1、大孔樹脂提取銀杏葉中總黃酮最佳工藝摘要： 目的考察大孔樹脂對銀杏葉中總黃酮的靜態(tài)吸附和動態(tài)吸 附以及解吸的最佳工藝條件。 方法采用多種樹脂對銀杏葉中總黃酮 進行靜態(tài)和動態(tài)吸附，以總黃酮的吸附量或解吸量為指標(biāo)，分別考 察了過柱次數(shù)、時間、水洗量、上樣濃度、洗脫機濃度和用量以及泄 露曲線的考察。關(guān)鍵詞：銀杏葉/化學(xué)；總黃酮/分析；大孔樹脂;靜 態(tài)吸附；動態(tài)吸附；紫外線，分光光度法一、實驗器材1.1主要實驗材料與試劑大孔吸附樹脂，：AB-8、LKY-02、HPD750、MD130、D101、HPD450、HPD5000、MD131；銀杏葉、工業(yè)乙醇1.2主要實驗器材與設(shè)備紫外可見分光光度計、粉碎機、

2、真空干燥器、水浴鍋、提取裝置、電 子天平、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、恒溫振蕩器。二、實驗步驟與結(jié)果1.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精確稱取蘆丁 1mg。用60%乙醇溶解并定容到25ml容量瓶中，搖均配 制得0.4mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別準(zhǔn)確量取該蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.25、 0.5、0.75、1.00、1.25、1.50mL 到 10mL 容量瓶中，分別加 60%乙醇 到溶液3ml，搖勻；分別加入5%NaNO2溶液0.30mL，搖勻靜置6min； 再每個容量瓶分別加入10%A1(NO3)3溶液0.30mL，搖勻后靜置6min； 再每個容量瓶分別加入4.00mlL4%NaOH溶液，用60%乙醇溶液稀釋定 容至刻度線，搖均

3、靜置15min后，在510nm處測吸光度。以不加蘆丁 標(biāo)準(zhǔn)品的溶液為空白對照。(吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)作圖一) 圖一2、提取銀杏葉中總黃酮2.1提取時間探究:稱取銀杏葉粉末5g五份，分別加體積分?jǐn)?shù)60%的乙 醇加熱回流提取，每份15倍量的溶劑，保持在75 C下分別提取1、 2、3、4小時后過濾。測吸光度。結(jié)果如下時間(h)1234吸光度0.1780.1830.2130.195提取率(%)0.5160.5160.710.64乙醇濃度60%物料比1： 15溫度80 C2.2乙醇濃度探究：稱取銀杏葉粉末5g四份,分別加體積分?jǐn)?shù) 20%40%60%80%的乙醇加熱回流提取，每份6倍量的溶劑，保持

4、在75 C下提取2小時后過濾。測吸光度。結(jié)果如下乙醇濃度()20406080吸光度0.6000.7040.6610.649提取率(%)0.61.161.291.01時間2h物料比1： 6溫度75 C2.3物料比探究：稱取銀杏葉粉末5g五份，分別加體積分?jǐn)?shù)60%的乙 醇加熱回流提取，分別以4、6、8、10、12倍量的溶劑，保持在75 C下提取2小時后過濾。測吸光度。結(jié)果如下物料比1： 41： 61： 81： 101： 12吸光度0.640.5360.5410.4250.402提取率(%)0.80.91.211.15時間2h乙醇濃度60溫度75 C2.4提取溫度探究：稱取銀杏葉粉末5g四份，分別加

5、體積分?jǐn)?shù)60%的 乙醇加熱回流提取，以8倍量的溶劑，分別在50、60、70、80 C下 提取2小時后過濾。測吸光度。結(jié)果如下溫度( C)50607080吸光度0.3660.4660.5530.443提取率(%)0.80.91.21時間2h乙醇濃度60物料比1： 82.5提取結(jié)果：通過以上單因素實驗表明提取銀杏葉中總黃酮的最佳 工藝為提取時間3小時，乙醇濃度為40%，物料比為1： 6，提取溫度 70 C時最大提取可達1.29%。3、銀杏葉總黃酮大孔樹脂靜態(tài)吸附初探3.1提取液的準(zhǔn)備：按照上面最佳提取方法提取足量黃酮備用。3.2靜態(tài)吸附：將已預(yù)處理完的八種大孔樹脂(AB-8、LKY-02、HPD7

6、50、 MD130、D101、HPD450、HPD5000、MD131)，各稱取 0.1g，分別置于 100ml錐形瓶中，精確加入40ml 一定總黃酮濃度的銀杏葉提取液， 置于25恒溫振蕩器中震蕩，分別在2、4、6、8、24h時吸取1ml 溶液進行吸光度測定，并計算吸附容量和吸附率。結(jié)果如下時間（h） 樹脂246812吸光度AB-80.1640.1550.1400.1390.520LKY-020.1500.1460.1360.1350.140HPD7500.1680.1520.1360.1430.146MD1300.1690.1640.1490.1480.178D1010.1670.1620.

7、1500.1450.170HPD4500.1830.1670.1560.1560.164HPD50000.1800.1570.1510.1500.160MD1310.1750.1680.1590.1600.1623.3吸附結(jié)果：實驗表明樹脂LKY-02吸附能力好，并在6h時基本達 到飽和。4、銀杏葉總黃酮大孔樹脂動態(tài)吸附探究4.1大孔樹脂對銀杏葉中總黃酮吸附次數(shù)實驗取一定量（徑高比1： 4）預(yù)處理好的樹脂LKY-02裝入3*30cm玻 璃制層析柱中，量取一定量提取液過樹脂柱，上柱次數(shù)分別為1、2、 3、4、5次，分別收集過柱液，取0.5ml測定吸光度。上柱次數(shù)12345吸光度0.5070.45

8、90.4480.4010.3934.2大孔樹脂對銀杏葉中總黃酮連續(xù)吸附實驗吸附質(zhì)與吸附劑的接觸時間在吸附操作過程中是個重要的影響因 素。在進行動態(tài)樹脂吸附實驗中，同樣有必要考慮時間因素對吸附效 果的影響。取一定量（徑高比1： 4）預(yù)處理好的樹脂LKY-02裝入3*30cm玻 璃制層析柱中，量取一定量提取液過樹脂柱，控制好流速，將接出的 過柱液與樣品耶合并連續(xù)上樣吸附，并分別在15、30、45、60、75、 90min時接取1ml過柱液，測其吸光度。時間 （min）153045607590吸光度0.4730.620.4390.4200.4030.3724.3大孔樹脂對銀杏葉中總黃酮的上樣濃度實驗

9、提取一定量黃酮，減壓蒸餾后測得濃度為11mg/ml，取四份10ml 溶液進行稀釋，分別稀釋至20、30、40、50ml作上樣液待用。取一定量（徑高比1： 4）預(yù)處理好的樹脂LKY-02裝入3*30cm玻 璃制層析柱中，將上述四份不同濃度的樣品溶液分別上樹脂柱吸附， 控制上樣流速，收集過柱液；并測定過柱液的吸光度。濃度 （mg/ml）5.503.672.752.2吸光度0.3060.2350.2300.2084.4大孔樹脂對銀杏葉中總黃酮的的泄露曲線實驗取一定量（徑高比1： 4）預(yù)處理好的樹脂LKY-02裝入3*30cm玻 璃制層析柱中，用濃度為4.404mg/ml的60ml上樣液進行過柱，控制

10、 流速，收集過柱液，每次5ml，逐管取0.1ml測其吸光度。上樣量（ml）5101520253035404550吸光 度0.2 830.4560.4660.5320.5390.5510.5620.5680.5420.557+吸光度上履5、銀杏葉總黃酮大孔樹脂動態(tài)解析探究5.1大孔樹脂對銀杏葉中總黃酮的水洗量實驗對吸附飽和的樹脂柱，先取足量蒸餾水，控制流速，進行水洗樹 脂柱，收集水洗液，每次收集10ml，逐個取1ml測定水洗液中的黃 酮含量。0. 4水洗量曲線吸光度5.2大孔樹脂對銀杏葉中總黃酮的解析劑用量實驗取一定量（徑高比1： 4）預(yù)處理好的樹脂LKY-02裝入3*30cm玻 璃制層析柱中，進行動態(tài)吸附，然后用水沖洗，再用60%乙醇溶液進 行解析，收集解吸液，每次收集10ml，逐管取1ml測其吸光度。f吸光度5.3大孔樹脂對銀杏葉中總黃酮的