1、專業(yè)報告模板 | REPORT TEMPLATEHPLC 測定酚類化合物實驗報告(完整版)1.實驗目的（1） 了解儀器各部分的構(gòu)造和功能及分析的原理（2） 掌握樣品、流動相的處理、儀器的維護等基本知識（3） 學會簡單樣品的分析操作過程（4） 掌握 HPLC 分析的定性、定量方法2.基本原理高效液相色譜儀以液體作為流動相，并采用顆粒極細的高效固定相的主色譜分離技術(shù)，在基本理論方面與氣相色譜沒有顯著不同，它們之間的重大差別在于作為流動相的液體與氣體之間的性質(zhì)差別。與氣相色譜相比，高效液相色譜對樣品的適用性強，不受分第7頁/總6頁析對象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，可以彌補氣相色譜法的不足。對于酚類化合物

2、的測定，其基本原理是這樣的： 先用固相小柱吸附水中酚類化合物，然后用溶劑洗脫， 經(jīng)氮吹氣濃縮至一定體積后，用反相高壓液相色譜法分析。在反相色譜柱上以甲醇/（水+乙酸）為流動相把經(jīng)預處理的酚類化合物分離，用二極陣列檢測器或紫外檢測器，測定各種酚的峰高或峰面積，以外標法定量。3. 儀器與試劑3.1 儀器：高效液相色譜儀：可編程紫外檢測器微量注射器：50L、100L色譜柱：C18 或 C8 柱化學工作站尖底濃縮瓶：10ml 具刻度富集柱3.2 試劑：流動相：甲醇/高純水(需0.22m 濾膜過濾)標準物：六種酚類混合物洗脫液：正己烷、 四氫呋喃(需重蒸) 硫酸冰醋酸無水亞硫酸鈉4. 所用儀器的主要組件

3、(1) 高壓輸液泵主要部件之一，壓力：150105350105 Pa。為了獲得高柱效而使用粒度很小的固定相(10m)，液體的流動相高速通過時，將產(chǎn)生很高的壓力， 因此高壓、高速是高效液相色譜的特點之一。應具有壓力平穩(wěn)、脈沖小、流量穩(wěn)定可調(diào)、耐腐蝕等特性。(2) 梯度淋洗裝置外梯度（高壓梯度）：用兩臺高壓輸液泵，將兩種不同極性的溶劑按一定的比例送入梯度混合室，混合后進入色譜柱。內(nèi)梯度（低壓梯度）：一臺高壓泵，通過比例調(diào)節(jié)閥，將兩種或多種不同極性的溶劑按一定的比例抽入高壓泵中混合。(3) 進樣裝置流路中為高壓力工作狀態(tài)，通常使用耐高壓的六通閥進樣裝置。(4) 高效分離柱柱體為直形不銹鋼管，內(nèi)徑 1

4、6 mm，柱長 540 cm。發(fā)展趨勢是減小填料粒度和柱徑以提高柱效。(5) 液相色譜檢測器 紫外檢測器應用最廣，對大部分有機化合物有響應。特點：靈敏度高，線形范圍寬；流通池可做得很小(1mm10mm，容積 8L)；對流動相的流速和溫度變化不敏感；波長可選，易于操作；可用于梯度洗脫。 光電二極管陣列檢測器光電二極管陣列檢測器：1024 個二極管陣列，各檢測特定波長，計算機快速處理，三維立體譜圖。 示差折光檢測器除紫外檢測器之外應用最多的檢測器。可連續(xù)檢測參比池和樣品池中流動相之間的折光指數(shù)差值。差值與濃度成正比。 熒光檢測器高靈敏度，高選擇性。對多環(huán)芳烴，維生素 B、黃曲霉素、卟啉類化合物、農(nóng)藥、藥物、氨基酸、甾類化合物等有響應。5. 數(shù)據(jù)處理（1）原始數(shù)據(jù)實驗所得色譜圖根據(jù)標準樣品的實驗數(shù)據(jù)，做出峰面積隨濃度變化的標準曲線。根據(jù)標準曲線，計算實際單標中的物質(zhì)濃度 單標為 8ppm 的標樣物質(zhì)實際濃度： C=7.990ppm