1、雞場抗體檢測與解讀 抗體檢測周報(bào)血凝（HA）和血凝(HI)抑制試驗(yàn)-以新城疫為例血凝試驗(yàn)（HA），目的：滴定病毒的血凝效價(jià)；原理：某些病毒或病毒的血凝素能選擇性地使某種動(dòng)物的紅細(xì)胞發(fā)生凝集，這種凝集紅細(xì)胞的現(xiàn)象稱為血凝（HA）,也稱直接血凝反應(yīng)。病毒顆粒紅細(xì)胞結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：1、：紅細(xì)胞呈細(xì)沙樣均勻鋪于孔底，即100凝集；2、：紅細(xì)胞均勻鋪于孔底，當(dāng)邊緣不整齊而稍向孔底集中，即75凝集；3、 ：紅細(xì)胞形成一個(gè)環(huán)狀，四周有凝集塊，即50凝集；4、 ：紅細(xì)胞于孔底形成圓團(tuán)，邊緣不夠光滑，四周稍有凝集塊，即25凝集；5、 ：紅細(xì)胞于孔底形成圓團(tuán)，邊緣光滑整齊，即無凝集。以100% 凝集的病毒最大稀釋度

2、為該病毒的血凝價(jià)，即為一個(gè)凝集單位。上表看出，該新城疫病毒液的血凝價(jià)為1:32，則l:32為1個(gè)血凝單位，1:16、l:8分別為2、4個(gè)血凝單位，或?qū)?2/4=8，即1:8稀釋的病毒液為4個(gè)血凝單位。根據(jù)判定結(jié)果，吸取1毫升已稀釋的病原溶液再以8倍稀釋，即為4個(gè)血凝單位的標(biāo)準(zhǔn)抗原，以備凝血抑制試驗(yàn)使用。+ + + + -血凝試驗(yàn)（HA）結(jié)果判定血凝抑制試驗(yàn)（HI），目的，確定抗體水平；原理：當(dāng)在病毒的懸液中加入特異性抗體，且這種抗體的量足以抑制病毒顆?；蚱溲貢r(shí)，則紅細(xì)胞表面的受體就不能與病毒顆?；蜓刂苯咏佑|。這時(shí)紅細(xì)胞的凝集現(xiàn)象就被抑制，稱為紅細(xì)胞凝集抑制（HI）反應(yīng)，也稱血凝抑制反應(yīng)

3、。I am late！抗體抗原1、在血凝板上112孔內(nèi)各加入50ul生理鹽水；2、在第1孔內(nèi)加入被檢血清50ul，然后倍比稀釋至第11孔，最后棄50ul；3、第112孔內(nèi)加入4個(gè)單位血凝抗原50ul（第12孔為病毒對(duì)照）；4、每孔加入1雞紅細(xì)胞懸液50ul；5、輕輕振蕩均勻，后放于室溫或37中靜置30分鐘6、結(jié)果判定血凝抑制試驗(yàn)步驟7血凝抑制試驗(yàn)（HI）結(jié)果判定結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)同血凝試驗(yàn)（HA）。將反應(yīng)板傾斜成45度角，沉于管底的細(xì)細(xì)胞沿著傾斜面向下呈線狀流動(dòng)者為沉淀，表明紅細(xì)胞未被或不完全被病毒凝集；如果孔底的紅細(xì)胞鋪平孔底，凝成均勻薄層，傾斜后紅細(xì)胞不流動(dòng)，說明紅細(xì)胞被病毒所凝集。能將4單位病毒物質(zhì)凝集紅細(xì)胞的作用完全抑制的血清最高稀釋倍數(shù)，稱為該血清的紅細(xì)胞凝集抑制效價(jià)，用被檢血清的稀釋倍數(shù)或以2為底的對(duì)數(shù)(10g2)表示。如上例，該血清的紅細(xì)胞凝集抑制效價(jià)為1：4或HI效價(jià)為2(10g2)。如上表所示：MAX為多個(gè)樣品中的HI抗體滴度最大值；MIX為HI抗體滴度最小值；GMT為多個(gè)樣品的HI幾何平均滴度；CV%為變異系數(shù)或離散度。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）,其基本過程是將抗原或抗體吸附于同相載體，在載體上進(jìn)行免疫酶反應(yīng)，底物顯色后用肉眼或分光光度計(jì)判定結(jié)果。整個(gè)反應(yīng)都必須在抗原結(jié)合抗體的最適條件下進(jìn)行。每次試驗(yàn)時(shí)都需設(shè)陽性和陰性對(duì)照。