1、高中生物選修三DNA重組技術和基本工具研究人員評估表明糖尿病死亡率現(xiàn)已居全世界疾病死亡率之首。目前中國糖尿病患者人數(shù)已居世界第二位，預計二二五年時更將達五千九百三十萬人。 治療糖尿病特效藥胰島素每100kg 豬或牛的胰腺中僅可提取45g。1979年，美國將人的胰島素基因重組到大腸桿菌內，實現(xiàn)了細菌生產胰島素，大大降低了生產成本。1979年，美國將人的胰島素基因重組到大腸桿菌內，實現(xiàn)了細菌生產胰島素，大大降低了生產成本。基因工程基因工程 按照人們的愿望，進行嚴格設計，并通過體外DNA重組和轉基因技術，創(chuàng)造出新生物類型和產品?；蚬こ?按照人們的愿望，進行嚴格設計，并通過體外DNA重組和轉基因技術

2、，創(chuàng)造出新生物類型和產品。轉基因或DNA重組技術問題探討蘇云金桿菌含有一種可以合成毒蛋白的基因。蘇云金桿菌毒蛋白問題探討蘇云金桿菌毒蛋白普通棉花抗蟲棉蘇云金桿菌含有一種可以合成毒蛋白的基因。讓細菌的毒蛋白基因在棉花細胞中表達，可培育出抵抗棉鈴蟲害的抗蟲棉。想一想需要做哪些關鍵工作？想一想需要做哪些關鍵工作？想一想需要做哪些關鍵工作？想一想需要做哪些關鍵工作？想一想需要做哪些關鍵工作？想一想需要做哪些關鍵工作？想一想需要做哪些關鍵工作？想一想需要做哪些關鍵工作？SmaSma平末端平末端EcoREcoREcoR黏性末端黏性末端1. 主要來源：2. 種類：3. 作用特點：4. 作用結果：一、限制性核

3、酸內切酶“分子手術刀”原核生物4000種1. 主要來源：2. 種類：3. 作用特點：4. 作用結果：一、限制性核酸內切酶“分子手術刀”識別特定核苷酸序列，切斷磷酸二酯鍵。具特異性。原核生物4000種1. 主要來源：2. 種類：3. 作用特點：4. 作用結果：一、限制性核酸內切酶“分子手術刀”識別特定核苷酸序列，切斷磷酸二酯鍵。具特異性。原核生物產生黏性末端或平末端4000種1. 主要來源：2. 種類：3. 作用特點：4. 作用結果：一、限制性核酸內切酶“分子手術刀” 要想獲得某個特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個切口？ 要想獲得某個特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個切口？要切兩個切口。 要想獲

4、得某個特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個切口？要切兩個切口。 如果把兩種來源不同的DNA用同一種限制酶來切割，會怎樣呢？ 要想獲得某個特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個切口？ 如果把兩種來源不同的DNA用同一種限制酶來切割，會怎樣呢？ 會產生相同的末端。要切兩個切口。G A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C G用同種限制酶切割G A A T T CC T T A A GG

5、A A T T CC T T A A GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C G用同種限制酶切割G A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C G用同種限制酶切割G A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A

6、 T T C GG C T T A A A A T T C G用同種限制酶切割G A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C G用同種限制酶切割“分子縫合針” : DNA連接酶 分類： Ecoli DNA連接酶 T4 DNA連接酶 作用：二、“分子縫合針” DNA連接酶Ecoli DNA連接酶 或T4DNA連接酶Ecoli DNA連接酶 或T4DNA連接酶Ecoli DNA連接酶 或T4DNA連接酶可把黏性末端之間的縫隙

7、“縫合”起來， 即恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵T4 DNA連接酶還可把平末端之間的縫隙“縫合”起來，但效率較低DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎？為什么？ DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎？為什么？ 不是一回事。相同點：形成磷酸二酯鍵不同點：1）DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯鍵；而DNA連接酶是在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵2） DNA聚合酶需要以一條DNA鏈為模板；而DNA連接酶不需要模板。載體需要的條件：作為分子運輸車載體，如果沒有切割位點將會怎樣？三、“分子運輸車” 基因進入受體細胞的載體三、“分子運輸車” 基因進入受體細胞的載體

8、載體需要的條件：作為分子運輸車載體，如果沒有切割位點將會怎樣？有1多個限制酶切點三、“分子運輸車” 基因進入受體細胞的載體載體需要的條件：作為分子運輸車載體，如果沒有切割位點將會怎樣？霍亂菌的質粒有多個限制酶切點，你會用它來做分子運輸車嗎？有1多個限制酶切點三、“分子運輸車” 基因進入受體細胞的載體載體需要的條件：作為分子運輸車載體，如果沒有切割位點將會怎樣？霍亂菌的質粒有多個限制酶切點，你會用它來做分子運輸車嗎？有1多個限制酶切點對受體細胞無害假如目的基因導入受體細胞后不能復制或不能轉錄，轉基因生物能有預想的效果嗎？假如目的基因導入受體細胞后不能復制或不能轉錄，轉基因生物能有預想的效果嗎？導

9、入基因能在受體細胞中復制、表達假如目的基因導入受體細胞后不能復制或不能轉錄，轉基因生物能有預想的效果嗎？目的基因有沒有進入受體細胞，如何去發(fā)現(xiàn)？導入基因能在受體細胞中復制、表達有某些標記基因，便于篩選假如目的基因導入受體細胞后不能復制或不能轉錄，轉基因生物能有預想的效果嗎？目的基因有沒有進入受體細胞，如何去發(fā)現(xiàn)？導入基因能在受體細胞中復制、表達常用運載體： 細菌的質粒 噬菌體或某些動植物病毒質粒的特點質粒的特點1.細胞染色體(或擬核DNA分子)外能自主復制的小型環(huán)狀DNA分子；質粒的特點1.細胞染色體(或擬核DNA分子)外能自主復制的小型環(huán)狀DNA分子；2.質粒的存在對宿主細胞無影響；質粒的特點1.細胞染色體(或擬核DNA分子)外能自主復制的小型環(huán)狀DNA分子；2.質粒的存在對宿主細胞無影響；3.質粒的復制只能在宿主細胞內完成。載體的一段DNA 含毒蛋白基因的細菌DNA片段模擬制作：在特定部位對載體DNA進行模擬切割，并將模擬毒蛋白基因取出，再用膠紙模擬基因種間連接。1.以下說法正確的是 （ ）A. 所有的限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列B. 質粒是基因工程中唯一的運載體 C. 運載體必須具備的條件之一是：具有多個限制酶切點，以便與外源基因連接D. DNA連接酶使黏性末段的堿基之間形成氫鍵練習1.以下說法正確的是 （ ）A. 所有的限制