1、一、選擇題1-5 BABBB 6-10 BDABB 11-15 ABCAC 16-18 CCC二、填空題1、根據(jù)線粒體和葉綠體起源內(nèi)共生學說，認為線粒體起源于 細菌,葉綠體起源于 藍藻。2、協(xié)助擴散和主動運輸?shù)闹饕嗤幵谟诙夹枰d體，速度都很快，主要差別在于協(xié)助擴散只能順濃度梯度進行，不消耗能量；主動運輸可 以逆濃度梯度進行，消耗能量。3、核纖層結(jié)構(gòu)的組成成分,屬于中間纖維 蛋白家族4,核小體的核心由四種組蛋白（ HA H?B、H?、H4）各兩分子共8分子組成的 八聚體，核心的外面纏繞了 1.75圈的DNA雙螺旋，其進出端結(jié)合有 H1組蛋白分子。5、YAC （酵母人工染色體）的構(gòu)建成功說明

2、：一個有功能的染色體至少有自主復制DNA序列，著絲粒 DNA序列，端粒DNA序列三個不可缺少的功能元件。6、真核細胞和原核細胞中都存在的 rRNA是5SrRNA。7、細胞周期調(diào)控中的兩個主要因子細胞周期蛋白依賴的蛋白激酶（CDK 激酶）和。細胞周期蛋白 其中前者是催化亞基,后者相當于調(diào)節(jié)亞基。三、名詞解釋.常染色質(zhì)（euchromatin）:間期核中處于伸展狀態(tài)，壓縮程度相對較低、 著色較淺的染色質(zhì)。.雙信號系統(tǒng)：以PIP2代謝為基礎(chǔ)的信號通路中，胞外刺激使轉(zhuǎn)化為 IP3和 DAG,引發(fā)IP3/Ca2+和DAG/PKC兩條信號轉(zhuǎn)導途徑，在細胞內(nèi)沿兩個方向傳 遞，實現(xiàn)細胞對外界的應答，這樣的信號

3、系統(tǒng)稱之為雙信號系統(tǒng)。.細胞周期同步化：將一個細胞群體內(nèi)處于不同時期的細胞處于細胞周期的 同一時相的方法。.多聚核糖體：具有特殊功能與形態(tài)結(jié)構(gòu)的核糖體與 mRNA的聚合體。.細胞凋亡：為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細胞自主的有序的死亡。.Hayflick界限：正常的體外培養(yǎng)的細胞壽命不是無限的，只能進行有限次 數(shù)的增殖。7踏車行為：在一定條件下彳散絲的正極由于肌動蛋白亞基不斷添加而延長，負 極由于肌動蛋白亞基去組裝縮短，這種現(xiàn)象稱為踏車行為。8細胞分化：細胞選擇性的表達各自特有的專一性蛋白質(zhì)。導致細胞在形態(tài)、 結(jié)構(gòu)和功能上產(chǎn)生穩(wěn)定性差異的過程。9異染色質(zhì)：在細胞間期保持高度凝聚狀態(tài)、染色較深、

4、不具有轉(zhuǎn)錄活性的染 色質(zhì)。有結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)和兼性異染色質(zhì)。10常染色質(zhì)：常染色質(zhì)是染色體中染色較淺的區(qū)段，其染色質(zhì)較為疏松11多聚核糖體： 當一個核糖體沿mRNA移動一定距離后，另一個核糖體又 與同一 mRNA的SD序列結(jié)合而起始下一輪翻譯，使一個 mRNA分子可能結(jié)合 多個核糖體并帶有長短不一的合成中的多肽鏈，稱為多聚核糖體12程序性死亡：為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細胞自主的有序的死亡 成為程序性死亡13 MPF及其生化本質(zhì)：MPF是卵細胞促成熟因子，可以誘導卵細胞成 熟的一種活性物質(zhì)，本質(zhì)是一種蛋白激酶含有 Cdc2蛋白和周期蛋白。三、問答及實驗分析題.怎么理解葉綠體與線粒體的半自主性？

5、答：葉綠體和線粒體中除有 DNA外，還有RNA、核糖體、氨基酸活化酶等。自 我繁殖所必需的基本組分，具有獨立進行轉(zhuǎn)錄和翻譯的功能，但人們發(fā)現(xiàn)葉綠體 僅能合成13種蛋白質(zhì)，線粒體能夠合成的蛋白質(zhì)也只有 60多種，而參與組成線 粒體的絕大多數(shù)蛋白質(zhì)仍得由核基因編碼， 在細胞質(zhì)核糖體上合成，轉(zhuǎn)移至葉綠 體和線粒體內(nèi)起作用，這些蛋白質(zhì)與葉綠體和線粒體DNA編碼的蛋白質(zhì)協(xié)同作用，也就是說，葉綠體和線粒體的自主程度是有限的， 它們對核遺傳系統(tǒng)有很大 的依賴性，因此葉綠體和線粒體的生長和增值是受核基因組及其自身的基因兩套 遺傳系統(tǒng)的控制，這就稱為葉綠體和線粒體的半自主性。.什么是細胞周期同步化？如何實現(xiàn)？答

6、：細胞同步化可以通過人工誘導或人工選擇。即人為的或通過藥物誘導，使細胞同步化在細胞周期中某個特定時期。目前應用較廣泛的誘導同步化方法主要有 兩種，即DNA合成阻斷法和分裂中期阻斷法。DNA阻斷法：是一種采用低毒或無毒的 DNA合成抑制劑特異地抑制 DNA 合成，而不影響處于其他時期的細胞進行細胞周期運轉(zhuǎn)，從而將被抑制的細胞抑制在DNA合成期的實驗方法。此方法的優(yōu)點是同步化效率高，幾乎適合于所有 體外培養(yǎng)的細胞體系。這種方法目前被廣泛應用。(2)分裂中期阻斷法：某些藥物，如秋水仙素、秋水酰胺和nocodazole等，可以抑制微管聚合，因而能有效地抑制細胞分裂器的形成， 將細胞阻斷在細胞分裂 中期

7、。處于間期的細胞，受藥物的影響相對較弱，常可以繼續(xù)運轉(zhuǎn)到分裂期。因 而，在藥物持續(xù)存在的情況下，處于分裂期的細胞數(shù)量會逐漸累加。 通過輕微振 蕩，將變圓的分裂期細胞搖脫，經(jīng)過離心，可以得到大量的分裂中期細胞。將分 裂中期細胞懸浮于新鮮培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，它們可以繼續(xù)分裂并沿細胞周期同步 運轉(zhuǎn)，從而獲得G1期不同階段的細胞。此方法的優(yōu)點是操作簡便，效率高。缺 點是這些藥物的毒性相對較大，若處理的時間過長，所得到的細胞常常不能恢復 正常細胞周期運轉(zhuǎn)。(3)人工選擇同步化：人為的將不同時期的細胞分離開來，從而獲得不同時相 的細胞群體。.根據(jù)近年來的研究成果，怎樣理解RNA在生命起源與細胞起源中的地位?

8、答：RNA, DNA,蛋白質(zhì)，三種生物大分子，只有 RNA既具有信息載體功能又 具有酶的催化功能。因此，推測可能是生命起源中最早的生物大分子。在漫長的 進化過程中，由RNA催化產(chǎn)生了蛋白質(zhì)，DNA代替了 RNA的遺傳信息功能， 蛋白質(zhì)取代了絕大部分RNA酶的功能，逐漸演化成今天遺傳信息流的模式一一中心法則。2從化學上推測核糖核酸的基本成分是核糖，很容易由當時地表豐富 的甲烷合成。而脫氧核糖需要還原形成，這一反應由專一性的酶完成，因此生命 的早期形式可能是由膜圍繞著一套具有自我復制能力的分子體系和簡單物質(zhì)與 能量的供應體系，其遺傳物質(zhì)載體是RNA不是DNA。在遺傳信息的表達中。不 僅要通過RNA

9、完成轉(zhuǎn)錄翻譯，而且一些重要的反應需要 RNA的催化作用。.請論述真核細胞基因表達的多級調(diào)控系統(tǒng)。答：真核細胞基因表達的調(diào)控是多級調(diào)控系統(tǒng)， 主要發(fā)生在三個彼此相對獨立的 水平上：轉(zhuǎn)錄前及轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控：決定某個基因是否會被轉(zhuǎn)錄，并決定轉(zhuǎn)錄的頻 率，轉(zhuǎn)錄前水平包括DNA重排DNA甲基化，染色質(zhì)丟失異染色質(zhì)化等，轉(zhuǎn)錄 水平主要包括順式作用元件和反式作用因子相互作用的綜合調(diào)控；加工水平的調(diào)控：決定初始mRNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物被加工為翻譯成多肽的信使 RNA的途徑，主要包 括選擇性剪接，組成型剪切，剪切增強子的識別，加“帽”、力口 Poly A “尾巴” 等過程；翻譯水平的調(diào)控：形成蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)，決定某種mR

10、NA是否會真正得到翻譯，如果能得到翻譯，還決定翻譯的頻率和時間長短包括mRNA的穩(wěn)定性半壽期等。翻譯后水平調(diào)控，多肽的折疊與修飾，形成更高級的結(jié)構(gòu)等。.你將如何進一步研究該 cDNA克隆的功能？答：根據(jù)以上信息推斷這一 cDNA克隆為一新基因，可通過以下兩個方面進一步 研究其功能.：（1）構(gòu)建含這一 cDNA克隆的過表達載體，將其在野生型受體細 胞中表達，分析轉(zhuǎn)基因受體細胞的生理變化，據(jù)此分析其功能；（2）敲除野生型細胞中這一克隆的表達，使野生型細胞中這一基因突變，進而分析細胞的生理生 化變化，進一步分析該cDNA克隆的功能。克隆鑒定定性測定-尋找到相關(guān)克隆后對克隆片段的分析 ？克隆DNA分析

11、包括 測序、定性、擴增和組構(gòu)測定等？克隆DNA測定之前必須先行分離純化。?克隆DNA測定包括：DNA大小、酶切圖譜、插入片段的定位與定向、測序， 等等核酸標記分子雜交-從酶切片段中尋找目標DNA片段PCR克隆DNA的組構(gòu)分析之前需確定功能基因的位置，然后才能進行基因的組構(gòu)分 析克隆DNA f酶解消化 -凝膠電泳-轉(zhuǎn)膜cDNA探針-標記-分子雜交 報告基因 啟動子+報告基因與載體連接并轉(zhuǎn)化宿主細胞觀察報告基因的表達研究啟動子的功能與特性、及下游基因的表達【載體連接】重組體DNA-【轉(zhuǎn)化宿主細胞】細胞培養(yǎng)（細胞克?。?【克隆 篩選分子雜交】靶DNA克隆-表達分析與功能分析.細胞程序性死亡的形態(tài)與生

12、化特征形態(tài)特征（1）細胞表面的特化結(jié)構(gòu)如絨毛消失，細胞間接觸消失，但細胞膜依然完整，未失去選擇透過性；線粒體大而完整，核糖體逐漸與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脫離，內(nèi)質(zhì) 網(wǎng)囊腔膨脹逐漸與質(zhì)膜融合；細胞核內(nèi)染色質(zhì)周縮，形成星月形帽狀結(jié)構(gòu)，沿核 膜分布。（2）凋亡小體形成，核染色質(zhì)斷裂為大小不等的片段，與某些細胞器聚 集在一起被反折的細胞質(zhì)膜所包圍。 細胞表面發(fā)泡，產(chǎn)生泡狀或芽莊突起，隨后 分離形成單個凋亡小體。（3）凋亡小體被鄰近的細胞或吞噬細胞吞噬， 凋亡細胞 的殘余物質(zhì)被重新利用。此過程細胞膜始終完整。DNA電泳檢測凋亡小體：細胞凋亡時細胞內(nèi)特異性核酸內(nèi)切酶活化，染色 質(zhì)DNA在核小體間被特異切割，DNA降解成1

13、80200bp或其整數(shù)倍片段。因 此凋亡細胞中提取的DNA在進行常規(guī)的電泳并染色，大小不同的 DNA可產(chǎn)生 梯狀條帶。7為什么中間絲有組織特異性，怎樣通過其鑒定腫瘤來源。（1）人類基因中至少有67鐘不同的中間絲蛋白基因，這種中間絲蛋白多樣性 與人體內(nèi)200多種細胞類型相關(guān)，這些細胞表現(xiàn)不同的功能和機械性又與 其特殊的骨架成分有關(guān)。因此中間絲蛋白是區(qū)別細胞類型的身份證。 在N 端和C端序列差異為不同細胞類型提供了獨特的環(huán)境。不同來源的組織 細胞表達不同類型的中間絲來源。（2）在細胞分化中，細胞內(nèi)中間絲類型 隨著細胞的分化過程而發(fā)生變化。中間纖維具有組織特異性，不同類型細 胞含有不同IF蛋白質(zhì)。月

14、中瘤細胞轉(zhuǎn)移后仍保留源細胞的 IF,因此可用IF 抗體來鑒定月中瘤的來源。第二信使能將細胞表面受體接受的細胞外信號轉(zhuǎn)換為細胞內(nèi)信號的物質(zhì)稱為第二信使，：包括 cAMP, cGMP, IP3, Ca2+, （DG）, 一氧化氮等。 主動運輸有ATP直接供能，耦聯(lián)轉(zhuǎn)運蛋白間接供能，光驅(qū)動泵。8如何驗證細胞液中1有 MPF : 1.融合實驗：將不同分裂期的細胞與間期細胞融合，有些可以看到染色質(zhì)凝聚，稱之為 PCC超前凝聚染色體。2,胞質(zhì)注射實驗：將分裂期的胞質(zhì)注射到間期細胞，引起間期細胞提前進入分裂期 說明胞質(zhì)中某種因子引起細胞成熟,MPF是卵細胞促成熟因子。3我們用基因敲 除的方法敲掉CDK1的基

15、因，或者周期蛋白B的基因，我們培養(yǎng)的細胞講不會進入 分裂期。普通光學顯微鏡：1光學放大系統(tǒng)2照明系統(tǒng)3機械和支架系統(tǒng)分辨率：區(qū)分開兩個質(zhì)點的最小距離。光鏡最大分辨率0.2微米熒光顯微技術(shù)：光鏡水平上檢測細胞上的特異熒光染料。在光源與樣品間加入激發(fā)光濾片。在物鏡目鏡見加入阻斷濾片電子顯微鏡以波長小于0.1納米的電子束作為光源，分辨率為 0.2納米。掃描電 子顯微鏡用來觀察樣品表面形貌特征。掃描隧道顯微鏡能觀察到生物膜，病毒等結(jié)構(gòu)免疫熒光技術(shù)將抗原-抗體特異性結(jié)合與熒光標記技術(shù)結(jié)合研究特異蛋白抗原在細胞內(nèi)分布的方法，二免疫電鏡技術(shù)可以提高分辨率單克隆抗體技術(shù)：骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合。融合后的雜

16、交瘤細胞一方面可以分泌抗體另一方面像月中瘤細胞可以無限增值。線粒體起源于細菌，葉綠體起源于藍藻。線粒體分裂方式收縮分離，出芽，間壁或隔膜分離。.知道分泌蛋白在粗面內(nèi)置網(wǎng)上合成的決定因素是蛋白質(zhì)N端的信號肽蛋白質(zhì)分選兩條途徑：翻譯后轉(zhuǎn)運途徑。共翻譯轉(zhuǎn)運途徑，邊合成邊轉(zhuǎn)移 到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)微絲與那些運動相關(guān)：肌肉收縮，胞質(zhì)環(huán)流，阿米巴運動，變皺膜運動， 吞噬，膜蛋白定位。微絨毛發(fā)生，細胞膜的股價，維持細胞形狀，細胞分裂的收 縮環(huán)。細胞偽足形成與遷移運動微管與哪些運動相關(guān)：細胞結(jié)構(gòu)的組織作用，細胞內(nèi)依賴微管的運輸，纖毛和鞭 毛的運動紡錘體和染色體的運動G蛋白耦聯(lián)受體介導的細胞信通路1以cAMP為第二信使：激

17、素 G蛋白耦聯(lián) 受體一 G蛋白腺甘酸環(huán)化酶cAMPPKA 基因調(diào)控蛋白基因轉(zhuǎn)錄1.病毒（virus）:是由核酸分子（DNA或RNA）與蛋白質(zhì)構(gòu)成的非細胞形態(tài)的靠寄 生生活的生物體。分類：以遺傳物質(zhì)分類：DNA病毒、RNA病毒、蛋白質(zhì)病毒（如骯病毒）.按病毒結(jié)構(gòu)分類：真病毒（Euvirus,簡稱病毒）和亞病毒（包括類病毒、骯病 毒）.根據(jù)寄主類型分類：噬菌體（細菌病毒）、植物病毒（如煙草花葉病毒）、動物 病毒（如禽流感病毒、天花病毒、HIV等）. 從感染特性來分：溫和病毒（如HIV）、烈性病毒（如狂犬病毒）.病毒核酸分為4種，其中單鏈RNA病毒可分為侵染性 RNA病毒，非侵染性RNA病毒以及帶有反轉(zhuǎn)錄酶的的單鏈 RNA病毒。病毒有衣殼，有的在衣殼外還有包膜。核小體由組蛋白H2a、H2b、H3和H4各2分子（構(gòu)成核心組蛋白八聚體），約200bp 的DNA片段（其中146 bp繞八聚體1.75圈），和一個H1組蛋白分子構(gòu)成.146 bp DNAr 一核小體核心2（H2a+H2b+