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1、天然植物精油(Natural Essential Oil)預(yù)防人工感染肉仔雞球蟲(chóng)病的藥效試驗(yàn)索 勛 教授 (中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院 100094)前言 由于免疫預(yù)防還沒(méi)有完全普及,迄今為止,控制肉仔雞球蟲(chóng)病的主要手段仍然是化藥防治,耐藥性的產(chǎn)生縮短了許多抗球蟲(chóng)藥的使用壽命,因此引進(jìn)新的抗球蟲(chóng)藥就顯得重要起來(lái)。本試驗(yàn)旨在證實(shí)天然植物精油(Natural Essential Oil /NEO)預(yù)混劑的抗球蟲(chóng)藥效,為引進(jìn)該藥在我國(guó)使用提供試驗(yàn)數(shù)據(jù)。一、 試驗(yàn)材料1. 受試藥物:NEO油乳劑(含量6%),由某意大利公司提供。2. 對(duì)照藥物:癸氧喹酯預(yù)混劑(含量6%),由國(guó)內(nèi)生產(chǎn)廠家提供。3. 動(dòng)物:剛

2、出殼AA肉雞300只,自由飲水、采食,試驗(yàn)期為114日齡。4. 飼料:肉雞全價(jià)飼料。飼料中除試驗(yàn)需添加藥物外,不含任何其他抗球蟲(chóng)藥物或抗菌藥物。5. 球蟲(chóng)株:柔嫩艾美耳球蟲(chóng)、毒害艾美耳球蟲(chóng)、巨型艾美耳球蟲(chóng)和堆型艾美耳球蟲(chóng);由動(dòng)物醫(yī)學(xué)院寄生蟲(chóng)學(xué)教研組提供。6. 試劑與器材:用于球蟲(chóng)培養(yǎng)、計(jì)數(shù)的常規(guī)試劑和器材。二、 試驗(yàn)方法1. 動(dòng)物分組:選擇體重均勻、健康的雞180只,分成6組,每組30只雞,設(shè)3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10只雞,均飼養(yǎng)在無(wú)球蟲(chóng)的條件下。2. 劑量分組:分別設(shè)高劑量NEO組(250g/T飲水)、中劑量NEO組(150g/T飲水)、低劑量NEO組(100g/T飲水)、癸氧喹酯對(duì)照組(30p

3、pm)、紅對(duì)照組(感染對(duì)照組)和白對(duì)照組(不感染對(duì)照組)六個(gè)組。在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中,所有組的飼料及用具均嚴(yán)格分開(kāi),以防健康對(duì)照組受球蟲(chóng)感染。試驗(yàn)采用飲水途徑給藥,對(duì)照藥物采用混飼法給藥。3. 給藥:高、中、低劑量NEO組和癸氧喹酯藥物對(duì)照藥物組雞只從2日齡開(kāi)始連續(xù)分別飲水或飼喂含不同濃度Test Drug A或?qū)φ账幬锕镅踵サ娘暳?,連續(xù)飼喂至試驗(yàn)結(jié)束。4. 感染球蟲(chóng)卵囊:除白對(duì)照組外,其他各組雞只在7日齡時(shí)用滴管經(jīng)口滴服柔嫩艾美耳球蟲(chóng)卵囊(1×104個(gè)/只)、毒害艾美耳球蟲(chóng)(1×104個(gè)/只)、巨型艾美耳球蟲(chóng)(5×104個(gè)/只)和堆型艾美耳球蟲(chóng)(10×1

4、04個(gè)/只)。5. 臨床觀察與記錄:感染后,每日3次觀察雞只的健康狀況、飲水和采食情況,記錄各組雞的發(fā)病和死亡情況,并進(jìn)行血便記分。于感染后第7天,全部剖殺試驗(yàn)雞,觀察并記錄各組雞只的十二指腸、小腸中段和盲腸病變,并計(jì)算病變值。計(jì)算糞便中卵囊排出量,計(jì)算盲腸內(nèi)容物卵囊數(shù),并計(jì)算卵囊值。最后計(jì)算抗球蟲(chóng)指數(shù),以此來(lái)評(píng)價(jià)藥效。6. 稱重:于1日齡,7日齡和14日齡稱重每羽雞,帶翅號(hào)。7. 藥效評(píng)價(jià):(1) 血便記分:按Morehouse和Baron(1977)方法記分。(2) 病變記分:按Johnson和Reid(1970)的5分制記分。(3) 病變值:以各組雞的平均病變記分乘以10。(4) 克糞便

5、卵囊數(shù):取感染后第7天每個(gè)重復(fù)的全部糞便,碾碎,并攪勻,然后稱取2克,加入60毫升飽和鹽水,經(jīng)充分?jǐn)噭蚝?,用McMaster法計(jì)數(shù)。(5) 盲腸內(nèi)容物卵囊數(shù):取出每個(gè)重復(fù)的盲腸,加定量飽和鹽水,勻漿后,取1mL,加入200毫升飽和鹽水,經(jīng)充分混勻后,用McMaster法計(jì)數(shù),然后換算結(jié)果。(6) 卵囊值:按角田清(1983)方法計(jì)算。(7) 抗球蟲(chóng)指數(shù)(ACI):按默克公司的方法計(jì)算ACI=(相對(duì)增重率+存活率)-(病變值+卵囊值)三、 試驗(yàn)結(jié)果1. 各組在試驗(yàn)不同階段體重與增重及統(tǒng)計(jì)分析見(jiàn)表1表1 試驗(yàn)時(shí)初重、感染前平均體重與感染后第7天平均體重與增重及其統(tǒng)計(jì)分析組 別 重復(fù)分組時(shí)(1日齡)

6、感染前(7日齡)感染后第7天(14日齡)平均增重(14日齡-7日齡) NEO 1(100g/T水) 2 340.57±1.07a40.39±1.29 a40.37±0.74 a144.24±9.64a145.63±11.75 a148.18±11.36 a182.40±25.15a171.95±23.37a179.52±16.63a37.65±22.99a31.95±30.64a31.96±21.35aNEO 1 (150g/T) 2 340.47±1.02a40.

7、56±1.41 a40.70±0.93 a143.62±15.35a148.93±6.91 a149.33±11.79 a218.18±24.74b215.58±31.46 b214.21±29.51b74.62±26.88b66.65±28.88b64.33±26.72bNEO 1(250g/T) 2 340.48±1.33 a40.66±1.45 a40.60±0.49 a147.26±7.85 a147.49±8.47 a151.

8、00±8.99 a171.57±16.24 a175.39±13.71 a179.13±18.73 a24.34±21.91a27.83±19.43a31.03±19.44a對(duì)照藥物 1癸氧喹酯組 2 340.41±1.31 a40.59±0.89 a40.58±0.84 a144.52±8.74 a146.86±7.69 a147.73±13.15a350.05±22.36c347.35±25.83c354.34±22.93c205.

9、53±24.99c200.49±21.59c206.61±24.75c不感染 1不用藥組 2(白對(duì)照) 340.54±0.94 a40.37±0.87a40.67±0.80a148.64±11.91 a153.08±10.33 a149.52±7.15 a362.58±18.20c355.25±19.57c350.96±23.81c213.94±18.91c202.17±19.30c201.44±25.91c感染 1不用藥組 2(紅對(duì)照) 340

10、.46±1.04 a40.47±1.26a40.53±0.76a152.70±15.23 a150.45±11.03 a146.02±17.25 a170.20 174.80 158.13±27.66 25.4013.0019.87±35.09注:1、表中同一欄內(nèi)數(shù)值右上標(biāo)示字母相同者差異不顯著(P0.05 ),不同者差異顯著(P0. 05)。2、表中各個(gè)數(shù)值各試驗(yàn)組或?qū)φ战M雞只體重或增重的平均數(shù)。3、感染后第7天(14日齡)紅對(duì)照組因第一、二重復(fù)組只剩一只雞,其平均體重不能做統(tǒng)計(jì)分析。2、藥物組和對(duì)照組雞只生產(chǎn)性

11、能和球蟲(chóng)感染指標(biāo)及抗球蟲(chóng)指數(shù)(ACI)見(jiàn)表2表2 藥物組和對(duì)照組雞只生產(chǎn)性能和球蟲(chóng)感染指標(biāo)及抗球蟲(chóng)指數(shù)(ACI*)組 別 生產(chǎn)性能指標(biāo)球蟲(chóng)感染指標(biāo)抗球蟲(chóng)指數(shù)(ACI)7-14天增重成活率(%)料肉比血便記分病變記分病變值 克糞便卵囊數(shù)* 盲腸卵囊數(shù)*卵囊值十二指腸小腸中段盲腸 十二指腸小腸中段盲腸NEO(100g/T水) 33.85a50 ab2.39 a2 a3.67 a1.57 a3.8 a 36.7 a15.7 a38 a7.4×105 ab4.4×107 a208.44NEO (150g/T水) 68.53 b90 bc2.07 b2 a3.2 b1.27 b3.7

12、3 a 32 b12.7 b37.3 a7.5×105 ab1.5×107 a2065.99NEO (250g/T水) 27.73 a66.7 b2.43 a2.3 a3.47 ab1.67 a4 b34.7 ab16.7 a40 b5.7×105 b1.0×107 b1030.17對(duì)照藥物 癸氧喹酯組 204.21 c100 c1.47 c0 b0 c0 c0 c 0 c0 c0 c2.5×103 c1.0×104 c0199.37不感染不用藥組(白對(duì)照) 205.85 c100 c1.43 c0 b0 c0 c0 c0 c0 c0

13、 c0 d0 d0-感染不用藥組 (紅對(duì)照) 19.42*26.7 a2.59 a3 a4 d1.9 d4 b40 d19 d40 b1.3×106 a1.2×107 ab40-注:* 抗球蟲(chóng)指數(shù)(ACI)的病變值以盲腸的病變值計(jì)算;* 感染后第7天(14日齡)紅對(duì)照組因第一、二重復(fù)組只剩一只雞,其平均體重不能做統(tǒng)計(jì)分析;* 克糞便卵囊數(shù)和盲腸卵囊數(shù)統(tǒng)計(jì)處理時(shí)先換算成LN(X+1)的值再統(tǒng)計(jì)分析。四、 討論與結(jié)論從表1體重的統(tǒng)計(jì)結(jié)果來(lái)看,1日齡分組時(shí)的各組體重沒(méi)有顯著差異,說(shuō)明隨機(jī)分組是正確的;7日齡(感染前)的各組體重也沒(méi)有顯著差異,說(shuō)明各組雞只飼養(yǎng)條件是一致的;感染后感

14、染不用藥組(紅對(duì)照組)體重表現(xiàn)最差,不感染不用藥組(白對(duì)照組)體重表現(xiàn)最好;反映出這次試驗(yàn)是成功。評(píng)價(jià)抗球蟲(chóng)藥物抗球蟲(chóng)效果的指標(biāo)有兩大類,一類反映雞只生產(chǎn)性能指標(biāo),如增重、料肉比和成活率;另一類反映球蟲(chóng)學(xué)指標(biāo),如排卵囊量、血便記分和病變記分;默克公司將這兩類指標(biāo)綜合起來(lái)考慮,設(shè)計(jì)了抗球蟲(chóng)指數(shù)(ACI)來(lái)反映抗球蟲(chóng)藥物抗球蟲(chóng)的綜合效果,ACI180為高效藥物,160ACI180為中效藥物,120ACI160為低效藥物,ACI120為無(wú)效藥物。從各組的ACI值來(lái)看,癸氧喹酯組的ACI值大于180,屬于高效藥物。NEO高、中、低劑量組的ACI值低于120,屬于無(wú)效藥物。從球蟲(chóng)學(xué)指標(biāo)來(lái)看,NEO高、中、低劑量三個(gè)組在血便記分、病變記分和排卵囊量三方面均好于感染不用藥組(紅對(duì)照組),說(shuō)明NEO確實(shí)有抗球蟲(chóng)的作用,這種作用在這次大劑量的試驗(yàn)感染下,作用不明顯,反映不到對(duì)生產(chǎn)性能的改善上,但在田間小劑量感染下可能會(huì)有較明顯的抗球蟲(chóng)效果,能反映出該藥物有抗球蟲(chóng)效果,從而改善生產(chǎn)性能的作用。

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