、平行實驗，記錄下標準和樣品的位置。加入 50L稀釋了的酶標記物到微孔底部, 再加入 50L的標準或處理好的樣品到各自的微孔中。標準和樣品做兩個平行實驗。加入 50L稀釋了的抗體溶液到每一個微孔底部充分混合，在室溫孵育2 小時，覆蓋上薄膜（防止蒸發(fā)）。-精品 word 文檔 值得下載值得擁有 -A.6.5倒出孔中的液體 ,將微孔架倒置在吸水紙上拍打 (每行拍打 3 次)以保證完全除去孔中的液體 . 用 250L蒸餾水充入孔中 , 再次倒掉微孔中液體 ,再重復操作兩次。A.6.6加入 50L基質(zhì)和 50L發(fā)色試劑到微孔中 , 充分混合并在室溫暗處孵育30 分鐘。A.6.7加入 100L反應(yīng)停止液到微孔中 .，混合好在 450nm 處測量吸光度值，以空氣為空白。必須在加入停止液后60 分鐘內(nèi)讀取吸光度值。A.7結(jié)果計算所獲得的標準和樣品吸光度值的平均值除以第一個標準(0 標準 )的吸光度值再乘以100。因此 0 標準等于 100%并且以百分比給出吸光度值。標準的吸光度值 ( 或樣品 )。計算的標準值繪成一個對應(yīng)鏈霉素濃度( g /kg)的半對數(shù)坐標系統(tǒng)曲線圖,校正曲線在2ug/kg-32ug/kg 范圍內(nèi)應(yīng)當成為線性 .。相對應(yīng)每一個樣品的濃度( g /kg)可以從校正曲線上讀出。本方法牛奶中鏈霉素的檢測限是20g/kg。A.8 注意事項A.8.1保存試劑盒于 20