1、糖化白蛋白檢測試劑盒（酶法）臨床試驗(yàn)報(bào)告申辦者：XX醫(yī)療科技（中國）有限公司臨床試驗(yàn)報(bào)告產(chǎn)品通用名稱：糖化白蛋白檢測試劑盒（酶法）試驗(yàn)開始日期：2016年4月試驗(yàn)完成日期：2016年5月研究單位：復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院主要研究者：（簽名）試驗(yàn)機(jī)構(gòu)：復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院（蓋章）統(tǒng)計(jì)單位：復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院（蓋章）統(tǒng)計(jì)學(xué)負(fù)責(zé)人：（簽名）申辦單位：XX醫(yī)療科技（中國）有限公司（蓋章）申辦單位的聯(lián)系人及聯(lián)系方式：報(bào)告日期：2016年5月原始資料保存地點(diǎn)：復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院目錄 TOC o 1-1 h z u HYPERLINK l _Toc451957620 臨床試驗(yàn)報(bào)告 PAGEREF _Toc4

2、51957620 h 1 HYPERLINK l _Toc451957621 研究報(bào)告摘要 PAGEREF _Toc451957621 h 3 HYPERLINK l _Toc451957623 一、臨床試驗(yàn)背景 PAGEREF _Toc451957623 h 5 HYPERLINK l _Toc451957624 二、產(chǎn)品的檢測原理及方法 PAGEREF _Toc451957624 h 6 HYPERLINK l _Toc451957625 三、產(chǎn)品的預(yù)期用途 PAGEREF _Toc451957625 h 7 HYPERLINK l _Toc451957626 四、臨床試驗(yàn)?zāi)康暮蛢?nèi)容 PA

3、GEREF _Toc451957626 h 7 HYPERLINK l _Toc451957627 五、試驗(yàn)總體說明 PAGEREF _Toc451957627 h 7 HYPERLINK l _Toc451957628 六臨床試驗(yàn)結(jié)果及統(tǒng)計(jì) PAGEREF _Toc451957628 h 10 HYPERLINK l _Toc451957629 七. 結(jié)論 PAGEREF _Toc451957629 h 13 HYPERLINK l _Toc451957630 附件一：樣本信息記錄表 PAGEREF _Toc451957630 h 14 HYPERLINK l _Toc451957631 附

4、件二：試驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表 PAGEREF _Toc451957631 h 14 HYPERLINK l _Toc451957632 附件三：相關(guān)試劑盒使用說明書及信息 PAGEREF _Toc451957632 h 14 HYPERLINK l _Toc451957633 附件四：臨床試驗(yàn)主要研究人員的簡歷信息 PAGEREF _Toc451957633 h 14研究報(bào)告摘要研究單位：復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院產(chǎn)品名稱：糖化白蛋白檢測試劑盒（酶法）臨床試驗(yàn)類別：體外診斷試劑注冊申請的臨床驗(yàn)證主要研究者：潘柏申研究目的：驗(yàn)證考核試劑同參比試劑對于臨床樣本的檢測一致性樣本數(shù)量：110例（考核試劑與參比試劑相

5、關(guān)性）50例（血清血漿相關(guān)性）共計(jì)160例入選標(biāo)準(zhǔn)：樣本性別、年齡不限，隨機(jī)入組；臨床診斷為糖尿病的患者（尤其是不同時(shí)期，不同嚴(yán)重程度的患者）；臨床上診斷為疑似糖尿病的患者的樣本；正常沒有相關(guān)疾病的人群的樣本。排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸患者的樣本；經(jīng)過多次反復(fù)凍融的（3次以上）樣本；樣本信息不全或樣本量不足以完成全部試驗(yàn)及存留的樣本；臨床試驗(yàn)時(shí)候認(rèn)為不能入組的樣本，應(yīng)予以排除。試驗(yàn)后如有樣本因不符合要求被剔除，應(yīng)予以說明；如剔除樣本后樣本數(shù)量不能滿足試驗(yàn)要求，應(yīng)予以補(bǔ)充樣本，以達(dá)到數(shù)量要求。評價(jià)指標(biāo)：雙變量相關(guān)性大于0.95。兩種試劑檢測的結(jié)果做散點(diǎn)圖，分析其線性相關(guān)系數(shù)，r20.95。B

6、land-Altman偏倚圖顯示若95%以上的差值在1.96SD范圍內(nèi)，可視為結(jié)果具有一致性。分析和結(jié)論：分析：復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院醫(yī)院一共入組160例，其中110例樣本在日立7600全自動生化分析儀分別使用考核試劑和參比試劑測定血清中濃度，在日立7600全自動生化分析儀上測定同一樣本中血清與血漿的濃度共50例。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示考核試劑同參比試劑的檢測結(jié)果一致性非常好，其定量結(jié)果總結(jié)如下：血清樣本：樣本數(shù)數(shù)量110雙變量相關(guān)系數(shù)（R）0.9808線性相關(guān)系數(shù)（R2）0.9620線性方程Y= 0.9211*X+1.874血清血漿樣本：樣本數(shù)數(shù)量50雙變量相關(guān)系數(shù)（R）0.9865線性相關(guān)系數(shù)（R2）

7、0.9733線性方程Y= 0.9882*X-0.225結(jié)論：通過本次臨床試驗(yàn)的比較分析，考核試劑同參比試劑的檢測結(jié)果雖然在一定程度上存在著差異，但總體差異不明顯，兩種試劑的檢測結(jié)果線性相關(guān)性非常好（r=0.9808）。報(bào)告日期：2016年5月25日一、臨床試驗(yàn)背景糖化白蛋白(GA)是血液中葡萄糖與白蛋白發(fā)生非酶醣化反應(yīng)的早期糖基化產(chǎn)物。因白蛋白在體內(nèi)的半衰期較短（約17天），且白蛋白與血糖的結(jié)合速度比血紅蛋白快，所以GA對短期內(nèi)血糖變化比糖化血紅蛋白（HbA1c）敏感，通常認(rèn)為GA測定可反映患者近期（約2周）的血糖控制情況，目前GA已成為臨床上應(yīng)用較廣泛的血糖檢測指標(biāo)。多項(xiàng)研究表明，30天內(nèi)的

8、血糖水平影響HbA1c水平達(dá)50%，而90天120天只影響10%。所以，在血糖檢測體系中GA是對HbA1c的有效補(bǔ)充。近年來，GA與HbA1c的關(guān)系受到廣泛重視，通過研究GA與HbA1c的關(guān)系可進(jìn)一步認(rèn)識GA的臨床意義。動脈粥樣硬化是長期慢性炎癥性過程，它并非在糖尿病確診后才啟動，在血糖升高但仍未達(dá)到糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)時(shí)就已啟動，隨著血糖的增高而進(jìn)展加速。既往研究表明，作為糖尿病患者體內(nèi)主要的早期糖基化產(chǎn)物，GA可通過破壞內(nèi)皮細(xì)胞功能，導(dǎo)致血管壁的氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)、刺激平滑肌細(xì)胞增殖和遷移等病理過程，加快動脈粥樣硬化和糖尿病血管并發(fā)癥的發(fā)生與發(fā)展。因此GA在糖尿病動脈粥樣硬化病理生理機(jī)制中起到重

9、要作用。GA是反映過去2-3周平均血糖水平的一項(xiàng)指標(biāo)。比血糖檢測“金標(biāo)準(zhǔn)”HbA1c的反映周期要短一些。因此，GA在治療效果的確認(rèn)以及臨床用藥量的調(diào)整方面比A1c具有優(yōu)勢。另外，在許多血紅蛋白代謝異常的情況下，A1c的結(jié)果受到影響不能真實(shí)反映患者的血糖水平，而GA的結(jié)果則不受影響，如糖尿病腎病透析患者、貧血患者、妊娠期婦女的血糖檢測等，因此GA為血糖監(jiān)測的首選指標(biāo)。二、產(chǎn)品的檢測原理及方法XX醫(yī)療株式會社生產(chǎn)的糖化白蛋白檢測試劑盒（酶法）有GA酶液、,ALB緩沖液、ALB顯色劑和校準(zhǔn)品、組成，其中校準(zhǔn)品、為均勻的凍干粉狀，溶解后使用，其他試劑均為液體試劑，可直接上機(jī)使用。此試劑盒采用酶法定量檢

10、測血清或血漿中的糖化白蛋白濃度。糖化白蛋白的測定蛋白酶第一反應(yīng)：糖化白蛋白糖化氨基酸FAOD第二反應(yīng)：糖化氨基酸 + O2 + H2O 葡萄糖醛酮 + 氨基酸 + H2O2PODH2O2 + 4-氨基安替比林 + DSBmT 紅紫色色素白蛋白的測定第一反應(yīng)：還原型白蛋白氧化型白蛋白BCP第二反應(yīng)：氧化型白蛋白白蛋白-BCP結(jié)合體糖化白蛋白值（%）的計(jì)算糖化白蛋白值（%）=糖化白蛋白濃度/白蛋白濃度為使測定值與常規(guī)檢測方法（Lucica GA-L，旭化成制藥株式會社）測定結(jié)果相一致，需用以下公式進(jìn)行補(bǔ)正。補(bǔ)正公式：（糖化白蛋白濃度/白蛋白濃度） 48.9 + 1.9三、產(chǎn)品的預(yù)期用途本產(chǎn)品用于定

11、量檢測血清或血漿中GA的濃度。四、臨床試驗(yàn)?zāi)康暮蛢?nèi)容4.1 臨床試驗(yàn)?zāi)康尿?yàn)證考核試劑同參比試劑對于臨床樣本的檢測一致性。4.2 臨床試驗(yàn)內(nèi)容通過考核試劑對按照方案要求入組的樣本的檢測結(jié)果同參比試劑對同一樣本的檢測結(jié)果的分析對比，統(tǒng)計(jì)出兩種試劑檢測的一致性。五、試驗(yàn)總體說明5.1 臨床試驗(yàn)流程按照臨床試驗(yàn)方案設(shè)定的流程進(jìn)行檢測。5.2 考核試劑信息5.2.1 名稱及主要成分考核試劑的名稱為糖化白蛋白檢測試劑盒（酶法）。產(chǎn)品組成為GA酶液、；ALB緩沖液、ALB顯色劑和校準(zhǔn)品、組成，其中校準(zhǔn)品、為均勻的凍干粉狀，溶解后使用，其他試劑均為液體試劑，可直接上機(jī)使用。5.2.2 儲存條件及有效期儲存條件

12、：210有效期：制造日起14個(gè)月5.2.3 試劑信息本臨床試驗(yàn)使用的是日立的7600系列全自動生化分析儀。生產(chǎn)廠家：XX醫(yī)療株式會社產(chǎn)品名稱：糖化白蛋白試劑盒（酶法）試劑校準(zhǔn)品質(zhì)控品產(chǎn)品批號005RLM005RLM005RLM有效期2016-082016-082016-08容量GA：40ml2GA：13.4ml2ALB：40ml2ALB：20ml21ml2濃度31ml2濃度65.2.4 操作步驟具體請?jiān)斠娍己嗽噭┊a(chǎn)品說明書，見附件三.1。5.3 參比試劑信息及第三方驗(yàn)證試劑信息5.3.1 參比試劑生產(chǎn)廠家：旭化成制藥株式會社產(chǎn)品名稱：糖化白蛋白檢測試劑盒（酶法）試劑校準(zhǔn)品質(zhì)控品產(chǎn)品批號1502

13、A1501A1501A有效期2016-092016-062016-06容量GA R-1：40ml2GA R-2：10ml2ALB R-1：40ml2ALB R-2：20ml21ml23ml2濃度1參比試劑的詳細(xì)操作步驟及相關(guān)注意事項(xiàng)請?jiān)斠妳⒈仍噭┑漠a(chǎn)品說明書，見附件三.2。5.3.2第三方驗(yàn)證試劑生產(chǎn)廠家四川邁克生物科技股份有限公司產(chǎn)品名稱糖化白蛋白檢測試劑盒（酶法）產(chǎn)品批號TBD有效期TBD5.4 臨床試驗(yàn)的樣本量按照臨床試驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)要求，本單位的樣本量應(yīng)不低于100例.復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院一共入組160例，其中110例樣本分別使用考核試劑和參比試劑在日立7600全自動生化分析儀（使用考核

14、試劑）上測定血清中濃度，在日立7600全自動生化分析儀上測定同一樣本中血清與血漿的濃度共50例。實(shí)際進(jìn)行統(tǒng)計(jì)的樣本例數(shù)為160例。因總臨床樣本數(shù)已經(jīng)滿足臨床試驗(yàn)方案的要求，因此，本臨床單位不再另行補(bǔ)充樣本以滿足100例的要求。5.5 臨床試驗(yàn)單位信息名稱：復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院地址：上海市徐匯區(qū)楓林路180號電話：021-640419905.6 臨床樣本的入選與排除按照臨床試驗(yàn)方案的要求，隨機(jī)入組了160例樣本，經(jīng)檢測后揭盲，對比樣本信息所有樣本均符合入組要求。5.7 臨床樣本的保存及運(yùn)輸方式均符合臨床試驗(yàn)方案的要求。5.8 樣本相關(guān)信息記錄入組樣本的相關(guān)信息符合臨床試驗(yàn)方案的要求。5.9 臨床

15、樣本分組符合臨床試驗(yàn)方案的要求。六臨床試驗(yàn)結(jié)果及統(tǒng)計(jì)6.1 樣本說明樣本信息見附件一。本次臨床試驗(yàn)使用110例血清樣本進(jìn)行了考核試劑和參比試劑的檢測，50例同一樣本考核試劑血清血漿結(jié)果相關(guān)性的檢測。檢測后，110例血清樣本經(jīng)Bland-Altman偏倚圖比較兩組結(jié)果的差值，有106個(gè)樣本結(jié)果（96.36%95%）的差值在均值1.96SD范圍內(nèi)，可視為結(jié)果具有一致性，無需剔除或補(bǔ)充樣本。血清血漿結(jié)果相關(guān)性也良好。6.2 定量檢測結(jié)果統(tǒng)計(jì)描述說明：以下統(tǒng)計(jì)中，考核試劑指的是XX醫(yī)療株式會社生產(chǎn)的糖化白蛋白檢測試劑盒（酶法），參比試劑指的是旭化成制藥株式會社生產(chǎn)的糖化白蛋白檢測試劑盒（酶法）。試驗(yàn)數(shù)

16、據(jù)見附件二。6.2.1 線性相關(guān)及散點(diǎn)圖以考核試劑為因變量，參比試劑為自變量，進(jìn)行線性回歸擬合，其線性結(jié)果如下：考核試劑和參比試劑的檢測結(jié)果的相關(guān)系數(shù)為r=0.9808（r2=0.9620），兩者的線性方程為：Y= 0.9211*X+1.874，兩組檢測結(jié)果高度相關(guān)。以自變量（參比試劑結(jié)果）為X軸，因變量（考核試劑結(jié)果）為Y軸做散點(diǎn)圖，結(jié)果如下：考核試劑與參比試劑相關(guān)性考核試劑血清GA%參比試劑血清GA%6.2.2偏倚圖（bland-altman）分析以參比試劑和考核試劑的差值作為縱坐標(biāo)，參比試劑作為橫坐標(biāo)，做散點(diǎn)圖，進(jìn)行差值偏倚分析。110例血清樣本經(jīng)Bland-Altman偏倚圖比較兩組結(jié)

17、果的差值，有4個(gè)樣本結(jié)果超出均值1.96SD范圍，有96.36%（95%）的差值在均值1.96SD范圍內(nèi)，可視為結(jié)果具有一致性，因此無需剔除或補(bǔ)充樣本。6.3 血清與血漿樣本比對結(jié)果血漿與血清樣本相關(guān)性：同一患者的血漿（EDTA二鈉抗凝）和血清樣本，用考核試劑進(jìn)行GA檢測，以這兩個(gè)檢測結(jié)果作為雙變量，分析目標(biāo)是確定兩個(gè)變量之間的相關(guān)性。6.3.1血清與血漿樣本相關(guān)性分析血清樣本檢測結(jié)果和血漿樣本檢測結(jié)果的相關(guān)系數(shù)為r=0.9865（r2=0.9733），兩者線性方程為：Y=0.9882*X-0.225。以同一患者的血清檢測結(jié)果為自變量Xi，血漿檢測結(jié)果為因變量Yi，以Yi對Xi作散點(diǎn)圖，結(jié)果如下：血清和血漿相關(guān)性考核試劑血清GA%考核試劑血漿GA%七. 結(jié)論通過本次臨床試驗(yàn)的比較分析，考核試劑同參比試劑的檢測結(jié)果無顯著性差異，兩種試劑的檢測結(jié)果線性相關(guān)性高度相關(guān)（r=0.9808）。經(jīng)Bland-Altman偏倚圖比較兩組