1、小園形、亮的細胞從組織移植塊中爬出箭頭所示小園形、亮的細胞從組織移植塊中爬出箭頭所示200200 左圖，分選前流式細胞儀檢測培育細胞左圖，分選前流式細胞儀檢測培育細胞c-kit陽性率陽性率右圖，用流式細胞儀分選經(jīng)右圖，用流式細胞儀分選經(jīng) c-kit 標志的細胞標志的細胞流式細胞儀鑒定分選后流式細胞儀鑒定分選后CD34、CD45的陽性率的陽性率分選后的單個細胞左圖，培育后簇集式增殖、心球樣細胞團構(gòu)成右圖分選后的單個細胞左圖，培育后簇集式增殖、心球樣細胞團構(gòu)成右圖200在光學(xué)顯微鏡下在光學(xué)顯微鏡下(左圖左圖)、熒光顯微鏡下右圖察看剛分選、熒光顯微鏡下右圖察看剛分選的同一批的同一批c-kit+細胞細

2、胞400051015200100000200000300000心尖部細胞心尖部細胞心臟中部細胞心臟中部細胞心房 細胞心房 細胞 ? ?時間 (d)細 胞數(shù) 量051015200100000200000300000雌性雄性時間 (d)細 胞 數(shù) 量分選后分選后4周用抗周用抗cTnI, SMA and CD31抗體檢測培育細胞抗體檢測培育細胞免疫表型免疫表型A,300; B-C,200A AC CB B0.00.51.01.5GATA-4HCN 2HCN 4at week 2at week 4at week 8 * *#relative mRNA expressionRT-PCR方法分析分選細胞不

3、同培育時間的方法分析分選細胞不同培育時間的GATA-4, HCN2和和HCN4的的mRNA表達表達 * P 0.05, # P 0.01, 培育培育8周組周組 vs 培育培育4周組周組 用抗用抗cTnI, GATA4抗體檢測經(jīng)抗體檢測經(jīng)5-Aza誘導(dǎo)后誘導(dǎo)后CSCs分化的免疫表型分化的免疫表型A,200; B,400用抗用抗HCN4抗體檢測經(jīng)抗體檢測經(jīng)5-Aza誘導(dǎo)后誘導(dǎo)后CSCs分化細胞表達分化細胞表達HCN4蛋白情況蛋白情況A,400; B,200不同濃度不同濃度5-aza誘導(dǎo)后的細胞在誘導(dǎo)后的細胞在4周時表達周時表達GATA-4, cTnI和和HCN4蛋白情況蛋白情況 . 10uM組與前

4、兩組比較，組與前兩組比較， # P 0.055-Aza誘導(dǎo)濃度誘導(dǎo)濃度010203040cTnIGATA4HCN405uM10uM#熒光 染 色 陽性 率RT-PCR技術(shù)分析在不同濃度技術(shù)分析在不同濃度5-aza誘導(dǎo)后的細胞在不同培育時間的誘導(dǎo)后的細胞在不同培育時間的GATA-4, HCN2和和HCN4 mRNA表達表達 0.00.20.40.60.81.0GATA-4HCN2HCN4#Brelative mRNA expressionRT-PCR技術(shù)分析在不同濃度技術(shù)分析在不同濃度5-aza誘導(dǎo)后的培育細胞在不同培育時間的誘導(dǎo)后的培育細胞在不同培育時間的GATA-4, HCN2和和HCN4 mRNA表達表達. P 0.05, # P 0.01, 2組組 vs 3組或組或4組組 體外培育條件下可以獲得體外培育條件下可以獲得c-kit+ C D 3 4 - C D 4 5 - C S C s不同部位不同性別來源不同部位不同性別來源CSCs的增殖的增殖 才干存在差別才干存在差別c-kit+CSCs具有向心肌樣和竇房結(jié)樣具有向心肌樣和竇房結(jié)樣 細胞分化的才干細胞分化的才干10M 5-Aza有加強上述分化的作用有加強上述分化的作用ASCsBMSCs細胞形狀學(xué)流式細胞儀檢測細胞外表標志物增殖才干比較5-AZa誘導(dǎo)倒置