1、天津市高等教育自學考試課程考試大綱課程名稱：細胞工程技術 課程代碼：0776第一部分 課程性質與目標一、課程性質與特點細胞工程技術是高等教育自學考試生物技術（本）專業(yè)的一門專業(yè)主干課程。它是在完成了基礎課、專業(yè)基礎課后學生必修的四大生物技術專業(yè)課程之一，本課程的學習對于全面深入掌握生物技術領域中的理論與知識，尤其是細胞工程的理論基礎、知識及其應用具有重要的作用。細胞工程技術是生物技術中的一個重要領域，它是運用細胞培養(yǎng)技術和對細胞進行各種遺傳操作，從而得到新的生物或其產物，因此它在醫(yī)藥、動植物改良等方面有廣泛的應用。本課程以細胞工程中所涉及的技術及其應用為素材，使學生掌握細胞工程中共有的規(guī)律以及

2、特殊情況下的原理與方法。由于細胞工程與基因工程有強烈的交叉，而交叉點又是細胞工程新的發(fā)展方向，如動植物細胞轉基因技術、細胞反應器生產重組基因工程藥物等，因此本課程要反映這一特點。二、課程目標與基本要求本課程的目標和任務是使學生通過自學和助學輔導，掌握細胞工程的基本理論知識和技術及其相關的應用領域和新的進展，立足于培養(yǎng)生物技術的高素質人才。課程的基本要求如下：1、了解細胞工程的含義、細胞全能性的理論和體細胞遺傳學的概念。2、掌握細胞工程研究的特點及其主要研究與應用領域，了解真核細胞遺傳操作中存在的問題。3、了解植物細胞與組織培養(yǎng)的名詞術語及其含義，了解植物細胞培養(yǎng)的各種方法。4、學習花粉及花藥培

3、養(yǎng)誘導單倍體植物的原理、方法及其應用。5、了解植物胚胎、子房、胚乳培養(yǎng)的方法和應用。6、了解植物原生質體的分離培養(yǎng)和融合的技術及原理，掌握體細胞雜種篩選的方法。7、了解體細胞無性系變異的機理和突變體誘發(fā)篩選的方法和原理及其應用。8、了解植物腫瘤形成的原理，Ti質粒T-DNA結構與功能及植物基因工程載體。9、掌握植物細胞各種轉化系統(tǒng)的技術特點。10、學習真核表達系統(tǒng)的特點及其種類，了解昆蟲細胞桿狀病毒表達系統(tǒng)的原理、特點及應用。 11、了解動物細胞培養(yǎng)技術及特點和重要的概念。12、掌握雜交瘤技術的原理及其應用。三、與本專業(yè)其他課程的關系 細胞工程技術為生物技術專業(yè)的專業(yè)課程，它需要有生物科學知識

4、作為基礎，同時它也是全面了解和掌握其他生物技術的基礎。第二部分 考核內容與考核目標第一章 緒論一、學習目的與要求了解細胞工程的含義，細胞全能性和體細胞遺夢軒閣傳學的概念，掌握細胞工程研究的特點及主要應用領域和存在的問題。二、考核知識點與考核目標（一）細胞工程的定義及應用領域（重點）識記：細胞工程的含義及相關應用領域，名稱概念的含義。理解：根據細胞工程的含義，了解細胞工程的各個不同層次上的交叉和運用。（二）體細胞遺傳學與細胞工程的關系（重點）識記：體細胞遺傳學含義，細胞全能性的概念和重要的實驗驗證。理解：體細胞遺傳學與傳統(tǒng)遺傳讀者居學的區(qū)別，微生物作為遺傳學研究的重要優(yōu)點，細胞工程的研究特點。（

5、三）細胞工程中存在問題的分析（一般） 識記：最低接種密度概念，條件培養(yǎng)基概念，克隆的概念。 理解：離體培養(yǎng)細胞和整體生物基因表達的差異。第二章 植物細胞與組織培養(yǎng)技術導論一、學習目的與要求了解細胞與組織培養(yǎng)技術的發(fā)展歷史及其進展，掌握重要的名稱概念，植物細胞培養(yǎng)基的組成及激素應用原則。二、考核知識點與考核目標（一）植物細胞形態(tài)發(fā)生（重點）識記：形態(tài)發(fā)生，細胞全能性的概念，植物激素的主要類別與作用應用：激素的合理運用及其規(guī)律（二）植物組織培養(yǎng)中的重要名詞（重點）識記：各名稱的含義與概念理解：植物細胞懸浮培養(yǎng)中細胞的特點，分生組織培養(yǎng)與莖尖培養(yǎng)的區(qū)別應用：不同類型細胞和組織的培養(yǎng)（三）植物細胞與組

6、織的培養(yǎng)基（一般）識記：培養(yǎng)基的基本組成要素，常用培養(yǎng)基的名稱應用：實驗室中配制培養(yǎng)基的方法第三章 植物組織和細胞培養(yǎng)技術一、學習目的與要求掌握植物愈傷組織的誘導與培養(yǎng)，懸浮細胞的誘導與培養(yǎng)和細胞同步化的方法、目的和意義，了解植物細胞大規(guī)模培養(yǎng)和固定化培養(yǎng)的特點和其應用。二、考核知識點與考核目標（一）愈傷組織的誘導與培養(yǎng)（次重點）識記：愈傷組織的概念、用途、胚性愈傷組織的概念及用途。理解：胚性愈傷組織特點、長期保存的方法，圓柱形外植體誘導愈傷組織的優(yōu)點（二）懸浮細胞培養(yǎng)及同步化（重點）識記：懸浮培養(yǎng)細胞的特點和優(yōu)點，細胞同步化的概念，有絲分裂指數概念理解：培養(yǎng)細胞的生長周期和測定方法，化學誘導

7、細胞同步化的原理應用：群體細胞生長周期長短的決定因素及其在實際中的應用（三）飼養(yǎng)層培養(yǎng)技術（一般）識記：飼養(yǎng)層細胞的含義和意義，平板培養(yǎng)，雙層濾紙植板技術理解：飼養(yǎng)層細胞取材原理（四）植物細胞大規(guī)模培養(yǎng)和固定化培養(yǎng)（重點）識記：大規(guī)模培養(yǎng)的意義，分批培養(yǎng)的概念，固定化培養(yǎng)的意義理解：植物細胞大規(guī)模培養(yǎng)與微生物培養(yǎng)的區(qū)別和特點，次生代謝物的積累與細胞生長的關系。 應用：利用植物細胞大規(guī)模培養(yǎng)方法生產藥物的生物工程步驟第四章 花粉和花藥培養(yǎng)一、學習目的與要求了解花藥及花粉培養(yǎng)方法獲得單倍體植物的途徑，掌握該途徑在植物改良中的應用及原理二、考核知識點與考核目標（一）花粉的發(fā)育途徑（次重點）識記：花粉

8、的發(fā)育途徑，形成單倍體胚或愈傷組織的途徑（二）花藥及花粉培養(yǎng)（重點）識記：花粉植株和單倍體的概念，純合二倍體的概念理解：花粉培養(yǎng)與花藥培養(yǎng)的比較及優(yōu)點，花粉植株的形成過程應用：花藥及花粉培養(yǎng)方法（三）花粉植株的應用（重點） 識記：單倍體育種，常規(guī)育種，三體，雙三體，四體，異附加系 理解：單倍體育種與單規(guī)育種法的比較，縮短育種周期和提高選擇效率的原理 應用：利用花藥或花粉培養(yǎng)方法于育種實踐第五章 胚胎培養(yǎng)與試管受精一、學習目的與要求：了解植物胚胎，子房，胚乳培養(yǎng)的方法及意義及試管受精的概念二、知識點與考核目標（一）離體胚培養(yǎng)（次重點）理解：胚培養(yǎng)的目的及意義，培養(yǎng)基組成的特點，滋養(yǎng)胚乳移植方法（

9、二）子房培養(yǎng)（次重點）識記：孤雌生殖的含義理解：未受精子房培養(yǎng)的意義應用：未受精子房培養(yǎng)誘導單倍體植株的方法（三）胚乳培養(yǎng)（次重點）識記：胚乳在遺傳上的獨特性，三倍體理解：傳統(tǒng)三倍體制備上的程序，胚乳培養(yǎng)法的要點（四）試管受精（次重點）識記：試管授粉概念及意義，子房內授粉，胚珠授粉應用：試管受精的步驟和方法第六章 植物原生質體的分離、培養(yǎng)和融合一、學習目的與要求了解植物原生質體作為細胞工程研究的重要意義，掌握分離和培養(yǎng)原生質體的技術、方法和原理，熟悉體細胞雜交的方法，雜種篩選的原理和雜種細胞的鑒定二、考核知識點與考核目標（一）原生質體的性質和應用（重點）識記：原生質體的特點 、性質理解：原生質

10、體的應用領域（二）原生質體的分離（次重點）識記：植物細胞壁的成份，酶解液的主要成份及其作用理解：各種分離原生質體材料的優(yōu)缺點應用：分離植物原生體的方法（三）原生質體的培養(yǎng)（次重點）識記：液體淺層培養(yǎng)法和固體平板法的含義及優(yōu)點理解：原生質體活力測定的原理及方法，原生質體發(fā)育及植株再生的過程的主要步驟以及培養(yǎng)和檢測的方法（四）體細胞雜交（重點）識記：原生質體融合，體細胞雜交，PEG，電融合，細胞雜種和胞質雜種，同核體，異核體等的概念理解：細胞雜種和胞質雜種的來源和區(qū)別及意義應用：用PEG誘導原生質體融合的主要實驗步驟（五）體細胞雜種篩選（重點）識記：互補選擇法，NR-，同功酶，分子雜交，機械分離法

11、等概念理解：建立篩選方法的重要性，互補選擇法的幾種類型應用：根據互補選擇法的原理設計選擇程序第七章 體細胞無性系及突變體篩選一、學習目的與要求通過本章學習，了解植物體細胞無性系變異的機理及應用，細胞突變體的類型，各類突變體誘發(fā)篩選的方法和突變體在細胞工程中的應用二、考核知識點和考核目標（一）體細胞無性系（次重點）識記：體細胞無性系概念，特點，染色體變異（數量和結構），轉位因子等的概念理解：體細胞無性系變異發(fā)生的機理（二）細胞突變體分類（重點）識記：細胞突變體的概念和基本特征，營養(yǎng)缺陷型，抗性突變體的概念理解：在離體細胞水平上誘發(fā)篩選突變體的優(yōu)越性，突變體發(fā)生的原理（三）誘變和機理（重點）識記：

12、誘變因子，DNA修復，BUdR,烷化劑，EMS，讀碼框，移碼突變，最適劑量理解：誘發(fā)和篩選細胞突變體對材料的要求，不同材料用于細胞突變體篩選的優(yōu)點，化學誘變劑作用的原理（天然堿基類似物，烷化劑，吖啶類物質）（四）突變體篩選（重點）識記：正選擇法、負選擇法的概念，正選擇劑、負選擇劑、誘變劑的概念，一步選擇法，多步選擇法理解：正選擇法和負選擇法的區(qū)別、鑒別突變體的條件應用：正選擇法和負選擇法在細胞突變體篩選中的運用（五）細胞突變體應用（次重點）應用：根據突變體的類型和特點掌握其在理論研究和細胞工程中的用途第八章 植物腫瘤發(fā)生和基因工程載體一、學習目的與要求通過本章的學習，了解根癌農桿菌誘發(fā)冠癭瘤的

13、機理，Ti質粒和T-DNA的功能和植物基因工程載體的構建方法。二、考核知識點與考核目標：（一）根癌農桿菌與植物的相互關系（重點）識記：根癌農桿菌、冠癭、冠癭堿、Ti質粒、T-DNA、遺傳性寄生等的概念理解：冠癭瘤的特征及分類，冠癭形成的分子機理（二）Ti質粒的性質和功能（重點）識記：章魚堿、胭脂堿、治愈菌株、Ocs基因、Nos基因、Shi基因、Roi基因理解：Shi基因和Roi基因表達和突變與誘發(fā)冠癭瘤之間的關系，T-DNA轉移和整合的機制應用：從T-DNA基因的表達理解冠癭瘤組織能在無激素培養(yǎng)基上生長的分子機理（三）農桿菌載體構建（次重點）識記：中介載體、穿梭載體、共整合質粒，報告基因理解：

14、野生型Ti質粒不能作為載體的理由及改造的主要方法與步驟，報告基因的條件和種類第九章 植物細胞的轉化一、學習目的與要求通過本章的學習，了解植物細胞各種轉化系統(tǒng)的原理與技術特點和其在植物基因工程中的應用二、考核知識點與考核目標（一）轉化（一般）識記：植物細胞轉化的概念理解：基因轉化對植物受體系統(tǒng)的基本要求和比較受體系統(tǒng)的特點（二）農桿菌作基因轉化載體（重點）識記：共培養(yǎng)法、葉圓盤法、細菌圓球體、融合轉化等概念理解：葉圓盤轉化法的原理與技術特點，農桿菌圓球體轉化植物原生質體的原理及特點應用：原生質體與農桿菌共培養(yǎng)轉化的原理、步驟及對受體的要求（三）DNA介導基因轉移（重點）識記：Ti質粒轉化、直接基

15、因轉移、電激法、微注射法、花粉管通道法和基因槍轉化的含義理解：pNos-APH3-pAocs的含義，外源基因以組成型方式表達的遺傳學分析，脂質體作為載體的優(yōu)點和與細胞相互作用的方式第十章 真核細胞基因工程一、學習目的與要求通過本章的學習，了解用于表達基因工程藥物的真核系統(tǒng)的類型、原理及其應用二、考核知識點與考核目標（一）表達系統(tǒng)（次重點）識記：原核表達系統(tǒng)，真核表達系統(tǒng)，轉基因生物反應器，細胞反應器的概念理解：原核表達系統(tǒng)與真核表達系統(tǒng)的特點的比較，真核表達系統(tǒng)的類型（二）昆蟲細胞表達系統(tǒng)（重點）識記：桿狀病毒、感染、轉染、共轉染、多角體、表達載體、感染復數等的概念理解：昆蟲細胞桿狀病毒表達系

16、統(tǒng)的優(yōu)點和特點，外源基因插入病毒基因組的原理，體外昆蟲細胞培養(yǎng)的方法應用：用昆蟲細胞表達和生產重組蛋白藥物的應用第十一章 動物細胞培養(yǎng)一、學習目的與要求通過本章的學習，了解動物細胞培養(yǎng)的方法和技術及其應用二、考核知識點與考核目標（一）動物細胞培養(yǎng)概念（重點）識記：原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)、單層細胞培養(yǎng)、細胞系、細胞株、群體倍增時間、貼壁依賴性等的概念理解：群體細胞生長曲線、貼壁細胞生長過程，細胞周期與群體細胞倍增時間的區(qū)別應用：細胞生長動態(tài)的測定方法（二）培養(yǎng)基（一般）理解：動物細胞培養(yǎng)基的組成和特點，血清的主要功能與不利影響（三）大規(guī)模培養(yǎng)（次重點）識記：分批式培養(yǎng)，流加式培養(yǎng)，半連續(xù)培養(yǎng)與連續(xù)培

17、養(yǎng)的概念理解：比較上述幾類培養(yǎng)方式的區(qū)別第十二章 雜交瘤技術一、學習目的與要求通過本章的學習，了解雜交瘤技術生產單克隆抗體的原理與方法及其應用二、考核知識點與考核目標：（一）免疫反應（次重點）識記：抗體、抗原、免疫反應、天然抗體、人工抗體、多克隆抗體、單克隆抗體等的概念（二）雜交瘤技術（重點）識記：雜交瘤，細胞融合，HGPRT-,TK-,HAT培養(yǎng)基理解：雜交瘤技術的原理應用：雜交瘤技術的過程及其應用第三部分 有關說明與實施要求一、考核目標的能力層次表述 本大綱在考核目標中，按照“識記”、“理解”、“應用”三個能力層次規(guī)定其應達到的能力層次要求。各能力層次為遞進等級關系，后者必須建立在前者的基

18、礎上，其含義是：識記：能知道有關的名詞、概念、知識的含義，并能正確認識和表述，是低層次的要求。理解：在識記的基礎上，能全面把握基本概念、基本原理、基本方法，能掌握有關的概念、原理、方法的區(qū)別與聯(lián)系，是較高層次的要求。應用：在理解的基礎上，能運用基本概念、基本原理、基本方法分析和解決有關的理論問題和實際問題。二、教材指定教材：細胞工程簡明教程 俞新大、耿朝暉編著 南開大學生命科學學院講義2002參考教材：植物細胞與體細胞遺傳學技術與原理 張自立、俞新大編著高教出版社 1990 細胞培養(yǎng)工程 陳國良、陳志宏編 華東化工學院出版社 1992三、自學方法指導1、在開始閱讀指定教材某一章之前，先翻閱大綱

19、中有關這一章的考核知識點及對知識點的能力層次要求和考核目標，以便在閱讀教材時做到心中有數，有的放矢。2、閱讀教材時，要逐段細讀，逐句推敲，集中精力，吃透每一個知識點，對基本概念必須深刻理解，對基本理論必須徹底弄清，對基本方法必須牢固掌握。3、在自學過程中，既要思考問題，也要做好閱讀筆記，把教材中的基本概念、原理、方法等加以整理，這可從中加深對問題的認知、理解和記憶，以利于突出重點，并涵蓋整個內容，可以不斷提高自學能力。4、完成書后作業(yè)和適當的輔導練習是理解、消化和鞏固所學知識，培養(yǎng)分析問題、解決問題及提高能力的重要環(huán)節(jié)，在做練習之前，應認真閱讀教材，按考核目標所要求的不同層次，掌握教材內容，在

20、練習過程中對所學知識進行合理的回顧與發(fā)揮，注重理論聯(lián)系實際和具體問題具體分析，解題時應注意培養(yǎng)邏輯性，針對問題圍繞相關知識點進行層次（步驟）分明的論述或推導，明確各層次（步驟）間的邏輯關系。四、對社會助學的要求1、應熟知考試大綱對課程提出的總要求和各章的知識點。2、應掌握各知識點要求達到的能力層次，并深刻理解對各知識點的考核目標。3、輔導時，應以考試大綱為依據，指定的教材為基礎，不要隨意增刪內容，以免與大綱脫節(jié)。4、輔導時，應對學習方法進行指導，宜提倡“認真閱讀教材，刻苦鉆研教材，主動爭取幫助，依靠自己學通”的方法。5、輔導時，要注意突出重點，對考生提出的問題，不要有問即答，要積極啟發(fā)引導。6、注意對應考者能力的培養(yǎng)，特別是自學能力的培養(yǎng)，要引導考生逐步學會獨立學習，在自學過程中善于提出問題，分析問題，做出判斷，解決問題。7、要使考生了解試題的難易與能力層次高低兩者不完全是一回事，在各個能力層次中會存在著不同難度的試題。8、助學學時：本課程共5學分，建議總助學課時90學時，