1、自編細(xì)胞工程專題復(fù)習(xí)1、（2011· 天津高考)土壤農(nóng)桿菌能將自身Ti質(zhì)粒的T-DNA整合到植物染色體DNA上，誘發(fā)植物形成腫瘤。T-DNA中含有植物生長(zhǎng)素合成酶基因(S)和細(xì)胞分裂素合成酶基因(R)，它們的表達(dá)與否能影響相應(yīng)植物激素的含量，進(jìn)而調(diào)節(jié)腫瘤組織的生長(zhǎng)與分化。據(jù)圖分析，下列敘述錯(cuò)誤的是( )A.當(dāng)細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的比值升高時(shí)，誘發(fā)腫瘤生芽B.清除腫瘤組織中的土壤農(nóng)桿菌后，腫瘤不再生長(zhǎng)與分化C.圖中腫瘤組織可在不含細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)D.基因通過控制酶的合成控制代謝，進(jìn)而控制腫瘤組織生長(zhǎng)與分化2、（11天津理綜卷）8.（14分）絮凝性細(xì)菌分泌的具有絮凝活性的高

2、分子化合物，能與石油污水中的懸浮顆粒和有機(jī)物等形成絮狀沉淀，起到凈化污水的作用。為進(jìn)一步提高對(duì)石油污水的凈化效果，將絮凝性細(xì)菌和石油降解菌融合，構(gòu)建目的菌株。其流程圖如下。據(jù)圖回答：（1）溶菌酶的作用是_。（2）PEG的作用是_。（3）經(jīng)處理后，在再生培養(yǎng)基上，未融合的A、B難以生長(zhǎng)。圖中AB融合菌能生長(zhǎng)和繁殖的原因是_。（4）目的菌株的篩選：篩選既能分泌具有絮凝活性的化合物，又能在含有_的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的AB融合菌，選擇效果最好的最為目的菌株。（5）為探究目的菌株不同發(fā)酵時(shí)間發(fā)酵液的絮凝效果，將目的菌株進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，定時(shí)取發(fā)酵液，加入石油污水中：同時(shí)設(shè)置_為對(duì)照組。經(jīng)攪拌、靜置各3分鐘后，分別

3、測(cè)定上層水樣的石油濃度COD值（COD值越高表示有機(jī)物污染程度越高）,計(jì)算石油去除率和COD去除率，結(jié)果如下圖。（6）目的菌的種群增長(zhǎng)曲線是_型。在4044小時(shí)，發(fā)酵液對(duì)石油污水的凈化效果最好，其原因是 _。3、(2012·天津高考·T2)芥酸會(huì)降低菜籽油的品質(zhì)。油菜有兩對(duì)獨(dú)立遺傳的等位基因(H和h,G和g)控制菜籽的芥酸含量,如圖是獲得低芥酸油菜新品種(HHGG)的技術(shù)路線。已知油菜單個(gè)花藥由花藥壁(2n)及大量花粉(n)等組分組成,這些組分的細(xì)胞都具有全能性。據(jù)圖分析,下列敘述錯(cuò)誤的是()A.兩過程均需要植物激素來誘導(dǎo)細(xì)胞脫分化B.與過程相比,過程可能會(huì)產(chǎn)生二倍體再生植

4、株C.圖中三種途徑中,利用花粉培養(yǎng)篩選低芥酸植株(HHGG)的效率最高D.F1減數(shù)分裂時(shí),H基因所在染色體會(huì)與G基因所在染色體發(fā)生聯(lián)會(huì)4、（2013天津卷）9.（15分）花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖。據(jù)圖回答下列問題：（1）過程所需的酶是 。（2）過程后，在顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有供體的 存在，這一特征可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。（3）原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一

5、定的滲透壓，其作用是 。原生質(zhì)體經(jīng)過 再生，進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。（4）若分析再生植株的染色體變異類型，應(yīng)剪取再生植株和 植株的根尖，通過 、 、染色和制片等過程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。（5）采用特異性引物對(duì)花椰菜和黑芥基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對(duì)雙親及再生植株14進(jìn)行PCR擴(kuò)增的結(jié)果。據(jù)圖判斷，再生植株14中一定是雜種植株的有 。（6）對(duì)雜種植株進(jìn)行 接種實(shí)驗(yàn)，可篩選出具有高抗性的雜種植株。5、（2011年安徽卷）31.（21分）.（9分）家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q

6、細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。(1)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用_酶短時(shí)處理幼蠶組織，以便獲得單個(gè)細(xì)胞。(2)為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來自cDNA文庫(kù)的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的_和_之間。(3)采用PCR技術(shù)可驗(yàn)證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。改PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含：擴(kuò)增緩沖液（含Mg2+）、水，4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_和_。(4)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí)，的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以_增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。6、（2013新課標(biāo)II卷）40.生物選修3：現(xiàn)代生物科技專題（15分

7、）甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小組擬培育同時(shí)含有A和B的新型藥用植物?；卮鹣铝袉栴}：（1）為了培育該新型藥用植物，可取甲和乙的葉片，先用 酶和 酶 去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的 ，再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合。形成的融合細(xì)胞進(jìn)一步培養(yǎng)形成 組織，然后經(jīng)過 形成完整的雜種植株。這種培育技術(shù)稱為 。（2）上述雜種植株屬于多倍體，多倍體是指 。假設(shè)甲與乙有性雜交的后代是不育的，而上述雜種植株是可育的，造成這種差異的原因是 。（3）這種雜種植株可通過制作人工種子的方法來大量繁殖。經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的 等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。7、（2014

8、課標(biāo)卷）40.生物選修3：現(xiàn)代生物科技專題（15分）某研究者用抗原（A）分別免疫3只同種小鼠（X、Y和Z），每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)（能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)），結(jié)果如下圖所示。若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞（染色體數(shù)目40條），并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞（染色體數(shù)目60條）按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞?；卮鹣铝袉栴}：（1）制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過 次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到

9、要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是 小鼠，理由是 。（2）細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有 ，體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是 。（3）雜交瘤細(xì)胞中有 個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是 條。（4）未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是 。8、（2013重慶卷）2題 2 圖是單克隆抗體制備流程的簡(jiǎn)明示意圖。下列有關(guān)敘述，正確的是A是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng) T 淋巴細(xì)胞B中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群9、（2013海南生物卷）3

10、1.【生物選修3：現(xiàn)代生物科技專題】（15分）單純皰疹病毒I型(HSV-I)可引起水泡性口唇炎。利用雜交瘤技術(shù)制備出抗HSV-1的單克隆抗體可快速檢測(cè)HSV-1?；卮鹣铝袉栴}： (1)在制備抗HSV-I的單克隆抗體的過程中，先給小鼠注射一種純化的HSV-1蛋白，一段時(shí)間后，若小鼠血清中抗_ _的抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性，說明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了_ _反應(yīng)，再?gòu)男∈蟮腳 _中獲取B淋巴細(xì)胞。將該B淋巴細(xì)胞與小鼠的_ _細(xì)胞融合，再經(jīng)過篩選、檢測(cè)，最終可獲得所需的雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞具有的特點(diǎn)是_ _ _ 。 (2)若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體，可將該雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的_ _中使其增殖，再?gòu)腳 _中提取、純

11、化獲得。 (3)通過上述方法得到的單克隆抗體可準(zhǔn)確地識(shí)別這種HSV-I蛋白，其原因是該抗體具有_ _ 和_ _等特性。10、（2012江蘇卷）31（1）2,4D常用于秈稻愈傷組織的誘導(dǎo)， 對(duì)形態(tài)的發(fā)生有一定的抑制作用。為促進(jìn)愈傷組織再分化，在配制分化培養(yǎng)基時(shí)需（填“升高”、“保持”或“降低”）2,4D的濃度。（2）當(dāng)秈稻愈傷組織在只含有細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時(shí)，出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點(diǎn)，但繼續(xù)出芽，通常在培養(yǎng)基中添加，以促進(jìn)幼苗形成。（3）研究中用顯微鏡可以觀察到的現(xiàn)象是（填下列序號(hào)）。綠色芽點(diǎn)細(xì)胞排列松散剛?cè)诤系亩i稻和稗草雜交細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離胚狀體細(xì)胞中有葉綠體分化的愈傷組織的各細(xì)胞的形

12、態(tài)大小一致（4）經(jīng)組織培養(yǎng)篩選獲得的秈稻葉綠素突變體，其葉綠素a與葉綠素b的比值顯著大于對(duì)照，葉綠素總量不變。某同學(xué)用（填序號(hào)：綠色紅色藍(lán)紫色黃色）光照射突變體和對(duì)照葉片，檢測(cè)到兩者光合放氧差異不大。若取等量色素提取液進(jìn)行層析，會(huì)發(fā)現(xiàn)突變體第條色素帶（自上而下）窄于對(duì)照組。（5）胚乳（3n）由一個(gè)精子與兩個(gè)極核受精發(fā)育而成。若用秈稻種子的胚乳誘導(dǎo)愈傷組織，培育三倍體，需適時(shí)晚年除胚，以免胚的存在影響愈傷組織細(xì)胞的，還可避免再生苗中混有。11、（2015重慶卷，6，6分）6.下列有關(guān)人胰島素基因表達(dá)載體的敘述，正確的是A.表達(dá)載體中的胰島素基因可通過人肝細(xì)胞mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得B.表達(dá)載體的復(fù)制和

13、胰島素基因的表達(dá)均啟動(dòng)于復(fù)制原（起）點(diǎn)C.借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細(xì)胞篩選出來D.啟動(dòng)子和終止密碼子均在胰島素基因的轉(zhuǎn)錄中起作用12、（2015新課標(biāo)卷，40，15分）40.【生物選修3：現(xiàn)代生物科技專題】(15分)已知生物體內(nèi)有一種蛋白質(zhì)(P)，該蛋白質(zhì)是一種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，由305個(gè)氨基酸組成。如果將P分子中158位的絲氨酸變成亮氨酸，240位的谷氨酰胺變成苯丙氨酸，改變后的蛋白質(zhì)(P1)不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性?；卮鹣铝袉栴}：從上述資料可知，若要改變蛋白質(zhì)的功能，可以考慮對(duì)蛋白質(zhì)的 進(jìn)行改造。以P基因序列為基礎(chǔ)，獲得P1基因的途徑有修飾 基因或合成 基因。所獲得

14、的基因表達(dá)時(shí)是遵循中心法則的，中心法則的全部?jī)?nèi)容包括 的復(fù)制；以及遺傳信息在不同分子之間的流動(dòng)，即： 。蛋白質(zhì)工程也被稱為第二代基因工程，其基本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)，通過 和 ，進(jìn)而確定相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，據(jù)此獲得基因，再經(jīng)表達(dá)、純化獲得蛋白質(zhì)，之后還需要對(duì)蛋白質(zhì)的生物 進(jìn)行鑒定。13、（2015新課標(biāo)卷，40，15分）40.生物選修3：現(xiàn)代生物科技專題 HIV屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒，是艾滋病的病原體?；卮鹣铝袉栴}：（1）用基因工程方法制備HIV的某蛋白（目的蛋白）時(shí)，可先提取HIV中的 ，以其作為模板，在 的作用下合成 。獲取該目的蛋白的基因，構(gòu)建重組表達(dá)載體，隨后導(dǎo)入受體細(xì)胞。（2）從受

15、體細(xì)胞中分離純化出目的蛋白，該蛋白作為抗原注入機(jī)體后，刺激機(jī)體產(chǎn)生的可與此蛋白結(jié)合的相應(yīng)分泌蛋白是 。該分泌蛋白可用于檢測(cè)受試者血清中的HIV，檢測(cè)的原理是 。（3）已知某種菌導(dǎo)致的肺炎在健康人群中罕見，但是在艾滋病患者中卻多發(fā)。引起這種現(xiàn)象的根本原因是HIV主要感染和破壞了患者的部分 細(xì)胞，降低了患者免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能。（4）人的免疫系統(tǒng)有 癌細(xì)胞的功能，艾滋病患者由于免疫功能缺陷，易發(fā)生惡性腫瘤。14、（2015安徽卷，31，9分）（9分）科研人員采用轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因綿羊，以便通過乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人凝血因子IX醫(yī)用蛋白，其技術(shù)路線如圖。（1） 由過程獲得的A為_。（2） 在

16、核移植之前，必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核，目的是_。受體應(yīng)選用_期卵母細(xì)胞。（3） 進(jìn)行胚胎移植時(shí)，代孕母羊?qū)σ迫胱訉m的重組胚胎基本上不發(fā)生_，這為重組胚胎在代孕母羊體內(nèi)的存活提供了可能。（4）采用胎兒成纖維細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆，理論上可獲得無限個(gè)轉(zhuǎn)基因綿羊，這是因?yàn)開。答案：1B 3D 8D2、（11天津理綜卷）答案：8（14分）（1） 分解細(xì)胞壁（2） 誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合（3） 兩親本失活部位不同，融合后活性部位互補(bǔ)（4） 石油（5） 不加發(fā)酵液的石油淺水（6） S 此期間，目的菌及其產(chǎn)生的絮凝活性高分子化合物的含量高4、（2013天津卷）【答案】（1）纖維素酶和果膠酶 （2）葉綠體（3）

17、保持原生質(zhì)體完整性 細(xì)胞壁（4）雙親（或花椰菜和黑芥） 解離 漂洗（5）1、2、4 （6）黑腐病菌5、（1）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶） （2）啟動(dòng)子 終止子 （3）TaqDNA聚合酶 對(duì)干擾素基因特異性的DNA引物對(duì) （4）增大細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的附著面積6、（1）纖維素酶 果膠酶 原生質(zhì)體 愈傷 再分化（或分紅） 植物體細(xì)胞雜交技術(shù)（2）體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上染色體組的個(gè)體在減數(shù)分裂過程中，前者染色體聯(lián)會(huì)異常，而后者染色體聯(lián)會(huì)正常（3）胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽7、（1）四 Y Y小鼠的抗體效價(jià)最高（2）B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞 細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到

18、100%（3）1 100（4）不能無限增殖9、【答案】(1) HSV1蛋白（1分） 體液免疫（1分，其他合理答案也給分）脾臟（1分，其他合理答案也給分） 骨髓瘤（1分）無限增值且產(chǎn)生專一抗體（3分，其他合理答案也給分）(2)腹腔 腹水（每空2分，共4分）(3)純度高（2分） 特異性強(qiáng)（2分，其他合理答案也給分）10、答案：（1）降低（2）適量的生長(zhǎng)素（3）（4）4（5）增殖與分化二倍體幼苗11、【答案】C【解析】由于胰島素基因只在胰島B細(xì)胞中表達(dá)，因此在肝細(xì)胞中無胰島素基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA，A項(xiàng)錯(cuò)誤；胰島素基因的轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)于啟動(dòng)子，而不是復(fù)制原點(diǎn)，B項(xiàng)錯(cuò)誤；抗生素抗性基因可作為標(biāo)記基因在含有抗

19、生素的培養(yǎng)基中將受體細(xì)胞篩選出來，C項(xiàng)正確；終止密碼子位于信使RNA，不位于DNA上，啟動(dòng)子和終止子均在胰島素基因轉(zhuǎn)錄中起作用；12、12、【答案】（1）氨基酸序列（或結(jié)構(gòu)）（1分，其他答案合理也給分） （2）P P1 （每空2分，共4分） DNA和RNA（或遺傳物質(zhì)）（2分） DNARNA、 RNADNARNA蛋白質(zhì)（或轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄、翻譯）（3分） （3）設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu) 推測(cè)氨基酸序列（每空2分，共4分） 功能（1分）【解析】本題考查蛋白質(zhì)工程相關(guān)知識(shí)，難度較小。（1） 對(duì)蛋白質(zhì)的 氨基酸序列（或結(jié)構(gòu)）進(jìn)行改造，可達(dá)到改變蛋白質(zhì)的功能的目的。（2）以P基因序列為基礎(chǔ)，獲得P1基因，可以對(duì)P基因進(jìn)行修飾改造，也可以用人工方法合成P1基因；中心法則的全部?jī)?nèi)容包括 DNA的復(fù)制、 DNA RNA、RNADNA、RNA蛋白質(zhì)（或轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄、翻譯）。（3）蛋白質(zhì)工程的基本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)，通過設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和推測(cè)氨基酸序列，推測(cè)相應(yīng)的核苷酸序列，并獲取基因。經(jīng)表達(dá)的蛋白質(zhì)，要對(duì)其進(jìn)行生物功能鑒定。13、【答案】（1）RNA 逆轉(zhuǎn)錄酶 cDNA（或DNA）（2）抗體 抗原