1、中醫(yī)藥調(diào)節(jié)肝纖維化相關(guān)因子的研究進(jìn)展    【摘要】  肝纖維化發(fā)生、發(fā)展過程中和體內(nèi)多種細(xì)胞因子合成與功能失調(diào)有關(guān)。肝星狀細(xì)胞的激活、表型改變并分泌大量的細(xì)胞外基質(zhì)是肝纖維化發(fā)生的中心環(huán)節(jié)。而細(xì)胞因子在肝星狀細(xì)胞的活化、表型改變中扮演重要角色。目前中醫(yī)藥對肝纖維化相關(guān)因子的研究取得一定進(jìn)展。 【關(guān)鍵詞】  肝纖維化；肝星狀細(xì)胞；細(xì)胞因子；中醫(yī)藥；綜述Abstract：Liver fibrosis in the development process is related to synthesis of a variety of cy

2、tokines and dysfunction in vivo.The activation of hepatic stellate cell phenotype change and secretion of extracellular matrix of liver fibrosis is the central link.And cytokines play an important role in hepatic stellate cells activation and phenotype changes.Chinese medicine for liver fibrosis?rel

3、ated factors research achieved definite progress.Key words：liver fibrosis；hepatic stellate cell；cytokines；Chinese medicine； review    肝纖維化（Hepatic fibrosis，HF）是指肝臟內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)的合成大于降解，導(dǎo)致纖維結(jié)?組織異常過度沉積。HF是多種慢性肝病病情發(fā)展的共同病理基礎(chǔ)，是發(fā)展至肝硬化的必經(jīng)階段。肝纖維化發(fā)生、發(fā)展過程中和體內(nèi)多種細(xì)胞因子合成與功能失調(diào)有關(guān)。近年來,有些學(xué)者通過對HF發(fā)生機(jī)制的研究發(fā)現(xiàn),肝星細(xì)胞（

4、HSC）的激活、表型改變并分泌大量的細(xì)胞外基質(zhì)是HF發(fā)生的中心環(huán)節(jié)1。而細(xì)胞因子在肝星狀細(xì)胞的活化、表型改變并分泌大量的細(xì)胞外基質(zhì)中扮演重要角色2。    各種細(xì)胞因子根據(jù)其細(xì)胞因子在肝纖維化過程中所起的作用,可大致分為兩大類：促進(jìn)因子和抑制因子。前者包括如轉(zhuǎn)化生長因子（TGF?撥攏?、血小板衍生生長因子（PDGF）、白介素1、6、13（IL?1、6、13）、瘦素（leptin）、結(jié)締組織生長因子（CTGF）、血管緊張素（ANG）、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑（TIMPs）、腫瘤壞死因子?撥粒?TNF?撥粒齲緩笳咴蛑饕?為干擾素（IFN）家族,包括IFN?撥梁?IFN?撥

5、靡約鞍捉樗?10（IL?10）、肝細(xì)胞生長因子（HGF）、 基質(zhì)金屬蛋白酶家族（MMPS）等。近年來中醫(yī)藥在抗肝纖維化研究中取得了較大進(jìn)展，對各種相關(guān)因子的作用也有較深入的闡述，現(xiàn)將研究現(xiàn)狀，綜述如下。1  對促進(jìn)因子的作用1.1  結(jié)締組織生長因子（CTGF） CTGF是一種新發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子，在不同組織器官中，因其作用部位不同,表現(xiàn)出不同的生物學(xué)功能。在肝纖維化中CTGF是TGF?撥碌南掠渦葜?,介導(dǎo)了TGF?撥露約渲氏赴?的作用，如促進(jìn)其增殖及膠原合成3。中醫(yī)藥可通過降低CTGF達(dá)到治療肝纖維化的作用。賀松其等4用免疫組化方法觀察鱉甲煎丸對肝纖維化大鼠肝組織C

6、TGF的表達(dá)，示其能有效治療復(fù)合因素誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化，其作用機(jī)理可能是通過抑制肝纖維化組織CTGF的表達(dá)，進(jìn)而阻斷TGF?撥麓俳涸?合成作用、抑制細(xì)胞外基質(zhì)的合成，最終延緩肝纖維化的進(jìn)程。1.2  瘦素（leptin） 瘦素是主要由白色脂肪組織產(chǎn)的由肥胖基因所編碼的一種的分泌型蛋白質(zhì)5，能促進(jìn)HSC的增殖,抑制HSC的凋亡，介導(dǎo)肝星形細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì),導(dǎo)致肝纖維化的產(chǎn)生6。董培紅等7用不同濃度的川芎嗪培養(yǎng)大鼠的HSC細(xì)胞，用ELISA法檢測其上清液瘦素型和膠原水平發(fā)現(xiàn)川芎嗪抑制HSC增殖，并抑制型膠原表達(dá)和瘦素的表達(dá)，提示川芎嗪也有可能通過減少HSC瘦素的表達(dá)使膠原合成

7、減少，達(dá)到抗肝纖維化的作用。1.3  轉(zhuǎn)化生長因子?（TGF?撥攏?  TGF?撥率薔哂寫俳?細(xì)胞生長和轉(zhuǎn)化特性的一類物質(zhì)，在其超家族中，TGF?撥?1在肝纖維化形成和發(fā)展中起著重要作用8。主要是活化肝星狀細(xì)胞（HSC）：通過促進(jìn)HSC細(xì)胞增殖、表型的轉(zhuǎn)換、與功能的改變,生成與分泌大量ECM,并沉積于肝臟,促使肝纖維化的形成與發(fā)展，并可抑制肝細(xì)胞再生,誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡。有學(xué)者研究顯示中藥冬蟲夏草的提取物蟲草多糖脂質(zhì)體,鱉甲、莪術(shù)等合劑抗纖軟肝沖劑及中藥復(fù)方護(hù)肝片既能分別下調(diào)TGF?撥?1的基因轉(zhuǎn)錄9和抑制TGF?撥?1蛋白的表達(dá)10，又能在其基因轉(zhuǎn)錄、蛋白表達(dá)雙水平同時(shí)起作用

8、11。1.4  血小板衍生的生長因子（PDGF）  PDGF主要由肝內(nèi)枯否細(xì)胞和產(chǎn)生,也是一種重要的促分裂劑,能刺激多種與肝纖維化有關(guān)的細(xì)胞分裂和增殖,如經(jīng)PDGF 作用的HSC細(xì)胞貯存的脂滴消失,轉(zhuǎn)換為能產(chǎn)生ECM的肌成纖維細(xì)胞,合成大量ECM,活化的HSC分泌活性PDGF,又進(jìn)一步刺激HSC,形成了PDGF自分泌循環(huán)以維持HSC于活化狀態(tài)。另外還可誘導(dǎo)HSC合成IGF（胰島素樣生長因子）,TGF等細(xì)胞因子外,并通過增加IGF而刺激HSC增殖的作用。近來研究用中藥、中藥復(fù)方、中藥聯(lián)合西藥都有減少PDGF而減輕肝纖維化的作用。姚希賢等13用血清藥理學(xué)的方法研究益肝康，發(fā)現(xiàn)其

9、復(fù)方及拆方不僅有抑制PDGF基因和蛋白表達(dá)同時(shí)抑制其受體的基因和蛋白表達(dá)，且全方作用優(yōu)于拆方。單用抗纖二號、吡喹酮對小鼠日本血吸蟲病肝纖維化PDGF 表達(dá)的影響有限，但將此兩種藥物合用后PDGF?BB下降顯著，提示中西藥合用有助于提高療效14。1.5  腫瘤壞死因子（TNF?撥粒? 通常認(rèn)為TNF?撥潦墻櫚幾嗡鶘說鬧饕?和終末介質(zhì)，且與其他細(xì)胞因子相互影響并形成調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)，加強(qiáng)HSC的趨化性,促進(jìn)HSC的增殖和轉(zhuǎn)化，對肝纖維化的啟動及調(diào)控起重要作用。甘樂文等15發(fā)現(xiàn)：氧化苦參堿具有下調(diào)血清TNF?撥了?平的作用,且呈劑量依賴性，提示氧化苦參堿抑制膠原合成度和抗肝纖維化作用的機(jī)

10、制可能與下調(diào)血清TNF?撥了?平有關(guān)。2  對抑制因子的作用2.1  干擾素（INF） 干擾素包括 INF?撥梁? IFN?撥茫?是肝臟免疫反應(yīng)的重要因子之一，在臨床實(shí)踐中已證實(shí)具有良好的抗肝纖維化作用。目前研究顯示INF的作用較復(fù)雜，通過以下多種途徑發(fā)揮抗肝纖維化作用：通過抑制HSC的活化和增殖,降低ECM的沉積；通過抑制肝內(nèi)病毒復(fù)制及減輕炎癥反應(yīng)降低肝纖維化發(fā)生和進(jìn)展；抑制肝臟膠原的合成及促進(jìn)其降解；通過抑制膠原蛋白基因的表達(dá)及上調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制劑的活性等降低膠原的沉積；抑制TGF2B的表達(dá)；抗脂質(zhì)過氧化作用。中醫(yī)藥在治療肝纖維化過程中能增加INF的表

11、達(dá)，因而推測其可能通過誘導(dǎo)內(nèi)源性INF的產(chǎn)生來實(shí)現(xiàn)的。劉春宇16、韓曉靜17分別用沙苑子黃酮、大黃蟄蟲丸觀察中藥對四氯化碳（CCL4）誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化的影響。用ELISA 法檢測血清IFN?撥謾?TGF?撥?1蛋白含量，發(fā)現(xiàn)其不僅有改善肝功能、減輕肝臟纖維化病理改變，而且有上調(diào)IFN?勃撥謾碌?TGF?撥?1的作用，提示上調(diào)IFN?撥玫謀澩鍤瞧淇垢蝸宋?化的可能機(jī)制之一。用黃芪治療人肝纖維化后檢測相關(guān)細(xì)胞因子，也驗(yàn)證了動物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，提示中藥誘導(dǎo)內(nèi)源性IFN?撥貌?生在動物和人肝纖維化治療中有良好的一致性 18。2.2  肝細(xì)胞生長因子（HGF）  肝細(xì)胞生長因子由非實(shí)質(zhì)

12、細(xì)胞如HSC、竇狀內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的多效性的細(xì)胞因子,在刺激肝細(xì)胞增殖和抑制肝纖維化中起重要作用：HGF可以減少前膠原mRNA的表達(dá)水平、抑制TGF?撥?1mRNA的表達(dá)、保護(hù)肝細(xì)胞、促進(jìn)肝細(xì)胞增殖與成熟。晏維19用肝炎平作用血吸蟲性感染后肝纖維化家兔，用蘇木精?慘梁烊舊?觀察肝臟病理形態(tài)改變，免疫組化法檢測各組HGF、TGF?撥?1在肝內(nèi)的表達(dá)；RT?PCR和Westernblot法分別檢測各組HGF、TGF?撥?1mRNA和蛋白表達(dá)水平發(fā)現(xiàn)肝炎平能促進(jìn)HGF的表達(dá)而抑制TGF?撥?1，因而認(rèn)為增加HGF表達(dá)是其可能的機(jī)制之一。 2.3  血管緊張素（ANG） 近來研究發(fā)現(xiàn)血

13、管緊張素在肝纖維化的發(fā)生發(fā)展中也扮演著重要角色，血管緊張素主要通過直接刺激肝星狀細(xì)胞使其活化、增殖，促進(jìn)ECM的沉積；增加肝纖維化促進(jìn)因子TGF?撥隆?PDGF、核因子（NF?撥?B）及整合素等的合成和分泌及減少抑制因子HGF的合成和分泌、下降金屬蛋白質(zhì)酶組織抑制因子MMP?1活性，增高M(jìn)MP?2,-9活性導(dǎo)致膠原代謝失常等。楊玲20用莪術(shù)提取物治療大鼠肝纖維化過程中發(fā)現(xiàn)其有降低大鼠血管緊張素及其型受體表達(dá)，提示其抗纖維化作用機(jī)理可能與干擾血管緊張素分泌及阻斷AT1受體的表達(dá)有關(guān)。2.4  基質(zhì)金屬蛋白酶家族（MMPS）和基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑（TIMPs） 肝纖維化的主要病

14、理變化是ECM的合成和降解失衡導(dǎo)致其在肝臟中的過多沉積、重構(gòu)?；|(zhì)金屬蛋白酶-基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑是肝臟ECM代謝的主要調(diào)節(jié)因素，前者促進(jìn)降解，后者是對前者降解作用的抑制。當(dāng)MMPs?TIMPs功能失調(diào)會導(dǎo)致ECM沉積增多和纖維化的發(fā)生。邱德凱21從基因水平研究冬蟲夏草抗肝纖維化機(jī)理,表明該中藥通過促進(jìn)肝組織膠原酶mRNA表達(dá)而促使、膠原降解的?？鄥⑺貙Cl4誘導(dǎo)的肝纖維化有預(yù)防及治療作用,其部分機(jī)制為通過減少M(fèi)MP?2mRNA、MMP?2活性蛋白的表達(dá)、抑制其活性，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的降解,并使肝竇基底膜的完整性得以保持,從而減輕或逆轉(zhuǎn)肝纖維化22。3  其它 &

15、#160;  白細(xì)胞介素（IL）家族中既有促進(jìn)又有抑制肝纖維化形成的因子，IL?4、IL?10抑制HSC的激活，IL?1，IL ?6可促進(jìn)肝HSC細(xì)胞增殖，刺激HSC合成膠原蛋白。成揚(yáng)等23 應(yīng)用氧化苦參堿作用小鼠免疫性肝纖維化模型，發(fā)現(xiàn)其可抑制肝組織膠原纖維增生，下調(diào)IL?4、IL?10的表達(dá)水平。中藥復(fù)方肝纖靈不同劑量能使機(jī)體內(nèi)的 IL?1、IL?6和 TNF?撥戀謀浠?趨于正常，其中尤以中劑量組作用顯著，其抗肝纖維化作用與 IL?1、IL?6和 TNF?撥戀認(rèn)赴?因子直接相關(guān)24。    另外，中藥還能調(diào)解與肝纖維化相關(guān)的因子如細(xì)胞內(nèi)皮素（ET?1

16、）、核因子KB（NF?KB）、細(xì)胞間粘附分子（ICAM?1）、血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）等。限于篇幅，在此暫不敘述。4  展望    綜上所述，中醫(yī)藥在肝纖維化相關(guān)因子的研究中取得了較多的成果，但同時(shí)也存在一些問題需要解決。主要有1.范圍局限：與肝纖維化相關(guān)的因子眾多，目前中醫(yī)藥對其研究的范圍大多限于幾種主要的因子。2.機(jī)制欠清：現(xiàn)有的研究對于中藥復(fù)方的有效活性成分及其相互作用機(jī)制難以闡明。3.研究對象單一：肝纖維化過程中細(xì)胞因子的作用是綜合的，研究單個(gè)因子或研究因子的某個(gè)作用仍是目前研究的主流。4.研發(fā)脫節(jié)：不少研究只是限于動物階段，缺少進(jìn)一步的臨床

17、試驗(yàn)。5.模型單一：動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ捅容^單一，與臨床常見的病毒性肝炎所致肝纖維化有一定差距。    因此，我們應(yīng)在傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)理論的指導(dǎo)下，借助現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的研究成果和方法，針對研究中出現(xiàn)的問題，對中醫(yī)藥抗肝纖維化進(jìn)行系統(tǒng)、詳細(xì)的分析；同時(shí)在動物造模上拓寬思路，綜合考慮，通過對病毒性肝炎,酒精性肝炎及脂肪肝等所致肝纖維化病因、病理的研究，針對主要病因,建立能真實(shí)、客觀反映人類肝纖維化的發(fā)病機(jī)理的動物模型。在今后的研究工作中,一方面要尋找新的有效成分,另一方面可開展已有的幾種有效成分之間的作用比較,去粗取精,進(jìn)一步闡明不同成分的主要作用機(jī)制,以尋找療效更佳的藥物?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】&

18、#160; 1Cassiman D，Libbrecht L，Desmet V，etal.Hepatic stellate cell/ myofibroblast subpopulations in fibrotic human and rat liversJ.J Hepatol,2002,36：2002,209.2Bataller R，Brenner DA.Liver fibrosisJ.J Clin Invest 2005，115（2）：209?218.3Frazier K，Williams S，Kothapalli D，et al.Stimulation of fibroblast cel

19、l growth，matrix production，and granulation tissue formation by connective tissue growth factor.Invest Dermatol,1996，107（3）：404?11.4賀松其.鱉甲煎丸對肝纖維化模型大鼠結(jié)締組織生長因子的影響J.遼寧中醫(yī)雜志,2005，32（12）：1334?1335.5Bataller R，Brenner DA.Liver fibrosisJ.J Clin Invest，2005，115（2）：209?218.6Bataller R，Brenner DA.Liver fibrosis

20、J.J Clin Invest，2005，115（4）：1100.7董培紅,鄭宇,朱碧紅,等.川芎嗪對大鼠肝星狀細(xì)胞膠原合成及瘦素表達(dá)的影響J.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2005，21（23）2613?2615.8Akiyoshi S，Ishii M，Nemoto N，Kawabata M，Aburatani H，Miyazono KJ.Jpn J Cancer Res,2001，92：257?268.9李泓俊,彭欣輝,吳應(yīng)蓮,等.蟲草多糖脂質(zhì)體對小鼠免疫性肝纖維化TGF?撥?1mRNA表達(dá)的影響J.醫(yī)學(xué)臨床研究，2004，21（5）：500?503.10周正,劉麗萍,張赤志,等.抗纖軟肝沖劑對肝星狀細(xì)胞自分泌轉(zhuǎn)化生長因子的影響J.中國中醫(yī)藥信息雜志,2003，10（9）：21?22.11嚴(yán)茂祥.中藥肝力克對實(shí)驗(yàn)性肝纖維化的影響J.浙江中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2003，27（5）：55.13姚希賢,房紅梅,王軍民.拆方益肝康與藥物血清對肝星狀細(xì)胞PDGF及受體表達(dá)的影響J.世界消化雜志，2005，13（12）：1412?1416.14余治健,向選東,李萍等.抗纖二號治療小鼠日本血吸蟲病肝纖維化療效觀察及對肝臟PDGF表達(dá)的影響J.四川醫(yī)學(xué),2