1、1(2012·高考浙江卷)天然的玫瑰沒有藍色花，這是由于缺少控制藍色色素合成的基因B，而開藍色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B?，F(xiàn)用基因工程技術培育藍玫瑰，下列操作正確的是()A提取矮牽牛藍色花的mRNA，經(jīng)逆轉錄獲得互補的DNA，再擴增基因BB利用限制性核酸內(nèi)切酶從開藍色花矮牽牛的基因文庫中獲取基因BC利用DNA聚合酶將基因B與質(zhì)粒連接后導入玫瑰細胞D將基因B直接導入大腸桿菌，然后感染并轉入玫瑰細胞解析：選A。提取矮牽牛藍色花的mRNA，逆轉錄得到DNA，然后擴增，可獲得大量的基因B，A正確；從基因文庫中獲取目的基因，只要根據(jù)目的基因的相關信息和基因文庫中的信息進行篩選對比即可，不

2、需要用限制酶進行切割，B錯誤；目的基因與質(zhì)粒的連接需要用DNA連接酶，而不是DNA聚合酶，C錯誤；目的基因需要和運載體連接后形成重組質(zhì)粒再導入，而且應該用農(nóng)桿菌進行感染，而不是大腸桿菌，D錯誤。2(2011·高考浙江卷)將ada(腺苷酸脫氨酶基因)通過質(zhì)粒pET28b導入大腸桿菌并成功表達腺苷酸脫氨酶。下列敘述錯誤的是()A每個大腸桿菌細胞至少含一個重組質(zhì)粒B每個重組質(zhì)粒至少含一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點C每個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點至少插入一個adaD每個插入的ada至少表達一個腺苷酸脫氨酶分子解析：選C。大腸桿菌成功表達出腺苷酸脫氨酶，說明這些大腸桿菌都至少含有一個重組質(zhì)粒，A項

3、正確；作為載體的條件為至少含有一個或多個酶切位點，所以作為載體的質(zhì)粒至少含有一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點，B項正確；作為基因表達載體應包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因四部分，但并不是每個酶切位點都至少插入一個ada，C項錯誤；由于這些目的基因成功表達，所以每個ada至少表達一個腺苷酸脫氨酶分子，D項正確。3(2011·高考四川卷)北極比目魚中有抗凍基因，其編碼的抗凍蛋白具有11個氨基酸的重復序列，該序列重復次數(shù)越多，抗凍能力越強。下圖是獲取轉基因抗凍番茄植株的過程示意圖，有關敘述正確的是()A過程獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚基因組測序B將多個抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能

4、表達的新基因，不能得到抗凍性增強的抗凍蛋白C過程構成的重組質(zhì)粒缺乏標記基因，需要轉入農(nóng)桿菌才能進行篩選D應用DNA探針技術，可以檢測轉基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達解析：選B。因為一種氨基酸可能對應多種密碼子、真核生物體內(nèi)的基因含有內(nèi)含子等因素，導致逆轉錄合成的目的基因與原基因有較大的差異，所以人工合成的目的基因不能用于比目魚基因組測序，A選項錯誤；抗凍蛋白的11個氨基酸的重復序列重復次數(shù)越多，抗凍能力越強，并不是抗凍基因的編碼區(qū)重復次數(shù)越多抗凍能力越強，抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成的新基因已不是原來的抗凍基因，因此不能得到抗凍性增強的抗凍蛋白，B選項正確；農(nóng)桿菌轉化法是將目的基因

5、導入植物細胞的最常用方法，不是為了篩選含有標記基因的質(zhì)粒，C選項錯誤；應用DNA探針技術，可以檢測轉基因植物中目的基因的存在，但不能完成對目的基因表達的檢測，D選項錯誤。4在用基因工程技術構建抗除草劑的轉基因煙草過程中，下列操作錯誤的是()A用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草花葉病毒的核酸B用DNA連接酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體C將重組DNA分子導入煙草原生質(zhì)體D用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉基因煙草細胞解析：選A。限制性核酸內(nèi)切酶用于提取目的基因和切割載體，煙草花葉病毒的遺傳物質(zhì)是RNA，不能用限制性核酸內(nèi)切酶切割，A項錯誤；DNA連接酶可以連接具有相同粘性末端的目的基因和載體，B項正確；受體細胞可

6、以是受精卵和體細胞，也可以是去除細胞壁的原生質(zhì)體，C項正確；目的基因為抗除草劑基因，所以未成功導入目的基因的細胞不具有抗除草劑的能力，篩選時應該用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉基因細胞，D項正確。5(2012·高考福建卷)肺細胞中的let­7基因表達減弱，癌基因RAS表達增強，會引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術將let­7基因?qū)敕伟┘毎麑崿F(xiàn)表達，發(fā)現(xiàn)肺癌細胞的增殖受到抑制。該基因工程技術基本流程如圖1。請回答：(1)進行過程時，需用_酶切開載體以插入let­7基因。(2)進行過程時，需用_酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細胞，以利于傳代培養(yǎng)。(3)研究發(fā)現(xiàn)，let&

7、#173;7基因能影響癌基因RAS的表達，其影響機理如圖2。據(jù)圖分析，可從細胞中提取_進行分子雜交，以直接檢測let­7基因是否轉錄。肺癌細胞增殖受到抑制，可能是由于細胞中_(RAS mRNA/RAS蛋白)含量減少引起的。解析：(1)過程表示基因表達載體的構建，在該過程中需要用限制酶對載體進行切割以便于目的基因的插入(限制性核酸內(nèi)切酶，簡稱限制酶)。(2)過程表示動物細胞培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中出現(xiàn)接觸抑制后可以用胰蛋白酶處理，使之分散成單個的細胞，之后分裝到其他培養(yǎng)瓶里面進行傳代培養(yǎng)。(3)判斷目的基因是否在受體細胞中轉錄，可用分子雜交技術來進行，從細胞中提取mRNA和用放射性同位素或者熒

8、光標記的目的基因單鏈DNA片段進行雜交。根據(jù)題中信息“肺組織細胞中的let­7基因表達減弱，癌基因RAS表達就增強，引發(fā)肺癌”，導入let­7基因后，肺癌細胞受到抑制，說明RAS基因表達減弱，導致細胞中的RAS蛋白質(zhì)含量減少進而導致癌細胞受抑制。答案：(1)限制性核酸內(nèi)切(或限制)(2)胰蛋白(3)RNARAS蛋白 6(2011·高考上海卷)回答下列有關基因工程的問題。(1)基因工程中使用的限制酶，其特點是_。如圖四種質(zhì)粒含有E1和E2兩種限制酶的識別位點，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四環(huán)素的抗性基因。(2)將兩端用E1切開的Tcr基因與用E1切開的

9、質(zhì)粒X­1混合連接，連接后獲得的質(zhì)粒類型有_。(多選)AX­1BX­2CX­3DX­4(3)若將上圖所示X­1、X­2、X­3、X­4四種質(zhì)粒導入大腸桿菌，然后分別涂布在含有青霉素或四環(huán)素的兩種培養(yǎng)基上。在這兩種培養(yǎng)基上均不能生長的大腸桿菌細胞類型有_、_。(4)如果X­1用E1酶切，產(chǎn)生850對堿基和3 550對堿基兩種片斷：那么質(zhì)粒(X­2Tcr基因的長度為1 200對堿基)用E2酶切后的片段長度為_對堿基。(5)若將外源的Tcr基因兩端用E2切開，再與用E2切開的X­1

10、混合連接，并導入大腸桿菌細胞，結果顯示，含X­4的細胞數(shù)與含X­1的細胞數(shù)之比為13，增大DNA連接酶用量能否提高上述比值？_。原因是_。解析：(1)基因工程中使用的限制酶，其特點是特異性地識別和切割DNA。(2)用限制酶E1切開質(zhì)粒X­1后，質(zhì)粒X­1暴露出兩個粘性末端，APr被切下。兩端用E1切開的Tcr基因含有與上述切割后的質(zhì)粒X­1，Apr含有相同的粘性末端，混合后可形成X­1、X­2和X­3。(3)含質(zhì)粒X­1的細胞可在含青霉素的培養(yǎng)基上生長，含質(zhì)粒X­2的細胞可在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生

11、長；含質(zhì)粒X­3的細胞不含抗性基因，不能在兩種培養(yǎng)基上生長；不含有質(zhì)粒的細胞也不能在兩種培養(yǎng)基上生長。(4)X­2的長度為1 2003 5504 750，用E2酶切后質(zhì)粒由環(huán)狀變?yōu)殒湢睢?5)兩段DNA粘性末端相同，DNA連接酶對DNA片段沒有選擇性，故增大DNA連接酶用量不能提高上述比例。答案：(1)特異性地識別和切割DNA(2)ABC(3)無質(zhì)粒的細胞含X­3的細胞(4)4 750(5)不能DNA連接酶對DNA片段沒有選擇性(或兩段DNA末端相同)1(2013·紹興質(zhì)檢)下列有關基因工程的敘述，正確的是() ADNA連接酶能將任意兩個粘性末端連接起來

12、 B目的基因?qū)胧荏w細胞后，受體細胞發(fā)生了基因重組 C限制性核酸內(nèi)切酶能夠識別和切割DNA和RNA D常使用的載體有大腸桿菌、噬菌體和動植物病毒解析：選B。DNA連接酶將限制性核酸內(nèi)切酶“切”出的相同粘性末端重新連接形成磷酸二酯鍵，或者連接平末端的兩個片段；目的基因?qū)胧荏w細胞后，是屬于廣義的基因重組；限制性核酸內(nèi)切酶是可以識別DNA的特異序列，并在識別位點或其周圍切割雙鏈DNA的一類內(nèi)切酶，不能切割RNA；基因工程中最常用的載體是細菌質(zhì)粒、噬菌體和動植物病毒。2對下圖所示粘性末端的說法錯誤的是()A甲、乙、丙粘性末端是由各自不同的限制性核酸內(nèi)切酶催化產(chǎn)生的B甲、乙具相同的粘性末端可形成重組D

13、NA分子，但甲、丙之間不能CDNA連接酶作用位點在b處，催化磷酸基團和脫氧核糖之間形成化學鍵D切割甲的限制性核酸內(nèi)切酶不能識別由甲、乙片段形成的重組DNA分子解析：選C。甲圖表示在G和A之間進行剪切，乙圖表示在C和A之間進行剪切，丙圖表示在C和T之間進行剪切，因此三者需要不同的限制性核酸內(nèi)切酶進行剪切；甲和乙的粘性末端相同，能夠通過堿基互補配對形成重組DNA分子，但甲和丙不行；DNA連接酶作用的位點是磷酸二酯鍵，乙圖中的a和b分別表示磷酸二酯鍵和氫鍵；甲和乙形成的重組DNA分子相應位置的DNA堿基序列為，而甲在G和A之間切割，所以該重組序列不能被切割甲的限制性核酸內(nèi)切酶識別。3(2013

14、83;杭州模擬)鹽害是全球水稻減產(chǎn)的重要原因之一，中國水稻研究所等單位的專家通過農(nóng)桿菌中的質(zhì)粒將CMO基因、BADH基因、mtld基因、gutD基因和SAMDC基因5個耐鹽基因?qū)胨?，獲得了一批耐鹽轉基因植株。下列有關耐鹽轉基因水稻培育的分析正確的是()A該基因工程涉及多個目的基因，多種載體B該基因工程所需的限制性核酸內(nèi)切酶可能有多種C只要目的基因進入水稻細胞，水稻就會表現(xiàn)出抗鹽性狀D可通過將水稻種植到有農(nóng)桿菌的土壤中觀察目的基因是否表達解析：選B。該基因工程涉及多個目的基因，但只用到一種載體農(nóng)桿菌中的質(zhì)粒；因為涉及到多個目的基因，可能需要多種限制酶進行切割；目的基因?qū)胧荏w細胞后，經(jīng)表達成

15、功后才能表現(xiàn)出相應的性狀；通過將水稻種植在含鹽的土壤中觀察目的基因是否表達，以衡量基因工程操作是否成功。4酶是生命活動過程中的重要有機物，下列有關酶的敘述錯誤的是()A胰蛋白酶是動物細胞工程中常用的工具酶BRNA聚合酶、DNA連接酶和解旋酶作用的化學鍵相同C基因工程的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶DPCR技術中使用耐高溫的Taq DNA聚合酶擴增DNA片段解析：選B。轉錄過程中，RNA聚合酶連接的化學鍵與DNA連接酶作用的化學鍵相同，都為磷酸二酯鍵，而解旋酶是斷裂DNA雙鏈之間的氫鍵。5通過基因工程，可使大腸桿菌合成人的胰島素。下列敘述不正確的是()A常用相同的限制性核酸內(nèi)切酶處理目的

16、基因和質(zhì)粒B根據(jù)人的胰島素和氨基酸序列推測胰島素基因的序列，再化學合成胰島素基因C大腸桿菌能合成人的胰島素，是因為有相同的雙螺旋結構D導入大腸桿菌的人的胰島素基因不一定能成功表達解析：選C。基因工程中，需要用相同的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒以得到相同的粘性末端，便于連接，A正確；在轉錄和翻譯過程中嚴格遵循堿基互補配對原則，因此可根據(jù)人的胰島素的氨基酸序列推測胰島素基因的序列，再化學合成胰島素基因，B正確；大腸桿菌能合成人的胰島素，是因為各種生物共用一套遺傳密碼子，目的基因在大腸桿菌內(nèi)能夠表達，而非具有相同的雙螺旋結構，C錯；導入大腸桿菌的人的胰島素基因不一定能成功表達，需對其轉錄和翻譯過程分別進

17、行檢測，D正確。6(2013·寧波模擬)基因工程又稱基因拼接技術和DNA重組技術，是在分子水平上對基因進行操作的復雜技術，是生物工程的一個重要分支。基因表達載體的構建(即目的基因與載體結合)是實施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。以下有關說法正確的是()A限制性核酸內(nèi)切酶的功能是降解各種DNA分子B基因工程中經(jīng)常用到的酶就是DNA連接酶和限制性核酸內(nèi)切酶C將目的基因與載體結合的過程，實際上就是不同來源的DNA重新組合的過程D具有粘性末端的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處，先形成磷酸二酯鍵，再形成氫鍵解析：選C。大腸桿菌等生物對付噬菌體和外來DNA的入侵，依賴于修飾酶和限制性核酸內(nèi)切酶

18、。其中修飾酶是修飾宿主自身的DNA，使之打上標記，避免自身的DNA被限制性核酸內(nèi)切酶分解。限制酶的作用是降解外來的DNA，自身DNA由于受到保護而不會被降解，A選項錯誤。基因工程常用的酶除了DNA連接酶和限制性核酸內(nèi)切酶，還有DNA聚合酶(合成DNA片段)、逆轉錄酶(用mRNA逆轉錄生成DNA)等多種酶，B選項錯誤。在基因表達載體的構建時先用一定的限制酶切割載體(如質(zhì)粒)，使質(zhì)粒出現(xiàn)一個缺口，露出粘性末端。然后用同一種限制酶切割目的基因，使其產(chǎn)生相同的粘性末端(部分限制性內(nèi)切酶可切割出平末端，具有相同效果)。將切下的具有粘性末端的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處，首先是堿基互補配對結合，兩個粘性末

19、端吻合在一起，堿基之間形成氫鍵，再在DNA連接酶的作用下，催化兩條DNA鏈之間形成磷酸二酯鍵，從而將相鄰的脫氧核糖核酸連接起來，形成一個重組DNA分子。C選項正確，D選項錯誤。7下面是四種不同質(zhì)粒的示意圖，其中ori為復制必需的序列，amp為氨芐青霉素抗性基因，tet為四環(huán)素抗性基因，箭頭表示一種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點。若要得到一個能在四環(huán)素培養(yǎng)基上生長而不能在氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長的含重組DNA的細胞，應選用的質(zhì)粒是()解析：選C。A項破壞了復制必需的序列，不能復制。B項氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因都完好，在四環(huán)素培養(yǎng)基上和氨芐青霉素培養(yǎng)基上都能生長。C項氨芐青霉素抗性基因被破壞，

20、四環(huán)素抗性基因完好，能在四環(huán)素培養(yǎng)基上生長而不能在氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長。D項氨芐青霉素抗性基因完好，四環(huán)素抗性基因被破壞。8利用外源基因在受體細胞中表達，可生產(chǎn)人類所需的產(chǎn)品。下列選項中能說明目的基因完成表達的是()A棉花細胞中檢測到載體上的標記基因B山羊乳腺細胞中檢測到人生長激素的基因C大腸桿菌中檢測到人胰島素基因的mRNAD酵母菌細胞中提取到人的干擾素解析：選D。“基因完成表達”說明不僅基因存在于受體細胞中而且在受體細胞中已完成表達，能檢測到基因表達的產(chǎn)物，而表達又包括了轉錄和翻譯兩個過程。分析四個選項，選項A、B能檢測到載體上的標記基因，這只能說明將目的基因?qū)胧荏w細胞這一步成功，還不

21、能說明目的基因在受體細胞中能表達；選項C能檢測到人胰島素基因的mRNA，說明轉錄這一步已完成，但不能說明翻譯過程的情況；選項D能檢測到基因表達的產(chǎn)物人的干擾素，說明目的基因完成表達。9(2013·嘉興模擬)圖甲、乙中的箭頭表示三種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點，Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Ner 表示新霉素抗性基因。下列敘述正確的是()A圖甲中的質(zhì)粒用BamH切割后，含有4個游離的磷酸基團B在構建重組質(zhì)粒時，可用Pst和BamH切割質(zhì)粒和外源DNAC用Pst和Hind 酶切，加入DNA連接酶后可得到1種符合要求的重組質(zhì)粒D導入目的基因的大腸桿菌可在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生長解析：選C

22、。環(huán)狀質(zhì)粒被限制酶切割后會出現(xiàn)2個游離的磷酸基因；如果用BamH切割外源DNA后，會破壞目的基因；導入目的基因的大腸桿菌能否在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生長，關鍵看限制酶的切割部位在哪里，如果用Pst切割Ampr的話，由于Ampr基因被破壞，所以不能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生長。10下面是獲得抗蟲棉的技術流程示意圖。有關敘述錯誤的是()A重組質(zhì)粒構建過程中需要限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶B圖中愈傷組織分化產(chǎn)生的再生植株基因型一般都相同C卡那霉素抗性基因中含有相關限制性內(nèi)切酶的識別位點D轉基因抗蟲棉有性生殖的后代不能穩(wěn)定保持抗蟲性狀解析：選C。重組質(zhì)粒構建過程中需要限制性內(nèi)切酶切出相同的粘性末端，再經(jīng)

23、DNA連接酶連接形成重組質(zhì)粒，故A正確；細胞分化的過程不會改變遺傳物質(zhì)，故形成的再生植株的基因型一般是相同的，故B正確；卡那霉素抗性基因作為標記基因，其中不可能含有相關限制性內(nèi)切酶的識別位點，故C錯；轉基因抗蟲棉植株相當于雜合子，其后代會發(fā)生性狀分離，故D正確。11某研究小組為了研制預防禽流感病毒的疫苗，開展了前期研究工作。其簡要的操作流程如下圖。下列有關敘述錯誤的是()A步驟所代表的過程是逆轉錄B步驟需使用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶C步驟可用CaCl2處理大腸桿菌，使其從感受態(tài)恢復到常態(tài)D檢驗Q蛋白的免疫反應特性，可用Q蛋白與患禽流感康復的雞的血清進行抗原抗體特異性反應實驗解析：選C。由

24、圖可知，步驟所代表的過程是逆轉錄；步驟需使用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶；步驟可用CaCl2處理大腸桿菌，使其從常態(tài)轉化為感受態(tài)細胞；檢驗Q蛋白的免疫反應特性，可用Q蛋白與患禽流感康復的雞的血清進行抗原抗體特異性反應實驗。12我國科學家發(fā)現(xiàn)控制水稻產(chǎn)量的基因OsSPL14，將其植入我國南方水稻后，其產(chǎn)量增加了10%左右。下列有關敘述正確的是()A導入了OsSPL14基因的水稻有可能合成出對人體有直接毒性或潛在毒性的蛋白質(zhì)B該技術用到了三種工具酶：限制酶、DNA連接酶和載體C用DNA連接酶連接目的基因和質(zhì)粒，其產(chǎn)物必定是載體與OsSPL14基因形成的重組DNA分子D植物細胞作為受體細胞時，可用

25、氯化鈣處理增大細胞壁的通透性解析：選A。OsSPL14基因的表達產(chǎn)物可能對人體有毒性或者潛在的毒性；基因工程中用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶，載體不是工具酶；DNA連接酶在連接目的基因和質(zhì)粒時，產(chǎn)物可能是載體目的基因，也有可能是載體載體、目的基因目的基因；將重組DNA分子導入植物細胞時一般不用氯化鈣處理，常用農(nóng)桿菌轉化法、基因槍法、花粉管通道法，導入細菌細胞時用氯化鈣處理。13(2013·寧波模擬)我國科學家成功克隆了控制水稻理想株型的關鍵多效基因IPA1。研究發(fā)現(xiàn)，基因IPA1發(fā)生突變后，會使水稻穗粒數(shù)和千粒重(以克表示的一千粒種子的重量)增加，同時莖稈變得粗壯，增加了抗倒伏能

26、力。實驗顯示，將突變后的IPA1基因?qū)氤Ｒ?guī)水稻品種，可以使其產(chǎn)量增加10%以上。下圖表示該水稻新品種的簡易培育流程，據(jù)圖回答：(1)上圖所示流程中步驟是實驗所用技術的核心步驟。此步驟使_和_構成重組質(zhì)粒。(2)將重組質(zhì)粒導入土壤農(nóng)桿菌之前，常用_處理該細菌，以增加該細菌_的通透性。(3)每個含突變基因IPA1的重組質(zhì)粒中至少含_個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點。(4)過程應用的主要生物技術是_，原理是_。在該技術過程中，以適當配比的營養(yǎng)物質(zhì)和生長調(diào)節(jié)劑誘導_，才能得到水稻新品種植株。(5)從變異類型上分析，該水稻的新性狀的出現(xiàn)應該屬于可遺傳變異中的_。解析：基因工程操作的核心步驟是把目的基因和載體

27、連接成重組DNA分子，這里的目的基因是突變的IPA1基因，載體則用Ti質(zhì)粒。用氯化鈣處理細菌，增大細菌細胞壁的通透性，可以提高導入重組DNA分子的成功率。形成的重組質(zhì)粒中至少含有一個限制性核酸內(nèi)切酶的識別位點，且每個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點只能插入一個目的基因。利用細胞的全能性，把已經(jīng)導入了目的基因的受體細胞通過植物組織培養(yǎng)可以形成完整的新品種植株，這種新品種植株中的新性狀的出現(xiàn)屬于基因重組。答案：(1)突變的IPA1基因 Ti質(zhì)粒 (2)氯化鈣 細胞壁(3)1(4)植物組織培養(yǎng) 植物細胞的全能性 愈傷組織(5)基因重組14轉基因生物作為生物反應器，用于生產(chǎn)人們所需要的藥用蛋白，如激素、抗體、疫苗、酶等。下圖是通過生物工程培育能產(chǎn)生人胰島素的煙草的過程。請據(jù)圖回答：(1)構建表達載體的A過程中，需要用到的工具酶有_和_。(2)D過程采用的方法是_。若把重組質(zhì)粒導入動物細胞，常采用的方法是_。(3)E過程采用的技術主要包括_和_兩個階段。(4)如果利用DNA分子雜交原理對再生