1、關于氨基酸的等電點第一張，PPT共十一頁，創(chuàng)作于2022年6月蛋白質(protein)是生命現(xiàn)象的物質基礎，氨基酸(amino acid)是蛋白質的基本結構單位。天 然存在于蛋白質中的氨 基酸共有20種。氨基酸 的一般結構為 第二張，PPT共十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 氨基酸既含有能釋放H+ 的基團(如羧基)。也含有接受H+ 的基團(如氨基)，因此是兩性化合物，亦稱兩性電解質或兼性離子。 氨基酸的兩性形式示意圖 第三張，PPT共十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 酸性氨基酸：天冬氨酸(Asp)、谷氨酸 (Glu)堿性氨基酸：賴氨酸(Lys)、精氨酸(Arg)、 組氨酸(His) 20種常見天然氨基

2、酸中3個有堿性取代基，能和 H+結合，稱為堿性氨基酸；4個有酸性取代基，可以離解出H+，稱為酸性氨基酸；大多數(shù)為中性氨基酸第四張，PPT共十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 氨基酸的等電點(isoelectric point)：氨基酸的等電點在一定 pH條件下,某種氨基酸接受或給出質子的程度相等,分子所帶的凈電荷為零,此時溶液的pH值就稱為該氨基酸的等電點(pI) NH3+ NH3+ NH2 | +OH- | +OH- | H-C-COOH = H-C-COO- = H-C-COO- | +H+ | +H+ | R R R 陽離子 兩性離子 陰離子 pHpI第五張，PPT共十一頁，創(chuàng)作于2022年6

3、月氨基酸等電點的計算公式：pH=(pKn+pKn+1)/2 n:氨基酸（或多肽）完全質子化時帶正電荷基團數(shù)pK:解離基團的解離常數(shù)等電點時溶液的pH與氨基酸的濃度無關。通常氨基酸的的酸解離與堿解離的程度不同，純氨基酸溶液不能達到其等電點，可以通過加入酸或堿調(diào)節(jié)其 pH以達到等電點pH第六張，PPT共十一頁，創(chuàng)作于2022年6月等電點的計算步驟 先將氨基酸/多肽可解離基團的pK值自小到大按順序排列 判斷n值 判斷氨基酸的分類 酸性氨基酸和中性氨基酸的完全質子化數(shù) n=1 堿性氨基酸的完全質子化數(shù) n=2 第七張，PPT共十一頁，創(chuàng)作于2022年6月等電點的應用1電泳分離應用氨基酸的分離與分析 氨

4、基電泳：帶電顆粒在電場中移動的現(xiàn)象稱為電泳 酸不同（pI不同，大小不同），在電場中泳動速度不同，因此可以通過電泳將氨基酸彼此分開當pH=pI時，氨基酸呈兼性離子，在電場中不移動 當pHpI時，氨基酸帶負電荷，在電場中向正極移動 當pHpI時，氨基酸帶正電荷，在電場中向負極移 蛋白質在高于或低于其等電點的溶液中是帶電的，在電場中能向電場的正極或負極移動，從而分離蛋白質。根據(jù)支撐物不同，有薄膜電泳、凝膠電泳等。第八張，PPT共十一頁，創(chuàng)作于2022年6月等電點應用2蛋白質沉淀與分離 處于等電點的蛋白質溶解度最小。當?shù)鞍踪|混合物的 pH 被調(diào)到其中一種成分的等電點時，該蛋白質將大部分或全部沉淀下來。那些等電點高于或低于該 pH的蛋白質仍保留在溶液中，可利用此性質進行蛋白質的分離。這樣沉淀出來的蛋白質保持天然構象，能再溶解于水并具有天然的活性第九張，PPT共十一頁，創(chuàng)作于2022年6月參考文獻 李克安分析化學教程 北京大學出版社出版2005年5月第1版 陳閱增普通生物學生命科學通論 高等教育出版社1997年出版/biochemistry/htm/lhtx01.htm/showthrea