1、BIOSTATDL-50型發(fā)醉罐驗證方案起草人：審核人：批準人：部門：部門：部門：日期：日期：日期：驗證小組會簽部門職務姓名簽名日期質(zhì)管部部長生產(chǎn)部部長設備部部長車間工藝員質(zhì)管部QA質(zhì)管部QA質(zhì)管部化驗室土任質(zhì)管部無菌檢測驗證歷史：驗證次數(shù)完成日期驗證原因及主要內(nèi)容驗證確認結(jié)果備注目錄1、概述錯誤！未定義書簽。2、驗證目的錯誤！未定義書簽。3、驗證范圍34、驗證合格標準55、驗證人員及職責66、驗證時間安排67、驗證前準備68、驗證69、偏差處理與變更610、驗證結(jié)果811、驗證結(jié)果分析812、評價及建議813、驗證結(jié)論914、再驗證周期915、相關文件916、附件91、概述BIOSTATDL

2、-50型發(fā)酵罐是德國B.Braun.Biotechinternational公司生產(chǎn)，是藥品原液生產(chǎn)中的菌體發(fā)酵工序采用的發(fā)酵罐。介紹設備的構(gòu)造說本設備為微生物的生長和一系列生化反應提供最適環(huán)境的場所。通入無菌空氣，保證純種發(fā)酵，通過調(diào)節(jié)空氣流量和壓力可以保證發(fā)酵罐的正壓環(huán)境和微生物對溶氧的要求，微生物最適生長環(huán)境可通過控制溫度、酸堿度、攪拌轉(zhuǎn)速，溶解氧等參數(shù)來實現(xiàn)。通過對微生物生長環(huán)境的控制，最終得到最大量的目的產(chǎn)物。本發(fā)酵罐用于車間菌體的發(fā)酵設備的參數(shù)設備名稱：BIOSTATDL-50型發(fā)酵罐生產(chǎn)商B.Braun.Biotechinternational設備型號BIOSTATDL-50設備

3、編號SC-D-1-004制造日期出廠編號規(guī)格50L設備放置地十萬級發(fā)酵車問設備基本技術(shù)參數(shù)工作壓力：？Mpa設計壓力：0.3Mpa工作溫度：121c真空度：Mpa內(nèi)室容積：外型尺寸：2、驗證目的根據(jù)GM耍求，每年應對本設備進行驗證，以證明本設備各項功能符合設計要求，各項性能指標能滿足我公司產(chǎn)品的生產(chǎn)需求和產(chǎn)品質(zhì)量要求。此生物反應器是用于微生物擴大培養(yǎng)和目的產(chǎn)物表達的密封性設備，如果罐體內(nèi)不在生產(chǎn)使用前消毒滅菌完全，非生產(chǎn)用微生物會在良好的營養(yǎng)條件下競爭目的工程菌的生長，從而影響正常工程菌的生長和目的蛋白的表達。在進行純培養(yǎng)之前，其內(nèi)容物即培養(yǎng)基必須保證無菌，因此在發(fā)酵罐投入使用前，對其滅菌效果

4、進行驗證。3、驗證范圍3.1 風險評估3.2 驗證范圍根據(jù)風險評估的結(jié)果及該設備的安裝位置及設備主體部分在使用中未發(fā)生變化，故不需重復進行安裝確認，只進行BIOSTATDL-50型發(fā)酵罐運行及性能驗證。通過運行確認，確認設備的運行情況是否符合設備的技術(shù)規(guī)范要求和設備操作要求，并確定此設備平穩(wěn)運行的最高效率；通過性能確認，確認在設備不同裝載情況下，各項性能指標均在預定的可接受標準范圍內(nèi)。4、驗證合格標準4.1 未經(jīng)過消毒滅菌的培養(yǎng)基允許存在微生物生長；經(jīng)過消毒滅菌的培養(yǎng)基不允許存在任何微生物生長。4.2 滅菌系統(tǒng)運行后，蒸汽壓力必須達到一Mpa以上、保溫階段溫度不得超過一C04.3 發(fā)酵罐保壓過

5、程中，O訃得大于一，100倍物鏡下未發(fā)現(xiàn)明顯細菌5、驗證人員及職責驗證小組職務姓名公司職務驗證工作職責組長質(zhì)管部部長驗證方案及報告的評價、批準，協(xié)調(diào)驗證工作副組長設備部部長驗證具體組織實施組員設備部副部長驗證文件起草組員QAi任驗證文件審核及結(jié)果的分析，整個驗證過程的準備和監(jiān)控，確認人員培訓情況組員生產(chǎn)部部長負責驗證的實施組員QC主任驗證相關檢驗及出具報告的審核組員現(xiàn)場QA驗證過程監(jiān)督及檢測、取樣工作協(xié)調(diào)及實施組員設備管理員相關數(shù)據(jù)收集、匯總；負責設備維護保養(yǎng)及運行的調(diào)試、儀器、儀表的校正組員工藝員具體參與驗證協(xié)調(diào)及實施6、驗證時間安排擬安排年月對本設備進行驗證7、驗證前準備7.1 確認項目與

6、確認結(jié)果7.1.1 確認結(jié)果的說明：7.1.1.1 “是”：確認結(jié)果完全符合方案標準；7.1.1.2 “否”：確認結(jié)果不符合方案標準。7.2 文件資料的檢查確認：見附件1-17.3 儀器、儀表確認：見附件1-27.4 確認前檢查：見附件1-38、驗證8.1 電源確認：見附件1-48.2 控制系統(tǒng)確認：見附件1-58.3 操作界面確認 主界面控制：見附件 參數(shù)設置：見附件 手動運行：見附件 自動運行：見附件8.4滅菌效果的驗證8.4.1.1 于DL型發(fā)酵罐內(nèi)裝入50L發(fā)酵培養(yǎng)基。8.4.1.2 按&BIOSTATDL-50型發(fā)酵罐標準操作規(guī)程進行培養(yǎng)基滅菌實驗。8.4.1.3 將滅菌的發(fā)

7、酵培養(yǎng)基取出1L分裝于預定好的西林瓶中，封塞、封口，分別在28c培養(yǎng)2天，應無細菌生長。8.4.1.4 記錄見附件：1-68.4.1.5 再按正常操作過程（不接入菌種）進行通氣培養(yǎng)。8.4.1.6 測OD600值，監(jiān)測微生物生長狀況。8.4.1.7 培養(yǎng)12小時，應無微生物的生長，OD600值無變化8.4.1.8 記錄見附件：1-78.5培養(yǎng)效果的驗證8.5.1.1 向培養(yǎng)12小時后無微生物生長的培養(yǎng)基中，按5%（比例）的量介入大腸桿菌培養(yǎng)液8.5.1.2 按介素-2,G-CSF發(fā)酵工序標準操作規(guī)程進行發(fā)酵操作。8.5.1.3 培養(yǎng)23小時后，OD600值應有明顯上升，大腸桿菌進入對數(shù)生長期，

8、溶解氧值應有明顯下降，說明發(fā)酵罐運轉(zhuǎn)正常。8.5.1.4 記錄見附件：1-88.6性能確認8.6.1 做回顧性驗證：將近10批介素-2或G-CSF發(fā)酵記錄數(shù)據(jù)，統(tǒng)計質(zhì)量及發(fā)展趨向，分析是否滿足生產(chǎn)質(zhì)量要求。見附件29、偏差處理與變更驗證過程中如果出現(xiàn)偏差和變更，應立即通知驗證小組并對偏差和變更進行詳細記錄，分析偏差產(chǎn)生的根本原因并提出解決方法。所有偏差和變更得到有效處理后，驗證方可進入下一步驟。偏差處理單和變更處理單經(jīng)過批準后其原件必須附在驗證確認結(jié)果表中。10、驗證結(jié)果日期:總結(jié)人:11、驗證結(jié)果分析分析人:日期12、評價及建議驗證試驗是否有遺漏？驗證實施過程中對驗證方案有無修改？修改原因、

9、依據(jù)以及是否經(jīng)過批準?驗證記錄是否完整？驗證試驗結(jié)果是否符合標準要求？偏差及對偏差的說明是否合理？是否需要進一步補充試驗？評價人：日期：13、驗證結(jié)論結(jié)論人：日期：14、再驗證周期14.1 在正常生產(chǎn)情況下，每年對設備進行一次再驗證。14.2 設備有重大變更時應進行再驗證，如設備大修、主要部件更換等變更因素15、相關文件資料名稱文件編號存放處BIOSTATDL-50型發(fā)酵罐標準操作規(guī)程生產(chǎn)部發(fā)酵罐清潔標準操作規(guī)程生產(chǎn)部發(fā)酵罐標準維護規(guī)程生產(chǎn)部16、附件附件1-1：文件資料的檢查記錄附件1-2：儀器、儀表確認記錄附件1-3：確認前檢查記錄附件1-4:電源確認記錄附件1-5:控制系統(tǒng)確認記錄附件1

10、-6培養(yǎng)基滅菌情況監(jiān)測記錄附件1-7發(fā)酵罐通氣培養(yǎng)監(jiān)測記錄附件1-8接入菌種培養(yǎng)監(jiān)測記錄附件2:回顧驗證記錄附件3:驗證實施前人員培訓記錄表附件4:清潔檢查記錄附件1-1文件資料的檢查記錄文件名稱存放地點確認結(jié)果BIOSTATDL-50型發(fā)酵罐操作手冊設備部是口否口BIOSTATDL-50型發(fā)酵罐設備部是口否口BIOSTATDL-50型發(fā)酵罐保養(yǎng)規(guī)程設備部是口否口BIOSTATDL-50型發(fā)酵罐驗收報告設備部是口否口BIOSTATDL-50型發(fā)酵罐設備卡片設備部是口否口BIOSTATDL-50型發(fā)酵罐安裝、使用維護設備部是口否口產(chǎn)品合格證設備部是口否口檢查人:復核人日期:儀器、儀表確認記錄儀器

11、名稱型號要求確認結(jié)果氣體流星計經(jīng)檢定并在校驗周期是口否口溫度探測儀經(jīng)檢定并在校驗周期是口否口壓力表經(jīng)檢定并在校驗周期是口否口PH電極校驗，有合格證是口否口溶氧電極校驗，有合格證是口否口檢查人：復核人：日期確認前檢查記錄廳P確認項目確認步驟、可接受標準、結(jié)果記錄確認結(jié)果1驗證實施前人員培訓見附件3是口否口2清潔檢查記錄見附件4是口否口檢查人：復核人：日期:電源確認記錄項目要求確認結(jié)果閉合各空氣升關，升啟鑰匙旋鈕，檢查各指示燈觸摸屏顯示初始回聞，打印機旨不久鳧，電源指示火鳧，PLC運行火鳧是口否口檢查人：復核人：日期:控制系統(tǒng)確認記錄項目要求確認結(jié)果清潔烝汽及火菌系統(tǒng)檢查潔凈蒸汽，0.40壓力W0

12、.6Mpa,蒸汽管路無泄漏電磁閥工作止常是口否口壓縮空氣系統(tǒng)無油空壓機，干燥器，分配系統(tǒng)，末端過濾裝置空氣壓力0.5Mpa,空氣濾芯經(jīng)起泡點壓力驗證，氣體管路無泄漏，氣動閥工作止常是口否口冷卻系統(tǒng)冷水機工作正常，出水溫度26C,回水正常，電磁閥工作止常，管路無泄漏是口否口機械攪拌及控制系統(tǒng)攪拌轉(zhuǎn)速0-500rpm,精度±2rpm?？谑欠窨谘a料控制系統(tǒng)蠕動泵流量可控，管路無滴漏?？谑欠窨跈z查人：復核人：日期培養(yǎng)基滅菌情況監(jiān)測記錄培養(yǎng)基培養(yǎng)天數(shù)12后無細菌生長（是否渾濁）是口否口是口否口培養(yǎng)溫度（28C）檢查人：復核人：日期發(fā)醉罐通氣培養(yǎng)監(jiān)測記錄培養(yǎng)時間（小時）后無微生物生長ODfi1后口否口2后口否口3后口否口4后口否口5后口否口6后口否口7后口否口8后口否口9后口否口10后口否口11后口否口12后口否口檢查人：復核人：日期接入菌種培養(yǎng)監(jiān)測記錄