1、魚類粘膜免疫系統(tǒng)真骨魚類粘膜相關(guān)淋巴組織(mucosa2associatedlymphoid tissues)主要包括 腸道、皮膚和鰓，這些暴露于外環(huán)境的組織及其表面的粘液構(gòu)成了抵御病原入 侵的第一道屏障.這些組織中分布有各種免疫細(xì)胞，使其具有獨(dú)立完成局部免 疫應(yīng)答的功能口1. 1 腸道魚類的腸道粘膜層可分為兩層：腸上皮層(laminaepithelialis)和腸固有層 (lamina propria) 7,8.粘膜層中分布有粒細(xì)胞、巨嗜細(xì)胞等白細(xì)胞，主要存在 于腸道皺褶的固有層，而上皮層中較少魚類腸道雖然沒有類似哺乳動(dòng)物Peyer 氏淋巴集結(jié)，但是還有著相當(dāng)數(shù)量的淋巴細(xì)胞，主要分布在腸道的

2、中后部.根據(jù)它 們的位置，可以分為腸道固有層淋巴細(xì)胞(lamina proprialymphocytes ,LPLs )和上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞(intraepitheliallymphocytes ,IELs).通過免疫組化檢測發(fā)現(xiàn)，后腸中的Ig+淋巴細(xì)胞主要分布在 固有層，上皮層中的淋巴細(xì)胞則大多是Ig-細(xì)胞10也有報(bào)道在中腸上皮層有Ig+細(xì) 胞的分布.Ig -的細(xì)胞一般被認(rèn)為是T細(xì)胞,Abelli等uh應(yīng)用胸腺細(xì)胞的單抗檢測 腸道淋巴細(xì)胞，也證實(shí)T細(xì)胞主要分布于腸道上皮層.McMillan和Secombes9發(fā) 現(xiàn)，腸上皮層細(xì)胞淋巴細(xì)胞對(duì)腫瘤靶細(xì)胞具有類似T細(xì)胞的細(xì)胞毒性，這個(gè)結(jié)果與 T、B淋巴

3、細(xì)胞在腸道中的分布情況相吻合.1. 2 皮膚魚類的皮膚表皮主要由上皮細(xì)胞組成,其間分布有粘液細(xì)胞和囊狀細(xì)胞,另外還 證實(shí)，皮膚表皮還存在抗體分泌細(xì)胞.1. 3 鰓鰓組織的細(xì)胞主要由大淋巴細(xì)胞、小淋巴細(xì)胞巨嗜細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性 粒細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、泌氯細(xì)胞(chloride cells)、上皮細(xì)胞等構(gòu)成.鰓上淋巴 細(xì)胞和巨嗜細(xì)胞基礎(chǔ)13.通過檢測這些細(xì)胞內(nèi)酶的活性，結(jié)果表明部分粒細(xì)胞及 巨嗜細(xì)胞具有酸性磷酸酶、堿性磷酸酶及非特異性脂酶的活性，類似于外周血免 疫細(xì)胞的酶活性特點(diǎn)12.進(jìn)一步研究表明魚類鰓上的細(xì)胞能產(chǎn)生和分泌一種化學(xué) 趨化物質(zhì)(chemoattractants )，能引起白細(xì)胞向

4、鰓的局部遷移;而鰓上的白細(xì) 胞遷移活性遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于頭腎白細(xì)胞,這種現(xiàn)象與腸道白細(xì)胞類似，意味著白細(xì)胞遷 移到粘膜組織后,就對(duì)趨化物質(zhì)不敏感了，因而駐留在粘膜組織.從鰓淋巴細(xì)胞對(duì) 有絲分裂原LPS和PHA的應(yīng)答情看,PHA能明顯引起淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化,而LPS引起的淋 巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化則相對(duì)較弱，推測鰓上的淋巴細(xì)胞中T細(xì)胞占多數(shù)14.粘膜免疫系統(tǒng)的非特異性免疫魚類的非特異性免疫，如通過一些非特異性的溶菌酶、蛋白酶及呼吸暴發(fā)產(chǎn)生的 活性氧自由基等來殺滅入侵微生物，是魚類相當(dāng)重要的防御機(jī)制之一.研究表明, 粘膜免疫系統(tǒng)也存在這些非特異性的免疫機(jī)制.通過對(duì)魚的皮膚和粘液抽提物進(jìn) 行研究，發(fā)現(xiàn)其中具有一些非特異性的抗細(xì)

5、菌、真菌的物質(zhì)15，這些物質(zhì)對(duì)病原 的作用具有廣譜性.對(duì)皮膚粘液與寄生蟲感染的關(guān)系研究發(fā)現(xiàn)，虹鱒鰭條和皮膚 粘液細(xì)胞密度與三代蟲感染強(qiáng)度呈負(fù)相關(guān)，并認(rèn)為粘液中的溶菌酶、蛋白酶、免 疫球蛋白及C3補(bǔ)體對(duì)寄生蟲的感染都有影響.魚類鰓和腸道的吞噬細(xì)胞都存在活 性氧自由基(O-2 )鰓上的吞噬細(xì)胞具有吞噬活性，但是從其O-2活性看，其呼 吸暴發(fā)(respiratory burst )強(qiáng)度不如頭腎白細(xì)胞.而對(duì)腸道巨嗜細(xì)胞的呼吸 暴發(fā)進(jìn)行研究，結(jié)果表明虹鱒后腸巨嗜細(xì)胞對(duì)PMA刺激后的化學(xué)發(fā)光反應(yīng) (chemiluminescence response)強(qiáng)度明顯比前腸細(xì)胞強(qiáng)，這種差別并不是因?yàn)?巨嗜細(xì)胞在前

6、、后腸中數(shù)量上的明顯差別，而是兩個(gè)部位的巨嗜細(xì)胞細(xì)胞反應(yīng)強(qiáng) 度不相同.此外，大劑量的維生素E可以增強(qiáng)魚類腸道白細(xì)胞的吞噬活性,這可能 與維生素E能增強(qiáng)吞噬細(xì)胞膜的流動(dòng)性有關(guān).魚類的嗜曙紅粒細(xì)胞 (eosinophilic granule cells ,EGCs)在非特異性免疫中也有相當(dāng)重要的作用。 Flano等發(fā)現(xiàn)虹鱒魚體外培養(yǎng)的鰓在受到細(xì)菌刺激時(shí),EGCs數(shù)量增加,并推測EGCs 是由局部的前體細(xì)胞分化而來.Holland等us的結(jié)果也證實(shí)了這一點(diǎn)，在體外培養(yǎng) 的鰓受到LPS和人重組TNFa刺激時(shí),EGCs的數(shù)量有顯著的增加，并且還發(fā)現(xiàn)魚體 受急性應(yīng)激(acute stress )和慢性應(yīng)激

7、(chronicstress)時(shí),EGCs的數(shù)量也會(huì) 增加，這些現(xiàn)象類似于哺乳動(dòng)物肥大細(xì)胞應(yīng)激時(shí)的反應(yīng)機(jī)制.另外魚類皮膚、鰓 及腸道的EGCs與哺乳動(dòng)物肥大細(xì)胞有類似的細(xì)胞酶活性(如磷酸酶，非特異性脂 酶等)，并在P物質(zhì)(substance P,SP)、辣椒素等物質(zhì)的刺激下發(fā)生去顆?；?，因 而一般認(rèn)為魚類的EGCs細(xì)胞與哺乳動(dòng)物肥大細(xì)胞是同源的.粘膜免疫系統(tǒng)的特異性免疫在哺乳動(dòng)物中，當(dāng)抗原接觸粘膜時(shí)，可以引起局部的免疫應(yīng)答，并分泌特異性的 IgA抗體.成特異性免疫應(yīng)答.最初，研究表明口服和腸道灌注的方法進(jìn)行免疫 都可以引起體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答，而且口服疫苗可以使魚體產(chǎn)生不依賴于血清抗 體的粘膜抗

8、體.近十年來，圍繞這一問題的研究取得了很大的進(jìn)展,越來越多的學(xué) 者傾向于粘膜免疫系統(tǒng)可以不依賴系統(tǒng)免疫，獨(dú)立地完成特異性免疫應(yīng)答這一觀 點(diǎn);粘膜免疫系統(tǒng)可獨(dú)立完成抗原攝取、呈遞及抗體分泌,并且局部的免疫應(yīng)答 對(duì)抵御病原的入侵起著重要的作用M.4粘膜免疫系統(tǒng)的免疫調(diào)節(jié)目前魚類的免疫調(diào)節(jié)的研究尚為起步階段，對(duì)粘膜免疫系統(tǒng)的免疫調(diào)節(jié)則還很欠 缺.Dezfuli等18對(duì)感染絳蟲的褐鱒(Salmo trutta )腸道中的多種神經(jīng)調(diào)節(jié)因 子，包括P物質(zhì)(substance P ,SP)、降鈣素基因相關(guān)肽(calcitonin generelated peptide ,CGRP)、甲硫啡肽、腸血管肽(va

9、soactiveintestinal peptide ,VIP)、血清素等進(jìn)行研究,這些神經(jīng)因子都是哺乳動(dòng)物腸道免疫調(diào)節(jié) 相關(guān)因子，結(jié)果表明魚類抗腸道絳蟲炎癥反應(yīng)中，這些神經(jīng)因子的水平也有發(fā)生 變化，如SP、甲硫啡肽、VIP、血清素水平都有不同程度的上升，暗示著這些神經(jīng) 因子參與了魚類腸道的免疫調(diào)節(jié)，但這些因子如何調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)則還有待于進(jìn)一 步的研究.另外有研究表明粘膜免疫系統(tǒng)對(duì)抗原的應(yīng)答具有選擇性,J ones等發(fā) 現(xiàn)魚類腸道對(duì)KLH(keyhole limpet hemocyanin)不產(chǎn)生免疫應(yīng)答，而通過注射 KLH卻可以引起系統(tǒng)免疫應(yīng)答,其原因是腸道B淋巴細(xì)胞對(duì)該抗原是選擇性不應(yīng)答, 對(duì)腸道適應(yīng)性的B細(xì)胞層次的免疫調(diào)節(jié).5粘膜免疫研究展望由于魚類是進(jìn)化上最早具有較完善免疫系統(tǒng)的動(dòng)物，對(duì)其粘膜免疫系統(tǒng)的研究， 將豐富人們對(duì)魚類免疫學(xué)、比較和發(fā)育免疫學(xué)的認(rèn)識(shí)，對(duì)免疫系統(tǒng)的發(fā)生和進(jìn)化 都有重要意義，日前已逐漸為人們所重視，成為魚類免疫學(xué)中的又一熱點(diǎn).然而目 前仍然有許多問題尚待進(jìn)一步研究，包括粘膜免疫應(yīng)答的機(jī)制，如抗原的攝取、 呈遞、T/ B淋巴細(xì)胞的應(yīng)答;細(xì)胞因子及內(nèi)分泌系統(tǒng)對(duì)粘膜免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié);致 敏免疫細(xì)胞從誘導(dǎo)部位到效應(yīng)部位的歸巢(homing)(這一點(diǎn)是目前哺乳動(dòng)物免疫 學(xué)研究中的前沿及熱點(diǎn))；粘膜免疫與系統(tǒng)免疫之間的相互協(xié)作關(guān)系等等.另外, 對(duì)魚類粘膜免