1、生化鑒定類實驗此類實驗是利用物質(zhì)的一些特性來鑒定該物質(zhì)，因此物質(zhì)的特性及常用的鑒定方法必須牢牢掌握。高巾生物學教材中相關的實驗有：生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定；葉綠體中色素的提取和分離；DNA的粗提取與鑒定。中學階段，最常用的提取、分離方法是利用各種物質(zhì)溶解度的差異進行鹽析或層析；最常用的鑒別（定）方法是利用各種物質(zhì)特定的顯色反應，此法應嚴格控制樣品的量，和排除其他有關物質(zhì)的干擾，最常用的定量方法是滴定法和比色法。、實驗：生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定1實驗原理：某些化學試劑能夠使生物組織中的有關化合物，產(chǎn)生特定的顏色反應。還原糖斐林試劑磚紅色沉淀脂肪蘇丹染液橘黃色顯色反應脂肪蘇

2、丹染液紅色蛋白質(zhì)十雙縮脲試劑紫色反應2方法步驟：還原糖的鑒定：選材制備組織樣液鑒定樣液。脂肪的鑒定：選材切片制作染色鏡檢鑒定。蛋白質(zhì)的鑒定：選材制備樣液鑒定樣液。3注意事項：（1）本實驗成功與否的關鍵在于實驗材料的選擇，為提高實驗效果，應根據(jù)當?shù)貙嶋H情況，精心選擇含糖量較高，富含脂肪、蛋白質(zhì)的生物組織或器官作為實驗材料。選好實驗材料，實驗則成功了一半。（2）用于鑒定還原糖的生物組織，最好選含糖量較高，而組織顏色較淺，或近于白色的，如蘋果和梨的果實。經(jīng)試驗比較，顏色反應的明顯程度，依次為蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜。（3）用于鑒定脂肪的實驗材料最好選擇富含脂肪的種子，如花生種子取其子葉，供實驗用

3、的花生種子必須提前浸泡34h（以宜于制作臨時裝片為準）。浸泡時間短了不容易成切片；浸泡時間過長，則組織太軟，切下的薄片不易成形。（4）用于鑒定蛋白質(zhì)的植物材料，應提前浸泡12d，便于研磨。（5）斐林試劑極不穩(wěn)定，其甲液和乙液需分別配制、儲存，使用時再臨時混合均勻用于實驗。（6）雙縮脲試劑的使用，應先加試劑A，造成堿性環(huán)境，再加試劑B。（7）在可溶性糖的鑒定中，對試管中的溶液加熱時，試管底部不要觸及燒杯底部；試管口不要朝向實驗者，以免溶液沸騰時沖出試管造成燙傷。（8）蛋白質(zhì)的鑒定如果是用稀釋液，濃度不能太大，以免實驗后粘住試管壁，不易洗凈。【例1】下列關于實驗操作步驟的敘述中，正確的是A用于鑒定

4、可溶性還原糖的斐林試劑甲液和乙液，可直接用于蛋白質(zhì)的鑒定B脂肪的鑒定需要用顯微鏡才能看到被染成橘黃色的脂肪滴C鑒定可溶性還原糖，要加入斐林試劑甲液搖勻后，再加入乙液D用于鑒定蛋白質(zhì)的雙縮脲試劑A液與B液要混合均勻后，再加入含樣品的試管中，且必須現(xiàn)混現(xiàn)用解析本題在于考查學生的操作是否規(guī)范、正確，是否注意了不同鑒定實驗之間的差別。斐林試劑與雙縮脲試劑所用漆質(zhì)相同，且所用氫氧化鈉溶液的濃度相同，但二者所用的硫酸銅的質(zhì)量濃度不同。鑒定可溶性還原糖時，是甲、乙液現(xiàn)混現(xiàn)用，一次加入。而鑒定蛋白質(zhì)時要先加A液，再加B液。還原糖、蛋白質(zhì)的顏色反應走試劑與其發(fā)生化學反應的結果，足肉眼可見的。脂肪的鑒定中，由于脂

5、肪滴小且分散在細胞中，所以需要借助于顯微鏡觀察。答案B變式1將面包圍包在紗布中在清水中搓洗，鑒定黏留在紗布上的黏稠物質(zhì)和洗出的白漿用的試劑分別是 A碘液、蘇丹溶液B雙縮脲試劑、碘液C斐林試劑、蘇丹溶液 D碘液、斐林試劑二、實驗：葉綠體中色素的提取和分離1實驗原理：葉綠體色素能溶解在有機溶劑中，如丙酮；葉綠體色素在層析液中的溶解度不同，隨層析液在濾紙上擴散的速度也不同。2方法步驟：提取色素制濾紙條濾液畫線紙上層析觀察結果。3注意事項：（1）要選取新鮮色深的葉片作實驗材料，以便使色素液中含有較多的色素。（2）研磨時一定要快速充分。（3）過濾時要用脫脂棉（或單層尼龍紗布），不能用濾紙。（4）濾液細線

6、畫得要細而直，否則，在層析時會導致色素帶的重疊。要把濾液細線畫細畫直。應該做到：毛細吸管的管口要細要齊，畫線時，速度要快且均勻。（5）畫濾液細線時，要重復畫23次，以便提高色素細線中色素的含量。（6）層析時不能讓濾液細線接觸到層析液，因為色素容易溶解于層析液中，導致色素帶不清晰?！纠?】下列為“葉綠體色素提取和分離”實驗：（1）在“葉綠體色素的提取和分離實驗”中，將葉綠體色素進行分離的方法名稱是 （2）某學生在實驗過程中將畫有濾液細線的濾紙條（已重復幾次畫線）浸入層折液中，幾分鐘后取出觀察，發(fā)現(xiàn)在濾紙條上無色素分帶現(xiàn)象，而其他用同一濾液做實驗的同學的濾紙條上卻色素分帶明顯。其實驗失敗的原因可能

7、是 。（3）觀察葉綠體色素的熒光現(xiàn)象，可將盛有葉綠體色素溶液的試管，讓光線照射。如果置葉綠體色素溶液于 光下，則呈綠色；如置于 光下，則溶液呈現(xiàn)紅色。解析此題主要考查葉綠體色素提取和分離實驗的知識。用丙酮溶解法可以提取葉綠體色素，用紙層析法可以分離葉綠體色素，分離色素時，如果濾液細線浸入層析液中，葉綠體色素就會溶解在層析液中而無法分離。與物理學的反射和透射知識相聯(lián)系，就可以觀察到葉綠體色素的不同的顏色。答案（1）紙層析法 （2）濾液細線浸入層析液（3）透射；反射變式2某同學在做“葉綠體中色素的提取和分離”實驗時，操作情況如下所述，結果實驗失敗，請指出其錯誤所在。（1）將5g新鮮菠菜葉片放入研缽

8、中，加入丙酮、石英砂、碳酸鈣，快速充分研磨，然后按要求過濾。（2）用毛細吸管吸取少量濾液，沿著筆線處小心均勻地畫出一條濾液細線，并連續(xù)迅速地重復畫23次。（3）把畫好細線的濾液條插入層折液中，并不斷搖晃，以求加快色素在濾紙條上的擴散。三、實驗：DNA的粗提取與鑒定1實驗原理：DNA在氯化鈉溶液中的溶解度，隨著氯化鈉濃度的變化而變化；DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液；DNA遇二苯胺（沸水?。境伤{色。2方法步驟：提取細胞核物質(zhì)溶解核內(nèi)的DNA析出DNA黏稠物濾取DNA黏稠物DNA黏稠物再溶解過濾含DNA的氯化鈉溶液提取含雜質(zhì)較少的DNADNA的鑒定。3注意事項：（1

9、）血液量充足（不能用哺乳動物的血細胞）。（2）血細胞液加水后，必須充分攪拌，讓血細胞充分破碎，溶解出DNA。（3）用NaCl溶液析出DNA時，注意控制溫度，NaCl溶液和血細胞濾液要混合均勻。（4）所用酒精要充分預冷，提取DNA絲狀物的方法是緩緩旋轉玻棒。（5）盛放雞血細胞液的容器等最好使用塑料制的?！纠?】在DNA的粗提取和鑒定的實驗中，提取雞血細胞的核物質(zhì)和析出含DNA的黏稠物的操作過程中均用到蒸餾水，其作用在于 A前者用來溶解血細胞，后者用來溶解DNAB前者使血細胞吸水破裂，后者用來稀釋NaCl溶液C前者用來分離細胞核與細胞質(zhì)，后者用來提取DNAD前者使DNA從核中分離出來，后者使DNA

10、析出解析此題主要考查DNA的粗提取實驗的知識。第一次加蒸餾水的作用是使血細胞過度吸水而破裂，以便使核內(nèi)物質(zhì)釋放；第二次加適量蒸餾水，是為了降低氯化鈉濃度，使DNA因溶解度達到最小而析出。答案D變式3在DNA粗提取實驗中，有兩次DNA的沉淀析出，其依據(jù)的原理是 DNA在氯化鈉的濃度為014 mol·L-l時溶解度最低 DNA在95的酒精中能沉淀析出A兩次都是B兩次都是C第一次是，第二次是D第一次是，第二次是變式4下圖所示為關于“DNA的粗提取和物理性狀觀察”實驗。詩據(jù)圖回答下列問題：（1）DNA在氯化鈉溶液中溶解度，隨氯化鈉而改變，當氯化鈉物質(zhì)的量濃度為014 mol·L-l

11、時，最低，可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA 。（2）在下圖中圖A所示的實驗步驟中加蒸餾水的目的是 ；通過圖B所示的步驟取得濾液，再在溶液中加入2 mol·L-lNaC1溶液的目的是 ；圖中C所示的實驗步驟中加蒸餾水的目的是 。將制備好的雞血細胞液5 mL10 mL，注入到50 mL燒杯中，向燒杯中加入20 mL蒸餾水的目的是 。（3）在制雞血細胞液的過程中，加入的抗凝劑是變式5DNA在氯化鈉溶液中的溶解度有二重性，隨著NaCl溶液濃度的變化而變化。（1）請在下列濃度的NaCl溶液中，選出能使DNA析出最徹底的一種和溶解度最高的一種 A014 mol·L-l B2 mol&#

12、183;L-lC015 mol·L-l D03 mol·L-l（2）欲使溶有DNA的2 mo1·L-l的NaCl溶液中的DNA析出，需降低NaCl溶液的濃度，最有效的方法是 A加蒸餾水 B加礦泉水C加清水 D加生理鹽水（3）DNA不溶于酒精溶液，但細胞中的某些物質(zhì)卻可以溶于酒精溶液，利用這一原理可以 ，可以推測溶于酒精的物質(zhì)中可能有 。（4）利用DNA遇 呈藍色的特性，將該物質(zhì)作為鑒定 的試劑。其實驗過程要點是向放有 的試管中加入4 mL的 ?；旌暇鶆蚝?，將試管置于 5 min，待試管，觀察試管中溶液顏色的變化。這個實驗說明DNA耐 溫，前次溫度有利于，后次溫度則

13、有利于DNA的1（2004年江蘇高考題）根據(jù)生物組織中的有機物與某些化學試劑相互作用能產(chǎn)生顏色反應的原理，可以鑒定生物組織中某些有機物的存在。請?zhí)顚懴卤碇械目崭瘛?（2004年江蘇高考題）鑒定DNA時，一般先將被鑒定物加入到物質(zhì)的量濃度為0015 mol·L-l的Nacl溶液的試管中，攪拌后，再加入 試劑，混合后將其置于沸水中加熱5 min。待試管冷卻后，若其中溶液顏色為 ，而對照組試管中溶液為無色，則可確定被鑒定物為DNA。3（2003年新課程高考理綜題）在過氧化氫酶溶液中加入雙縮脲試劑，其結果應該是 A淺藍色 B磚紅色 C綠色 D紫色4（2003年江蘇高考生物試題）分別在A、B、

14、C三個研缽中加2g剪碎的新鮮菠菜綠葉，并按下表所示添加試劑，經(jīng)研磨、過濾得到三種不同顏色的溶液，即：深綠色、黃綠色（或褐色）、幾乎無色。注：“”表示加；“”表示不加。試回答：（1）A處理得到的溶液顏色是 ，原因是（2）B處理得到的溶液顏色是 ，原因是（3）C處理得到的溶液顏色是 ，原因是5（2001年高考理綜全國卷）下列關于實驗的描述中，正確的是 A將在蔗糖溶液中已發(fā)生質(zhì)壁分離的洋蔥表皮細胞轉到更高濃度的蔗糖溶液中，則發(fā)生質(zhì)壁分離復原B將斐林試劑加入到蔗糖溶液中，加熱后出現(xiàn)磚紅色沉淀C將肝臟研磨液煮沸冷卻后，加入到過氧化氫酶溶液中立即出現(xiàn)大量氣泡D將雙縮脲試劑加入到蛋清稀釋液中，溶液變成紫色選

15、擇題：每小姐僅有一個選項最符合姐菠。1制備雞血細胞液的過程中，要除去上清液的主要原因是 A上清液中存在有毒物質(zhì)B上清液中的某些成分能與DNA結合成復合物CDNA分子不存在于上清液中D上清液中水分含量高，影響DNA的提取2某同學收集到的葉綠體中色素提取液為淡綠色，產(chǎn)生該結果的可能原因是 研磨不充分，色素未充分提取出來丙酮加入量太多，稀釋了色素提取液丙酮加得太少，色素未提取出來未加CaCO3粉末，葉綠素分子已被破壞A B C D3在實驗過程中實驗材料必須自始至終保持在生活狀態(tài)下的是 觀察植物細胞的有絲分裂 觀察植物細胞的質(zhì)壁分離和復原 觀察黑藻細胞的細胞質(zhì)流動葉綠體色素的提取和分離A B C D4

16、在DNA的粗提取和鑒定的實驗中，提取舍雜質(zhì)較少的DNA時必須用 A014 mo1·L-l的NaCl溶液B玻璃棒充分攪拌直至絲狀物溶解C經(jīng)充分冷卻的95的酒精溶液D01g·mL-l的檸檬酸鈉溶液5下列關于“葉綠體色素提取和分離”的實驗描述中，不屬于實驗要求的是 A提取高等植物葉綠體中的色素B用紙層析法分離色素C了解各種色素的吸收光譜D驗證葉綠體中所含色素的種類6下列對斐林試劑和雙縮脲試劑的配方，敘述不正確的是 A都含有NaOH溶液和CuSO4溶液B斐林試劑的配制是將45滴005g·mL-l的CuSO4溶液滴入2mL-l0lg·mLl的NaOH溶液中即成C雙

17、縮脲試劑是將34滴401g·mL-l的CuSO4溶液滴入2 mL01g·mL-l的NaOH溶液中混合而成D雙縮脲試劑含有兩種試劑：質(zhì)量濃度為01g·mLl的NaOH溶液和質(zhì)量濃度為001g·mL-l的CuSO4溶液為了便于提取雞血細胞中的DNA，下列所采取的措施中，最恰當?shù)氖牵合蚪?jīng)抗凝劑處理的雞血細胞液加入 A蒸餾水 BATPC03g·mL的蔗糖溶液 D二氧化碳8如圖所示，將提取的葉綠體色素濾液裝入試管中，讓一束白光穿過該濾液后經(jīng)三棱鏡對光進行色散，哪條光譜的顏色明顯減弱 A綠光 B紅光C紅橙光、藍紫光 D黃光非選擇題1據(jù)藥理研究，一種茅草的根

18、內(nèi)含有降血糖的因子及多種有益于健康的成分，某公司將它開發(fā)成一種保健飲料。該產(chǎn)品是否適用于糖尿病患者，生物學興趣小組的同學以此作為研究課題。請你完成下面的實驗鑒定報告：（1）實驗目的：鑒定一種茅草的根是否含有還原糖和淀粉。（2）實驗原理：還原糖可用 試劑檢測，淀粉可用 來檢測。（3）實驗器材：一種茅草的根、所需試劑、刀片、載玻片、酒精燈、試管夾、火柴、滴管。（4）實驗步驟：鑒定還原糖：鑒定淀粉：（5）實驗現(xiàn)象： 。（6）結果分析： 。（7）在鑒定還原糖的實驗操作中應注意2關于DNA粗提取的實驗材料的選擇，也經(jīng)過了多次實驗結果的比較，最終選擇雞血做實驗材料的原因是什么？請據(jù)圖回答問題：（1）雞血細

19、胞中紅細胞 ，家雞屬于鳥類，新陳代謝旺盛，因而血液中 細胞的數(shù)目較多，可以提供豐富的 。（2）實驗前由老師制備好雞血細胞液提供給同學們做實驗材料，而不用雞全血，主要原因是（3）生活在牧羊區(qū)的人們，采取牛、羊和馬的血較方便，若他們按實驗要求完成實驗步驟后，結果是，這是因為這些動物和人類一樣 。但若改用動物的肝臟做實驗材料，實驗能順利進行，這是因為（4）若選用動物肝臟做實驗材料，在提取之間，最好增加 程序，使組織細胞更易分離。3某同學拿著幾種材料回學校上實驗課，準備：（1）用綠色葉片做可溶性還原糖的鑒定實驗（2）用芝麻種子做脂肪鑒定實驗（3）用新鮮的牛奶做蛋白質(zhì)鑒定實驗問：該同學能否在學校完成這些實驗并得到結果？請說明理由。生化鑒定類實驗參考答案1B2（1）未去除粗葉脈和將葉剪碎，降低了葉綠素的提取率。 （2）上一次濾液細線未干燥，即畫下一次線，使濾液過粗或線上色素量較低。 （3）不斷搖晃，導致層析液接觸濾紙，溶解了色素。3C4（1）濃度變化；DNA的溶解度；析出 （2）使血細胞加速破裂，使DNA溶解；使溶液濃度降低，降低DNA的溶解度，使DNA析出；加速血細胞破裂（3）0lg·mLl的檸檬酸鈉溶液5（1）AB