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蛋白質的鹽析作用 1實驗目的掌握鹽析的原理和方法熟練使用基本儀器2實驗原理用中性鹽類使蛋白質從溶液中沉淀析出的過程稱為蛋白質的鹽析作用.蛋白質是親水膠體,當加入適量的輕金屬鹽類時蛋白質分子即處于高滲透壓的溶液中,使蛋白質外周水化膜被破壞,同時鹽類的離子中和了蛋白質分子的電荷,結果蛋白質的膠體穩(wěn)定性遭到破壞而沉淀;但此時蛋白質分子內(nèi)部的結構沒有改變,仍然保持其天然蛋白質的性質,即可復溶解于原來的溶劑中.沉淀蛋白質所需鹽類濃度視蛋白質種類而異.呈粗分散系者(如球蛋白)較細分散系者(如清蛋白)容易鹽析.3實驗操作取小試管或離心管加蛋清稀釋液1ml及飽和(NH4)SO4(74.5%)溶液1ml混和后靜置10分鐘,球蛋白即沉淀析出,離心十分鐘(2000轉/分)。將離心后的上清液(含有清蛋白),吸出1ml加入另一支小試管,逐漸加入(NH4)SO4結晶粉末,每加一次需用細玻璃棒充分攪拌,直至粉末不再溶解而達到飽和狀態(tài)為止,靜置約十分鐘,離心十分鐘,傾去上清液,此時的沉淀即為清蛋白。向上述兩個離心管的沉淀內(nèi)各加水1ml,用細玻璃棒攪拌沉淀,觀察沉淀能否復溶,此得出什么結論。4注意事項 加(NH4)SO4沉淀清蛋白時,一定加入適量,倘若太過量則清蛋白不能沉淀,而呈乳膠狀物,
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